拟澳洲赤眼蜂和短管赤眼蜂在菜芯地的扩散动态

在不同生长期的菜芯地释放赤眼蜂防治小菜蛾,当蜂量为2000头/点时,拟澳洲赤眼蜂在田间的有效扩散距离(寄生率大于60%),苗期为3米,生长中期和收获期为4米.短管赤眼蜂在田间的有效扩散距离,苗期和生长中期为4米,收获期为5米,较拟澳洲赤眼蜂具有更强的扩散能力.     

两种赤眼蜂对小菜蛾卵的寄生能力和种间竞争

在实验室内研究了本地天敌拟澳洲赤眼蜂和外来天敌短管赤眼蜂在不同卵龄和不同空间条件下对小菜蛾卵的寄生和种间竞争.结果表明,在0～62 h的小菜蛾卵上,拟澳洲赤眼蜂和短管赤眼蜂单独接蜂时对小菜蛾卵的寄生率、子代羽化率、子代雌蜂百分率随卵龄下降,而后代发育死亡率则随卵龄增加.短管赤眼蜂对各龄小菜蛾卵的寄生率、子代羽化率、子代雌蜂百分率均较拟澳洲赤眼蜂高,而子代蜂的发育死亡率则较拟澳洲赤眼蜂低.两种蜂对小菜蛾卵龄的要求都不太严格,在小于48 h的小菜蛾卵上都能产卵寄生,且寄生率高于50%,但短管赤眼蜂寄生对小菜蛾卵龄的要求更宽松.在两种蜂混合接蜂时,后代中短管赤眼蜂的比例在各处理中都高于50%,且随寄主卵龄增加,当小菜蛾卵龄大于48 h后,短管赤眼蜂的比例高达100%,说明短管赤眼蜂对小菜蛾有更强的寄生能力和竞争能力.拟澳洲赤眼蜂和短管赤眼蜂单独接蜂时,在4～22cm^3空间范围内,各处理间对小菜蛾卵的寄生率没有显著差异,而短管赤眼蜂的寄生率(76.4%～86%)略低于拟澳洲赤眼蜂(88.7%～92.3%).当空间大于53 cm^3时,寄生率显著下降,在102cm^3空间时显著降低到50%.混合接蜂时各处理间寄生率差异不显著.两种接蜂方式对后代羽化率和雌蜂百分率没有太大影响,蜂的后代发育死亡率在两种蜂单独接蜂时随空间而增加.在4～102cm^3空间范围内,混合接蜂后代雄蜂中短管赤眼蜂从80%以上降低到20%以下,说明短管赤眼蜂的竞争能力随接蜂空间的加大而降低.     

孤雌产雌生殖品系松毛虫赤眼蜂产卵强度对Wolbachia诱导的其生殖表型的影响

[目的]松毛虫赤眼蜂Trichogramma dendrolimi是一种用于鳞翅目害虫生物防治的重要卵期寄生蜂.本研究旨在明确孤雌产雌生殖品系松毛虫赤眼蜂的产卵强度对其体内Wolbachia滴度及Wolbachia诱导的孤雌产雌生殖表型的影响.[方法]在室内调查了3个处理组松毛虫赤眼蜂雌蜂不同产卵强度(每日仅1 h供寄...     

温度通过影响Wolbachia滴度调控赤眼蜂生殖方式

【目的】揭示温度对宿主体内Wolbachia滴度及其调控宿主生殖作用的影响。【方法】以感染Wolbachia且营孤雌产雌生殖的食胚赤眼蜂Trichogramma embryophagum为对象,在22,25,28和31℃4个梯度温度下连续培养5代,观察生殖方式、性比等生物学特性;采用实时荧光定量PCR以Wolbachia特异基因——外膜蛋白基因(wsp)、二磷酸果糖醛缩酶基因(fbp A)和酰胺转移酶基因(gat B)为靶标对内生菌进行定量分析。【结果】22和25℃条件下连续培养5代,食胚赤眼蜂生殖方式均未发生改变(无雄蜂出现),且5代赤眼蜂群体Wolbachia滴度没有明显差异;28℃下,食胚赤眼蜂在F3代开始有雄蜂出现,至F5代雄蜂比例明显增多,且体内Wolbachia滴度在F2代开始下降,至F5代显著下降;31℃下,F2代即有雄蜂出现,至F5代已经恢复成产雄孤雌生殖,体内Wolbachia滴度也在F2代开始下降,F3代开始显著降低,到F5代Wolbachia滴度极小甚至检测不到。【结论】高温可改变营孤雌产雌生殖赤眼蜂的生殖方式及体内Wolbachia滴度,且随着处理代数的增加以及温度的升高作用显著,即高温对营孤雌产雌生殖赤眼蜂生殖方式改变程度与其体内Wolbachia滴度呈负相关。     

