红花细胞克隆的平板培养

在红花(Cathamus unctorrus)细胞克隆的平板培养中很多因素都能影响其植板率,如培养基的 pH 值,无机盐中的 NH_4NO_3、ZnSO_4、MnSO_4;有机酸中的柠檬酸、琥珀酸、苹果酸及延胡索酸,谷氨酰胺和精氨酸,葡萄糖,椰乳和水解乳蛋白等。向培养基中加入10mg/l 柠檬酸或3mg/l 琥珀酸能显著提高植板率。适量的人参寡糖及黑节草寡糖应用对促进红花细胞克隆生长取得很好效果。常规的高压灭菌最不利于细胞生长,在15磅/cm~2灭菌5分钟效果较好,过滤灭菌效果最好。     

人参培养细胞的单细胞克隆

培养基组成成分能影响人参培养细胞单细胞克隆的植板率。Ms培养基中2,4－D和KT需要一个适合的浓度比才能有效地促进细胞克隆的形成,其最佳浓度组合是2,4－D1．5mg／L和KT O．5mg／L。适合人参细胞克隆形成的NH₄N0₃浓度是400mg／L,CaCl₂.2H₂O浓度是750mg／L。向培养基中补加适量的琥珀酸、精氨酸和维生素等都能明显提高植板率。通过优化培养基的组成成分,细胞克隆的植板率可增加到2.34倍。悬浮培养两周左右的细胞平板培养最有利克隆形成,当细胞植板密度低于4×10³个细胞／ml时,几乎没有克隆形成。     

我国薯芋皂甙元的工业生产和资源的回顾与展望

本文对我国薯芋皂素(Diosgenin)的工业生产进行了概略回顾,对各种工艺流程进行了比较,并介绍了薯芋属植物的资源现状。     

综合利用薯芋淀粉生产肌苷的研究

本文报道综合利用野生薯芋属植物盾叶薯芋(Dioscorea zingibensisC.H.wright)和穿龙薯芋(Dioscorea nipponica Makino)中的淀粉生产肌苷(Inosine)的方法。将薯芋原料带水磨碎,在水中筛分得到皂甙淀粉浆,用稀酸水解该物质使淀粉糖化,分离后得到糖液和糖渣。糖液加氮源和无机盐,发酵生产肌苷。糖渣再水解提取薯芋皂甙元。     

红花单细胞克隆的建立

KT,2,4-D 及 NAA 能提高红花(Cathamus tinctorius)细胞克隆平板培养的植板率。这三种激素对细胞生长的最佳搭配是2,4-D2.0mg/l,KT0.3mg/l,NAA 0.5mg/1。红花细胞悬浮继代培养代数不同,其植板率相差甚远,用悬浮培养第三代的细胞做材料最好,其植板率是第一代悬浮培养细胞做材料的8.5倍。红花细胞克隆的条件培养的植板率是普通平板培养的3.6倍。固-液双层培养的植板率是普通平板培养的4.7倍。对已建立的红花细胞克隆进行生长速率的比较表明,生长最漫的克隆的生长速率为3.08g/g/35天,生长最决的克隆的生长速率高达23.33g/g/35天。     

人参培养细胞单细胞克隆的条件培养

来自细胞悬浮培养物的条件培养基能显著地促进人参培养细胞的单细胞在较低细胞植板密度培养时的克隆形成。每毫升含3×10³个细胞时,条件培养的植板率是普通平板培养的4倍。细胞悬浮培养12－16天时所制备的条件培养基活性最大,在一定浓度范围内随条件培养基浓度增加。细胞克隆植板率随之增加。条件培养基具有一定的生理作用专一性。看护培养和条件培养的比较,表明前者在细胞密度较低时能更有效地促进细胞克隆的形成和生长。条件培养基在4℃条件下贮存两周仍保持活性稳定,并且能耐受高温处理。当受到强酸或强碱处理其活性失去．但在弱酸或弱碱条件下稳定。     

对影响薯芋皂甙元收率和熔点因素的探讨

本文比较全面地介绍了工业生产中影响薯芋皂甙元收率和熔点的各种因素及其解决的方法。     

上海科学家纯化克隆芋螺毒素获成功

蛇蝎入药“以毒攻毒”,可曾想到形似芋艿的芋螺毒素也可入药,而且不亚于前者?以中科院上海生物化学与细胞生物学研究所戚正武院士为首的课题组从6种南海芋螺中首次纯化及克隆得到100多种新毒素,为研发具有自主知识产权的神经性疾病新药提供了可能性,相关项目还获得2005年度上海市科技进步奖一等奖。盛产于我国南海的各色芋螺,猎捕时会冷不防地向小鱼虾等发射一枚枚“毒箭”,使之麻痹后吞而食之。至今发现有500多种这样的小芋螺,它们总共能产生5万多种不同结构与功能的毒素。因此,国     

