大球盖菇性遗传模式和育种工艺研究

为探讨大球盖菇的交配型,以鲜大球盖菇为材料,经担孢子弹射,稀释分离法获得22个单孢菌株。经单孢出菇验证其性遗传模式为异宗结合。再经单孢配对试验,得到4种不同交配型的单孢菌株,单孢的极性比为4∶4∶11∶3。经异核体菌株出菇试验,证实大球盖菇的性遗传模式为四极性异宗结合。     

大球盖菇原生质体制备与再生条件研究

研究了大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)菌丝原生质体制备和再生条件,结果表明:在30℃、pH5.5、0.6mol/L甘露醇、1.5%溶壁酶条件下对培养3d的菌丝体酶解2.5h,原生质体产量达到1.36×107个/mL。原生质体适宜再生培养基为马铃薯200g,蔗糖20g,蛋白胨2g,酵母粉2g,KH2PO41.5g,K2HPO41.5g,MgSO4.7H2O 1.5g,维生素B10.1g,维生素B60.1g,0.6mol/L甘露醇。采用上述培养基,双层平板法进行再生试验,再生率达到0.96%。为大球盖菇原生质体技术深入研究和应用奠定了基础。     

大球盖菇硒多糖体内抗氧化能力检测

采用液体发酵的方法对大球盖菇菌丝进行富硒培养,提取硒多糖进行抗氧化能力测定.结果表明,大球盖菇硒多糖能明显提高小鼠血中SOD、GSH-Px的含量,能在一定程度上显著降低血中MDA的含量,具有显著的抗氧化功能.     

大球盖菇原生质体再生及单核化特性的研究

大球盖菇原生质体再生条件及单核化特性结果。原生质体再生程度极快,涂布平板3d后肉眼即可见明显的再生菌落形成,在PGPM再生培养基上再生率为0．97－2．0％,渗稳剂种类对再生率无明显影响,但可影响再生菌落形态,液体预培养1－2d,再生率明显下降;大球盖菇原生质体单核化率高达77．6％,且再生双核体和再生单核体在形成再生菌落时无时间差,其生长速度亦无快慢之分,液体预培养可显著减少单核化率,再生单核体中存在亲本两种交配型,但二者的比率不为1。     

大球盖菇“山农球盖3号”品种的选育

本研究收集了国内外28株大球盖菇菌株,通过SRAP分子标记技术和耐高温递进式循环驯化选择出2株适合的实验材料,采用原生质体融合、原生质体再生技术进行耐高温菌株初选,筛选出2株性状优良的耐高温菌株（S20菌丝耐高温、产量高;R10 I级菇比例高、子实体耐高温）,收集2菌株出菇后的孢子进行单孢杂交,在高温条件下通过多次继代培养和栽培实验,最终确定出J8L4（山农球盖3号）为最优耐高温高产菌株。该菌株能连续7d在最高料温达27-34℃、最高气温达40-47℃条件下生长良好,无杂菌污染,40d出菇,其产量达到14.56kg/m ²,生物转化率为91.03%,优质菇比例为66.21%。研究结果表明,通过多层次的驯化筛选和多项育种技术的综合使用,使得所选菌株的优良性状更显著,遗传稳定性更好。     

基质氮素对大球盖菇生长及亚硝酸盐含量的影响

目的探索氮源对大球盖菇生长及亚硝酸盐、硝酸盐含量的影响。方法在培养基中添加不同含氮化合物,培养菌丝,定时测定生长量,并采用重氮偶合分光光度法测定其亚硝酸盐、硝酸盐含量。结果添加亚硝酸盐的基质,菌丝生长速度比对照慢。尿素、硫酸铵、硝酸铵和硝酸钾四处理之间差异无显著性,其生长速度最快。各处理间亚硝酸盐、硝酸盐含量差异均存在非常显著性。亚硝酸钾处理,亚硝酸盐含量高达402.03 mg/kg,不宜食用。硝酸钾处理,亚硝酸盐含量为30.87 mg/kg,食用100 g,就会超出亚硝酸盐日限量;硝酸铵处理,硝酸盐含量远远超过日常蔬菜,也不宜食用。结论在栽培大球盖菇时氮源不宜使用亚硝酸盐、硝酸盐,应使用尿素或硫酸铵,有机氮源也可以。     

