人血树突状细胞培养后的形态及抗肿瘤活性

观察新鲜分离和经体外培养３６小时的人外周血树突状细胞ＤＣ。和ＤＣ３６的形态学及其对淋巴因子与植物血凝素激活的杀伤细胞（ＬＰＡＫ细胞）体外诱导人肝癌细胞株ＢＥＬ┐７４０２的促进作用。形成学观察用免疫细胞化学法。抗肿瘤实验分为三大组：（１）Ｌ组（ＢＥＬ┐７４０２＋ＬＰＡＫ）,（２）ＬＤ３６组（ＢＥＬ┐７４０２＋ＬＰＡＫ＋ＤＣ３６）,（３）ＬＤ０组（ＢＥＬ┐７４０２＋ＬＰＡＫ＋ＤＣ０）。各组均采用ＬＰＡＫ与ＢＥＬ┐７４０２为５∶１和１０∶１两种效靶比。培养４８小时后用中性红摄入比色法检测ＬＰＡＫ细胞的杀伤活性。结果显示,ＤＣ３６的形态以具有细长突起者为多,与ＤＣ０主要为园形或具有短而钝突起的形态有明显差别。各组的细胞毒活性依次为：ＬＤ３６组＞ＬＤ０组＞Ｌ组（Ｐ＜０．０１）,并随效靶比增高而相应增强。这表明新鲜分离的人外周血ＤＣ在体外经３６ｈ培养后,不仅在形态上成熟,而且抗肿瘤活性也明显增强     

化学修饰对反义寡核苷酸稳定性及抗流感病毒活性的影响

为了探讨 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 化学修饰形式与 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 稳定性,体外细胞毒性以及抗流感病毒活性之间的关系,合成了 ７ 种不同化学修饰形式的 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ：硫代 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端分别磷酸化和胆固醇修饰;３′与 ５′端硫代,中间为天然结构的混合骨架 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ;天然结构 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端分别磷酸化和胆固醇修饰等．测定了 ７ 种修饰体在小鼠血清, Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞裂解液,含 ２％ 胎牛血清的 Ｄ Ｍ Ｅ Ｍ培养液以及水中的稳定性,体外细胞毒性和在细胞水平抗流感病毒活性．结果表明,混合骨架 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ,硫代 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端接磷酸和胆固醇的修饰形式在小鼠血清, Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞裂解液与含２％ 胎牛血清的 Ｄ Ｍ Ｅ Ｍ 培养液中稳定性相对较高,作用 ２４～４８ ｈ 仅混合骨架 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 与硫代 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 发生部分降解;天然结构 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端接磷酸和胆固醇修饰体在 ２４ ｈ 内大部分降解．所有 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 修饰体在水中具有很高稳定性,４８ ｈ 内未见降解作用．７ 种 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 修饰形式在 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞中未表现明显的细胞毒性．硫代 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端接磷酸和胆     

人血树突状细胞对LAK细胞抗H_（7402）细胞影响的形态学观察

本研究结合光镜免疫组化和组织化学方法,在光镜和电镜下观察了人外周血树突状细胞（ＤＣ）对ＬＡＫ细胞杀伤人肝癌Ｈ７４０２细胞的影响。结果显示,（１）ＤＣ不仅能与ＬＡＩＣ细胞形成花环,还能与ＬＡＫ、Ｈ（７４０２）细胞相互接触形成细胞簇,常见呈明显坏死状态的Ｈ（７４０２）周围有ＤＣ和ＬＡＫ细胞围绕;（２）与Ｈ（７４０２）＋ＬＡＫ细胞组相比,在Ｈ（７４０２）＋ＬＡＫ＋ＤＣ组中,肿瘤细胞的坏死程度明显加重。提示人外周血ＤＣ在细胞免疫抗肿瘤过程中起重要作用。     

Flt3配基的生物学特性研究进展

Ｆｌｔ３配基（ＦＬ）是一种新近发现的、能够刺激早期造血的细胞因子。该因子通过与造血干细胞表面酪氨酸激酶受体３（Ｆｌｔ３）结合,刺激造血干细胞的增殖和分化,增加淋巴细胞、树突状细胞（ＤＣ）、自然杀伤（ＮＫ）细胞及体外长期培养的干细胞等的数量。若与其它造血细胞因子合用,ＦＬ的作用可以得到明显加强。最近的研究还发现,ＦＬ通过促进体内ＤＣ、ＮＫ细胞、细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬ）的增殖、分化和成熟,发挥抗肿瘤作用     