几种南海芋螺二硫键异构酶的克隆及进化分析

目的:从来自中国南海的4种芋螺中克隆出包含完整3’和5’非翻译区的蛋白质二硫键异构酶(PDI)全基因序列,并对其进行序列及进化分析。方法:根据各种生物PDI基因的保守区域设计引物,利用3’和5’cDNA末端快速扩增(RACE)方法克隆出PDI全基因序列,并通过生物信息学方法对各芋螺PDI序列进行分析。结果与结论:从中国南海玉女芋螺、黑星芋螺、堂皇芋螺、桶形芋螺cDNA中克隆出包含有完整3’和5’非翻译区的PDI全基因序列;分析结果表明各芋螺之间的同源性大于90%,而与对虾、人类、酿酒酵母的同源性均小于60%;各芋螺PDI与其他生物的2个活性位点序列高度保守,而底物结合位点具有物种特异性,进化树显示各芋螺PDI的特征可能受其捕食食性影响。     

甾体药物源植物薯蓣属植物中薯蓣皂甙元的研究及生产状况

本文对薯蓣属植物的资源分布、化学成分、薯蓣皂甙元的应用价值及提取工艺进行了概述 ,通过对其研究及生产现状的分析 ,表明该产业具有较好的发展前景。     

不同肥料对黄山药根茎产量和薯蓣皂甙元含量的影响

通过对施用硝酸钾肥和复合肥的比较试验,表明硝酸钾肥对促进黄山药(Dioscrea panthaica)地上、地下部分生长,提高次生根茎产量有显著效果.栽培32个月的次生根茎平均生长量达405.9±254.0g/株,产量58.5t/ha,比施用复合肥的增产37.5%和20.5%,比对照增产29.9%和17.9%.施用复合肥的次生根茎平均生长量253.6±148.6g/株,产量46.3t/ha,比对照低10.8%和3.1%.三者的薯蓣皂甙元含量无明显差异.     

红豆杉单细胞克隆的建立

本文报道了红豆杉单细胞克隆的建立过程,在红豆极细胞克隆中使用悬浮培养１０－１５天的细胞培养物分离单细胞进行看护培养的效果最好。     

培养抗性植物的细胞/组织培养途径

抗性育种在作物品种改良中已日益显得重要。近10多年来,随着细胞/组织培养、遗传操作等生物技术的迅速发展,以及由于植物具有全能性,在人工培养条件下,从单细胞原生质体可以再生成一个完整的个体成功以来,人们试图利用细胞/组织培养等生物技术将野生种的抗性基因引入到作物中来,或是人工诱发抗性变异,从而筛选出抗性愈     

蜂毒溶血肽(melittin)cDNA在大肠杆菌高表达质粒中的克隆(英文)

本项研究从新羽化的蜜蜂蜂王毒腺中提取了总mRNA,用逆转录的方法,合成了cDNA,并将其克隆到了噬菌体质粒λgtll的EcoRI位点,建立了melittin的cDNA文库。用PCR扩增技术从cDNA文库中产生了长度为87bp的melittin基因,并将其插入到高表达载体pBV220的EcoRI和pstI位点构成重组质粒PBM95,并转化到大肠杆菌JM101的感受态细胞中。经过在含氨苄青霉素的LB平板上对转化子进行筛选和对来自转化子中的重组质粒PBM95的酶切分析及melittin基因的测序,证明melit－tincDNA克隆成功。     

商陆单细胞平板培养及色素高产细胞株的筛选

研究了细胞悬浮培养时间、培养方法和接种密度对商陆单细胞平板培养植板率的影响,建立了筛选色素高产细胞株的简单实用的方法。结果表明：普通单细胞平板时培养法培养商陆单细胞的植板率很低,而以悬浮培养１４－２１ｄ的单细胞为材料,接种密度为５＊１０＾３／ｍｌ时,进行条件培养和看护培养,植板率达１１．０２％。根据细胞平板培养结果,可在显微镜下直接观察单细胞克隆的颜色,筛选出商陆色素高产细胞株。     

CLONING OF MELITTIN cDNA FROM HONEYBEE INTO THE HIGH EXPREHION PLASMID OF ESCHERICHIA COLI*

Abstract Total mRNA from venom glands of newly emerged queen bees was reversely transcribed into cDNA and cloned into the EcoRI site of plasmid λgt11; cDNA library for bee venom was thus constructed. PCR technique was used to produce the melittin coding sequence from the cDNA library. A 87 bp product was produced and inserted into the EcoRI and PstI sites of the high level expression vector pBV220. Recombinant plasmid pBM95 was transformed into the competent cells of E.coli JM101. After screening transformants on LB medium with ampicilin, structure of the recombinant plasmid pBM95 from transformants was analyzed and melittin gene in pBM95 was sequenced. The cloned cDNA coding for honey bee melittin was obtained.     

PRIMARY CELL CULTURE FOR EMBRYONIC CARDIAC MYOCYTES OF MEXICAN AXOLOTL AND DISTRIBUTION OF DESMIN AND VIMENTIN

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＴｈｅａｘｏｌｏｔｌｐｒｏｖｉｄｅｓａｖａｌｕａｂｌｅｍｏｄｅｌｓｙｓｔｅｍｆｏｒｓｔｕｄｙｉｎｇｍｕｓｃｌｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙｒｅｖｅａｌｓｔｈａｔａｘｏｌｏｔ...