日本旋覆花总黄酮的微波提取与含量测定

目的:探讨提取日本旋覆花总黄酮的方法并对其含量进行分析.方法:采用微波技术提取日本旋覆花中的总黄酮,同时以芦丁为对照品,用分光光度法测定不同产地日本旋覆花的总黄酮含量.结果:日本旋覆花总黄酮在10.4～51.7μg/ml范围内线性关系良好,回归方程为:Y=12.1841X+0.0003 (r=0.9999,n=5),方法回收率为99.2％,RSD为1.49％.结论:微波提取技术操作简单,效果可靠,适用于日本旋覆花总黄酮的提取.     

荆芥中总黄酮的微波提取及含量测定

中药荆芥原名假苏 ,始载于《本经》,列入下品 ,为唇形科植物裂叶荆芥 ( Schizonepeta tenuifolia〈 Benth〉Briq)和多裂叶荆芥的茎叶和花穗。民间用于治疗祛风、解表、透疹和止血。近年研究表明荆芥具有解热降温、镇静、镇痛、抗炎、止血、抑制心肌收缩、祛痰平喘、抗氧化等药理作用。目前从荆芥中分离得到的主要化学成分有酚类、酸类、黄酮类化合物 ,穗状花序含有单萜类化合物 ,荆芥挥发油主要含有胡薄荷酮和薄荷酮等化合物 ,具有特殊的香气[1] 。微波技术的应用 ,近年来得到很大发展。微波具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。微…     

茯苓中多糖的提取及含量测定

采用水煎煮、稀碱浸提茯苓中的多糖,通过正交试验优选工艺条件。结果表明,稀碱浸提茯苓中的多糖的工艺较为合理,其操作简单,提取时间短,收率较高．为测定提取液中的多糖含量,以苯酚—硫酸法,制得有色糖醛衍生物,用分光光度法,在490nm波长处测定吸光度,回归方程线性关系好。方法简单易行、稳定、快速。     

葛根中总黄酮的提取条件优化及含量测定

采用乙醇浸提法对葛根黄酮提取工艺进行研究,考察了提取温度、时间、乙醇浓度及固液比对葛根黄酮收率的影响,通过正交试验确定了葛根黄酮提取的最佳工艺条件,并采用紫外分光光光度法,以葛根素标准溶液为标样,测定了葛根中总黄酮的含量。实验结果表明,提取温度为70℃,固液比控制在1∶20,乙醇体积分数为80%,提取120min,葛根黄酮得率高达3.3%。在葛根黄酮检测方法的方法学考察中,平均回收率为97.5%,标准差与变异系数均较小,表明该测定方法精密度高,重现性好,可作为检测葛根中总黄酮含量的一种有效手段。     

遮荫和红膜处理对高山红景天根生物量及红景天甙含量季节变化的影响

采用纱布遮荫(覆以透明膜)和红色滤光膜处理人工种植生长3年和4年的高山红景天,观察了根生物量和红景天甙含量的季节变化结果表明,纱布遮荫处理(相对光强为全光照的51．8％)下根的生物量显著下降;红景天甙含量略有增加,红景天甙产量(红景天甙含量与根生物量乘积)则有所降低,但差异均不显著,红色滤光膜处理(相对光强为全光照的51．8％)与纱布遮荫处理相比,根生物量减少但不显著,红景天甙的含量和产量则显著增加,生长季末前者的红景天甙含量为后者的1．63倍(生长3年)和1．55倍(生长4年),红景天甙产量为后者的1．44倍(生长3年)和1．45倍(生长4年)。     

白花蛇舌草多糖的分离提取及含量测定

采用热水浸提法提取白花蛇舌草水溶性多糖,薄层层析法鉴定其多糖的单糖组成。通过正交试验优选浸提显色条件,以苯酚-硫酸法制得有色糖醛衍生物,用分光光度法在490nm波长处测定吸光度,其曲线方程为Y=0．01361x-0．08161,相关系数r=0．9997。结果表明,白花蛇舌草多糖由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖及甘露糖等组成,含量为15．10％,回收率达95．68％。     

