~(60)Coγ-线对人血淋巴细胞DNA和RNA合成能力的影响

T例人血在体外接受~(60)Coγ-_线照射后进行培养,用~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)和~(14)C-尿嘧啶核苷(~(14)C-UR)作掺入实验,以反映DNA和RNA的合成能力。应用滤膜法收获细胞,液体闪烁计数器测定双标记样品,发现γ-线对DNA和RNA合成的影响有一定规律,即随照射剂量的增加,~3H和~(14)C掺入的放射性呈指数下降。经统计处理分别得到照射剂量和~3H-TdR、~(14)C-UR掺入的放射性计数的对数值两变量间的直线迥归方程。10拉德的照射导致~3H—TdR和~(14)C-UR掺入的放射性计数显著性减少,RNA比DNA合成受抑更明显。     

~(60)Coγ-线对DNA、RNA、蛋白质合成代谢的效应

人血在体外受~(60)co γ-线照射后,用~3H-TdR、~(14)C-UR、~(14)C-缬氨酸和~3H-亮氨酸作掺入实验,分别反映DNA、RNA和蛋白质的合成能力。结果说明γ线对三种大分子合成的影响有一定规律性,即随剂量增加,掺入的放射性呈指数下降,10拉德导致~3H-TdR和~(14)C UR掺入放射性显著减少,四种标记化合物掺入下降的趋势基本一致。     

14MeV快中子和~(60)Coγ线对人血细胞脱氧核糖核酸(DNA)合成的影响

应用人血在体外接受14MeV快中子和~(60)Coγ线照射后进行培养,以~3氢-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)作参入实验以反映DNA合成。采用液体闪烁测量法和放射自显影法发现两种射线对DNA合成的影响呈一定的规律性,即随照射剂量的增加,合成率显著降低。经统计处理分别得到中子和γ线的照射剂量和~3H-TdR参入的放射性脉冲数(或标记百分数)的对数值两变量间的直线回归方程,在中子剂量100～400拉德的范围内,中子/γ的R.B.E.为1.45～1.98。     

14Me V快中子和~(60)Coγ线对人血细胞脱氧核糖核酸(DNA)合成的影响

应用人血在体外接受14MeV快中子和~(60)Coγ线照射后进行培养,以~3氢-胸腺嘧啶核苷(~8H-TdR)作参入实验以反映DNA合成。采用液体闪烁测量法和放射自显影法发现两种射线对DNA合成的影响呈一定的规律性,即随照射剂量的增加,合成率显著降低。经统计处理分别得到中子和γ线的照射剂量和~8H-TdR参入的放射性脉冲数(或标记百分数)的对数值两变量间的直线回归方程,在中子剂量100～400拉德的范围内,中子/γ的R.B.E.为1.45～1.98。     

