伤寒Vi多糖菌稳定性研究

为研究国产伤寒Vi多糖菌苗的稳定性,将保存三年以上的伤寒Vi多糖菌苗成品采用自然风干和37℃恒温干燥两种方法浓缩后,用CL－4B柱层析分析系统,测定KD在0．25前多糖的回收率,结果均大于50％,同时对保存三年以上的制品按规程进行了全球,结果均符合规程要求,表明国产菌苗放置三年依然合格。     

伤寒Vi多糖菌苗规程草案

<正>目录引言概述A.生产要求 1.定义 2.一般生产要求 3.生产控制 4.分装与容器 5.成品检定 6.稳定性试验 7.记录 8.样品 9.标签和包装内的附页 10.分发和运输B.国家检定要求 1.总则     

冻干伤寒Vi＋A群流脑二联多糖疫苗的研究

将现行伤寒多糖疫苗和A群脑多糖疫苗各1人份,联合后以乳糖为保护剂冻干,制备成1人份二联冻干疫苗。并对该疫苗进行鉴别试验、伤寒Vi多糖含量测定、A群流脑多糖磷含量测定、安全试验、冻干二联苗与单价苗Sepharose CL-4B柱层析图比较以及免疫保护效果、动物血清抗体滴度和稳定性试验。试验初步表明,该二联多糖疫苗是安全的,混合后不会引起各自的主要成份、免疫保护效果和抗体应答水平发生变化。即相互没有干扰。一年后各项指标检测表明稳定性良好。可以作为二联苗接种同时预防伤寒和A群汉脑所引起的传染。     

伤寒Vi多糖菌苗接种反应观察

本文报告了对我国首次成功的伤寒Ｖｉ多糖菌苗进行人体接种反应观察结果,接种对象为２０至５４岁无伤寒病史,近年无伤寒菌苗接种史的健康人,共６０名,以完全随机的方法分为两组,实验组注射３０μｇＶｉ多糖菌苗,对照组注射Ｖｉ多糖菌苗的稀释液。其结果３０名Ｖｉ多糖菌苗接种者注射后体温无中重反应发生,局部红肿仅有１例中反应。注射后对血压、心律没有影响。红细胞计数,白细胞计数均在正常范围,与接种前相比,无显著差异     

火箭电泳法测定伤寒Vi多糖菌苗多糖含量

伤寒沙门氏菌Ｖｉ抗原系ａ─１,４─Ｎ─乙酰─半乳糖醛酸高度聚合体,其Ｃ２和Ｃ３位分别被Ｎ─乙酰基和０─乙酰基取代,它不能用分光光度法测定其含量,实验表明火箭电泳的火箭峰高与其样品中多糖含量的对数成直线相关关系,作者采用火箭电泳方法对全国六个生物制品研究所的１８批伤寒Ｖｉ多糖菌苗中Ｖｉ多糖含量进行了测定,结果表明多数制品符合规程要求,但部分制品多糖含量偏高,值得引起注意,各所三批制品差别不大,表明各所的生产工艺相对稳定,利用火箭电泳测定伤寒Ｖｉ多糖,操作简单,用时较短,所需样品极少,是目前较为合适的测定伤寒Ｖｉ多糖菌苗多糖含量的方法。     

十六烷基三甲基溴化铵（Cetavlon）对伤寒Vi多糖菌苗生产中…

用Ｃｅｔａｖｌｏｎ不同母液浓度,不同作用温度及作用时间等三方面对伤寒Ｖｉ多糖菌苗生产中复合多糖收量的影响进行了比较试验。结果证明,使用０．６％的浓度,１５－２０℃室温,作用１２小时以上可得到比较多的复合多糖收量。     

十六烷基三甲基溴化铵(Cetavlon)对伤寒Vi多糖菌苗生产中复合多糖收量的影响

用Ｃｅｔａｖｌｏｎ不同母液浓度、不同作用温度及作用时间等三方面对伤寒Ｖｉ多糖菌苗生产中复合多糖收量的影响进行了比较试验,结果证明,使用０．６％的浓度,１５～２０℃室温,作用１２小时以上可得到比较多的复合多糖收量。     