大球盖菇原生质体再生及单核化特性的研究*

大球盖菇原生质体再生条件及单核化特性结果。原生质体再生速度极快,涂布平板３ｄ后肉眼即可见明显的再生菌落形成,在ＰＧＰＭ再生培养基上再生率为０．９７～２．０％,渗稳剂种类对再生率无明显影响,但可影响再生菌落形态,液体预培养１～２ｄ,再生率明显下降;大球盖菇原生质体单核化率高达７７．６％,且再生双核体和再生单核体在形成再生菌落时无时间差,其生长速度亦无快慢之分,液体预培养可显著减少单核化率,再生单核体中存在亲本两种交配型,但二者的比率不为１。     

毛竹林下套种大球盖菇对中小型土壤动物群落特征的影响

为了解毛竹林下套种大球盖菇对中小型土壤动物群落特征的影响,以套种大球盖菇不同年限(0、1、2和3 a)的毛竹林为研究对象,采用Tullgren干漏斗法和Baermann湿漏斗法对土壤中小型动物群落组成及分布进行调查。试验共捕获中小型土壤动物89511只,隶属于8纲13类。土壤动物类群数和密度均随种植年限的增加呈先升高后降低趋势,以种植1 a最高(P<0.05)。各处理土壤动物类群数和密度均随土层加深而逐渐减少,呈现表聚性特征。Shannon多样性指数、Pielou均匀度指数、Margalef丰富度指数和密度-类群指数均随着种植年限的增加呈先升高后降低趋势,且均以种植1 a最高,而Simpson优势度指数呈先降低后升高趋势,种植1 a显著低于其他处理(P<0.05)。种植0和3 a、2和3 a的相似性指数为中等相似,其余各处理间的相似性指数均为极相似。综上表明,毛竹林下套种大球盖菇对中小型土壤动物群落结构具有明显影响,种植1 a后毛竹林地具有更高的土壤动物类群数、密度和多样性。随着种植时间的延长,中小型土壤动物的数量逐渐恢复到种植前水平,但群落组成可能发生改变。     

不同碳氮营养源和培养温度对大球盖菇菌丝生长的影响

研究了碳源、氮源和温度对大球盖菇菌丝生长的影响,结果表明碳源中蔗糖对大球盖菇的菌丝生长最有利,其次为可溶性淀粉. 氮源中尿素最好,其次为蛋白胨和酵母膏;经温度梯度试验得出大球盖菇菌丝生长温度在 5～35 ℃,适宜生长温度为 25～30 ℃.经生料栽培发现大球盖菇适于麦秸、稻草上生长.     

大球盖菇产胞外多糖液体优化培养条件初探

以菌丝生物量及胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)含量为指标对大球盖菇产胞外多糖液体培养基组成和发酵条件进行了优化。结果表明,最适碳源是麦芽糖,最适氮源是酵母膏,正交试验确定最佳培养基组成为马铃薯150 g/L,麦芽糖20 g/L,酵母膏1 g/L,KH2PO41 g/L,MgSO4.7H2O 2.5 g/L。最佳发酵条件为28℃,摇床转速160 r/min,起始pH值6.5,装液量100 mL/250 mL、接种量10%,发酵时间6 d。在此条件下,大球盖菇菌丝生物量及EPS含量分别比对照增加了31.8%和51.6%。     

硒对镉胁迫下大球盖菇菌丝生长的影响

选用大球盖菇Stropharia rugosoannulata为试验材料,分析在镉胁迫处理下（2mg/L）添加不同浓度硒（0、6、15、20mg/L）对大球盖菇菌丝生长的影响,初步研究了施加硒对镉胁迫下大球盖菇菌丝生长抑制的缓解效应和作用机制。结果表明：镉对大球盖菇生长速度和生物量具有明显抑制作用,镉造成了大球盖菇渗透调节物质、过氧化氢和丙二醛含量显著增加;添加硒后,镉对大球盖菇菌丝的生长速度、生物量抑制作用均有所改善,且增加了渗透调节物质,促进镉胁迫下大球盖菇渗透调节能力;硒诱导抗氧化酶的活性上调,提高活性氧清除能力,降低了菌丝中丙二醛和过氧化氢的含量,缓解细胞膜过氧化程度,增强了大球盖菇对镉的耐受性。本研究重点探讨外源添加硒对镉胁迫下大球盖菇菌丝生长、生理特性及抗氧化胁迫能力的影响,为进一步研究硒在食用菌抗镉栽培中的应用奠定了一定的理论基础。     

