细胞壁代谢与琯溪蜜柚果实成熟过程汁胞粒化的关系

以易发生汁胞粒化的老龄树和不易发生汁胞粒化的适龄树的琯溪蜜柚（Citrus grandis（L．）Osbeck‘Guanximiyou’1果实为材料,研究了果实成熟过程中汁胞粒化发生与细胞壁代谢的关系。结果表明：老龄树果实的汁胞粒化指数随着果实成熟而上升。在汁胞粒化发生过程中,汁胞维持较低的细胞壁降解酶[果胶甲酯酶（PE）、多聚半乳糖醛酸酶（PG）、纤维素酶（Cx）]活性,保持较高的细胞壁物质（原果胶、纤维素、半纤维素）含量;尤其在汁胞粒化的起动阶段和加快阶段,纤维素、半纤维素含量极显著增加。相反,适龄树果实的汁胞粒化指数在果实成熟过程中变化不大,汁胞中细胞壁降解酶活性较高,促进原果胶、纤维素、半纤维素等细胞壁物质的降解,保持较低的细胞壁物质含量,使汁胞发育正常、柔软多汁。这说明PE、PG、Cx活性和原果胶、纤维素、半纤维素含量与錧溪蜜柚汁胞粒化密切相关。     

Guan溪蜜柚汁囊分化和粒化过程的解剖学观察

用徒手切片、石蜡切片、细胞化学等方法观察了Ｇｕａｎ溪蜜柚（Ｃｉｔｒｕｓｇｒａｎｄｉｓ（Ｌ．）Ｏｓｂｅｃｋ）汁囊的分化和粒化过程。结果表明,心皮内皮表皮和表皮下细胞分裂共同形成汁的基。由汁囊原基发展成柱状结构。柱状结构项端有类似分生组织的细胞群,中心有类亿分生组织的细胞柱。     

琯溪蜜柚果实粒化症矫治研究

本文概述1995~1999年琯溪蜜柚果实汁胞粒化症矫治研究的主要进展,包括探讨各种内外因素对汁胞粒化指数的影响,以及提出矫治琯溪蜜柚果实粒化症的综合配套技术。     

琯溪蜜柚汁囊分化和粒化过程的解剖学观察

用徒手切片、石蜡切片、细胞化学等方法观察了琯溪蜜柚（Ｃｉｔｒｕｓ　ｇｒａｎｄｉｓ（Ｌ．）Ｏｓｂｅｃｋ）汁囊的分化和粒化过程。结果表明,心皮内表皮细胞和表皮下细胞分裂共同形成汁囊原基。由汁囊原基发展成柱状结构。柱状结构顶端有类似分生组织的细胞群,中心有类似分生组织的细胞柱。它们的细胞呈多角形,细胞核大,原生质浓厚。类似分生组织的细胞柱纵贯柱状结构中心（除柄部外）。开花后７周近柄端明显分化。开花后约两个半月,汁囊雏形形成。汁囊的粒化分为４个阶段：（１）正常汁囊阶段,汁囊透明,切开溢出果汁。表皮下细胞为角隅加厚的厚角组织,个别薄壁组织细胞原生质体已死亡。（２）凝胶化阶段,汁囊透明、坚挺,切开为凝胶状,表皮下细胞区的厚角组织细胞壁全面加厚。有的汁囊中已有部分细胞的细胞壁木质化。（３）粒化阶段,汁囊乳白色或部分乳白色。表皮、表皮下细胞区、长细胞区和汁细胞区等四个细胞区均有较多细胞的细胞壁木质化加厚。（４）粒化后期,汁囊黄白色,部分硬化,部分萎缩,汁囊变形,硬化部分大部细胞木质化,萎缩部分死亡的细胞被挤压,随果实贮存时间延长,正常汁囊减少,汁囊中淀粉量减少,油滴增多。     

琯溪蜜柚汁胞RNA提取方法的比较

比较了3种从琯溪蜜柚汁胞中提取RNA的方法,通过琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度计检测,对提取所得RNA的完整性、纯度及浓度进行分析。试验结果表明,Trizol法适合琯溪蜜柚汁胞RNA的提取,能有效获得纯度高、完整性好的RNA样品,而且Trizol法步骤简单,RNA得率与质量均较高。通过RT-PCR检验表明该RNA适于后续分子生物学操作。     