伤寒Vi多糖菌苗多糖含量及分子大小测定试验

伤寒Ｖｉ多糖菌苗是我国新近研制成功的一种多糖菌苗。为了严格控制该制品的质量,经反复试验,建立了多糖含量和分子大小的测定方法。本文报导了（１）用火箭电泳法测定伤寒Ｖｉ多糖菌苗多糖含量。经对不同实验条件进行比较,选择出较为理想的条件。用该法测定８批样品。结果均符合规程要求。对其中５批样品进行６次重复试验表明,该法的重复性好,操作简单,是测定多糖含量较为理想的方法。（２）用琼脂糖柱层析法对２８批伤寒Ｖｉ多糖菌苗的分子大小进行测定。对用该法所得柱层析收集液分别用Ｈｅｓｔｒｉｎ法和２０６ｎｍ扫描法测定其多糖回收率,对测定结果进行比较。结果表明,两种方法的测定结果无显著性差异（Ｐ＞０．０１）,而且重复性均好。可根据实验室条件选择测定方法。     

国产与法国Merieux产伤寒Vi多糖菌苗人体接种反应及血清抗体应答比较

作者对国产伤寒Ｖｉ多糖菌苗和法国Ｍｅｒｉｅｕｘ产伤寒Ｖｉ多糖菌苗人体接种反应及血清抗体应答情况进行比较,接种后６～８小时法国菌苗的体温反应同国产菌苗相比有显著性差异（ｘ２＝５．３４７,０．２５＞Ｐ＞０．０１）,２４小时后反应消失,免后一月国产菌苗和法国菌苗Ｖｉ抗体四倍增长率分别为９１．８０％和８９．６％（ｘ２＝０．１６４,Ｐ＞０．０５）,ＧＭＴ分别为３６．９４和３５．４９（ｔ＝０．６５３,Ｐ＞０．０５）,二者均无显著性差异。     

被动血凝试验测定伤寒Vi抗体

作者从拘橼酸杆菌中提取纯化获得其Ｖｉ多糖抗原,该抗原具有伤寒沙门氏菌Ｖｉ抗原的免疫学特性,而不含伤寒沙门氏菌０,Ｈ抗原,用其致敏新鲜羊血球作被动血凝试验,特异性敏感性均很好。所需Ｖｉ抗原致敏浓度极低,仅为０．０５ｕｇ／ｍｌ。使用新鲜羊血球凝模式较好,便于观察结果,采用被动血凝试验检测１０６名健康中学生肌肉注射３０ｕｇ伤寒Ｖｉ多糖菌苗前后Ｖｉ抗体的变化情况,发现免疫后血清抗体的四倍增长率达８９％,表明伤寒Ｖｉ多糖苗具有良好的免疫原性。     

宋内氏痢疾菌无毒株S7表达Vi抗原工程菌的构建

将含有编码Ｖｉ抗原ＶｉａＢ基因片断的质粒转导进入宋内氏痢疾菌无毒株Ｓ７中,组建了重组菌株Ｓ７Ｖｉ。质粒电泳图谱显示重组菌株Ｓ７Ｖｉ中存在被转入的外源质粒带。重组株的生化特性没有改变。菌体凝集及Ｖｉ抗血清标记的ＳＰＡ菌液凝集反应证明在重组株的菌体表面,同时表达了Ｖｉ抗原和宋内氏毒菌的Ｏ抗原。以５×１０~８ＣＦＵ、１０×１０~８ＣＦＵ的重组株免疫近交系的ＬＩＢＰ小鼠,免疫小鼠对宋内氏毒株Ｓ６３攻击的保护率为６０％至９０％,对伤寒毒株Ｔｙ２攻击的保护率为２５％至４０％。     

