双孢蘑菇的分子遗传育种研究进展

双孢蘑菇（Agaricusblsporus）是一种以二极性次级同宗配合方式进行遗传的食用真菌。双抱蘑菇的双核抱子多数为自体可育的异核抱子,使得在育种实践及基础遗传学研究中急需的同核不育单抱很难获得,而且同、异核菌丝也无法在生理形态上加以区分。这是多年来双抱蘑菇遗传育种研究进展缓慢的最重要原因。1980年,FritS。h以恢复育性为标记进行单抱杂交,才首先育成了在生产上广泛使用的UI和U3。1982年,Royse和M则发展了蛋白质水平上的同工酶电泳标记技利］。随后,随着分子生物学技术的发展,双抱蘑菇的遗传育种也以DNA标记进行菌株间亲…     

双孢蘑菇分子标记研究进展

双孢蘑菇（Agaricus bisporus）是世界上最重要的人工栽培的食用菌,近20年来双孢蘑菇分子标记研究发展迅速,取得了许多阶段性成果。本简要地对双孢蘑菇同工酶标记,电泳核型,RFLP,RAPD,AFLP等分子标记研究的发展状况进行了综述。     

应用RAPD技术分析两个双孢蘑菇遗传家系

应用ＲＡＰＤ技术分析两个由同工酶为遗传标记建立的典型双孢蘑菇遗传家系中各亲子菌株间的遗传相关性,结果表明,单孢同校体的ＲＡＰＤ图谱较异核体而言有单一化的倾向;同时,随着遗传代数的增加,杂种子代与出发异核亲本间的遗传差异逐渐增大;研究结果还进一步印证同核单孢杂交比传统的单抱、多孢筛选更易产生优势明显的杂种．     

双孢蘑菇96．4菌株和单孢后代间的遗传变异

本文研究了野生双孢蘑菇菌株96．4（Agaricus bisporus)和它的10个单孢菌株的生长发育和遗传变异。研究表明,在菌株96．4和它的单孢菌株之间以及在10个单孢菌株之间在菌丝生速度和随机扩增多态DNA（RAPD）揭示的遗传变异等方面都存在着明显的变异。RAPD指纹揭示了96．4菌株通过有性生殖产生的丰富的生物学变异。     

双孢蘑菇杂交菌株As2796家系的分子遗传研究

应用PCR和凝胶电泳等技术,对双孢蘑菇杂交菌株As2796及其亲本和子代作分子遗传标记跟踪分析,结果如下：1）总DNA的RAPD分析表明,随着遗传代数的增加,杂种子代和出发异核体亲本间的遗传差异逐渐增大;2）mtDNA的酶切图谱表明,亲本8213及其杂交子代具有相同的基因型,表明双孢蘑菇mtDNA呈单亲遗传;3）Est同工酶的PAGE图谱表明,结合了亲本02高产特征和8213优质特征的杂交子代具有两个亲本的标记带型,证明Est同工酶标记是双孢蘑菇新菌株特性预测或鉴定的有效指标。     

双孢蘑菇堆肥中真菌群落多样性分析

以农作物玉米秸和稻草、牛粪为原料,分别设计双孢蘑菇Agaricus bisporus堆肥配方并进行堆肥发酵,研究二者堆肥过程中真菌多样性。在建堆、一次发酵结束和二次发酵结束3个时期分别采集堆肥样品,提取总DNA,以真菌18S rDNA基因通用引物,进行PCR-DGGE扩增和序列分析。累计获得39条特异条带18S rDNA基因信息,分属于真菌14个属、藻类7个属和原生动物3个属。子囊菌是两种配方堆肥过程中的优势菌群,建堆时期的优势类群为Pichia和Wickerhamomyces,一次和二次发酵时期的优势类群为Chaetomium和Lecythophora。多样性指数分析显示,稻草配方微生物多样性大于玉米秸配方;主成分分析（PCA）显示,玉米秸配方一次发酵结束时期与稻草和玉米二次发酵结束时期聚为一类,说明玉米秸配方堆肥提前腐熟。     

双孢蘑菇子实体营养成分分析

测定了双孢蘑菇子实体中氨基酸、矿质元素、多糖、粗蛋白、粗脂肪、灰分、粗纤维、核苷酸、维生素C和SOD等含量。结果表明,粗蛋白含量为37．86％,在测定的18种氨基酸中含有17种氨基酸,8种必须氨基酸含量占氨基酸总量的42．30％;必需氨基酸与非必需氨基酸比值（E／N）为0．73。还含有丰富的多糖、纤维素、超氧化物歧化酶（SOD）和核苷酸类物质。     