抗生素处理对感染Wolbachia的丽蚜小蜂生殖的影响

Wolbachia是一类广泛存在于节肢动物体内, 可以对寄主的生殖力及生殖行为产生影响的共生菌。用抗生素可以有效除去寄主体内的Wolbachia。本实验通过喂食浓度分别为1, 5和10 mg盐酸四环素/mL蔗糖水, 结合PCR检测丽蚜小蜂Encarsia formosa体内Wolbachia的去除效果; 解剖观察丽蚜小蜂F0代及F1, F2和F3代怀卵量和卵巢管数量, 评价Wolbachia对丽蚜小蜂生殖的影响。结果显示： 抗生素处理去除Wolbachia后F0代蜂的卵巢管数量与未处理蜂之间无显著差异（P=0.12）, 但F1, F2和F3代蜂的卵巢管均为6条, 显著少于F0代蜂的卵巢管数量（P<0.001）。抗生素处理去除Wolbachia后的F0代蜂怀卵量与未处理蜂相比显著下降, 但显著高于经抗生素处理去除Wolbachia后的F1, F2和F3代蜂怀卵量（P<0.001）, 后代（F1, F2, F3）蜂之间怀卵量无显著差异（P=0.59）。去除Wolbachia后, 丽蚜小蜂可以产生雄性后代, 但未见交配行为, 且雌蜂可不经交配而产生雌性后代。结果说明, Wolbachia不仅直接影响丽蚜小蜂的怀卵量, 而且还可以通过影响丽蚜小蜂卵巢管的发育影响丽蚜小蜂的怀卵量; 然而, 去除Wolbachia不改变雌蜂的孤雌生殖方式。     

Wolbachia对赤眼蜂的性别调控机制及生理影响

沃尔巴克氏体(Wolbachia)是广泛分布于节肢动物生殖组织内的一类共生细菌。它们通过共生诱导宿主赤眼蜂的产雌孤雌生殖,在生物防治上具有重要意义。文章概述了Wolbachia在赤眼蜂中的分布状况,对赤眼蜂的性别调控机制,在赤眼蜂种群中的传播及限制因素,以及对赤眼蜂适合度的影响。     

短期高温对感染Wolbachia的松毛虫赤眼蜂发育和繁殖的影响

感染了沃尔巴克氏体Wolbachia的松毛虫赤眼蜂Trichogramma dendrolimi Matsumura营孤雌产雌生殖方式,但高温可能影响这一特性。为了模拟该赤眼蜂在田间遇到短期高温后的受影响情况,研究了柞蚕卵繁殖的Wolbachia感染了Wolbachia的松毛虫赤眼蜂孤雌产雌品系,于蛹中期和蛹后期经历6h32,35,38℃高温单次冲击处理,对当代羽化出蜂率、单卵出蜂数、单卵雌蜂率、寿命4个指标和处理子代羽化出蜂率、有效繁殖个体、单卵出蜂数、单卵雌蜂率4个指标的影响。结果表明,短期高温刺激会对孤雌产雌的松毛虫赤眼蜂产生不利影响,尤其是38℃高温不利影响明显,主要表现在羽化出蜂率和单卵出蜂数两指标明显降低;高温冲击对子代蜂各指标影响不明显。2代赤眼蜂均未有雄峰出现,表明短期高温冲击不能对Wolbachia调控其宿主生殖方式的作用产生影响。     

