冬凌草活性部位逆转SGC7901/ADR细胞多药耐药性的体外研究北大核心CSCD

以SGC7901和SGC7901/ADR为细胞模型,检测了冬凌草活性部位与化疗药物联用后,对SGC7901/ADR耐药性的逆转效应;冬凌草活性部位处理细胞后,检测耐药细胞内阿霉素的蓄积变化、耐药细胞P-糖蛋白(P-gp)的表达水平以及mdr1基因的表达变化。结果显示,冬凌草氯仿部位和乙酸乙酯部位可以有效提高化疗药物阿霉素在SGC7901/ADR细胞内的蓄积,降低P-gp的表达,降低mdr1基因的转录。冬凌草逆转胃癌耐药细胞SGC7901/ADR多药耐药性的活性部位是冬凌草氯仿部位和乙酸乙酯部位,其逆转作用与抑制P-gp的表达相关。     

高温逆转人胃癌细胞SGC7901多药耐药性的初步研究

目的:观察高温对人胃癌耐药细胞多药耐药性的逆转作用.方法:对人胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM予高温43℃处理,用MTT试验检测高温对ADM、5-FU、DDP、TAX作用下细胞生存率和IC50,并以人胃癌敏感细胞株SG-C7901为对照.结果:实验发现人胃癌耐药株sGc7901/ADM细胞除了对诱导耐药的ADM耐受,对CDDP、5-FU、TAX也有交叉耐药.加温至43℃,耐药株SGC7901/ADM细胞的耐药指数明显下降,而且对ADM组、CDDP组、TAX组人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞耐药逆转倍数分别为3.77、2.24、6.25,但对5-FU组SGC7901/ADM细胞的耐药逆转指数较低,为1.11.结论:高温可以增加耐药株SGC7901/ADM细胞对化疗药物ADM、DDP、TAX的敏感性,一定程度逆转细胞的多药耐药性.     

脉冲磁场对白血病细胞HL60/ADR多药耐药的逆转效果及分子机制研究

目的:探讨脉冲磁场(pulsedmagnetic fields,PMF)对白血病细胞HL60/ADR多药耐药的逆转效果及其可能的分子机制.方法:生长曲线法检测PMF的细胞毒性;MTT法测定HL60、HL60/ADR的IC50及经不同参数PMF作用后HL60/ADR的IC50,计算耐药倍数和逆转倍数;流式细胞术检测PMF作用前后HL60/ADR细胞内药物蓄积变化及多药耐药相关蛋白(Multidrug Rcsistance Related Protcinl MRPI)阳性表达率的变化;RT-PCR法检测MRPI基因表达的变化.结果:单独PMF对HL60/ADR细胞的生长没有明显抑制作用,不同参数(频率为150Hz和250Hz,场强均为40mT,照射时间30min和1 h)的PMF均能有效逆转HL60/ADR的多药耐药,150 Hz/1 h作用最为明显,逆转倍数为5.891倍.PMF作用后Rh123在HL60/ADR细胞内的蓄积增加了近8.0%,而MRPl基因表达下调了68.3%,蛋白阳性表达率下调23.6%.结论:PMF能够通过下调MRPl基因和蛋白的表达.进而增加Rh123在细胞内的蓄积,功能性部分逆转白血病细胞的多药耐药.     

低频脉冲电场逆转MCF-7/ADR对高三尖杉酯碱和长春新碱的耐药性

为了探讨低频脉冲电场对人乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR耐药性的逆转作用及机制,采用MTT比色法检测MCF-7/ADR的耐药指数和耐药性的逆转倍数,荧光显微镜观察脉冲电场对MCF-7/ADR细胞内DiOC2(3)(P-gp的特异性荧光底物)积累和外排的影响。结果发现,在低频脉冲电场不影响MCF-7/ADR细胞生长的情况下,不同时间的电场作用均能逆转MCF-7/A的多药耐药,对高三尖杉酯碱(HHT)耐药性的逆转倍数在1.429～1.848之间,对长春新碱(VCR)耐药性的逆转倍数在1.473～2.090之间,45min电场作用的逆转效果最好,其次是30min电场作用。药物积累和外排实验结果表明,脉冲电场作用45min能使细胞内的DiOC2(3)积累明显增加,而30min电场作用能显著抑制DiOC2(3)的外排。促进药物积累和抑制其外排可能是脉冲电场逆转多药耐药的机制之一。     

