褐藻胶寡糖制备的研究进展

褐藻胶寡糖(alginate oligosaccharides,AOS)是褐藻胶降解而形成的一种功能性寡糖,具有广泛的生物活性,如促进植物生长、提高植物抗逆性、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等。褐藻胶寡糖的制备方法主要分为:化学法、物理法和酶解法。不同的方法制备出的褐藻胶寡糖结构亦有所不同。介绍了化学法、物理法和酶解法等各种褐藻胶寡糖制备方法的研究现状、存在的问题及发展趋势。     

高压液相色谱法分离寡糖的对氨基苯甲酸乙脂衍生物

寡糖的对氨基苯甲酸乙酯衍生物,以及它的全乙酰化产物具有紫外吸收基团适合HPLC分离,研究了氨基柱和十八烷基柱对寡糖混合物的分离性能及检测灵敏度。从免疫球蛋白M中分离到的寡糖组分,衍生后用HPLC进一步分离提纯出另一些含量较少的糖链。     

微生物发酵-膜分离法制备褐藻胶寡糖及其产物分析

比较褐藻胶裂解酶产生菌Alteromonassp .在摇瓶和发酵罐培养过程中生物量、褐藻胶寡糖含量以及褐藻胶裂解酶活性的变化 ,根据其变化确立了通过微生物发酵 膜分离技术结合制备褐藻胶寡糖的条件 ,并对寡糖进行凝胶过滤色谱和薄层色谱分析。用组成为每升含酵母粉 5g、蛋白胨 10g、FeSO4 0 1g、褐藻酸钠 12g、NaCl 1 5g ,pH为7 5的培养基 ,在 2 8℃培养褐藻胶裂解酶产生菌 ,结果表明 ,发酵罐培养 30h ,发酵液寡糖含量达到最大。发酵液通过超滤 纳滤两级膜分离 ,得到褐藻胶寡糖 ,寡糖的回收率和脱盐率分别为 94 0 %和 93 3%。通过凝胶柱分离和TLC分析 ,得到 5个褐藻胶寡糖组分。     

生物技术制备植物性来源的功能寡糖

功能性寡糖是近年来国内外竞相开发的热点之一 ,其中植物性来源的多聚糖经生物技术处理制备的功能寡糖以其原料来源广泛、安全及较好的生理功能而倍受青睐。本文简要介绍了国内外寡糖产品的开发研究现状和发展趋势 ,着重介绍了两个由植物半纤维素类原料制备的功能寡糖———木寡糖、半乳甘露寡糖的研究进展     

寡糖色谱分离研究进展

糖类化合物一直被认为是生物结构的重要组成部分和能量来源。近年来的研究发现,糖类化合物特别是寡糖具有细胞识别等多种生物功能,因此引起了人们日益广泛的关注。寡糖的色谱分离是糖生物学中重要的研究领域之一,小型化和高通量制备可能会成为寡糖色谱分离的发展方向。对寡糖色谱分离方面的最新进展进行综述。     

两步法硫酸水解热凝胶生产β-1,3-葡寡糖

对硫酸水解热凝胶制备β-1,3-葡寡糖进行了研究。首先建立了葡寡糖的分析方法,采用半制备HPLC分离热凝胶水解液得到β-1,3-葡寡糖,利用ESI-MS和TLC技术对分离组分进行了成分鉴定。考察了反应温度和反应时间对热凝胶寡糖收率的影响,结果表明,两步法硫酸水解获取低聚合度β-1,3-热凝胶寡糖(DP 2~6)的较优水解条件为:1.0 mol/L硫酸于70℃水解1%热凝胶6h,回收水解残留物后于80℃继续水解3 h;对于较高聚合度寡糖(DP 7~10)两步水解时间分别为4 h和1 h较为合适。     

酶法制备壳寡糖及其生物学功能

用正交试验方法考察温度、酶浓度、pH对蜗牛酶降解壳聚糖的影响,筛选蜗牛酶降解壳聚糖的最佳反应条件,采用SDS-PAGE方法分析降解产物,制备具有生物学功能的壳寡糖。用不同浓度的壳寡糖处理人肝癌HepG2细胞,观察细胞形态学变化,MTT法检测壳寡糖对其增殖的影响,琼脂糖凝胶电泳检测DNA变化,流式细胞术检测凋亡率(AR)。结果表明:蜗牛酶降解壳聚糖的产物主要是聚合度为4以上的寡糖,更多的接近壳六糖。最佳反应条件为pH 4.0、温度40℃、酶和底物质量比为4∶50;壳寡糖质量浓度在2~4 mg/mL时,对HepG2细胞增殖有抑制效应,细胞经壳寡糖处理48 h后,开始空泡化,DNA出现明显的凋亡条带,AR明显高于对照组。在最佳反应条件下蜗牛酶能较好地降解壳聚糖,制备的壳寡糖在一定浓度范围内能通过诱导HepG2细胞发生凋亡而抑制其增殖,其作用呈浓度依赖性。     

几丁寡糖,壳寡糖的应用与开发

几丁寡糖、壳寡糖的应用与开发大连理工大学化工学院１１６０１２黄丽萍刘宗明甲壳质是Ｎ—乙酰基—Ｄ—葡萄糖胺以β—１,４键结合而成的多糖,它是作为蟹、虾等甲壳类、甲虫等的外骨骼及蘑菇等菌类的细胞壁构成成分,广泛存在于自然界的天然高分子物质。它的脱Ｎ—乙酰...     