双孢蘑菇优质高产栽培技术

我们于1994年引进台湾双抱蘑菇菌种及相关的栽培技术,结合本地区的具体情况,经过大面积栽培试验,生物转化率为35％左右,最高可达50％,现将此技术介绍如下：1栽培料的质量要求稻草：新鲜并且干燥,水分含量18％以下。硫酸按：白色结晶,含氮量21％。尿素：白色结晶,含氮量46％。过磷酸钙：黄褐色或灰色粉末,PZq含量15％。轻质碳酸钙：白色至灰色粉末,op含量95％以上,pH7．0～8．so熟石灰：白色粉末,pH11Lll。大米糠：黄白色粉末,无酸臭味,且不得结决。2菇房结构和栽培床的搭建①菇房结构：利用空闲民房作菇房,也可建成大棚式…     

双孢蘑菇‘双孢106’的选育报告

‘双孢106’是‘A20’通过单孢选育的品种。子实体散生,少量丛生,近半球形。菌盖白色,表面光洁,直径3.5-5.0cm,厚2.0-3.0cm,质地致密;菌柄白色,粗短,近圆柱形,基部略膨大,长2.0-2.8cm。发菌适温22-25℃,子实体生长发育温度10-24℃,最适温度16-18℃。鲜菇粗纤维含量1.00%,蛋白质含量3.54%,氨基酸总量2.84%。该品种出菇早,子实体圆整、结实,产量高,商品化等级高。适宜双孢蘑菇工厂化设施栽培。     

双孢蘑菇杂交菌株As2796家系的分子遗传研究

应用PCR和凝胶电泳等技术,对双孢蘑菇杂交菌株As2796及其亲本和子代作分子遗传标记跟踪分析,结果如下: 1) 总DNA的RAPD分析表明,随着遗传代数的增加,杂种子代和出发异核体亲本间的遗传差异逐渐增大; 2) mtDNA的酶切图谱表明,亲本8213及其杂交子代具有相同的基因型,表明双孢蘑菇的mtDNA呈单亲遗传; 3) Est同工酶的PAGE图谱表明, 结合了亲本02高产特征和8213优质特征的杂交子代具有两个亲本的标记带型,证明Est同工酶标记是双孢蘑菇新菌株特性预测或鉴定的有效指标。     

Evaluation of Genetic Diversity and Population Structure Analysis among Germplasm of Agaricus bisporus by SSR Markers

Agaricus bisporus is a popular edible mushroom that is cultivated worldwide. Due to its secondary homothallic nature, cultivated A. bisporus strains have low genetic diversity, and breeding novel strains is challenging. The aim of this study was to investigate the genetic diversity and population structure of globally collected A. bisporus strains using simple sequence repeat (SSR) markers. Agaricus bisporus strains were divided based on genetic distance-based groups and model-based subpopulations. The major allele frequency (MAF), number of genotypes (NG), number of alleles (NA), observed heterozygosity (HO), expected heterozygosity (HE), and polymorphic information content (PIC) were calculated, and genetic distance, population structure, genetic differentiation, and Hardy–Weinberg equilibrium (HWE) were assessed. Strains were divided into two groups by distance-based analysis and into three subpopulations by model-based analysis. Strains in subpopulations POP A and POP B were included in Group I, and strains in subpopulation POP C were included in Group II. Genetic differentiation between strains was 99%. Marker AB-gSSR-1057 in Group II and subpopulation POP C was confirmed to be in HWE. These results will enhance A. bisporus breeding programs and support the protection of genetic resources.     

农杆菌介导双孢蘑菇AS2796转化体系的优化

双孢蘑菇Agaricus bisporus是一种药食皆宜的食用真菌,具有极高的经济价值,近年来在双孢蘑菇全基因组测序完成后,功能基因组学的研究逐步提上日程。其中,高效的遗传转化体系作为技术基础成为研究重点。农杆菌介导的遗传转化体系作为一种高效的功能基因组研究方法,在双孢蘑菇中已经得到了广泛的应用,但是仍然存在着效率较低的问题有待解决。为了提高双孢蘑菇的农杆菌转化效率,找到双孢蘑菇遗传转化的最优条件,本实验首先对双孢蘑菇的潮霉素抗性压力进行了筛选,结果显示20mg/L的潮霉素浓度可以抑制菌丝生长,而50mg/L的潮霉素浓度则可以完全抑制菌丝生长。其次,对农杆菌菌株、菌液浓度、乙酰丁香酮浓度、菌丝培养时间以及浸染时间做了L16（4 ⁵）的正交实验,通过对各因素影响的分析,得出对转化效率影响最大的因素为菌丝培养时间和农杆菌菌株,且当菌株为LBA4404、菌液浓度OD₆₀₀=0.8、乙酰丁香酮浓度为100μmol/L、菌丝培养时间为40d、浸染时间为10min时,农杆菌介导的双孢蘑菇遗传转化效率最高。     