三种植物生长调节剂对琯溪蜜柚果实粒化的影响

采用正交试验探讨6-BA、GA₃、2,4-D不同浓度组合幼果期涂抹果柄对溪蜜抽果实粒化的影响。结果表明,三种生长调节剂对果实粒化指数影响的大小依次为:6-BA、GA₃、2,4-D,三种生长调节剂不同浓度组合以6-BA300mg/L、GA₃100mg/L、2,4-D10mg/L对减轻果实粒化指数效果最好。本研究还对筛选组合进行两年的应用,结果表明,该组合对减轻果实粒化程度有较显著的作用。     

贮藏期柚粒化过程中果实总细胞壁物质积累和维管束超微结构的变化

汁胞粒化是柑橘类果实一类普遍的生理失调病害,主要表现为汁胞硬度增加,果实品质降低。为了明确汁胞粒化过程其他果实组织的生理代谢特征,该试验以成熟‘琯溪蜜柚’果实为材料,室温贮藏60 d,测定不同贮藏阶段果实背面维管束汁胞、侧面维管束汁胞、囊衣和果皮总细胞壁物质含量,以及两类汁胞可溶性固形物含量,同时利用透射电子显微镜观察果实背面维管束和侧面维管束细胞超微结构的动态变化。结果显示：(1)贮藏10 d时两类果实维管束的筛管和伴胞次生细胞壁开始明显加厚,韧皮部薄壁细胞线粒体和囊泡数量开始增多,而且次生细胞壁也开始明显加厚;贮藏20 d时两类维管束韧皮部薄壁细胞线粒体和囊泡数量持续增加,而且高尔基体出现(之后消失),同时囊衣和果皮总细胞壁物质含量开始显著提高;贮藏40 d时仅侧面维管束韧皮部薄壁细胞线粒体数量持续增多,侧面维管束汁胞总细胞壁物质含量开始显著升高;贮藏60 d时两类果实维管束次生细胞壁持续加厚,囊衣、果皮和侧面维管束汁胞总细胞壁物质含量均持续显著升高,然而至贮藏期结束背面维管束汁胞总细胞壁物质含量始终无显著变化。(2)贮藏期内囊衣总细胞壁物质含量始终显著高于果皮,而果皮总细胞壁物质含量始终显著高于两类汁胞;贮藏后期侧面维管束汁胞总细胞壁物质含量显著高于背面维管束汁胞。(3)在果实贮藏过程中背面维管束汁胞可溶性固形物含量始终无显著变化,而侧面维管束汁胞可溶性固形物含量从贮藏40 d至贮藏期结束持续显著降低。研究表明,贮藏期柚果实维管束、囊衣和果皮中细胞壁物质代谢的变化早于汁胞;发现果实维管束韧皮部薄壁细胞内线粒体数量增加的同时维管束次生细胞壁明显加厚,在整个贮藏期内侧面维管束汁胞可溶性固形物含量的显著降低伴随着总细胞壁物质含量的显著升高。这些结果可能有助于柑橘类果实粒化机理的全面揭示。     

沙田柚花粉发育过程中同工酶的变化研究

分析了沙田柚花粉在发育过程中３ 种酶的同工酶的活力及类型的变化。结果表明, 过氧化物酶活力在单核期达到最大, 在四分体期与单核期所具有的一条染色较深的快速酶带在双核期消失。α－ 淀粉酶活力在成熟期达到最大, 谱带上也表现出在成熟期有酶带的增多。分析酯酶酶谱, 可见其在各个发育时期均有明显的特征带, 这些特征带可作为花粉发育各时期的生化指标。     

白兰瓜子叶衰老过程中蔗糖酶同工酶的分离及其活性变化

利用DEAE—纤维素柱层析对白兰瓜子叶蔗糖酶同工酶进行了分离。发现细胞质可溶性部分含有4种蔗糖酶同工酶,其中3种为酸性蔗糖酶(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),其活性最适pH分别为5.40、4.30和4.73;另外一种为碱性蔗糖酶,其最适pH为7.40。细胞壁盐溶性部分仅含1种酸性蔗糖酶,其最适pH亦为4.73。在白兰瓜子叶生长后期(7～11d),定位于细胞质的酸性蔗糖酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的活性略有升高;衰老发生后(17～23d)其活性显著下降;衰老后期碱性蔗糖酶活性消失。在子叶生长和衰老期间细胞壁酸性蔗糖酶活性则一直下降。     