大球盖菇的生物学基础、活性成分及其应用

大球盖菇是联合国粮农组织向发展中国家推荐栽培的食用菌之一,对农作物秸秆及林木枝条、落叶等有较强的降解能力。通过人工种植可培养营养丰富、美味可口的大球盖菇子实体产品,其菌渣还能够改善土壤环境,在生态农林产业及循环经济等方面具有重要作用。本文从大球盖菇的生物学基础、子实体营养、生物活性成分及其在农林生态和环境修复应用等角度进行综述,为大球盖菇的进一步开发利用及其相关产业发展提供参考。     

基于基因组数据解析大球盖菇交配型系统

大球盖菇Stropharia rugosoannulata是一种具有较强木质纤维素降解能力以及高营养的重要食用菌。此菌属于四极性异宗结合担子菌,但是交配型位点结构仍未被解析。本研究利用基因组数据通过生物信息学方法进行大球盖菇的A和B交配型位点解析,并与其他大型真菌进行比较。结果显示大球盖菇的A交配型位点包含了一对保守的HD1和HD2基因,位点上下游基因的共线性较高,与Galerina patagonica和砖红韧黑伞Hypholoma sublateritium相似度最高,A位点结构上也较为保守,在上下游具有保守的MIP、Sec61蛋白、甘氨酸脱氢酶和β侧翼蛋白。B位点包含5个信息素受体和3个信息素前体基因,与其他真菌相比较发现,B位点及上下游基因的共线性较差,表明在不同的真菌中B位点变异性较大。本研究所获得的结果将有助于诠释大球盖菇交配型位点结构,为今后的遗传育种提供了理论依据。     

硒对大球盖菇菌丝生长、子实体农艺性状和营养品质的影响

【背景】大球盖菇是我国新兴的食用菌栽培品种,其栽培技术简单、产量高、效益高,在农业废弃物高效转化和农民增收方面发挥重要作用。【目的】探究硒对大球盖菇菌丝生长、子实体农艺性状和营养品质的影响,为富硒大球盖菇的实践生产提供依据。【方法】通过平板试验,测定添加不同质量浓度的Na₂SeO₃对菌丝生长速度和干重的影响。以木屑、稻壳、玉米芯为主要原料,添加0-10mg/kgNa₂SeO₃,进行大球盖菇生料栽培试验,测定一潮菇农艺性状、营养品质和抗氧化活性。【结果】Na₂SeO₃浓度为0-10mg/L时,对大球盖菇菌丝生长速度与干重无显著影响,分别为3.74-3.76 mm/d和40.67-41.33 mg;当浓度达到15 mg/L及以上时,显著抑制菌丝生长。栽培试验结果表明,添加0-10 mg/kg Na₂SeO₃对一潮菇生物学效率无显著影响,7.5 mg/kg剂量组表现出最佳的菌盖直径、菌柄直径和单菇鲜重。子实体营养分析显...     

培养基中添加海藻糖对大球盖菇、斑玉蕈菌丝生长的影响

【背景】大球盖菇和斑玉蕈是食药兼用且具有开发潜力的珍稀食用菌,培养基对菌丝生长及子实体发育具有重要作用,优化培养基显得尤为重要。【目的】筛选出最适合培养大球盖菇、斑玉蕈的新型培养基。【方法】使用添加海藻糖的新型培养基,对不同培养基培养的大球盖菇及斑玉蕈菌株的菌丝生长状况、生长速度和生物量及纤维素酶、漆酶活性进行测定与分析。【结果】相较于PDA培养基,添加海藻糖的培养基能够提高菌丝生长速度、增加生物量,海藻糖添加的比例对纤维素酶和漆酶的影响较大,对大球盖菇及斑玉蕈菌丝的生长产生显著的促进作用,但不会改变其蛋白质的组成。【结论】大球盖菇最适合选用PTA-5培养基,斑玉蕈的最佳培养基是PDTA培养基。     

中国的球盖菇科(四)裸盖菇属

通过观察吉林农业大学菌物研究所标本馆(HMJAU)、中国科学院微生物研究所菌物标本馆(HMAS)、广东省微生物研究所标本馆(HMIGD)及作者野外采集的共37份标本的宏观及微观形态结构,对中国裸盖菇属[Psilocybe(Fr.)Kumm.]进行了分类学研究,对已知的10个种进行了形态学描述,并编写了分种检索表。报道了采自内蒙古的1个新种:蒙古裸盖菇(Psilocybe mongolica Sarentoya et Tolgor);3个中国新记录种:鳞柄裸盖菇(Psilocybe baeocystis Singer & Smith)、拟变蓝裸盖菇(Psilocybe wayanadensis K.A.Thomas,Manim & Guzmán)、越南裸盖菇(Psilocybe yungensis Singer & Smith);4个省级新记录种:内蒙古新记录种喜粪生裸盖菇[Psilocybe coprophila(Bull.ex Fr.)Kumm.]、广东省新记录种古巴裸盖菇[Psilocybe cubensis(Earle)Sing.]、广西省新记录种黄裸盖菇(Psilocybe fasciata Hongo)和西藏新记录种毒裸盖菇[Psilocybe venenata(Imai)Imazeki & Hongo]。     