滇产牛肝菌属一新种——短管牛肝菌

本文报道牛肝菌属一新种,属于牛肝菌组和短管牛肝菌亚组(新亚组)。     

两种赤眼蜂对小菜蛾卵的寄生潜能分析

应用生命表技术分析了拟澳洲赤眼蜂Trichogramma confusum Viggiani(T.c)和卷蛾分索赤眼蜂Trichogramm-atoidea bactrae Nagaraja(T.b)在两种繁蜂条件组配下（分别用米蛾Corcyra cephalomica(Stainton)(RM)卵和小菜蛾Plutella xylostella(L.)(DBM)卵繁育）对小菜蛾卵的寄生潜能分析,结果表明：（1）在相同寄主繁蜂条件下,卷蛾分索赤眼蜂在小菜蛾卵上显示出较强的寄生潜能,米蛾卵上所繁的卷蛾分索赤眼蜂（T.b-RM)和小菜蛾卵上所繁的卷蛾分索赤眼蜂（T.b-DBM)的内禀增长率为0.3509和0.3450,而米蛾卵上所繁的澳洲赤眼蜂（T.c-RM)和小菜蛾卵上所繁的拟澳洲赤眼蜂（T.c-DBM)的仅为0.2391和0.1902,T.b-RM和T.b-DBM的每雌平均寄生卵数为70.75和46.13粒,而T.c-RM和T.c-DBM的仅为64.90和31.73粒,但拟澳洲赤眼蜂的雌蜂寿命较卷蛾分索赤眼蜂更长。（2）在不同寄主繁蜂条件下,同种赤眼蜂对小菜蛾卵的寄生潜能以米蛾卵所繁的仔蜂的各项寄生特性参数（内禀增长率,每雌寄生卵量,净生殖力,平均世代历期和雌蜂寿命）均优于用小菜蛾卵所繁之蜂,米蛾卵是其适宜的中间寄主。（3）长期用中间寄主繁蜂,赤眼蜂对目标寄主表现出一定的不适应性,中间寄主的驯化对赤眼蜂的寄生潜能有不容忽视的削弱作用。     

卷蛾赤眼蜂体内共生Wolbachia对寄主产雌孤雌生殖行为的影响

在30℃的条件下,连续饲养卷蛾赤眼蜂 Trichogramma cacoeciae Marchall 10代,观察每代蜂的生物学特性,并进行Wolbachia的wsp基因的分子检测,以研究卷蛾赤眼蜂产雌孤雌生殖行为与其体内共生菌Wolbachia的关系.结果表明,高温下卷蛾赤眼蜂体内的Wolbachia被抑制,4代以后wsp基因的PCR检测结果变为阴性;同时赤眼蜂的产雌孤雌生殖行为的改变程度也随着世代的增加呈递增趋势.这显示卷蛾赤眼蜂的产雌孤雌生殖行为与其体内的共生菌Wolbachia具有一定程度的相关性.     

Wolbachia在玉米螟赤眼蜂内的三重感染

Wolbachia是一类广泛存在于节肢动物体内的共生菌。玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostriniae是我国玉米田间的优势赤眼蜂种, 据报道, 赤眼蜂种内有Wolbachia感染。本文利用Wolbachia的16s rDNA和wsp基因引物通过PCR方法对玉米螟赤眼蜂的野生种群进行了调查, 发现以wsp基因为鉴定依据, 检测的所有个体都感染了3种Wolbachia ［wOstGDAa (GenBank accession no. EU157103), wOstGDAb (GenBank accession no. EU157104) 和 wOstGDB (GenBank accession no. EU157105)］。本文首次报道了野生赤眼蜂种群内Wolbachia的三重感染率几乎为100%。根据本研究的结果, 可以推测当不同种赤眼蜂寄生同一寄主时, Wolbachia可能会在不同赤眼蜂种间进行横向传播。     

拟澳洲赤眼蜂和短管赤眼蜂在米蛾卵上的种间竞争

By means of single and mixed inoculation, this paper studied the interspecific competition between T. confusum and T. pretiosum on the factitious eggs of Corcyra cephaloica under different parasitoid densities, host densities and inoculated spaces. The results showed that for both singly and mixed inoculated groups, the parasitism increased with parasitoid density but decreased with host density, whereas the percentage of female progeny dropped with parasitoid density but enhanced with host density. No significant effect was observed on adult emergence for all parasitoid and host density treatments. In mixed inoculated group, the proportion of T. pretiosum in the progeny decreased with parasitoid density but increased with host density, and was more than 50% in all treatments, indicating that T. pretiosum had a stronger competitive ability than T. confusum. In the spaces ranging from 4cm^3 to 102cm^3, the parasitism decreased gradually in both singly and mixed inoculated groups. The percentage of female progeny and adult emergence had no significant difference among different inoculated spaces. In mixed inoculated group, the proportion of T. pretiosum in the progeny was more than 50% in all treatments except space 102 cm3, but decreased with space, which suggested that T. confusum could improve their competitive ability through increasing their search areas and looking for more hosts.     