盐分对碱蓬幼苗离子含量,甜菜碱水平和BADH活性的效应

研究了盐生植物碱蓬（Ｓｕａｅｄａ ｓａｌｓａ）生长在不同浓度的ＮａＣｌ和ＫＣｌ溶液中体内Ｎａ＋ 、Ｋ＋ 含量、甜菜碱水平和甜菜碱醛脱氢酶（ＢＡＤＨ）活性的动态变化。ＮａＣｌ处理９６ 小时后,碱蓬地上部Ｋ＋ 含量低于对照,而Ｎａ＋ 明显高于对照,并分别随外界盐度增加而升、降;ＫＣｌ处理的植株,Ｋ＋ 、Ｎａ＋ 含量变化与ＮａＣｌ处理的相反;甜菜碱水平和ＢＡＤＨ 活性随外界ＮａＣｌ浓度增加而升高,甜菜碱水平随处理时间延长而增大,ＫＣｌ对甜菜碱水平和ＢＡＤＨ 活性的效应类似ＮａＣｌ。证明ＮａＣｌ和ＫＣｌ均能促进盐生植物碱蓬体内甜菜碱的积累,初步证明ＢＡＤＨ 与甜菜碱的积累有关     

CD3ε和PMA对fas基因转录调控作用的研究

研究了ＣＤ３ε和ＰＭＡ对细胞凋亡基因ｆａｓ的转录调控作用．根据已知的人ｆａｓ基因５＇上游序列设计引物,用ＰＣＲ法从人胸腺细胞基因组ＤＮＡ中扩增出ｆａｓ５＇上游长为４４６ｂｐ的启动子片段．将此片段定向克隆到以虫荧光素酶为报告基因的真核细胞表达载体ｐＸＰ２中．经限制性内切酶酶切鉴定及序列测定分析表明此重组表达质粒ＤＮＡ的结构和序列正确．用此质粒（ｐＸＰ２－ｆａｓｕｐ）瞬时转染人ＪｕｒｋａｔＴ淋巴细胞,分析报告基因的表达水平．结果表明ｆａｓ基因上游－５０６到－６０的区域有弱启动子活性,约是阴性对照的１．５倍．抗ＣＤ３ε抗体和ＰＭＡ处理均可增强ｆａｓ启动子的活性,促进报告基因的表达,其虫荧光素酶活性分别是未经处理的ｐＸＰ２－ｆａｓｕｐ转染细胞的１．７倍和３．３倍,但二者没有协同作用．ＰＫＣ的抑制剂ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ和ＰＴＫ的抑制剂ｈｅｒｂｉｍｙｃｉｎＡ可抑制ＰＭＡ诱导的ｆａｓ基因转录,使虫荧光素酶基因的表达降至未用ＰＭＡ处理的水平．但ＰＴＫ的另一种抑制剂ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ可与ＰＭＡ发挥协同作用,上调ｆａｓ基因的转录,使虫荧光素酶活性增加到５倍．这些结果为阐明ＣＤ３ε及ＰＭＡ介导Ｔ淋巴细胞激活和凋亡的分子机制     

DIDS和ConA对带3蛋白转运活性及结构的影响

测定了伴刀豆球蛋白（ＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ）和ＤＩＤＳ对人红细胞带３蛋白活性及结构的影响。（１）ＣｏｎＡ使带３转运速度常数Ｋ显著增加。ＣｏｎＡ浓度达到０．０５ｍｇ／ｍｌ时,Ｋ值增加３４．４％。ＤＩＤＳ对带３活性有明显的抑制作用。（２）荧光探针ＤＰＨ,３ＡＳ,９ＡＳ,１６ＡＰ分别测定ＣｏｎＡ和ＤＩＤＳ与带３结合后膜流动性的变化。ＣｏｎＡ能明显增加膜脂的流动性,而ＤＩＤＳ则降低膜脂流动性。（３）差示扫描量热法（ＤＳＣ）测定带３蛋白变性性质,发现ＣｏｎＡ使红细胞膜上带３蛋白变性峰出现温度从６９．２５°Ｃ减小到６６．２５°Ｃ,而ＤＩＤＳ则使之增至７９．５°Ｃ。     