中国的球盖菇科(二)球盖菇属

通过对吉林农业大学菌物研究所标本馆(HMJAU)、中国科学院微生物研究所菌物标本馆(HMAS)、中国科学院昆明植物研究所标本馆隐花植物标本室(HKAS)和广东微生物研究所标本馆(HMIGD)的132份标本的宏观形态和微观结构的观察,共报道中国球盖菇属[Stropharia(Fr.)Qulet]真菌14种(包括变种、变型),其中包括1个拟定新种,即黄囊球盖菇[Stropharia chrysocystidia Meng T.X.et Tolgor];1个新变种,即蚯蚓铜绿球盖菇[Stropharia aeruginosa(Fr.)Qulet var.earthwormia Meng T.X.et Tolgor];2个中国新记录种,即偏孢孔球盖菇[Stropharia dorsiporaEsteve-Rav.&Barrasa]和盐碱球盖菇[Stropharia halophila Pacioni];四川省新记录种1个,即亮白球盖菇[Stropharia albonitens(Fr.)Qulet];吉林省新记录变型1个,即浅黄皱环球盖菇[Stropharia ru-gosoannulataf.luteaHongo];云南和西藏新记录变型1个,即黄褐球盖菇[Stropharia aeruginosa(Fr.)Qulet f.brunneola Hongo]。对已知种进行了形态学描述、显微线条图绘制,编写了分种检索表,对每个种的担孢子进行了扫描电子显微镜观察。     

裸盖菇和斑褶菇属真菌菌种的有效分离方法

【目的】探讨获取裸盖菇属及斑褶菇属真菌纯培养的有效分离方法。【方法】采用菌褶接种法和孢子弹射法进行分离,以形态鉴定为基础,通过ITS区测序并与DNA序列库中已知序列进行比对的分子鉴定方法鉴别分离培养物的真伪,以确定分离方法的可靠性。【结果】对采自云南的28个裸盖菇属和斑褶菇属菌株进行了分离,菌褶接种法有24个菌株分离纯化成功,成功率达86%,而孢子弹射法仅有7个菌株分离成功,成功率为25%。【结论】菌褶接种法对于裸盖菇属和斑褶菇属真菌是一种有效而简便易行的分离方法,该法利用菌褶为产孢组织的优势,无需对菌褶进行表面消毒,易于纯化成功,值得在其他类似的腐生小型薄盖伞菌类群的分离中尝试应用。     

东北地区拟南芥室内栽培技术

结合东北地区气候特点摸索出一套适合拟南芥生长的室内栽培方法。采用土壤育苗法和基质育苗法培养拟南芥,并根据其生物学特性在温度、光照、肥水管理、病虫害防治等方面给予适当管理,能培养出生长健壮、满足实验要求的拟南芥植株,为拟南芥在东北地区种植提供参考资料。     

皱环球盖菇实时荧光定量PCR内参基因的筛选

本研究以皱环球盖菇Stropharia rugosoannulata不同发育时期(菌丝期、原基期、幼菇期、小菇期、成熟期)、不同组织部位(菌盖、菌柄、菌褶)和不同颜色菌盖(红色、黄色、白色)为试验材料,选择10个内参基因(ACT、GAPDH、TEF、RPL4、PGI、PGM、RPB2、β-TUB、α-TUB、UBQ)并设计跨内含子的引物,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术进行扩增,利用geNorm、NormFinder、BestKeeper和ΔCt算法进行表达稳定性分析以及综合评价算法ReFinder进行加权评比,最终筛选适宜各类样本的内参基因。根据内参基因稳定性的最终排名,最适宜作为不同颜色菌盖内参基因的组合是UBQ和GAPDH,最不适宜的是ACT、PGI和TEF;最适宜作为子实体不同组织部位内参基因的组合是UBQ和RPB2,最不适宜的是ACT、RPL4和TEF;最适宜作为不同发育时期内参基因的组合是ACT和RPB2,最不适宜的是GAPDH、α-TUB和β-TUB。