P-糖蛋白对结肠癌多药耐药的影响

结肠癌是常见的消化道恶性肿瘤。对术后患者以及无法采用手术治疗的患者,临床多采用化疗、放疗等综合性治疗方法。随着大量化疗药物在临床的广泛使用,结肠癌多药耐药性成为化疗失败的最主要原因。研究表明,P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)作为ATP结合盒(ABC)转运蛋白超家族成员之一,与多种肿瘤的多药耐药相关,其介导的多药耐药已经成为目前研究的热点。本文旨在通过对P-糖蛋白的结构、耐药机制以及逆转P-糖蛋白介导的结肠癌多药耐药新发现进行阐述,引导读者对P-糖蛋白在结肠癌多药耐药中的作用有更深入的了解。     

三种中药制剂Ams-11、Fw-13、Tul-17逆转肿瘤细胞多药耐药性的研究

为寻找能有效逆转肿瘤细胞多药耐药性的药物,通过体外细胞实验对Ams-11、Fw-13、Tul-17三种中药制剂逆转肿瘤细胞多药耐药性的作用进行了分析。并用流式细胞仪测定了Tul-17处理细胞后药物累积程度的变化及细胞P糖蛋白表达情况。为进一步研究体外细胞实验筛选出的多药耐药逆转剂在体内的药效学,将其中Fw13用于人白血病K562/ADR裸鼠移植瘤逆转试验。结果:在无细胞毒性的剂量范围内,该三种中药制剂均能明显增强多药耐药细胞对抗癌药物的敏感性,而且其逆转作用呈剂量依赖关系。Tu-17处理后,K562耐药细胞表达的P糖蛋白较对照降低1.5倍,对罗丹明123的累积量是对照的2.5倍。用Fw13治疗人白血病K562/ADR裸鼠移植瘤,可将硫酸长春新碱(VCR)对K562/ADR的抑瘤率从19.79%提高到86.59%,与单独VCR治疗疗效有显著性差异(P<0.05)。结果表明,这三种中药制剂可望成为肿瘤多药耐药逆转剂,在肿瘤化疗中发挥作用。     

P-糖蛋白在多药耐药的K562细胞转运苯妥英纳与卡马西平中的作用

研究证实,多药转运体与难治性癫痫耐药机制密切相关,P-糖蛋白在其中起重要作用．主要研究P-糖蛋白拮抗剂维拉帕米对P-糖蛋白过表达的K562细胞耐药性及细胞内苯妥英纳与卡马西平浓度的影响．首先建立了P-糖蛋白高表达的K562/Dox(阿霉素诱导)耐药细胞株,比较耐药细胞株和P-糖蛋白表达阴性的K562细胞株对苯妥英纳和卡马西平的耐药性,并观察给予维拉帕米后,耐药细胞内抗癫痫药物的浓度变化．结果发现,苯妥英纳和卡马西平对K562/Dox细胞株的半数抑制浓度(IC₅₀)明显高于K562细胞株,加入维拉帕米后,苯妥英纳和卡马西平对K562/Dox 细胞的IC₅₀明显下降,逆转倍数分别为2.5和1.5．进一步研究发现,K562/Dox细胞内苯妥英纳和卡马西平的浓度均显著少于其药敏K562细胞,仅分别为正常K562细胞的23.6%和32.2%．当加入维拉帕米后,K562/Dox细胞内抗癫痫药物浓度明显升高(P < 0.05)．由此证明,高表达的P-糖蛋白参与了细胞的药物转运,在难治性癫痫的耐药机制中扮演重要角色．     

P-糖蛋白线粒体转位与线粒体DNA缺失肿瘤细胞多药耐药产生的关系

线粒体DNA缺失细胞(ρ~0细胞)拮抗化疗药物诱导的凋亡,但其确切机制尚不明确。本研究探讨P-gp线粒体转位与人肝癌细胞(SK-Hepl)mtDNA缺失细胞(ρ~0SK-Hep1)多药耐药产生的关系。以SK-Hep1、ρ~0SK-Hep1和转线粒体细胞SK-Hep1Cyb为研究对象,CCK-8方法检测细胞对药物敏感性;AnnexinV/PI双染法及DAPI染色法检测细胞凋亡;Westernblot检测P-gp表达;激光共聚焦显微镜结合免疫荧光检测P-gP细胞内分布。结果显示,SK-Hep1、ρ~0SK-Hep1和SK-Hep1Cyb细胞对多柔比星(DOX)的IC_(50)分别为0.62±0.02μg/ml、4.93±0.17μg/ml和0.57±0.02μg/ml。SK-Hep1、ρ~0SK-Hep1和SK-Hep1Cyb细胞凋亡率分别为1 1.25%±1.36%、4.75%±0.98%和14.50%±1.57%,ρ~0SK-Hep1对细胞凋亡有明显抗性。Western blot检测发现ρ~0细胞内P-gP、Bax、Bcl-2表达增加,Bcl-2/Bax比值增加。免疫荧光共定位显示,ρ~0细胞线粒体内P-gP...     