香菇C_（91－3）菌发酵液小鼠体内外抗肿瘤作用的研究

香菇Ｃ_（９１－３）菌是我们多年筛选出的一株经生物发酵后,其发酵液具有明显的抗肿瘤、抗细菌作用的真菌。研究结果表明：该发酵液具有明显体外抗肿瘤作用的活性物质。对ＭＨ_（１３４）、Ｘ５５５３、Ｃａ７６１／Ｌ、ＹＡＣ－１、Ｈ_（２２）、Ｋ５６２抑瘤率为７６．７～１００％。在体内抗肿瘤实验中,采用Ｈ_（２２）、Ｓ１８０腹水瘤的研究中,小鼠存活率分别为４０％、４５％。本文还对香菇Ｃ_（９１－３）菌发酵液抗肿瘤的机理进行了探讨。     

抗菌肽的固相合成,分离纯化与构效关系的研究

应用手工固相ＤＣＣ／ＨＯＢｔ法合成ＣｅｃｒｏｐｉｎＢ、Ｓｈｉｖａｌ１、ＡＢＰ３、ＷＨＤ４种抗菌肽,各抗菌肽的Ｃ－端均为酰胺化,最终用ＨＰＬＣ分离纯化,这４种肽对大肠杆菌Ｋ１２Ｄ３１,野生型大肠杆菌,产气杆菌及４种植物病原菌青枯菌,临床致病理大肠杆菌,伤寒杆菌,硝酸盐杆菌均有明显的杀伤或抑制作用,对白血病细胞Ｋ５６０,肺癌细胞Ａ５４９也有杀伤作用,其中尤以ＷＨＤ杀伤作用最为明显,并用对其它３种肽不能     

Ca2+/CaM介导生长素对小麦胚芽鞘细胞NAD激酶的刺激作用

外源ＩＡＡ 处理可以显著增加小麦胚芽鞘细胞ＮＡＤ 激酶的催化活性,钙离子可以增强ＩＡＡ 的作用效果,而钙离子通道抑制剂ＬａＣｌ３ 则起强烈的抑制作用,但在存在钙离子的条件下,这种抑制作用可以被钙离子载体Ａ２３１８７ 消除;钙调蛋白能够在离体条件下激活经过ＤＥＡＥ 纤维素柱纯化的小麦胚芽鞘ＮＡＤ激酶,经过ＩＡＡ 处理的胚芽鞘细胞中能够刺激ＮＡＤ 激酶活性的钙调蛋白含量明显增加,ＩＡＡ 的这一作用受ＬａＣｌ３ 的抑制。上述结果表明Ｃａ２＋ ／ＣａＭ 复合物介导了生长素对小麦胚芽鞘细胞ＮＡＤ 激酶活性的促进作用。     

LC－CW的抗肿瘤作用及其机理的研究

提取干酪乳酸杆菌细胞壁成分（ＬＣ－ＣＷ）,研究其抗肿瘤作用及其机理。结果表明：１００μｇＬＣ－ＣＷ,ｉｐ,连续４天,可明显抑制小鼠Ｓ１８腹水瘤移植物的生长,抑瘤率为５４％。增强ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ杀伤活性,可明显促进小鼠ＮＫ杀伤活性,明显促进小鼠Ｔ细胞转化,促进ＣｏｎＡ和ＰＨＡ－Ｐ诱导的ＩＬ－２产生,促进ＳＩＬ－２Ｒ的减少。研究结果表明ＬＣ－ＣＷ是一种重要的抗肿瘤免疫调节因子。     

老龄大鼠海马CA_3区神经元的酶细胞化学改变及人参茎叶皂甙的抗衰老作用

本实验应用酶细胞化学方法观察了老龄大鼠海马ＣＡ３区神经元的琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）,酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ）的衰老变化,同时对比观察了人参茎叶皂甙的抗衰老作用。实验数据由彩色显微图像分析系统进行定量分析。实验结果提示老龄时海马ＣＡ３区神经元ＳＤＨ酶活性减弱,ＡＣＰａｓｅ活性增强。而人参茎叶皂甙具有促进神经元ＳＤＨ酶活性,降低ＡＣＰａｓｅ活性的作用。本结果为老龄时学习记忆能力下降及人参茎叶皂甙延缓衰老提供了一定的酶细胞化学变化的依据。     