小白鼠发育过程中胃和大肠蛋白酶活性的变化

采用活性电泳方法对小白鼠发育过程中胃和大肠蛋白酶活尾进行了研究。结果发现：（１）出生前、胃和大肠蛋白酶种类少、活性弱,出生后,胃和大肠蛋白酶的种类多,活性增加;（２）胃肠蛋白酶可能与其结构的构建和功能建立有密切关系;（３）食物 刺激可能对胃肠蛋白酶有显著影响。     

琯溪蜜柚和度尾蜜柚自交和互交胚珠发育状况的比较

用石蜡切片技术对溪蜜柚 (Citrus grandis cv.Guanxim iyou)和度尾蜜柚 (C.grandis cv.Duweimiyou)自交和互交胚珠发育进行了比较观察。溪蜜柚的自交授粉后胚珠发育有 2种不同情形 (I型和 II型 ) , 型在授粉后5 d的珠心组织细胞有变形现象 ,接着胚囊萎缩 ,但外珠被能生长发育到 5 0 d左右 ; 型受精后胚乳发育异常 ,种子不能发育。度尾蜜柚自交胚囊中胚乳没有出现 ,在授粉后 35 d左右珠心组织和囊腔同时萎缩。互交胚珠发育正常 ,成熟果实有籽。表明两品种是自交不亲和的 ,导致了果实无籽。但两者的识别反应和阻抑部位不同 ,溪蜜柚 I型可能出现在受精前 , 型出现在受精后 ,而度尾蜜柚自交花粉管可能没有进入胚囊 ,是一种受精前的障碍。瘪籽的大小与不亲和障碍发生的时期有关。实验为进一步研究两品种的自交不亲和性遗传机理提供了实验证据 ,将有助于解决由于果实无籽导致的汁胞粒化、裂果、裂瓣等品质问题。     

柚雌蕊不同部位抽提液对自交不亲和阻抑效果的研究

以‘土柚’（Citrus grandis ‘Tuyou’）作对照,采用荧光显微技术对‘琯溪蜜柚’（Citrus grandis‘Guanxi-miyou’）、‘度尾蜜柚’（Citrus grandis ‘Duweimiyou’）两个品种花粉在本品种和异品种雌蕊不同部位抽提液中花粉萌发和花粉管伸长状态进行了观察。结果表明：‘琯溪蜜柚’和‘度尾蜜柚’子房抽提液对自身花粉管伸长阻抑最明显,并产生严重的弯曲;柱头抽提液对自身花粉管伸长稍有影响,出现中度弯曲;花柱抽提液中自身花粉管伸长正常,仅有轻微弯曲。然而,对于异品种的花粉以及自交亲和的‘土柚’,其子房、花柱和柱头抽提液对花粉管伸长没有这种阻抑效应。     

金柚贮藏真菌病害及保鲜技术研究

1998年5月-2000年10月间调查了梅州柚果贮藏期的真菌病害,它们是:①柚果绿霉病(Penicilliumdigitatum),②柚果炭疽病(Collettrichumgloeosporioides),③柚果黑腐病(Alternariacitri),④柚果焦腐病(Diplodianatalensis)和⑤柚果酸腐病(Oosporacitri-aurantii)等5种.从几种安全性高的保鲜剂中筛选出1个混用配方,该配方对柚果贮藏防腐保鲜效果明显,贮藏5个月无病斑果达100%,6个月也只有20%的柚果出现少量病斑,且柚果几项质量指标较好.     

