造血干细胞与免疫活性细胞的沉降特性

应用 Simonsen 的脾指数测定方法以及体内生成脾结节和体外琼脂培养方法,分别研究了小鼠脾脏和外周血中造血干细胞和免疫活性细胞在自然沉降条件下的沉降特性。在小鼠脾脏细胞的沉降试验中,CFU-S 的沉降速度为4.50毫米/小时,CFU-C 的沉降速度为6.69毫米/小时,脾指数阳性细胞的沉降速度为3.57毫米/小时。在小鼠外周血白细胞的沉降试验中,CFU-S 的沉降速度为4.96毫米/小时,脾指数阳性细胞的沉降速度为5.12毫米/小时。上述沉降试验表明,造血干细胞与免疫活性细胞有不同的沉降速度和分布特性,因此,有可能通过自然沉降,在一定程度上分开这两类细胞,其中,粒系定向造血干细胞(CFU-C)的沉降速度要高于多向性造血干细胞(CFU-S),因而,在沉降分离中 CFU-C 与免疫活性细胞可以得到较高程度的分离。从造血细胞中分离免疫活性 细胞是当前造血干细胞移植中的重要研究课题。本文对于应用速度沉降装置分离免疫活性细胞、减轻造血细胞移植中的移植物抗宿主反应(GVHR)的前景作了讨论。     

RunX3对小鼠骨髓造血干细胞功能的影响

目的研究RunX3基因对造血干细胞自我更新和分化能力的影响。方法流式细胞术测定小鼠骨髓干细胞和外周血单个核细胞的比例;通过竞争性骨髓移植实验检测RunX3转基因小鼠骨髓干细胞的功能。结果移植后来源于RunX3-/-小鼠骨髓干细胞供体的外周血细胞占总外周血细胞的比例与野生对照鼠相比无明显差异,移植后来源于RunX3-/-小鼠骨髓干细胞供体的外周血中髓系细胞占总外周血髓系细胞的比例较野生型对照鼠高。结论RunX3基因缺失对骨髓造血干细胞的自我更新没有影响,但其可能参与了骨髓造血干细胞的分化过程。     

造血干细胞嵌合体诱导移植免疫耐受

造血干细胞混合嵌合体是指两个不同基因型个体的骨髓造血干细胞共存的一种状态。在同种异体或异种移植的动物模型中,造血干细胞混合嵌合体巳成功地诱导出针对供者特异性的免疫耐受。现已证实造血干细胞具有否决活性,来自造血干细胞的否决细胞在诱导移植特异性免疫耐受中可能起重要作用。     

造血干细胞及其应用研究进展

造血干细胞(hematopoietic stem cells, HSCs)是一类多能干细胞,位于特殊的造血微环境,主要存在于骨髓中。其能自我更新和多向分化为各种功能的血细胞,维持血液系统的建立和动态平衡。造血干细胞的这些重要特性以及造血干细胞移植在临床上的广泛应用,结合基因治疗和基因编辑技术的进步,使得基于造血干细胞治疗多种血液疾病和免疫疾病的基因治疗研究在近年来取得了很大的进展。该文将从造血干细胞生物学特征、来源、造血干细胞微环境的基础研究,以及造血干细胞基因治疗、自体造血干细胞移植治疗β-地中海贫血等方面的临床研究和应用进展进行综述。     

骨髓间充质干细胞在移植免疫方面的研究进展

骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem ells,MSCs)是存在于骨髓中一类低免疫原性的非造血成体干细胞,体外研究表明MSCs能够通过抑制混合淋巴细胞反应抑制抗原呈递细胞分化成熟及功能发挥、抑制CTL形成、抑制NK细胞活性、增加调节性T细胞比例等途径发挥免疫调节作用。体内实验证明,MSC输注能够延长狒狒异体皮肤移植的存活时间,而在小鼠心脏移植的模型中,体外诱导免疫耐受的MSCs在活体内反而加速了小鼠的排斥反应,临床上输注MSCs可缓解移植物抗宿主病(GVHD)。本文对MSCs的免疫学特性及免疫调控功能的研究进展作一综述。     

