五步蛇毒对小鼠免疫功能的影响

目的 探索五步蛇毒对正常小鼠免疫功能的影响.方法 将KM小鼠随机分为5组,分别为空白组、五步蛇毒安全范围内低剂量组(30 mg/kg)、五步蛇毒安全范围内中剂量组(60 mg/kg)、五步蛇毒安全范围内高剂量组(120 mg/kg)(以下简称五步蛇毒低、中、高剂量组)以及西洋参组(30 mg/kg),每组10只.各组小...     

乙醇对五步蛇（Agkistrodonacutus）毒毒性的影响

目的为了探索乙醇对五步蛇毒毒性的影响。方法将五步蛇毒不同浓度致死量经不同浓度乙醇体外处理后,选择小白鼠分别给予皮下注射、口服,并将致死量蛇毒于小白鼠皮下注射后立即于局部注射乙醇,观察蛇毒毒性情况。结果使用乙醇体外处理后的五步蛇毒毒性明显下降,小白鼠经皮下注射致死量五步蛇毒后立即在局部注射50％异蛇米酒或75％乙醇0．1～0．2ml有一定的保护作用,口服20倍致死量五步蛇毒未发现有毒性表现。结论五步蛇毒体外经过乙醇处理后毒性明显下降。口服五步蛇毒是安全的。蛇毒进入皮下后立即用乙醇处理有一定的治疗效果。     

艾滋病猴特异性细胞免疫的胞内细胞因子检测方法优化与应用

目的 为准确检测艾滋病猴模型特异性细胞免疫,优化、确定胞内细胞因子染色(ICS)影响因素和条件.方法 使用三种多克隆激活剂分别刺激SIV感染猴外周血单个核细胞(PBMC),确定最佳阳性刺激物和刺激时间;然后使用五种浓度SIVmac239混合肽库分别刺激SIV感染猴PBMC,体外培养,不同时间点进行细胞染色和流式检测,确定肽库的最适刺激浓度和最佳刺激时间.最后,初步应用该方法检测SIV感染猴细胞免疫水平.结果 PMA+离子霉素组合可用作本实验的阳性刺激物;2μg/mL肽库,37℃5％ CO2培养16 h,能更有效的刺激T细胞分泌TNF-α、IL-2、IFN-γ.结论 该方法的优化对艾滋病药物的临床前评价和疫苗研发等研究具有重要意义.     

五步蛇毒和蝮蛇毒透析前后的某些性质及五步蛇毒热稳定性的研究

五步蛇（Agkistrodon acutus）和蝮蛇（Agkistrodon halys）蛇毒透析前后含量、毒性和抗原成分的变化,以及温度对五步蛇毒致死活性的影响等,尚未见有资料。本文就浙江产五步蛇毒和腹蛇毒在透析前后的某些性质及五步蛇毒的热稳定性研究作初步报道。     

中西医结合治疗五步蛇咬伤患肢肿胀的临床观察

目的 总结中西医结合治疗五步蛇咬伤的治疗方法.方法 将我院2008年9月~2013年4月收治的五步蛇咬伤患者92例随机分为治疗组50例,对照组42例.对照组采用常规治疗方案,治疗组在此基础上加用犀角地黄汤和五味消毒饮加减及加用中医针刺、拔罐.结果 治疗组有效率为96%,对照组为76.2%,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用抗五步蛇毒血清以及中西医结合综合治疗对五步蛇咬伤患肢肿胀具有明显效果,能减少患肢伤残率.     

五步蛇伤患者早期伤口切开的临床特点及预后

目的 探讨早期伤口切开的五步蛇伤患者的临床特点及预后.方法 选择22例已行早期伤口切开(观察组)及35例未行早期伤口切开(对照组)的五步蛇伤患者的临床资料进行回顾性分析总结,并比较其临床特点及预后.结果 观察组患者伤口的肿胀及溃疡程度均轻于对照组(P<0.05);观察组患者行早期伤口切开常引起伤口严重出血,血红蛋白浓度较对照组显著降低(P<0.05);观察组患者的平均住院天数显著少于对照组(P<0.05).结论 早期伤口切开将加重五步蛇伤患者的出血,但对伤口状况有较好的改善作用.对五步蛇伤患者在使用足量抗蛇毒血清且凝血功能正常后或可行小切口切开减压引流排毒,利于伤口愈合.     