生长素与乙烯在沙田柚上胚轴不定芽再生中的作用

结果表明,6 BA只能诱导较低频率的不定芽再生,IBA的加入可以促进不定芽的再生。从再生率与单位外植体再生芽数综合考虑,以高浓度IBA(1.5mg·L 1)与低浓度6 BA(0.5mg·L 1)配合的效果最佳,加入生长素极性运输的调节剂TIBA与Flavone可进一步提高不定芽的再生频率。乙烯抑制上胚轴不定芽的再生,而乙烯生理作用的拮抗剂Ag+与生物合成抑制剂AOA、Co+可以显著提高不定芽再生频率。水杨酸(SA)也抑制不定芽的再生。     

柚子(Citrus grandis Osbeck)S-like核酸酶基因CgSL1的分离与特征分析

从柚子（Citrus grandis Osbeck)2个自交不亲和品种Guan溪蜜柚和度尾蜜柚的花柱中克隆出一个类似S核酸酶基因CgSL1（C.grandis S-likde RNase),它的cDNA序列全长1074bp,编码297个氨基酸,通过与其它植物S-like核酸酶和S核酸酶氨基酸序列进行比较,发现CgSL1类似于S-like核酸酶,与拟南芥中的RNS2一致性为62．5％。对CgSL1的表达分析表明该基因在花柱,花药,叶片不同器官以及花柱的不同发育阶段均有表达,且在花柱中的表达随衰老增强,由此推测它可能与衰老有关。     

鹤顶兰胚囊发育过程中Ca~（2＋）分布的超微细胞化学定位（英文）

用焦锑酸盐沉淀法对鹤顶兰（Phaius tankervilliae）胚囊发育过程中的Ca2＋状态进行超微细胞化学定位。观察结果发现：功能大孢子时期,珠孔端的胚囊壁上开始出现小颗粒的Ca2＋沉淀,但功能大孢子细胞内未见明显的Ca2＋标记;四核胚囊时期胚囊壁上的Ca2＋沉淀明显增多,液泡膜上有Ca2＋沉淀出现,珠孔处的Ca2＋沉淀颗粒较大;成熟胚囊时期,胚囊壁上的Ca2＋沉淀进一步增多,且胚囊内Ca2＋分布明显增多,且极性明显,珠孔端助细胞、卵细胞比合点端反足细胞有更多的Ca2＋沉淀。鹤顶兰成熟胚囊内Ca2＋积累的来源有：（1）在胚囊成熟前主要由珠被细胞、珠细胞通过胞间连丝向胚囊运输;（2）以沉淀有大量Ca2＋的小泡形式跨过胚囊壁进入胚囊。     

不同氮源下生长的柚树叶片光合参数对高浓度CO2驯化作用的比较

比较研究了在不同形式氮源下生长柚树叶片光合对高浓度 CO2 驯化过程中有关参数变化。植株生长在人工混成土壤中 ,分别浇灌含有 2 mmol L- 1N的 NO- 3 - N,NH+ 4 - N和 NH4 NO3- N溶液。空气 CO2 增高处理时向生长植株的开顶透明罩中通入 74.4Pa CO2 ,以空气 CO2 生长的植株为对照。利用 CI- 30 1 ( CID,Inc) CO2 气体交换系统测定叶片光合速率和通过光合作用相关响应曲线计算光合参数。结果表明 ,在 CO2分压倍增下 ,NO- 3 - N生长植株光饱和光合速率较大气 CO2 分压下的高。而生长在 NH+ 4 - N和 NH4 NO3- N的植株光合速率与大气 CO2 分压下的相近 ,表现对高 CO2 的驯化。在空气 CO2 倍增下无论供给何种形式氮源并不影响Γ* ,但可增高 Rd( P<0 .0 5 )。 CO2 分压倍增下供给 NO- 3 - N植株的 Vcmax和 Jmax较大气分压相应的植株高 ,而 NH+ 4 - N和 NH4 NO3- N植株则与大气 CO2分压的相应植株相似 ( P>0 .0 5 )。无论供给何种形式氮源 ,生长在空气 CO2 分压倍增下不改变叶片单位面积干重 ,叶绿素含量和叶片中氮在 Rubisco、生物能学组分和捕光色素复合体组分的分配系数 ;但能改变叶片中氮含量。植物对高 CO2 的驯化可能受到不同形式氮利用性的影响 ,在对高 CO2 驯化过程亦反映叶片中氮在不同光合功能组分