造血干细胞研究进展

造血组织是一个不断地增殖的组织,其中,细胞分裂活动是很活跃的。早在1949年 Jaco-bson 的脾脏屏蔽试验和1951年 Lorentz 的骨髓移植试验,都从实验上观察了移植的骨髓细胞可以在损伤的造血组织中进行增殖和分化,并促进照射动物造血功能的恢复。随着放射自显影技术的应用,造血细胞动力学的研究得到了相应的发展。实验研究表明,血细胞的寿命都是有限的,骨髓中一些幼稚细胞(例如,原粒细胞→中幼粒细胞,原红细胞→中幼红细胞等),它们在增殖中不断成熟。但是,正常成年动物的骨髓或外周血的细胞数量基本上维持恒定。这些事实都支持这一观点,即在造血组织中存在着一类造血干细胞,它们通过自我更     

胚胎干细胞体外分化为造血干细胞

造血干细胞移植已成为治疗白血病、再生障碍性贫血、重症免疫缺陷征、地中海贫血、急性放射病、某些恶性实体瘤和淋巴瘤等造血及免疫系统功能障碍性疾病的成熟技术和重要手段,另外这一技术还被尝试用于治疗艾滋病,已取得积极的效果。但是由于移植需要配型相同的供体,并且过程复杂,使得造血干细胞移植因缺少配型相同的供体来源以及费用昂贵而不能被广泛应用。胚胎干细胞是一种能够在体外保持未分化状态并且能进行无限增殖的细胞,在适合条件下能够分化为体内各种类型的细胞,研究胚胎干细胞分化为造血干细胞,不仅可作为研究动物的早期造血发生的模型,而且可以增加造血干细胞的来源,还可以通过基因剔除、治疗性克隆等方法来解决移植排斥的问题,从而为造血干细胞移植的发展扫除了障碍,因此有着重要的研究价值和应用前景。现对胚胎干细胞体外分化为造血干细胞的诱导方法,诱导过程中的调控机制,并对胚胎干细胞分化为造血干细胞的存在问题和发展前景进行讨论。     

CD4+CD25+调节性T细胞在造血干细胞移植后诱导免疫耐受的作用

异基因造血干细胞移植是治疗良恶性血液病的有效手段,尤其单倍型移植是具有中国特色的移植体系。然而,移植物抗宿主病(graft-versus-host disease, GVHD)的发生是移植后患者死亡的最重要原因。造血干细胞移植的成功实施需要安全有效的诱导免疫耐受,其中T淋巴细胞在GVHD发生中起到最重要的作用。CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)是近年来发现的一类能够抑制免疫应答的重要调节性免疫细胞,本文综述了Treg在造血干细胞移植后诱导免疫耐受的作用。     

Exo-1基因对端粒酶缺陷小鼠造血干细胞植入效率的影响

目的利用不同的造血干细胞移植方式,探讨Exo-1基因缺失对端粒酶基因敲除小鼠的造血干细胞植入效率的影响。方法以CD45.1小鼠的骨髓细胞或骨髓造血干细胞为供体,以端粒酶基因敲除小鼠或Exo-1基因和端粒酶基因双敲除小鼠为受体,在给予不同剂量X线照射或不照射的情况下,重复进行静脉注射全骨髓细胞或分选的骨髓造血干细胞(c-kit+、Sca-1+、lineage-,KSL),于移植后1个月取外周血,流式分析嵌合率。结果未经X线照射及1 Gy、2 Gy照射情况下,端粒酶基因缺陷受体小鼠的外周血中供体来源的细胞嵌合率较低;6 Gy照射后,供体来源的外周血细胞嵌合率仍低于50%,而且端粒酶基因缺陷受体小鼠在移植后1个月内死亡较多;3 Gy照射可形成较高嵌合率,Exo-1基因缺失对端粒酶缺陷小鼠的造血干细胞植入效率的影响不显著。结论以端粒酶缺陷小鼠作为衰老模型研究造血干细胞植入效率时,3 Gy X线照射能够有效地形成较高的外周血供体细胞的嵌合率,但是Exo-1基因没有进一步提高造血干细胞在端粒酶敲除小鼠的植入效率。     

脐带血造血干细胞治疗糖尿病的研究进展

脐带血造血干细胞具有极强的自我更新和多向分化潜能,为治疗糖尿病开辟了新的途径,造血干细胞在生成胰岛素分泌细胞前需要经过诱导分化、细胞选择和细胞成熟三个阶段。目前,脐带血造血干细胞在治疗糖尿病中已取得一定进展,将造血干细胞定向分化为胰岛β细胞成为了治疗的关键。本文通过对脐带血的特征、造血干细胞的制备和移植、糖尿病的治疗以及脐带血造血干细胞移植的利与弊等方面进行的归纳总结,分析脐带血造血干细胞在治疗糖尿病方面的进展和应用前景。     