美洲大蠊醇提物对大鼠抗氧化应激的影响

目的研究美洲大蠊Periplaneta americana醇提物对大鼠血清和卵巢抗氧化指标的影响。方法 17只成年雌性SD大鼠适应饲养7 d后,随机分为3组:对照组(9 m L·kg~(-1),生理盐水)5只、低剂量组(9 m L·kg~(-1),0.03 g·m L~(-1)美洲大蠊醇提物)6只、高剂量组(9 m L·kg~(-1),0.09 g·m L~(-1)美洲大蠊醇提物)6只。每2天灌胃1次,共饲养30 d。实验结束后,采集大鼠血清和卵巢,检测血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)指标和卵巢中SOD、GSH-PX、CAT基因表达的变化。结果与对照组相比,高剂量组(P=0.085)、低剂量组(P=0.091)血清中的NO含量均有降低的趋势;高剂量和低剂量的美洲大蠊醇提物均显著提高了大鼠血清中的SOD含量(P<0.05),同时,高剂量组血清中的MDA含量显著降低(P<0.05);此外,高剂量组和低剂量组卵巢SOD基因的表达显著升高(P<0.05)。结论美洲大蠊醇提物升高了大鼠血清SOD的含量,降低了NO和MDA的含量,同时,还提高了卵巢SOD基因的表达,说明美洲大蠊醇提物对大鼠卵巢具有一定的抗氧化应激功能。     

27例五步蛇咬伤病人的护理总结

通过对２７例五步蛇咬伤的病人观察护理,发现主要是根据症状,体征明确诊断,严密观察生命体征变化,特别是血循环系统的变化,注意有无休克症状出现及有无新的出血倾向（呕血、咯血、便血、血尿）,局部伤口有无流血不止,红肿痛及淤斑加重,溃烂的伤口有无变色坏死等;护理中做好心理护理,特别是伤口的处理及补液,尿管的护理,其次是口腔皮肤等基础护理     

五步蛇咬伤中毒的护理体会

五步蛇伤中毒以血循毒(火毒)为主症,轻者出现患肢伤口向心性肿胀、渗血,重者并发毒性休克、弥漫性血管内凝血(DIC)、急性肾功能衰竭等,且潜伏期短,发作快,如不及时救治,易致残,甚至危及生命。我院收治的22例五步蛇伤患者,经及时的救治及严密的观察护理,均治愈出院,现将护理体会     

蕲蛇酶对动物实验性血栓的防栓和溶栓作用

采用大鼠颈动脉－颈外静脉回路循环形成的血小板性动脉血栓,用兔脑粉浸出液诱导的大鼠下腔静脉血栓以及用凝血酶诱导的兔耳缘静脉血栓,作为实验性动脉及静脉血栓模型,并分别用阿斯匹林和尿激酶作为阳性对照药,以观察蕲蛇酶对血栓形成的影响。不同剂量的蕲蛇酶（６００,３００和１５０μｇ／ｋｇｉｖ）能使大鼠动脉和静脉血栓形成减少,并呈量效关系。蕲蛇酶对家兔耳缘静脉血栓形成亦表现抑制作用并促进血栓消褪。３００和６００μｇ／ｋｇ对家兔已形成的动脉和静脉血栓,能促使消褪,提示蕲蛇酶亦有溶栓作用     

蕲蛇提取物抗炎镇痛药理作用的研究

目的 研究蕲蛇提取物的抗炎及镇痛作用,为蕲蛇的临床应用提供科学依据.方法 采用热板法、冰醋酸刺激致痛法研究蕲蛇提取物对小鼠痛阈的影响,利用二甲苯致小鼠耳廓炎症模型和腹腔染料渗出法测定蕲蛇提取物的抗炎作用.结果 蕲蛇提取物醇溶性和水溶性部位对小鼠热板及冰醋酸致痛反应有明显镇痛作用,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、冰醋酸致腹腔毛细血管通透性增高均有明显的抑制作用.结论 蕲蛇提取物醇溶性和水溶性部位有一定的抗炎及镇痛作用,并且水溶性部位较醇溶性部位的药效好,可为蕲蛇的临床应用提供指导作用.     

蕲蛇酶治疗不稳定型心绞痛的疗效

目的：观察蕲蛇酶治疗不稳定型心绞痛（ＵＡＰ）的疗效。方法选择同期入院的ＵＡＰ患者６０例,随机分为观察组３０例和对照组３０例。观察组给予蕲蛇酶１．５ｕ加５％葡萄糖液５００ｍｌ静滴,每天１次,１０天为１疗程;对照组给予低分子右旋糖酐５００ｍｌ加复方丹参注射液２０ｍｌ静滴,每天１次,１０天为１疗程,两组均给予常规治疗。结果观察组ＵＡ治疗总有效率９３．３％,对照组为６０％。观察组心电图总有效率８３．３％,     

Cytokines Reduce Toxic Effects of Ethanol on Oligodendroglia

To characterize immunomodulatory mechanisms that affect oligodendroglia (OL) and white matter following ethanol exposure during early CNS development, we investigated the direct effects of ethanol and cytokines on glia. Mixed glial cultures from newborn rat brain were exposed to 6.5–130 mM ethanol for 1–3 days. OL were sensitive to ethanol, with death ranging from 32 to 88% with increasing time and ethanol concentrations. Little cell death occurred in astroglia or microglia. Mixtures of cytokines representative of those produced by pro-inflammatory Th1 and monocyte/macrophage (M/M) cells as well as those produced by anti-inflammatory Th2 cells were all protective. Three of the cytokines in the Th1 mixture, IL-2, TNF-α and IFN-γ, were protective individually, although no single cytokine was as effective as the mixture. The protective effects of the Th1 mixture and of IL-2 were reversed by inhibition of both MAP kinase and PI-3 kinase signaling pathways. We conclude that cytokines can act either directly on OL or indirectly through effects on astroglia or microglia to protect OL from ethanol toxicity.     