人体胸腺和周围淋巴器官内T细胞亚群和NK细胞分布的研究

本文用多种Ｔ细胞和ＮＫ细胞单抗和免疫组织化学的ＡＢＣ技术,在冰冻切片上对人扁桃体、淋巴结、牌和胸腺内Ｔ细胞亚群和ＮＫ细胞的分布进行了检测。结果显示,ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ４、ＣＤ３和ＡＩＧ３阳性细胞主要分布在扁桃体,淋巴结的副皮质区、脾的动脉周围淋巴鞘和胸腺,但各种抗体的反应强度不同。从各种Ｔ细胞工群的染色强度和形状看,胸腺髓质部的胸腺细胞相当于周围淋巴器官内的胸腺依赖区。胸腺内Ｔ细胞在分化过程中,质膜上的抗原也有相应变化。ＮＫ细胞主要分布在淋巴小结的生发中心,淋巴结和扁桃体的副皮质区,脾的红髓以及胸腺的筋质部。这些不同的分布,说明ＮＫ细胞不仅与淋巴小结的活动有关,可能还参与机体的免疫调节功能。     

吸湿—回干处理降低番茄种子电解质渗漏的机理研究

对吸湿－回干处理降低番茄种子电解质渗漏的机理进行了研究,结果表明,吸湿－回干处理降低番茄种子电解质渗漏的效应产生于吸湿阶段。随吸湿时间延长,电解质渗漏下降,而ＳＯＤ、ＣＡＴ活性上升。mRNA和蛋白质合成抑制对剂电解质渗漏下降与ＳＯＤ、ＣＡＴ活性上升均无抑制作用,表明吸湿处理降低电解质渗漏、提高ＳＯＤ、ＣＡＴ活性的作用mＲＮＡ和蛋白质合成无关,吸湿和吸湿－回干处理后Ｋ３Ｆe(CN)6还原活显著下降,表明的生理生化状态发生了某种变化。     

LC—CW的抗肿瘤作用及其机理的研究

提取干酪乳酸杆菌细胞壁成分,研究其抗肿瘤作用及其机理。结果表明：１００μｇ－ＬＣ－ＣＷ,ｉｐ,连续４天,可明显抑制小鼠Ｓ１８０腹水瘤移植物的生长,抑瘤率为５４％。增强ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ杀伤活性。可明显促进小鼠ＮＫ杀伤活性,明显促进小鼠Ｔ细胞转化,促进ＣｏｎＡ和ＰＨＡ－Ｐ诱导的ＩＬ－２产生,促进ＳＩＬ－２Ｒ的减少。     

PIC-BE诱导K562/ADM细胞凋亡及逆转其MDR的研究

β榄香烯吗素（ＰＩＣ－ＢＥ）是抗癌新药β榄香烯的水溶性衍生物．采用人红白血病的多药耐药性（ＭＤＲ）细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ作为实验模型,观察ＰＩＣ－ＢＥ对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,并进而研究其对该细胞ＭＤＲ的可能影响．结果显示：（１）Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对ＡＤＭ具有明显的抗性,与Ｋ５６２细胞相比,抗性倍数约为４０倍,而两者对ＰＩＣ－ＢＥ的ＩＣ５０接近,无显著差异;（２）ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０～３０．０μｇ／ｍｌ）对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞具有明显的生长抑制和凋亡诱导作用,两种作用的强度在一定的范围内均具药物浓度和作用时间依赖性;（３）低毒剂量ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０μｇ／ｍｌ）与ＡＤＭ（４．０μｇ／ｍｌ）联合应用,可显著增强ＡＤＭ对该细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,升高细胞内ＡＤＭ的浓度,降低该细胞对ＡＤＭ的ＩＣ５０,使该细胞对ＡＤＭ的抗性有数倍逆转．上述结果提示,ＰＩＣ－ＢＥ不仅是一种有效的广谱抗肿瘤剂,而且也是一种有效的ＭＤＲ逆转剂     