黄花菜多糖的提取工艺及含量测定

采用单因子试验和L9（33）正交试验设计对水浴提取黄花菜多糖的最佳工艺条件进行了优化,并对苯酚—硫酸法测定黄花菜多糖作了修正。结果表明：提取黄花菜多糖的最佳工艺条件为：温度80℃、浸提6h、料液比1∶15时,黄花菜多糖的提取率最高,多糖含量为2.68%。并以此计算出苯酚—硫酸法葡萄糖标准曲线测黄花菜多糖的换算因子为4.2。     

艾叶中总黄酮和总多糖提取工艺及抗氧化活性的研究

艾叶是一类传统的中药,本文研究了从艾叶中提取黄酮类和多糖类化合物的方法,并以比色法测定其含量及提取液的抗氧化活性。结果表明,艾叶中含有丰富的黄酮类、多糖类化合物,具有很强的抗氧化活性,可以认为艾叶具有很大的开发应用价值。     

野生黄精的多糖含量测定及提取工艺研究

采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定了宁波四明山区野生黄精的多糖含量,并对水煎煮法提取黄精多糖的工艺进行优化。通过单因素实验获得了提取温度、提取时间、液料比对黄精多糖得率的影响;在单因素实验的基础上采用L_9(3~4)正交试验优化黄精多糖提取工艺。研究结果表明,宁波野生黄精多糖的含量为25.09%;各因素对黄精多糖得率的影响不同,液料比对黄精多糖得率的影响最大,其次是提取温度和提取时间。黄精多糖最佳提取工艺为:提取温度为80℃,提取时间为2 h,液料比为20∶1,在该条件下,黄精多糖得率为27.43%。为黄精多糖的开发利用奠定了理论基础。     

块根紫金牛总黄酮提取工艺优化和不同产地、部位的含量比较

本研究采用正交试验分析和分光光度法,建立了块根紫金牛总黄酮含量测定的方法并比较分析其不同产地及不同部位总黄酮的含量差异.结果表明超声波法提取块根紫金牛中总黄酮的最佳提取工艺为:乙醇浓度60%,料液比1:70,提取时间50 min,提取功率200 W,提取温度70℃.另外,不同产地块根紫金牛中总黄酮含量顺序为:靖西＞那坡＞德保＞扶绥＞龙州＞武鸣;同一产地块根紫金牛根、茎、叶间总黄酮含量的高低顺序大致为:叶＞根＞茎.且通过精密度、重复性、稳定性和回收率实验来检测最佳提取工艺条件,结果显示该方法操作简便,结果准确,重复性好,RSD为0.788%,稳定性和回收率较高,平均回收率达96.20%.证明该方法可用于比较不同产地块根紫金牛药材中总黄酮的含量差异,对不同产地块根紫金牛的药材质量分析具有一定的指导作用.     

大孢虫花菌丝体多糖提取工艺优化及其测定方法优选

通过采用3,5-二硝基水杨酸法、蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法测定大孢虫花PaecilomycestenuipesPeck菌丝体多糖含量,比较精密度、样品回收率、稳定性三个指标,得出最佳测定方法为蒽酮-硫酸法。根据一次一因素实验和Box-Behnken中心组合实验,应用SAS软件分析得出大孢虫花菌丝体多糖提取的最佳条件为:100℃沸水浴,提取2h,重复4次,料液比(菌丝体质量:蒸馏水体积)为1︰20,此条件下大孢虫花菌丝体多糖为4.12g/100g。     