蕲蛇酶在健康人的药物代谢动力学

健康自愿者１４人,男９人,女５人,除研究者本身（女,６４岁）外,平均年龄２５．８±ｓ６．５岁,分３组。分别一次ｉｖ蕲蛇酶注射液１Ｕ（１５０）,２Ｕ（３００）和３Ｕ（４５０μｇ）。用ＥＬＩＳＡ方法检测药后不同时间血药浓度以研究药代动力学。结果显示血药－时间曲线符合二室开放模型,其ｔ１／２α分别为０．６６±０．１０,０．９７±０．３４和１．２２±０．７７ｈ,ｔ１／２β分别为１５．９５±２．４,１８．８０±４．９４和１９．７３±４．２８ｈ     

蛇伤凉血合剂对尖吻蝮蛇咬伤患者凝血四项的影响

目的观察蛇伤凉血合剂对尖吻蝮蛇咬伤的临床疗效。方法将60例尖吻蝮蛇咬伤患者随机分为观察组和对照组各30例,两组患者均给予常规治疗,治疗组加服蛇伤凉血合剂,观察比较两组患者就诊时(咬伤2h内)、咬伤后72h凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(Fg)的变化。结果两组患者就诊时TT、PT、APTT、Fg均在正常范围,两组比较差异无统计学意义。伤后72h,两组患者的TT、PT、APTT均升高,Fg均降低,而且组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论蛇伤凉血合剂对尖吻蝮蛇咬伤所致凝血功能障碍有防治作用。     

95例SARS患者细胞免疫功能抑制的特点及其原因

用ELISA方法测定95例SARS患者急性期、恢复期血清细胞因子水平,用流式细胞仪检测该组患者急性期、恢复期淋巴细胞亚群,并分析细胞因子水平和淋巴细胞亚群变化的关系。结果发现,IL-10和TGF—β在观察期（急性期和恢复期）持续升高,急性期CD4^＋和CD8^＋T细胞显著减少,恢复期患者外周血CD8^＋记忆T细胞减少36．78％。IL-10和TGF-β升高与淋巴细胞变化具有统计学相关。结果提示,SARS病毒感染抑制宿主的细胞免疫功能,引起急性期CD4^＋和CD8^＋T细胞显著降低和恢复期的免疫记忆细胞减少。而IL-10和TGF—β过表达可能在SARS免疫病理中起重要作用。     

Comparative study of Agkistrodon acutus venoms from China and Taiwan

Three hemorrhagic toxins (Ac1-, Ac2- and Ac3-proteinases) were isolated from the lyophilized venom of Agkistrodon acutus from China using gel filtration on a Sephadex G-75 column, followed by chromatography on diethylaminoethyl (DEAE)-Sephadex A-50, DEAE-Sephacel and DEAE-cellulose. Homogeneity was established by the formation of a single band in acrylamide gel electrophoresis, isoelectric focusing and sodium dodecyl sulfate (SDS) acrylamide gel electrophoresis. Three hemorrhagic toxins possessed both lethal and proteolytic activities. These activities were inhibited by ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA), ethyleneglycol (beta-aminoethyl)N,N,N',N'-tetraacetic acid (EGTA), o-phenanthroline or cysteine, but not by soybean trypsin inhibitor (SBTI), p-chloromercuribenzoate (PCMB) or diisopropyl fluorophosphate (DFP). Molecular weight of hemorrhagic toxins (Ac1-, Ac2- and Ac3-proteinases) were determined to be 24,500, 25,000 and 57,000, respectively. It was found that hemorrhagic toxins have considerable similarity to hemorrhagic toxins isolated by Nikai et al. (1977) and Sugihara et al. (1978, 1979), but Ac2- and Ac3-proteinases from China and Taiwan are electrophoretically unrelated.     

五步蛇蛇毒的分离纯化及综合利用

五步蛇蛇毒冻干粉经过SephadexG-75分子筛层析,使纤溶酶和类凝血酶初步分离;DEAE阴离子交换层析对2种酶进一步分离纯化,分别得到了纤溶酶和类凝血酶。2种酶在HPLC图谱上均呈单一峰,在SDS-PAGE图谱上均为单一条带,纤溶酶分子量大约为24．1kDa,类凝血酶分子量大约为14．4kDa,与以往报道相符。酶的总活力回收率大大提高,纤溶酶的活力回收率达23．9％,类凝血酶的活力回收率达34．5％。实现了对蛇毒的综合利用,为进一步开发利用蛇毒探索了一条有效的途径。