产氨短杆菌与枯草杆菌发酵产肌苷比较试验

采用诱变得来的枯草杆菌GMI-741和产氨短杆菌GMA-2892在1.2L自控发酵罐上进行肌苷发酵试验,产氨短杆菌GMA-2802在种子培养基中培养15h后,菌浓度达1.0×1011个/ml,而同样条件下,枯草杆菌GMI-741菌浓度只有9.5×109个/ml.在1.2L自控发酵罐上发酵时,GMA-2802发酵周期54h,产肌苷达20.40g/L,发酵液主要原材料成本为441.1元/吨;GMI-741发酵周期60h,产肌苷达19.52g/L,发酵液主要原材料成本为559.1元/吨.     

产氨短杆菌GMA-1112利用味精母液发酵生产肌苷

通过亚硝基胍或60 Coγ辐照等选育一株产氨短杆菌GMA 1 1 1 2 (Ade +Gua +VB1 +8 AGr+SGr+6 MPr) ,能以味精母液代替传统肌苷发酵添加酵母粉作为有机营养物 ,进行肌苷发酵 ,平均产肌苷率 2 5.4 0 g/L。具有降低发酵成本、提高产肌苷率等优点。     

原生质体融合选育肌苷产生菌产氨短杆菌GMA—2802

以肌苷产生菌产氨短杆菌ＧＭＡ－２７２２（Ａｄｅ－、 Ｇｕａ－、ＶＢ１－、Ｒｉｆｒ）和 ＧＭＡ－２７７６（Ａｄｅ－、 Ｂｉｏｔｉｎ－、ＶＢ１－、Ｓｍｒ）为出发菌株,经原生质体融合,将目的标志加以组合,获得遗传性状稳定、摇瓶发酵６１ｈ,产肌苷２５．４ｇ／Ｌ的融合子 ＧＭＡ－２８０２（Ａｄｅ－、Ｇｕａ－、Ｂｉｏｔｉｎ－、ＶＢ１－、 Ｒｉｆｒ、Ｓｍｒ）。     

新型肌苷新生菌——产氨短杆菌GMBA—800选育和特性的初步研究

采用多种方法诱变获得一株新型肌苷产生菌－－产氨短杆菌ＧＭＢＡ－８００,对其生长和发酵条件进行初步研究。肌苷产量从５ｇ／Ｌ提高到１８．４１ｇ／Ｌ,发酵周期从８４ｈ缩短为６３ｈ。菌株遗传性状稳定。     

新型肌苷产生菌──产氨短杆菌GMBA—800选育和特性的初步研究

采用多种方法诱变获得一株新型肌苷产生菌──产氨短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍａｍｍｏｎｉａｇｅｎｅｓ）ＧＭＢＡ－８００（具有腺嘌呤、生物素双重营养缺陷型和对８－氮杂鸟嘌呤、磺胺胍、６－流基嘌呤有抗性）,对其生长和发酵条件进行初步研究。肌苷产量从５ｇ／Ｌ提高到１８．４１ｇ／Ｌ,发酵周期从８４ｈ缩短为６３ｈ。菌株遗传性状稳定。     

絮凝方法收集产氨短杆菌MA-2、黄色短杆菌MA-3条件的优化

采用壳聚糖作絮凝剂收集富含延胡索酸酶活力的产氨短杆菌MA-2、黄色短杆菌MA-3。研究了絮凝剂加入量及加入时混合方式与时间等因素对延胡索酸酶活力及分离效果的影响,并对壳聚糖絮凝收集产氨短杆菌MA-2、黄色短杆菌MA-3的过程进行了初步分析。     

采用产氨短杆菌合成辅酶A的研究

用产氨短杆菌鲜菌体在以腺嘌岭代替ATP的反应系统中酶促合成辅酶A(CoA),每毫升反应液的CoA产量达Z21单位(u);在不加任何核苷酸类物质的条件下,也可达185u;合成在5小时左右达高峰。CoA合成主要在细胞内进行。提出了连续式碳一阴离子交换树脂柱提纯CoA的新方法,既提高了收率,又避免了原锌汞齐法的毒物危害,方法简易可行。用本法制得的结晶品含CoA 231u／mg,收率17．0％;阴柱洗脱液不经结晶直接制成CoA注射液,提取率20．9％,经广州药检所检验,各项指标均符合国家标准。     

固定化产氨短杆菌MA-2、黄色短杆菌MA-3反应动力学的研究

多年来虽然有不少学者对固定化细胞生产Ｌ 苹果酸的方法进行过探讨[1～ 6] ,但对过程动力学的研究报道并不多见[2 ,7] ,在富马酸铵转化体系中的表观动力学及本征动力学模型还未见报道 ,本文对富马酸铵转化体系中固定化产氨短杆菌ＭＡ 2、黄色短杆菌ＭＡ 3细胞的动力学进行了探讨 ,测定了两种固定化细胞的表观动力学常数 ,并进一步求解了相应的本征动力学常数 ,这一结果便于从理论上指导富马酸铵转化过程的工业化生产。1　材料和方法1 1　试剂富马酸 ,工业级 ,苏州合成化工厂 ,碳酸钙 ,工业级 ,泗联化工厂。1 2　菌株本文所用的菌株是由我院…     