四环素对孤雌产雌松毛虫赤眼蜂生殖表型及适合度的影响

共生菌Wolbachia能够诱导许多节肢动物发生产雌孤雌生殖现象。由于该菌无法在宿主细胞外离体培养,人们常采用抗生素处理获得Wolbachia去除或滴度降低的宿主种群,用以研究Wolbachia对宿主的调控作用,但抗生素可能会对宿主产生附加效应。前人研究主要集中在抗生素处理是否可以恢复感染寄生蜂的两性生殖,较少关注抗生素对宿主适合度的影响。本研究利用不同浓度四环素(0、5 mg/mL、15 mg/mL和25 mg/mL)连续饲喂5代来明确四环素对产雌孤雌生殖的松毛虫赤眼蜂Trichogramma dendrolimi适合度的影响。研究结果如下:(1)随各浓度四环素处理世代的增加,雌蜂的繁殖力先降低后升高。在F_1代、F_2代和F_5代中,雌蜂繁殖力随四环素浓度的增加而显著下降,但在F_3代和F_4代中,抗生素浓度对雌蜂繁殖力无显著差异;(2)在四环素不同浓度处理下,F_1代和F_3代的羽化率与对照无显著差异,在F_2代、F_4代和F_5代中,四环素对羽化率存在负面影响;(3)经四环素处理的松毛虫赤眼蜂子代雄性比显著高于对照组。在5 mg/mL的四环素处理条件下,松毛虫赤眼蜂子代雄性比随处理世代的增加而升高,但在25 mg/mL的四环素处理条件下随世代的增加先升高后下降。结果表明:四环素能够使孤雌产雌松毛虫赤眼蜂恢复两性生殖,但对松毛虫赤眼蜂的适合度存在不利影响。此外,随着四环素处理世代的增加,松毛虫赤眼蜂对抗生素产生了一定的适应能力。     

温度对感染沃尔巴克氏体的松毛虫赤眼蜂种群参数的影响

在16℃、20℃、24℃、28℃和32℃恒温下,观察了温度对感染沃尔巴克氏体的松毛虫赤眼蜂发育、存活和繁殖的影响,组建了相应温度下的实验种群生命表。结果表明,在实验温度范围内,感染沃尔巴克氏体的松毛虫赤眼蜂的发育历期随着温度的升高而逐渐缩短,5个温度下感染沃尔巴克氏体的松毛虫赤眼蜂世代的发育历期分别为23.2、17.8、13.2、11.1和7.8天,世代的发育起点温度和有效积温分别为7.40℃和212.69日·度,内禀增长率(r_m)和净生殖力(R₀)分别介于0.2448～0.4584和28.00～84.03之间。结果提示温度24℃～28℃为繁殖感染沃尔巴克氏体的松毛虫赤眼蜂的理想温度条件。     

Wolbachia在我国广赤眼蜂种群内的感染

Wolbachia是广泛分布于节肢动物生殖组织内的一类细胞内共生菌,它属于原细菌的α亚类,能够通过调控寄主的生殖活动而促进其在寄主种群中的扩散。通过对wsp 基因的克隆及PCR-RFLP分析确定了Wolbachia在我国广赤眼蜂种群内的存在,并发现有2种Wolbachia 菌系的感染,命名为wEvaA和wEvaB。经过克隆分离得到了这2种Wolbachia的wsp基因序列,在GenBank的登录号为AY390279和 AY390280 ,并由基于wsp基因的聚类树中发现,这两种Wolbachia菌系均属于A组。     

Quantification of Wolbachia copy number in Trichogramma eggs (Hymenoptera: Trichogrammatidae): Lysozyme treatment significantly improves total gene yield from the Gram-negative bacterium

The Wolbachia bacterium is one of the most prevalent endosymbionts of arthropods. The bacterium is known to induce four distinct reproductive manipulations in its various hosts; namely, cytoplasmic incompatibility, feminization, male killing and parthenogenesis induction. The bacterial titer has been thought to have an important role in expression of these phenotypes. Although host eggs of the bacterium are the place where all of the manipulations take place, in most cases, they are not big enough to be subjected to mechanical disruption to extract genetic materials from them. Furthermore, DNA extraction protocols generally involve washing steps in which part of the DNA is lost. With the simple three step digestion protocol we developed, we were able to preserve the whole genome and measure the titer of Wolbachia in individual Trichogramma eggs by real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR), which was comparable to the titer by visual observation.