黄绿蜜环菌菌丝体多糖分离纯化与含量测定

分离纯化黄绿蜜环菌菌丝体粗多糖,提高多糖含量,以进一步应用于工业化生产。采用DEAE-52纤维素层析柱分离纯化黄绿蜜环菌菌丝体多糖,依次用水、0.1 mol/L Na Cl、0.2 mol/L Na Cl、0.4 mol/L Na Cl、0.8 mol/L Na Cl进行洗脱;苯酚-硫酸法测定纯化后多糖含量,测定波长490nm,葡萄糖浓度与吸光度的回归方程为A=6.3137X+0.2156R2=0.9909。黄绿蜜环菌菌丝体水体粗多糖经DEAE-52纤维素层析柱分离纯化后,多糖含量达到99%以上。经过中试试验验证提取及分离纯化工艺适用于工业化生产。     

肺形侧耳发酵培养基优化及多糖提取工艺

通过碳源、氮源单因素实验和正交实验,对野生肺形侧耳进行发酵培养基优化。选取浸提时间、浸提温度及液料比3个因素,以胞内粗多糖提取率为指标,采用正交实验设计确定菌丝体胞内多糖提取的最佳工艺。结果表明,适宜肺形侧耳深层发酵的培养基为蔗糖1.5%,麸皮5%,蛋白胨0.6%,KH₂PO₄ 0.15%,MgSO₄ 0.75%,VB₁ 0.01%。胞内多糖提取的最佳工艺为浸提时间2h,液料比50:1,浸提温度90℃,此条件下多糖提取率为34.35%。     

蕨菜多糖超声波辅助提取及其药理活性初步研究

为优化蕨菜多糖的提取工艺,同时检测蕨菜多糖的药理学活性。实验采用超声波辅助提取法,在单因素试验的基础上,考察液料比、浸提次数、超声浸提时间、超声功率四因素对蕨菜多糖提取得率的影响。运用Design Expect 10.0软件分析,通过响应面分析法(RSM)优化提取条件,对蕨菜多糖促进小鼠脾细胞增殖能力和抑制结肠癌细胞(HTC-8)增殖能力进行分析。结果表明:蕨菜多糖的优化提取工艺为:液料比:36.2∶1;浸提次数:4次;超声浸提时间:43.1 min;超声波功率:240 W,在此条件下,蕨菜多糖提取效果最好,提取得率达8.60%。各因素对多糖提取得率的影响程度:浸提次数>液料比>超声浸提时间>超声功率。通过药理活性研究表明,本实验获得的蕨菜多糖具有脾细胞免疫增值和抑制结肠癌细胞增殖活性。     

High-field NMR as a technique for the determination of polysaccharide structures

NMR spectroscopy has played a developing role in the study of polysaccharide structures for over 30 years. Many new bacterial polysaccharide repeat unit structures have recently been published as a result of the application of modern NMR techniques. NMR can also be used to elucidate the structures of both regular and heterogeneous polysaccharides from fungal and plant sources, as well as complex glycosaminoglycans of animal origin. In addition to covalent structure, conformation and dynamics of polysaccharides are susceptible to NMR analysis, both in solution and in the solid state. Improvements in NMR technology with potential applications to polysaccharide studies hold promise for the future.     

Molecular-size determination of xanthan polysaccharide

Hydrodynamic chromatographic separations of xanthan polysaccharide of ultrahigh molecular weight have been obtained by using columns packed with 30-μm, non-porous spheres. From calibration curves of the elution volume versus particle size for spherical, polystyrene latexes, it was found that xanthan is eluted at the same volume as a 0.153-μm diameter sphere. Extremely dilute samples of xanthan (70 p.p.m.) were injected to preclude self-association and aggregate formation. Detection at these low concentrations was accomplished by tagging the xanthan with a fluorescein derivative and using a flow-through fluorometer detector. Flow rates of 1 mL/min yielded run times of ～7 min. Comparison of the accepted molecular conformation of xanthan—a rigid rod-like molecule—with the apparent molecular volume from the spherical-latex calibration indicates that the xanthan molecules are substantially oriented by the flow field in the chromatography column.     