A PROCEDURE FOR THE PURIFICATION OF BETA-LACTOGLOBULIN FROM BOVINE MILK USING GEL FILTRATION CHROMATOGRAPHY AT LOW pH

A simple and rapid procedure for the purification of beta-lactoglobulin (β-LG) from bovine milk is described. The procedure exploits the major difference in molecular mass of β-LG and other whey components and the existence of the former in monomeric form at acidic pH. Gel filtration of whey was carried out using a Bio-Gel P10 column at pH 3.0. Residual caseins and other milk proteins were excluded from the gel and β-LG and alpha-lactalbumin (α-LA) emerged as two fully resolved peaks. Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) suggested that β-LG was purified to apparent homogeneity, while absorption, fluorescence, and circular dichroism spectroscopy indicated the native-like conformation of the protein. Western blot analysis revealed that the antibodies raised against the purified β-LG in rabbits also readily react with the commercial bovine protein. This procedure requires only 4–5 hr for the purification of about 10 mg of β-LG from a single run while using a small column (2.3 cm × 83 cm) of Bio-Gel P10 and has the potential for scaling up.     

吸附层析法制备低聚原花青素

以AB 8大孔吸附树脂对葡萄籽原花青素粗提物进行了分级分离 ,所得乙酸乙酯洗脱产物总酚含量为 91% ,经高效液相色谱检测 ,酚类物质中单体约 2 8% ,低聚原花青素占 6 4 % ,多聚体仅为 8%。     

从辣椒精中分离辣味物质方法的研究

用硅胶柱层析方法从含辣味物质2．4％的黑红色辣椒精中分离得到含辣味物质22．2％的淡褐色辣椒精,从淡褐色辣椒精中分离得到辣味物质的白色晶体。     

应用树脂吸附分离制取茶多酚

从茶中分离制取天然抗氧化剂茶多酚,现行工业化生产多采用有机溶剂萃取和金属盐沉淀法,这两种方法,工艺繁琐,有机溶剂、金属盐或酸、碱损耗大,严重污染环境,提取率低、得率低、成本高、销售困难。笔者采用大孔吸附树脂层析法从茶中分离,纯化茶多酚,制得低含咖啡碱的茶多酚粗制品,得率为１８％～２１％,纯度≥７０％,ＥＧＣＧ＞２０％,咖啡碱＜２％。吸附树脂具有表面积大,吸附量大,吸附与洗脱高峰集中,不用或少用除乙醇外的有机溶剂,洗脱与再生容易,成本低,得率高等优点,大有开发前景。     

脉冲电泳用于确定念珠菌染色体数目和大小的研究

念珠菌(Candida),特别是白念珠菌是临床上最常见的机会致病真菌。欲了解它们的生物学本质及致病的分子机制,首先应清楚其基因组的基本结构。用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)技术分离了8种念珠菌共187株的染色体DNA,获得各种菌染色体数目和大小的数据。这些数据为深入研究致病酵母的分子生物学特征打下基础,同时也可作为种间基因型分类的可靠依据。     

利用气相色谱法同时测定土壤中反硝化作用和固氮作用的强度

土壤中反硝化菌和固氮菌的作用强度与其产生的N_2O及C_2H_2还原成C_2H_4的量有一定关系。本文报导了为测定土壤中微量的N_2O、C_2H_2和C_2H_2数量,所建立的双柱双检测器一次进样同时测定的二维气相色谱法。此法能简单、快速、准确地反映出土壤中反硝化菌和固氮菌的作用强度。文中对仪器装置、色谱条件、样品处理、干扰物的消除、最小检测浓度、重复性、方法应用等进行了报导。     

重楼属植物甾体皂甙的高效液相色谱分析

应用高效液相层析技术,对重楼属十八个种植物的甾体皂甙进行了定性、定量分析。植物用甲醇提取,抽出物经DIAION柱,以90％甲醇洗出总甙。在HPLC上,用ODS柱先将总甙以用醇:水(9:1)洗脱分为三馏段,每馏再在ODS柱或Rp-8柱上以甲醇:水(8:2;7:3.5)洗脱,使各个皂甙成分完全分离。被分离的每个色谱峰与已知重楼皂甙的保留时间进行比较并配合HPLC的加入法,TLC分析及用HPLC制备少量样品做MS测定来加以定性鉴定。定量采用内标及校正曲线法。     

高效液相色谱法测定大黄及含大黄中成药中番泻甙A的含量

本文报道了用高效液相色谱法分离测定大黄及其制剂中番泻甙A的含量。色谱住为Hibar Cica-Merck NH_2柱(4.6×250mm);流动相:乙腈-水-36％乙酸(65:35:4),340nm检测,外标定量。结果表明,建立的方法完全适用于大黄及含大黄制剂中番泻甙A的含量测定。