~(60)钴γ-线离体照射人淋巴细胞诱发的染色体畸变:剂量-效应关系及其与 X-线的比较研究

为了把外周血淋巴细胞中所观察到的染色体畸变量用来估算活体照射的剂量,需要确定离体照射血样本的剂量-效应曲线。继X-线离体照射的刻度实验后,我们又研究了~(60)钴γ-线诱发染色体畸变的剂量-效应曲线,并且比较了这两种辐射的效应,所得的结论如下:1.根据人淋巴细胞的染色体畸变进行生物剂量测定,只有在标准条件下确定的离体剂量-效应曲线才能得出有意义的结果,也就是说,应尽可能地与事故照射时所出现的条件相同。我们的研究表明,细胞遗传学的剂量测定应在37℃照射未受PHA~**刺激的全血,培养的时间应少于54小时。当比较各实验室符合上述条件的剂量-效应曲线时,显然有差异。因此,我们提议在细胞遗传学技术“标准化”之前,各实验室应建立自己的刻度曲线。2.按照世界卫生组织的标准,在分析剂量-效应关系时,以最小二乘方对实验资料作泊森方差和加权回归分析,拟以恰当的模式。如X-线一样,~(60)钴γ-线诱发的双着丝粒体和着丝粒环资料最适于二次多项式,a=0(回归线通过原点),分别为Y_(γ-线)=(0.59±0.94)×10~(-4)D+(4.77±0.40)×10~(-6)D~2和Y_(x-线)=(0.51±0.21)×10~(-3)D+(5.02±0.77)×10~(-6)D~2。这一方程的物理含义是,一些互换畸变由一次击中所产生,而另一些则是由二个分开的击中相互作用所致。当把两种辐射的系数b 和c 作比较时,主要差别在于导致不对称互换畸变的b 项。根据该指数方程.,畸变量的直线成分(即由一击损伤所致)与剂量率无关,而λ值(b/c)即为一击和二击事件的提供量相等时的剂量,此值分别为λ_(γ-线)=12拉德,而λ_(X-线)=100拉德。由此可以设想,在从事~(60)钴γ-线超暴光例子的生物剂量测定时,与X-线相比较,更应考虑到剂量率的问题。双着丝粒体和着丝粒环资料,同样也可拟以幂函数,此时,Y_(γ-线)=1.64×10~(-5)D~(1.79±0.11),而Y_(X-线)=6.50×10~(-5)D~(1.61±0.05)。然而应当指出,资料拟以二次多项式比幂函数更好些,当从畸变量外推至低剂量时尤其是这样。3.鉴于各种辐射诱发的畸变量彼此不一,所以从辐射防护出发,必须分别地确定剂量-效应曲线。这里的工作表明,~(60)钴γ-线诱发畸变的效能比X-线要低。~(60)钴γ-线相对于180kVX-线诱发互换畸变的RBE 不是一个单一值,其RBE 值变动在0.12和0.89之间。从RBE-剂量关系可以看出,在所用的剂量范围(24～488拉德)内,RBE 值随~(60)钴γ-线剂量的增加而上升,随后即趋向于饱和。     

内皮细胞生长状态对血管平滑肌细胞增生迁移的影响

实验通过建立细胞共培养体系,探讨内皮细胞生长状态对血管平滑肌细胞增生迁移的影响及机制。检测指标包括~3H-TdR掺入、细胞周期、细胞迁移计数和α-SM-actin mRNA表达。结果显示,融合生长内皮使平滑肌细胞~3H-TdR掺入量明显降低,增加平滑肌细胞停留在G_0/G_1期的比例,上调平滑肌细胞α-SM-actin mRNA表达;而对数生长内皮细胞使平滑肌细胞~3H-TdR掺入量明显升高,促进平滑肌细胞由 G_0/G_1期进入G_2/M和S期,下调平滑肌细胞α-SM-actin mRNA表达。对照组平滑肌细胞在基础状态下存在少量迁移,对数增殖内皮细胞组平滑肌迁移数比对照组增高约4倍(P<0.01),而融合生长内皮细胞组平滑肌迁移数仅为对照组的0.5倍(P<0.05)。结果提示内皮细胞生长状态不同,对平滑肌细胞生物学特性的影响也不同,增殖期内皮明显促进平滑肌细胞增生迁移、下调平滑肌细胞α-SM-actin mRNA表达。     

转化生长因子-β1对前单核白血病细胞系THP-1的分化诱导作用

本文研究了重组人转化生长因子-β1对前单核白血病细胞系THP-1细胞增殖抑制作用和分化诱导作用。细胞染色计数和~3H-TdR掺入数据表明,在0.078—1.25 ng/ml浓度范围内,rhTGF-β1剂量与增殖抑制呈正相关。在抑制细胞增殖的同时,rhTGF-β1诱导细胞分化,诱导体系中细胞形态和生长方式均发生明显变化,细胞转为贴壁生长,表现出Mφ的细胞形态。α-醋酸萘酚酯酶、硝基蓝四唑还原、细胞吞噬试验均表明细胞具有Mφ的生物功能。电镜观察显示分化细胞具有典型的巨噬细胞样细胞形态,胞内出现Mφ所特有的亚细胞结构初级溶酶体和次级溶酶体。另外,TGF-β特异性中和单抗TB 21对实验体系THP-1细胞分化的阻断证明,THP-1细胞的分化确为rhTGF-β1诱导所致。     