双功能抗体介导的胃癌杀伤效应

将诱变的αＣＤ３杂交瘤（ＴＫ~－）与ＰＤ４杂交瘤（ＨＧＰＲＴ~－）融合,获得分泌双功能抗体（ＢｓＡｂ）的四体杂交瘤Ｃ３．ＢｓＡｂＣ３可分别与ＣＤ３分子及胃癌相关抗原Ｐ４０反应．体外杀伤试验证实,当效靶比为４０：１,ＢｓＡｂＣ３浓度为１ｍｇ／Ｌ时,其杀伤效应可达７７．６％．该杀伤效应具有明显的特异性,仅Ｐ４０阳性表达的靶细胞可被溶解,体内杀伤试验证实,裸鼠接种胃癌细胞后５ｄ,以ＢｓＡｂＣ３活化的外周血淋巴细胞（ＰＢＬｓ）经局部皮下注射处理,可使移植胃癌完全消退（５／５）．这一明显的治疗作用可能与局部注射途径有关,可供临床应用参考．     

多胺与激动素对稀脉浮萍离体叶状体衰老的影响

多胺与ＫＴ 都可抑制暗诱导衰老的稀脉浮萍（Ｌｅｍ ｎａ ａｅｑｕｉｎｏｃｔｉａｌｉｓ）离体叶状体的叶绿素损失,且多胺的作用大于ＫＴ。ＫＴ 还显著抑制蛋白质的损失与蛋白酶活性的上升,而多胺对此却无大的影响。０．０５ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ的甲基乙二醛二脒基－腙（ＭＧＢＧ）轻微促进叶绿素和蛋白质的损失。０．０５ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ的ＫＴ 可抑制衰老过程中腐胺（Ｐｕｔ）的上升和亚精胺（Ｓｐｄ）的下降,而对精胺（Ｓｐｍ ）无明显影响。在稀脉浮萍中,精氨酸脱羧酶（ＡＤＣ）活性占优势。ＫＴ 可轻微促进ＡＤＣ 活性,而对鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）和Ｓ－腺苷甲硫氨酸脱羧酶（ＳＡＭＤＣ）活性无显著影响。讨论了多胺与细胞分裂素在抑制植物叶片衰老过程中作用途径的可能关系     

细菌DNA抗肿瘤免疫的实验研究

应用纯化提取的３种细菌染色体ＤＮＡ进行体内抗肿瘤免疫实验。结果表明，大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和长双岐杆菌ＤＮＡ由于含有大量的非甲基化的ＣｐＧ二核苷酸为核心的序列（称为ＣｐＧ ｍｏｔｉｆ），均能诱导ＮＫ细胞和单核细胞的激活，从而起到抗肿瘤免疫的作用。为微生物ＤＮＡ制剂作为生物反应修饰剂（ＢＲＭ）应用于抗肿瘤免疫提供了科学依据。     

灵芝多糖对人脐血LAK细胞活性的影响

本文研究了灵芝多糖（ＧＬＰ）对人脐血ＬＡＫ（ＣＢ—ＬＡＫ）细胞活性的影响,结果发现,单独ＧＬＰ能刺激人脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）增殖,但不能诱导ＬＡＫ活性,当与５０ｕ／ｍｌｒＩＬ—２伍用时,可增殖ＣＢ—ＬＡＫ细胞诱导活性,不同剂量ＧＬＰ（０．５—１００μｇ／ｍｌ）影响作用不同,以１０μｇ／ｍｌ浓度最好．在不同浓度ｒＩＬ—２（１０—１００ｕ／ｍｌ）诱导ＣＢ—ＬＡＫ细胞过程中加入ＧＬＰ（１０μｇ／ｍｌ）,可明显提高细胞增殖能力,减少ｒＩＬ—２用量。ＧＬＰ亦能促进效应阶段ＣＢ—ＬＡＫ细胞对Ｒａｊｉ肿瘤靶细胞的杀伤作用（Ｐ＜０．００１）。由此看出,ＧＬＰ具有增强ＣＢ—ＬＡＫ细胞活性的作用,是一很好的生物反应调节剂（ＢＲＭ）,有必要进行深入的研究。