产酸丙酸杆菌生长特性及5L罐发酵动力学研究

论文在摇瓶水平对产酸丙酸杆菌基本生长特性（温度、pH、摇床转速、接种量、种龄等）、碳源、氮源利用情况、产物抑制及5 L罐发酵动力学进行了研究。结果表明,该菌在32℃,初始pH 6．5,摇床转速150 r/min,接种24 h的种子液,接种量为5％条件下,产酸丙酸杆菌生长及产酸水平达最高值;该菌可利用碳源十分广泛,但对氮源要求比较高,只可利用有机氮源;在不同初始葡萄糖浓度下,产酸丙酸杆菌生长及产酸水平差异不大,无明显底物抑制现象;在2g/L的初始丙酸盐浓度下,该菌生长受到明显抑制;在5L发酵罐中,初始葡萄糖浓度为58．8 g/L,发酵72 h,葡萄糖消耗完全,丙酸终浓度达22．4 g/L,丙酸得率和产率分别达0．381 g/g和0．295 g/（L·h）,丙酸占总酸比例达72．10％。     

The derepression of enzymes of de novo pyrimidine biosynthesis pathway in Brevibacterium ammoniagenes producing uridine-5-monophosphate and uracil

A mutant of Brevibacterium ammoniagenes producing large quantities of UMP and uracil is described. The mutations render bacteria braditrophic for arginine, sensitive to adenine, resistant to rifampicin and pyrimidine analogues 5-fluorouracil, 5-fluorouridine, azauracil and thiouracil. The activities of enzymes involved in the UMP biosynthesis, i.e. orotate phosphoribosyltransferase, orotate-5-monophosphate decarboxylase, dihydroorotate oxidase, are 4-, 3.5- and 4.5-fold higher in the mutant than in the parent strain when grown in minimal medium. The synthesis of these enzymes in mutant cells is not repressed in the presence of exogenous Ura. True revertants, which completely restore the wild-type phenotype, occur among the Arg+ clones. The nature of the mutation is discussed.     

Isolation and characterization of two distinct membrane fractions from the Gram-positive nucleotide producer Brevibacterium ammoniagenes ATCC 6872

Abstract Bouyant density gradient centifugation of 'crude membranes' of the coryneform bacterium Brevibacterium ammoniagenes yielded two distinct membrane fractions which differed significantly in equilibrium densities (1.15 and 1.18 g/cm³), NADH dehydrogenase activity (0.29 and 0.09 μmol·min⁻¹·mg⁻¹), protein composition and association of ribosomes. As determined by one dimensional sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) proteins unique to either the free membrane (FM) fraction or the denser ribosome-containing complexed membrane (CM) fraction were identified.     

Genomic organization of purK and purE in Brevibacterium ammoniagenes ATCC 6872: purE locus provides a clue for genomic evolution

Abstract From the genomic library of Brevibacterium ammoniagenes ATCC6872, the purE locus encoding 5'-phosphoribosyl-5aminoimidazole (AIR) carboxylase (EC 4.1.1.21) was cloned and its nucleotide sequence was determined. From the sequence analysis, two distinct open reading frames (ORFs) in the sequence of the purE locus were identified as purK and purE genes ( purK-purE ). An in vivo translation experiment reconfirmed the purK and purE genes to be independent. The genomic organization in the purE locus of B. ammoniagenes is opposite to that of the bacteria Escherichia coli and Bacillus subtilis . However, it coincides with the fused genes ( purKE ) of higher organisms Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe and Vigna aconitifolia . This suggests that the purE locus might be an intermediate form for genomic evolution of bacteria to higher organisms.     

肌苷产生菌B.Subtilis H841在2升罐中的发酵

枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)H841肌苷产生菌是腺嘌呤、组氨酸、硫胺素三重缺陷型菌株,并对8—氮杂乌嘌呤、6—巯基嘌呤有抗性。在摇瓶中产肌胺18.1克/升,在2L自控发酵罐中最高可产肌苷19.6克/升,在流加葡萄糖情况下可产肌苷26.2克/升。控制pH较不控制pH发酵肌苷产量有较大的增加,控制pH发酵并补加营养时,肌苷产量可稳定地增长,但对葡萄糖的转化率是相同的。     

营养及环境因素对黄色短杆菌发酵生产L-亮氨酸的影响

目的:研究葡萄糖、玉米浆、蛋氨酸等主要营养物质以及环境因素对发酵生产L-亮氨酸的影响。方法:应用单因素实验确定发酵条件,采用高效液相色谱法测定产量。结果:在最优发酵条件下,以种龄36h、接种量为10%,摇瓶产L-亮氨酸的量可达19.4g/L,采用10L罐分批补料发酵64h可积累29.47g/L的亮氨酸。结论:营养及环境因素对发酵生产L-亮氨酸具有重要影响。     

黄色短杆菌产L-组氨酸菌株的诱变育种

以黄色短杆菌为出发菌,采用诱变育种的方法选育得到一株能高产L-组氨酸的突变菌株。在加有150g·L-1葡萄 糖;35g·L-1硫酸铵;10g·L-1蛋白胨的发酵培养基中培养72h,产L-组氨酸128.28mg·L-1。