~(60)Co-γ射线对唐菖蒲染色体的影响

4组各 16枚唐菖蒲种球分别经 4kγ、8kγ和 15kγ剂量60 Co -γ射线照射后培养根尖 ,组织学制片 ,盐酸地衣红染色 ,光学显微镜观察。结果表明 ,与对照组相比 ,经过照射的样本细胞内具有染色体桥、核空泡化、落后染色体等染色体畸变现象 ,其中 4kγ - 8kγ剂量的60 Co -γ射线是较为适宜的唐菖蒲育种的照射剂量     

人乳头状瘤病毒协同60钴照射促进食管上皮细胞恶性转化

为探明人乳头状瘤病毒(HPV)和促癌剂对食管上皮致癌作用,人胚食管上皮细胞转染HPV协同60钴(60Co)放射观察其恶性转化.用HPV18E6E7AAV转染的人胚食管上皮(SHEE),培养至13代,分为4组,实验组分别用60Co2、4、8Gy照射,每周1次共4周;SHEE未经照射为对照组.细胞形态用相差显微镜观察;细胞DNA合成和定量用3H-TdR掺入和用流式细胞仪分析;染色体众数用常规方法分析;致瘤性用软琼脂培养和裸小鼠接种;HPVDNA用PCR检测.经60Co照射后细胞呈凋亡和坏死(危象期).8周后SHEE 4Gy组细胞增殖,增殖指数(34%)和3H-TdR摄入增高,软琼脂培养和裸鼠接种出现致瘤性.对照组SHEE组细胞增殖指数24%,伴有少数3H-TdR掺入,裸鼠未成瘤.染色体众数:对照组,58～62;4Gy组,63～65;两组HPV18E6E7 PCR呈阳性条带.此结果表明,用HPV18E6E7协同60Coγ射线可以使人胚食管上皮恶性转化,60Co γ射线有加速食管上皮细胞恶性转化作用.     

γ—射线对酱油中细菌总数及营养成分影响的初步研究

用~(60)Co—γ—射线以不同剂量(30,50,70,90万拉德)照射瓶装酱油,然后对酱油中细菌总数及总酸和氨基酸态氮进行分析。结果证明:γ—射线具有良好的杀菌作用,剂量30万拉德已能使细菌总数降低到标准含量以下。而各个剂量的γ—照射对总酸及氨基酸态氮的数值几乎没有影响。     

^60Co—γ射线对唐菖蒲染色体的影响

4组各16枚唐菖蒲种球分别经4Kγ、8kγ和15kγ剂量^60Co-γ射线照射后培养根尖,组织学制片,盐酸地衣红染色,光学显微镜观察。结果表明,与对照组相比,经过照射的样本细胞内具有染色体桥、核空泡化、落后染色体等染色体畸变现象,其中4kγ-8kγ剂量的^60Co-γ射线是较为适宜的唐菖蒲育种的照射剂量。     

胸腺激素对淋巴细胞免疫功能调节的研究:Ⅰ胸腺素F5对有丝分裂原诱导下小鼠胸腺细胞增殖反应的影响

本文介绍了用氚胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入微量法测定小鼠胸腺细胞增殖反应的方法与影响因素;并应用此方法研究胸腺素F_5在体外对小鼠胸腺细胞在有丝分裂原诱导下增殖反应的影响。实验结果表明:小鼠胸腺细胞对ConA刺激反应远较对PHA刺激反应明显。在ConA作用下~3H-TdR掺入强度与胸腺细胞数量,ConA浓度及作用时间有关。同位素浓度与标记时间也直接影响。~3H-TdR掺入。胸腺素F_5在体外与小鼠胸腺细胞预育20小时左右(16—24小时)可增强胸腺细胞对ConA刺激的反应,但对PHA刺激无此作用。胸腺素F_5对小鼠胸腺细胞作用的有效剂量为50—200微克/1×10~7细胞/毫升。胸腺素F_5的这种增强作用,对各年龄组小鼠胸腺细胞都有所表现,但年龄较老的8月龄小鼠胸腺细胞对胸腺素F_5作用反应微弱。胸腺素F_5能增强胸腺细胞对ConA刺激的反应是否由于它能通过某种机制加速T细胞功能分化成熟有关,有待今后进一步研究确定。     