shRNA抑制c-fos表达对P-gp介导的乳腺癌多药耐药的影响

多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致化疗失败的重要原因,多药耐药基因(multidrug resistance gene,mdr1)产物P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)过表达是最主要的耐药机制。原癌基因c-fos在肿瘤MDR中的作用渐受重视。主要选用人乳腺癌敏感株MCF-7和阿霉素(adriamycin,ADR)筛选的、mdr1/P-gp高表达的耐药株MCF-7/ADR,探讨c-fos在P-gp介导的乳腺癌MDR中的作用。相对于MCF-7,c-fos在MCF-7/ADR高表达。采用shRNA法下调c-fos表达后,MCF-7/ADR对ADR的敏感性大大增强,且mdr1/P-gp表达减少、P-gp外排功能降低。c-fos表达下调可逆转对P-gp介导的乳腺癌MDR的实验结果,为c-fos成为逆转肿瘤耐药诊断和治疗的新靶标,对实现耐药乳腺癌的分子靶向治疗提供了理论基础。     

逆转肿瘤多药耐药策略进展

多药耐药MDR是肿瘤治疗的一大障碍 ,本文简述了MDR的可能机制与逆转克服策略及开发临床可应用的低毒有效逆转剂的新方向     

基因逆转肿瘤多药耐药的研究进展

化疗在恶性肿瘤的综合治疗中占有非常重要的地位,而耐药性是严重影响肿瘤病人化疗效果及生存的主要原因之一,其中多药耐药(multi-drug resistance,MDR)最具临床意义。多药耐药是指肿瘤细胞对某一化疗药物产生耐药性后,对其他化学结构及机理不同的化疗药物也产生交叉耐药性。研究表明MDR是一个多阶段发展、多因素参与的复杂事件。逆转肿瘤多药耐药是目前肿瘤化疗的研究热点之一。近年随着基础科学研究的不断深入,基因逆转肿瘤多药耐药的研究已从分子水平上,定点、多位点阻断多药耐药基因的表达,已取得一些显著的进展。本文对肿瘤多药耐药机制以及逆转肿瘤多药耐药性的相关基因做一简要综述。     

胃癌SGC7901 表柔比星耐药细胞亚系的建立与耐药机制研究

目的:建立人胃癌SGC7901表柔比星耐药细胞系,探讨其对表柔比星的耐药机制。方法:采用逐步增加表柔比星浓度,间歇作用体外诱导法,建立人胃癌SGC7901表柔比星耐药细胞亚系SGC7901/EPI。用MTT法测定药物敏感性;流式细胞仪检测其药物排除能力和凋亡抵抗能力等生物学指标的改变,western blot检测相关蛋白的表达。结果:经过12个月建成人胃癌SGC7901表柔比星耐药细胞系SGC7901/EPI,其对表柔比星明显耐药,且对其他多种抗癌药具有不同程度的交叉耐药性,阿霉素蓄积潴留实验显示SGC7901/EPI的阿霉素含量明显低于亲本细胞,Western blot显示MRP1的表达上调;SGC7901/EPI凋亡抵抗能力明显上升,Bcl-2表达比亲本细胞增高,而Bax的表达下调。结论:SGC7901/EPI细胞具有多药耐药表型,其可能通过MRP1的上调增加药物排出和上调Bcl-2/Bax的比值促进凋亡抵抗等机制产生耐药。该胃癌多药耐药细胞亚系为进一步研究胃癌耐药机制及逆转方法奠定基础。     

洛贝林逆转肿瘤细胞多药耐药机制新进展

洛贝林,是从半边莲的品种中提取的一种哌啶生物碱。近期发现洛贝林可以逆转肿瘤细胞的多药耐药,可能作为新型、低毒、有效的耐药逆转剂。研究其作用机理、体内实验等将有助于探讨其临床实用性。     

洛贝林逆转肿瘤细胞多药耐药机制新进展

洛贝林,是从半边莲的品种中提取的一种哌啶生物碱。近期发现洛贝林可以逆转肿瘤细胞的多药耐药,可能作为新型、低毒、有效的耐药逆转剂。研究其作用机理、体内实验等将有助于探讨其临床实用性。     