胎肝造血干细胞的移植特性

胚胎发育中,肝脏是一个重要的造血器官。近年来胎肝移植的临床应用重新引起了人们的关注。本文应用染色体的 C-带染色法研究了小鼠骨髓和胎肝造血干细胞在照射受体小鼠中的增殖能力与相互间的竞争作用。实验结果表明胎肝造血干细胞在成年骨髓中的植入率比较同样条件下的成年骨髓造血干细胞低,但胎肝造血干细胞比较成年骨髓造血干细胞具有更强的自我更新或增殖能力。在同种胎肝造血干细胞移植中,为了降低同种移植抗力,提高移植的胎肝造血干细胞在受体中的耐受性,移植前对受体作适当的免疫抑制处理是必要的。因此,克服个体发育屏障和移植免疫屏障是提高同种胎肝造血干细胞移植效果中两个重要的研究课题。     

罗汉果和熟地增加小鼠造血干细胞的数量和功能

目的：罗汉果和熟地具有增强机体免疫力,延年益寿的作用。本文研究罗汉果和熟地对造血干细胞的影响。方法各组小鼠连续喂养罗汉果或熟地3个月,流式细胞仪测量小鼠的外周血、脾脏和骨髓中免疫细胞和造血干细胞的变化;小鼠用半致死剂量的放射线照射后,连续喂养罗汉果或熟地1个月后,流式细胞仪测量罗汉果或熟地对于免疫细胞和造血干细胞损伤修复的作用。结果分析检测结果发现,与对照组相比,长期喂养罗汉果或熟地的小鼠骨髓和外周血中B细胞的比例降低,粒细胞的比例增加,T细胞没有明显变化;骨髓中造血干细胞的数量增加,尤其是长期造血干细胞数量增加显著。半致死剂量的放射线照射后,罗汉果或熟地喂养1个月,小鼠的粒细胞和T细胞都有明显的改善,造血干细胞的数量明显增加。结论罗汉果或熟地长期服用会增加小鼠造血干细胞的数量和功能,促进了辐射所致的骨髓抑制小鼠的造血干细胞的恢复。     

小鼠自然杀伤细胞在病毒感染应答中受调节性T细胞的调节和许可

自然杀伤细胞（NK细胞）根据其结合自身主要组织相容性复合物（MHC）限制的能力可具有不同的功能。该研究在体内确认了同源造血干细胞移植（HSCT ）或调节性T细胞（Treg细胞）缺失后,NK细胞亚群对抗小鼠巨细胞病毒反应许可的不同生理效应。造血干细胞移植后,许可NK细胞缺失导致在感染早期感染的靶器官病毒载量远远大于未缺失和缺失未许可NK细胞的小鼠。在未缺失许可NK细胞的小鼠接受造血干细胞移植和Treg细胞删除并感染后,C型凝集素样活化受体Ly49H阳性的许可NK细胞优先扩展,并能增加γ干扰素（IFN-γ）生产。与移植总NK细胞群或未许可NK细胞群相比,许可NK细胞亚群移植到免疫缺陷宿主对小鼠巨细胞病毒感染具有更高的抵抗力。在非造血干细胞移植小鼠中,只有同时Treg细胞缺失或中和转化生长因子β（TGF-β）才能检测到许可NK细胞的效应。表明该许可NK细胞是对巨细胞病毒感染初始和快速响应的NK细胞,且由Treg细胞和TGF-β调节。     

小鼠脐血移植模型研究进展

脐血中含有丰富的原始造血干细胞,由于免疫细胞发育不成熟,抗原表达和功能活性低下,移植物抗宿主疾病发生率低。脐血来源丰富、不易受病毒及残留肿瘤细胞的污染,越来越多地作为造血干细胞的优质来源在临床上广泛应用。通过建立小鼠脐血移植模型,对临床多种疾病尤其是对恶性血液病的造血干细胞移植研究提供有效途径,可以对脐血的生物学功能、植入过程、移植疗效做进一步研究,不断优化的小鼠移植模型对我们解读人类疾病的发病机理、疾病进程起到推动作用,本文将从小鼠种属的选择、移植模型的构建及脐血移植模型新进展等方面对进行综述。     