~(60)钴γ线对骨髓、脾脏造血细胞DNA和RNA合成能力的影响

~(60)钴γ线照射离体的人体骨髓细胞及豚鼠骨髓、脾脏细胞,观察~3H-TdR及~(14)C-UR放射性渗入受抑的情况。实验发现辐射引起渗入活性下降随剂量增高而愈剧,骨髓细胞比脾脏细胞敏感,DNA合成比RNA合成代谢敏感。10拉德剂量导致入骨髓细胞DNA合成能力显著下降。200拉德引起豚鼠骨髓细胞放射性渗入降低48％。     

二乙基二硫代氨基甲酸钠对癌细胞的双时相毒性

二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDC)(C_2H_5)_2NCS_2Na的浓度在10~(-5)～3×10~(-3)M范围内,对高度癌变的叙利亚地鼠成纤维细胞的集落形成率、DNA合成和细胞形态,都具有双时相特征的毒性。第一中毒时相发生在10~(-5)和10~(-4)M,第二时相在3×10~(-3)M。DDC也使含铜及锌的超氧化物歧化酶活性下降,但无时相性。     

水稻泰引一号~(60)Co-γ辐射二代早熟突变及其主要性状的遗传力和遗传相关

辐射育种实践已经证明,利用~(60)Co-γ射线改造水稻生育期、株高等是有效的,而且辐射第二代(γ_2)是突变选择的重要世代。因此研究γ_2突变及其主要性状的遗传力和遗传相关对辐射育种是有意义的。辐射能诱发熟期、株高、株型、穗型、穗重、粒型、粒重、叶型、叶色等多种类型的变异。本文是对~(60)Co-γ射线不同剂量照射迟熟中籼泰引一号γ_2早熟突变的调查结果,同时把获得的早熟突变作为一个群体,对主要性状的广义遗传力和遗传相关进行了分析。     

Caspase-3反义寡核苷酸对γ-射线诱导的HL-60细胞中caspase-3表达与细胞凋亡的抑制作用

γ-射线可诱导人髓性白血病细胞株HL-60细胞凋亡,但其机制尚未完全明了。为了观察caspase-3在这种细胞凋亡模型中的作用,本研究设计合成针对caspase-3mRNA5′-非编码区和编码起始区的反义寡核苷酸(ASODNs),即ASODN-1和ASODN-2,以脂质体介导法将不同浓度ASODN-1和ASODN-2转染进入HL-60细胞,γ-射线照射。应用TUNEL法观察凋亡细胞形态学变化及检测凋亡细胞百分率,免疫细胞化学、Westernblotting和RT-PCR技术分别检测caspase-3及其mRNA在引入ASODNs前后的表达水平,并以错配寡核苷酸(MODN)转染及未转染细胞作为对照组。TUNEL法检测发现,当ASODN-1和ASODN-2转染终浓度≥3μmol/L时,γ-射线诱导的HL-60细胞凋亡率降低,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。免疫细胞化学结果显示,与两对照组相比,转染ASODNs后各组caspase-3阳性细胞率显著下降,阳性细胞染色减弱,其平均灰度值显著增高(P<0.01)。Westernblotting检测显示,转染ASODNs组细胞caspase-3蛋白酶原表达降低,其中ASODN-1组显著低于ASODN-2组。RT-PCR结果显示两对照组细胞caspase-3mRNA均有明显表达,转染ASODNs后caspase-3mRNA表达丰度降低。另外,ASODN-1抑制细胞凋亡和caspase-3表达的作用显著强于ASODN-2(分别为P<0.05和P<0.01)。实验结果表明,caspase-3mRNAASODNs能够抑制γ-射线照射诱导的HL-60细胞凋亡,下调caspase-3蛋白和caspase-3mRNA的表达水平,其抑制作用在一定范围内呈剂量依赖性。     