超临界CO2萃取红景天中红景天苷、苷元酪醇的研究

采用超临界CO₂ 萃取法和乙醇常温浸提法相比较, 研究从红景天中提取红景天苷、苷元酪醇的工艺条件, 结论是:采用超临界CO₂ 萃取法能萃取出红景天生药中红景天苷的1.2%, 提取率不高, 但该方法能萃取出80%的苷元酪醇, 萃取液中苷元酪醇的相对含量可达45.68%;乙醇常温浸提法能将红景天苷、苷元酪醇同时有效萃取, 且得率较高, 但是萃取液中两物质相对含量较低, 进一步分离纯化将有难度。本研究结果表明, 将超临界CO₂ 萃取法和乙醇常温浸提法有效结合, 可实现两物质的有效分离, 推进红景天有效成分的产业化进程。     

乙醇、丙酮和氯化钙对W135群脑膜炎球菌荚膜多糖唾液酸含量检测的影响

目的研究乙醇、丙酮和氯化钙是否影响间苯二酚法测定W135群脑膜炎球菌荚膜多糖(group W135 meningococcal capsular polysaccharide)唾液酸(sialic acid)含量。方法用苯酚法制备W135群脑膜炎球菌荚膜多糖;分别定量检测唾液酸和W135群脑膜炎球菌荚膜多糖添加不同质量浓度乙醇、丙酮和氯化钙,用间苯二酚法测定其唾液酸含量,检测乙醇、丙酮和氯化钙对间苯二酚测定唾液酸含量的影响。结果添加质量浓度≥39.5μg/mL的乙醇和≥9.9μg/mL的丙酮对唾液酸含量测定均有影响,其中乙醇影响不明显,丙酮的影响极为明显,而不同加入量的氯化钙均对唾液酸含量的测定无影响。结论乙醇和丙酮对间苯二酚法测定唾液酸含量有影响,二者可能会对W135群脑膜炎球菌荚膜多糖质量控制产生影响。     

检测四价脑膜炎球菌多糖疫苗中A群多糖含量ELISA法的建立

目的建立双抗体夹心ELISA法,对A群流脑多糖抗原进行特异性定量测定。方法制备抗A群多糖的特异性多克隆抗体,所得抗血清经辛酸-硫酸铵沉淀法纯化后,用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记多克隆抗体。分别以抗A群多糖多克隆抗体作为包被抗体及酶标二抗,建立双抗体夹心ELISA法,优化反应条件,对A群多糖抗原进行特异性定量测定。结果一系列验证试验表明,该法特异性较好,未检出与C、Y、W135群多糖的交叉反应;1.25～20 ng/mL多糖浓度范围的剂量反应曲线线性最佳,相关系数大于0.98,经实验内10次及不同试验间以16、84、ng/mL测定3次A群多糖中的含量,变异系数在6.3%～11.5%间,回收率在91.8%～105.9%之间,符合常规质控要求,检测限量为4 ng/mL。采用该法测定3批ACYW135群四价脑膜炎球菌多糖疫苗中A群多糖含量、分子大小及回收率的结果均符合规程草案质量标准。结论建立的双抗体夹心ELISA法可尝试用于ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗中A群多糖的关键质量指标的检测。     

Fluoranthene determination based on a rapid and sensitive syringe extraction and solid-phase fluorescence technique

A rapid and sensitive strategy was proposed for the detection of fluoranthene (FL), which is a polycyclic aromatic hydrocarbon (PAH), in water samples. In this work, syringe solid-phase extraction (SPE) combined with solid-phase fluorescence spectrometry was used to determine FL in PAHs polluted environmental samples. The fluorescence signals were directly monitored on the membrane surface after FL was enriched by syringe SPE. Under the optimal conditions, the proposed method showed a linear relationship in the concentration range 2–50 μg/L with a correlation coefficient (R²) of 0.998, and the limit of detection was 0.143 μg/L. The recoveries varied from 93.47% to 109.81% in the actual samples, with the relative standard deviations (n = 3) ranging from 2.06% to 6.32%. According to the results, the established method can be applied in the field of rapid detection as it is fast, simple, portable, and highly sensitive, and has strong anti-interference.