25 Years after Vi Typhoid Vaccine Efficacy Study,Typhoid Affects Significant Number of Population in Nepal

Salmonella Typhi, first isolated in 1884, results in infection of the intestines and can end in death and disability. Due to serious adverse events post vaccination, whole cell killed vaccines have been replaced with new generation vaccines. The efficacy of Vi polysaccharide (ViPS) vaccine, a new generation, single-dose intramuscular typhoid vaccine was assessed in Nepal in 1987. However, despite the availability of ViPS vaccine for more than 25 years, Nepal has one of the highest incidence of typhoid fever. Therefore we collected information from hospitals in the Kathmandu Valley from over the past five years. There were 9901 enteric fever cases between January 2008 and July 2012. 1,881 of these were confirmed typhoid cases from five hospitals in the Kathmandu district. Approximately 70% of the cases involved children under 15 years old. 1281 cases were confirmed as S. Paratyphi. Vaccines should be prioritized for control of typhoid in conjunction with improved water and sanitation conditions in Nepal and in endemic countries of Asia and Africa.     

Specificity of monoclonal antibodies binding to the polysaccharide antigens (Vi, O9) of Salmonella typhi

A panel of monoclonal antibodies were generated against the surface polysaccharide antigens of the cell envelope of Salmonella typhi. Four clones (IgM) were specific for the capsular Vi polysaccharide, and one clone (IgG3) reacted selectively with the S. typhi lipopolysaccharide in enzyme immunoassay. On the basis of their reactivity pattern and binding affinity, MATy-V7 (IgM) and MATy-O9 (IgG3) antibodies were selected for further characterization of their antigenic specificity. In an inhibition enzyme immunoassay with rabbit factor-specific anti-Salmonella antibodies as the competing agents, the reactivity of MATy-V7 and MATy-O9 were significantly inhibited by the anti-Vi and anti-O9 antisera, respectively. Moreover, both the Vi- and O9-specific monoclonal antibodies were shown to be useful serotyping agents by correct identification in slide agglutination tests of 32 clinical isolates of all the S. typhi and other serogroup D salmonellae among a total of 140 bacterial isolates representing eight different Enterobacteriaceae genera tested.     

冬虫夏草多糖的分子结构与免疫活性

 冬虫夏草多糖(在本文中名为CS-81002)是由冬虫夏草菌Cordyceps sinensis(Berk)Sacc在人工发酵条件下产生的胞外多糖。用凝胶过滤法测出CS-81002的分子量Mr=43kD。CS-81002的单糖组成为Man:Gal:Glc=10.3:3.6:1。甲基化分析和部份酸水解结果表明,CS-81002是多分支的杂多糖,由→6)-Manp-(1→形成主链,大约每10个主链Man残基中,有6个在C3位上被取代(即形成→3,6)-Manp-(1→分支),有4个在位C2上被取代(即形成→2,6-Manp-(1→分支),从而形成侧链。主链中还有少许未被取代的Man残基。侧链则由→3-)-Galf-(1→,→4)-Glcf-(1→,→4)-Manp-(1→和→2)-Manp-(1→组成。位于非还原末端的,则三种单糖残基都有。CS-81002在5mg/kg体重×12剂量条件下,对正常的昆明小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有显著促进作用。在同样剂量条件下,对正常LACA小鼠脾脏溶血斑形成细胞(PFC)对绵羊红细胞的溶血作用无显著影响。不同程度的部份酸水解可使CS-81002的分子量下降,分支减少,并且对巨噬细胞吞噬功能的促进作用亦有下降趋势。在所得到的各个部份酸水解级分(分子量分别为41000,40000,32000,16000和12000)中,分子量为12000的级分对巨噬细胞吞噬功能无促进作用。     

夏枯草多糖的分离纯化与抗氧化活性研究

对夏枯草多糖(PP2)的分离纯化方法作了探讨,通过正交试验,筛选出多糖提取条件的最佳组合。采用纸层析、琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法对多糖纯度进行鉴定。通过气相色谱仪对多糖的单糖组成进行分析。通过体外化学模拟,研究夏枯草多糖的抗氧化性。实验表明,夏枯草多糖对O2-.、.OH二种自由基及亚硝酸根离子具有一定的清除能力,对R.自由基的清除较弱,具有防止膜脂质过氧化,减少红细胞溶血和降低脂质过氧化产物丙二醛的生成量的作用。