电离辐射后大鼠离体胰腺腺泡淀粉酶释放及M受体数量变化

我们曾观察到大鼠经γ-射线照射后胰淀粉酶活性降低和分泌减少[1],为进一步探讨照射后胰酶分泌减少的机制,本研究制备出分散的大鼠胰腺腺泡悬液并以不同浓度的~3H-二苯羟乙酸-3-喹咛环酯(~3Hquinuclidinyll benzilatc,简称~3H-QNB)进行M受体结合测定,同时观察胆碱能介质氨甲酰胆碱刺激腺泡所引起的淀粉酶释放反应。结果表明,γ-射线10Gy照射后3天,大鼠分散的胰腺腺泡在氨甲酰胆碱刺激时淀粉酶释放量减少到对照的50％,腺泡M受体与~3H-QNB最大结合量(Bmax)减少到对照的38％,伋M受体与~3H-QNB结合的解离常数(K_D)无改变,说明胰腺腺泡细胞M受体数量的减少可能是照射后胰腺腺泡分泌淀粉酶减少的原因之一。     

钴~(60)-γ射线对钉螺影响的初步实验

本实验初步观察了钴~(60)-γ,射线对钉螺生殖腺形态、交配力及繁殖力的影响,也初步观察了对钉螺的致死剂量。 一、钴~(60)-γ射线对钉螺睾丸、卵巢形态的影响 钉螺生殖腺对放射线较敏感。钴~(60)-γ射线照射后4个月解剖检查,2,000仑琴的剂量对雌雄钉螺生殖腺形态有明显影响,7,000仑琴以上的剂量可使睾丸、卵巢萎缩,约为原来的一半,卵巢呈淡黄,色泽较暗,有许多空隙而不饱满。雄螺经照射后,精囊亦发生一定程度的萎缩。     

前列腺素E2对小鼠骨髓细胞增殖及DNA合成的影响

本文采用半固体单层琼脂培养和液体培养_3H-TdR掺入法观察PGE_2对小鼠骨髓CFU-GM增殖分化的影响,实验结果表明PGE_2可明显抑制CFU-GM增殖和分化,抑制率与PGE_2剂量呈负相关。其50％抑制率所对应的PGE_2剂量,琼脂培养法为4.8×10~(-8)mol/L, ~3H-TdR掺入法为3.5×10~(-8)mol/L,两种方法观察的结果相近。压片染色集落分类的结果还表明PGE_2对CFU-GM各类型集落形成均有明显的抑制作用。其中以CFU-M和CFU-GM抑制最为明显。1×10~(-8)—1.2×10~(-8)mol/L的PGE_2浓度就可抑制CFU-M和CFU-GM增殖50％,当PGE_2浓度增至7.3×10~(-8)mol/L时CFU-M增殖即被抑制90％,说明单核-巨噬系祖细胞对PGE_2是十分敏感的。PGE_2对粒系集落的抑制作用机理尚不清楚。     

甲_2巨球蛋白的丙烯酰胺梯度SDS凝胶板电泳分析

甲_2巨球蛋白(简称α_2M)是一种分子量为725000的大分子糖蛋白。天然有活性的和失活的α_2M经SDS热引导和巯基乙醇还原分解的亚基分子量有明显差别。不同来源的α_2M亚基分子量也略有差异。本实验用3-25％丙烯酰胺梯度SDS凝胶板电泳来鉴定纯化的猪α_2M、大鼠α_2M和人α_2M制剂。结果指出猪α_2M和人α_2M均有185000、125000和62000三条亚带,代表有活性的天然α_2M,大鼠α_2M电泳图谱指出,130000分子量亚带代表天然α_2M,29000和90000分子量二带为失活部分。人α_2m制剂图谱表明除了混有两种球蛋白外,只有一条62000分子量亚带代表少量有活性的α_2M。