有害疣孢霉菌与双孢蘑菇的互作关系

通过菌丝对峙、双重培养,以及对发病双孢蘑菇子实体的显微观察,探讨有害疣孢霉菌Mycogone perniciosa（MP0012）与双孢蘑菇Agaricus bisporus（As2796）之间的互作关系。结果表明,在菌丝对峙生长阶段有害疣孢霉菌菌丝不侵入双孢蘑菇菌丝体内,两者可交叉生长,对双孢蘑菇生长影响不显著;对峙与双重培养均显示有害疣孢霉菌菌丝会产生对双孢蘑菇菌丝生长的抑制作用的挥发性物质,造成双孢蘑菇菌丝扭结断裂。同时试验证实了双孢蘑菇菌丝会促进有害疣孢霉菌厚垣孢子的产生和萌发、菌丝生长和发育。侵染实验结果表明,有害疣孢霉菌可直接侵染双孢蘑菇子实体,引起双孢蘑菇子实体病害;对罹病子实体显微观察结果发现,发病前期双孢蘑菇子实体表面长出绒毛状病原菌丝,菌柄中空,菌褶褐变腐烂并长出病原菌丝;发病中期双孢蘑菇子实体内菌丝组织会出现萎缩裂解现象,在近有害疣孢霉菌菌丝一侧的双孢蘑菇子实体菌丝细胞壁被降解;发病后期双孢蘑菇子实体菌丝组织基本消失。由此初步判断有害疣孢霉菌对双孢蘑菇的寄生类型偏向于死体营养型。     

褐蘑菇碱提物降血糖作用研究

目的：研究褐蘑菇碱提物的降血糖作用。方法：四氧嘧啶灌胃造高血糖小鼠模型,随机分成6组,分别是正常对照组、模型对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组,前两组以生理盐水连续灌胃7d,阳性对照组灌胃消渴丸溶液连续7d。高、中、低剂量组（100、200、400mg/kg）以褐蘑菇碱提物溶液连续灌胃7d,摘眼球取血,测定空腹血糖值。结果：高、中、低剂量组对糖尿病小鼠的降糖率分别是16.9%、20.2%和15.1%,阳性对照组的降糖率是25.1%。结论：褐蘑菇碱提物中剂量组降糖效果要优于高、低剂量组。褐蘑菇碱提物能显著降低四氧嘧啶所制备的糖尿病小鼠血糖浓度。     

Differences in microfibrils in the walls of Agaricus bisporus secondary mycelium

Thick fibres mainly located in longitudinal and parallel arrays were observed on the outer surface of vegetative mycelial walls of Agaricus bisporus treated to remove the polysaccharide mucilage. When thick fibres were removed from the cell wall, by alkali treatment, thin fibres with predominantly transverse orientation were observed. The former have been identified to be composed of α-glucan and the latter of chitin. Both different types of fibres constitute the skeletal components of the wall in which matrix materials are embedded.     

褐蘑菇水溶性多糖抗氧化活性研究

采用水提醇沉以及sevag去蛋白的方法获得褐蘑菇水溶性多糖(WPPA)。通过测定还原力、超氧阴离子清除率、羟基自由基清除率和抑制H2O2诱导红细胞氧化溶血实验评价WPPA抗氧化活性。结果表明:WPPA具有较强的还原力,对O2-.和.OH具有较强的清除作用,IC50分别为527μg/mL、310μg/mL;对H2O2诱导红细胞氧化溶血及MDA生成有很强的抑制作用,IC50分别为700μg/mL和541μg/mL。说明WPPA在一定浓度内具有较强的抗氧化能力。     

稻田蘑菇半裸镰刀菌病害的研究

半裸镰刀菌是双孢蘑菇栽培中出现的一种新的病原菌。报道了该病原菌的培养特征、形态特征、症状及发病规律 ,温度、pH、12种药物对菌丝体生长的影响 ,结果表明 ,使用克霉灵、甲醛、硫酸铜、有机酸等药物可以有效地杀灭病原菌     

Resource allocation ability of wild isolates of Agaricus bisporus on conventional mushroom compost

Abstract: Twenty-one wild isolates from two distinct sites and six cultivated strains of Agaricus bisporus were cultivated on a conventional mushroom compost. Their degradative abilities were studied by measuring 12 extracellular enzyme activities produced during mycelial growth. Differences in production of enzyme activities and in compost colonisation were observed between the three groups of strains and within each group. They were used to define the mechanisms of resource allocation in mushroom compost. The ability to grow and produce sporophores on mushroom compost appeared to be linked with the production of a balanced pool of enzymes including moderate levels of polysaccharidases active on straw cell walls and of enzymes able to degrade microbial biomass and microbial products.