Cetuximab抑制胃癌SGC7901/ADR细胞的增殖并增加其化疗敏感性

目的:探讨EGFR在胃癌耐药细胞中的表达及作用.方法:采用Western blot和免疫组化检测EGFR蛋白在胃癌耐药细胞系及组织标本中的表达,WST-1检测EGFR特异性抗体Cetuximab对胃癌耐药细胞增殖及化疗敏感性的影响.结果:SGC7901/ADR胃癌耐药细胞系中EGFR的表达明显高于亲本细胞,多数化疗后进展的胃癌组织EGFR的表达高于化疗前组织,针对EGFR的单克隆抗体Cetuximab可抑制SGC7901/ADR细胞的增殖,并增加其对部分化疗药物的敏感性.结论:EGFR过表达是胃癌细胞化疗耐药的分子机制之一,Cetuximab可逆转EGFR高表达耐药细胞的耐药表型.     

阿霉素-姜黄素聚氰基丙烯酸正丁酯复方纳米粒的研制及逆转MCF-7/ADR细胞多药耐药的研究

采用乳化聚合法制备阿霉素-姜黄素聚氰基丙烯酸正丁酯复方纳米粒(DOX-CUR-PBCA-NPs),该纳米粒平均粒径为133±5.34nm,Zeta电位为+32.23±4.56 mV,阿霉素(DOX)和姜黄素(CUR)的包封率分别为49.98±3.32％,94.52±3.14％.MTT实验结果和Western blott实验结果均表明,DOX-CUR-PBCA-NPs与CUR-PBCA-NPs+DOX-PBCA-NPs体外对MCF-7/ADR细胞的生长抑制活性相当,下调MCF-7/ADR细胞中P-糖蛋白(P-gp)的表达也相当,较没有用PBCA纳米粒包载的游离药物、单一药物的纳米制剂及其他形式的制剂联用的抗肿瘤活性及逆转多药耐药的性能都显著增强.说明利用PBCA纳米粒同时包裹抗癌药物阿霉素与中药逆转剂姜黄素协同用药可以增强克服多药耐药(MDR)的疗效.     

miR-17-92对急性白血病L1210/DDP细胞多药耐药性影响研究

目的:研究miR-17-92在白血病L1210/DDP细胞多药耐药形成中的作用.方法:首先构建L1210/DDP耐药细胞系,运用real-time PCR方法检测miR-17-92在L1210/DDP细胞与L1210细胞中的表达差异.利用脂质体Lipofectamine 2000将miR-17-92抑制物(miR-17-92sponge)及阴性对照(sponge vector)转染L1210/DDP细胞,构建miR-17-92表达下调的L1210/DDP细胞系.用MTS法检测转染后耐药细胞对顺铂和阿霉素体外药物敏感性.结果:miRNA-17-92在L1210/DDP耐药细胞系中高表达,上调倍数为(1.61±0.01)倍.体外药物敏感性实验表明,转染miR-17-92抑制物的实验组对顺铂和阿霉素的IC50分别为(3.29±0.51)、(1.35±0.13)g/ml,而转染阴性对照组对上述药物的IC50分别为(6.73± 0.82)、(2.66±0.42)g/ml,在耐药株中抑制miR-17-92在L1210/DDP细胞中的表达,显著增加细胞对顺铂和阿霉素的敏感性.结论:miR-17-92在白血病耐顺铂L1210/DDP细胞中高表达.抑制miR-17-92的表达可增加白血病L1210/DDP细胞对顺铂和阿霉素化疗药物的敏感性,部分逆转耐药.     

肿瘤多药耐药:机制及逆转剂

肿瘤细胞多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的产生是临床上导致肿瘤化疗失败的主要原因之一,因此寻找高效低毒的MDR逆转剂已成为肿瘤药物开发领域的热点。MDR的作用机制主要包括P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、乳腺癌耐药蛋白、肺耐药相关蛋白等等。多药耐药逆转剂包括钙离子通道阻滞剂、维拉帕米及其衍生物等等。本文主要介绍了MDR的作用机制以及肿瘤多药耐药逆转剂的研究进展。     

基于溶酶体靶点的抗肿瘤细胞多药耐药性

随着恶性肿瘤的发病率逐年上升,化疗的应用范围也日益广泛,但肿瘤细胞的多药耐药性(multi-drug resistance,MDR)严重影响了化疗的效果。随着对MDR机制的深入了解,各细胞器对肿瘤细胞MDR的影响方面的研究也越来越得到人们的重视。本文综述了溶酶体与肿瘤细胞MDR的关系,并对以溶酶体为靶点的肿瘤多药耐药治疗的应用前景进行展望。