昆虫造血作用和造血干细胞研究进展

昆虫血细胞（insect hemocyte）在昆虫代谢、 发育变态以及先天免疫等方面承担着重要的作用。昆虫只有先天免疫系统, 血细胞所行使的免疫功能对于昆虫对抗外源病菌尤为重要。本文主要介绍了昆虫血细胞类型、 造血作用、 造血干细胞及造血相关因子的相关研究。通过特殊染色和形态学观察, 果蝇Drosophila血细胞主要由3类细胞组成, 而鳞翅目等大部分昆虫血细胞由5类细胞组成。昆虫血细胞主要存在于循环血液环境及造血器官内, 而在这两个系统中都存在有进行复制的血细胞, 这为研究昆虫造血干细胞特性和其定位提供了一个很好的系统。果蝇血细胞祖细胞来自于胚胎中胚层细胞, 然后再分化为各种血细胞, 这一系列分化过程由造血因子所调控。     

同种异体宫内移植小鼠嵌合模型的建立

干细胞宫内移植是一种很有前途的产前治疗方式。为深入研究干细胞移植后的细胞行为,采用宫内移植的方法建立同种异体的嵌合小鼠模型。将雄鼠骨髓单核细胞宫内注射到胎鼠腹腔,在受体鼠出生后检测雌性受体鼠外周血细胞。应用PCR检测外周血是否存在雄性鼠的DNA,并采用定量PCR技术确定其嵌合量;同时用荧光原位杂交（FISH）技术直观观察外周血中雄性来源的细胞。结果表明：共获得4只阳性外周血嵌合小鼠,其中3只稳定嵌合达到6个月以上。应用宫内移植成功建立了外周血中存在异源细胞的小鼠嵌合模型。     

异基因造血干细胞移植中的树突状细胞

树突状细胞(DC)是目前已知的启动免疫反应最强大的抗原呈递细胞(APC),也是惟一能激活初始T细胞的APC。近年来,DC在移植免疫中的作用已成为研究的焦点。简要综述了DC在异基因造血干细胞移植中的研究进展。     

G-CSF诱导移植物抗白血病效应治疗异基因造血干细胞移植后复发白血病的研究

目的观察应用G-CSF诱导移植物抗白血病效应治疗异基因造血干细胞移植后复发白血病的疗效。方法对2011年7月至2013年2月该科异基因造血干细胞移植后40例复发的白血病患者,进行输注粒细胞集落刺激因子动员后供者外周血单个核细胞治疗。其中-CR3髓系有4例,细胞混合有6例,-CR2淋巴细胞有10例,-CR2髓系有16例,髓系加速期慢性有4例。在异基因造血干细胞移植后,半年内,40例患者均复发,予G-CSF动员后,供者外周血单个核细胞输注,每次输注细胞量逐级增加,每次输注间隔4周。结果 24例患者再次缓解完全,未缓解的16例。患者输注后,6例发生急性移植物抗宿主病Ⅰ~Ⅱ度,24例发生慢性移植物抗宿主病,5例未发生并发症。结论 G-CSF诱导移植物抗白血病效应治疗后,白血病复发有较好的疗效,不良反应小,值得临床推广。     

全身放疗在造血干细胞移植中的研究进展

全身照射疗法(TBI)是一种姑息治疗,该方法已经成功地应用在慢性淋巴细胞白血病或滤泡性淋巴瘤等无干细胞支持的放射敏感的疾病中。目前,在血液系统恶性疾病中造血干细胞移植是较为有效的治疗手段之一,其中全身放射治疗与大剂量化疗是造血干细胞移植疗法的经典预处理方案。TBI方法主要应用在造血移植环境中,具有较强的周期非特异性抗肿瘤效应和免疫抑制效能。TBI给予干细胞移植病人超过正常骨髓的辐射耐受量,通过重建病人的造血和免疫来达到治疗目的。     

脾结节生成细胞群的不均一性研究

应用单个脾结节移植和性染色体追踪方法证明正常F_1小鼠骨髓脾结节生成细胞(CFCs)的造血重建能力是很不均一的,连续注射羟基脲(HU)可使具有造血重建能力的脾结节生成细胞的比例显著提高。由此提出,小鼠造血组织中同时存在着具有多向性造血干细胞特性的脾结节生成细胞(Ps-CFUs)和具有多向性造血祖细胞特性的脾结节生成细胞(Pg-CFUs)。注射HU可使Pg-CFUs被杀灭,Ps-CFUs 相对比例增加;或者由于大量 CFU-S被杀灭,脾结节生成细胞的前体细胞(Pre-CFUs)加速向 Ps-CFUs分化。因此血细胞的生成过程中可能经历了以下细胞分化和成熟的阶段 Pre-CFUs→Ps-CFUs→Pg-GFUs→各系祖细胞→各系血细胞。