荔枝果皮多酚氧化酶的研究

本文报告在荔枝果皮中有多酚氧化酶存在,但荔枝果皮提取液在经煮沸后仍有部分的氧化对苯二酚的活性。在 pH4.0—6.8范围内,酶活性以在 pH6.8中为最强。此酶对邻苯二酚及对苯二酚均起氧化作用,但不能氧化间苯二酚及一元酚(对-甲酚和酪氨酸)。故从基质特异性来看,荔枝果皮的多酚氧化酶与漆酶相类似。抑制剂如硫脲及二乙胺基二硫代甲酸钠对荔枝果皮多酚氧化酶具有特殊的作用。硫脲对白蜡子荔枝果皮多酚氧化酶只呈暂时的抑制作用,以后抑制作用逐渐消失并转为促进作用,抑制时间及促进程度随浓度而异。硫脲对淮枝荔枝果皮多酚氧化酶则不呈抑制而只呈促进作用。低浓度(0.2mu)的二乙胺基二硫代甲酸钠对荔枝果皮多酚氧化酶呈抑制作用,但高浓度(2,4mM)则有强烈的促进作用。     

防止速冻荔枝果皮变褐的研究

荔枝(Litchi chinensis Sonn.)果实采收后容易变褐变质。三年来,我们研究了荔枝果皮的多酚氧化酶与变褐的关系以及防止速冻荔枝果皮变褐的各种枝术措施。证明:荔枝果皮中具有氧化邻苯二酚的多酚氧化酶,在果皮褐变过程中该酶起着重要的作用,采用热处理及化学药物处理能抑制多酚氧化酶活性,达到防止速冻荔枝果皮变褐的目的。     

荔枝(Litchi chinensis)果皮多酚氧化酶的部分纯化及性质

催化荔枝果皮褐变反应的多酚氧化酶,自新鲜果皮提取后,经丙酮沉淀和硫酸铵分级,酶活性增高8.2倍。该酶催化氧化邻位二元酚和三元酚的化合物,但不氧化一元酚。在40℃以下,该酶在1小时内活性保持不变,55℃以上,活性迅速下降。酶活性的最适温度为35℃。 以焦棓酚、D,L-3,4-二羟基苯丙氨酸或邻苯二酚作底物时,其Km值分别为1.85、2.5和5.0mM;Vmax值分别为41.62×10~3、0.85×10~3和0.24×10~3酶单位/分钟/毫克蛋白。 该酶强烈地受亚硫酸氢钠和二乙基二硫代氨基甲酸钠所抑制。二乙基二硫代氨基甲酸钠是荔枝果皮多酚氧化酶的非竞争性抑制剂,其Ki值为0.05mM。     

荔枝果皮多酚氧化酶酶促褐变的研究

从荔枝果皮分别提取多酚氧化酶及其天然底物,两者相作用,形成褐色产物,酶促褐变是荔枝果皮变褐的原因。 从荔枝果皮提取的酚类物质中分离出多酚氧化酶的天然底物。此底物的紫外吸收光谱分别在215和280 nm有一强的和一弱的吸收峰,它的红外吸收光谱在3190、1600、1500 cm~(-1)有很强的吸收峰。     

荔枝果实在发育和采后的乙烯产生及其生理作用

荔枝果实在发育与成熟过程中呼吸作用和乙烯的产生不断下降。 成熟荔枝果皮的乙烯产生量约为果肉和种子的86倍。外源乙烯处理能提高荔枝果皮多酚氧化酶和过氧化物酶活性。 在5℃下,荔枝果实的呼吸和乙烯产生受到强烈抑制,只有常温(25℃)下的1/10或更低,但进入常温后则很快上升,果实内部乙烯最高可达17.6 ppm。     

炭疽病菌侵染对荔枝果实生理生化变化的影响

本研究测定了荔枝果实人工接种炭疽病菌后呼吸速率、乙烯释放量的变化和果皮氧化、过氧化作用以及与酚类代谢有关的几种酶活性的变化。结果表明,接种炭疽病菌的荔枝果实呼吸速率和乙烯释放量显著增高,果皮活性氧(O₂^·)产生速率和丙二醛(MDA)含量显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低,过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性显著增高。说明炭疽病菌的侵染可导致荔枝果实呼吸速率和乙烯释放量的增高,加速荔枝果皮氧化和过氧化进程,并诱导荔枝果皮PPO、POD、PAL活性增高,是加速采收后荔枝果实衰老、褐变、腐烂的一个重要原因。     

不同条件下荔枝多酚氧化酶活性的分析(英)

经硫酸铵盐析和ＳｅｐｈａｄｅｓＧ－１００,Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＰｈｅｎｙｌＳｅｐｈａｒｏｓｅ柱层析分别纯化后,得到了电泳均一的荔枝多酚氧化酶,荔枝多酚氧化酶在ＳＤＳ和ＣＡＴＢ存在下测得的酶活性略有降低,但在ＴｒｉｔｏｎＸ－１００下活性有所增加,丁酸等短链的脂肪酸对酶活性起抑制作用,而亚油酸等长链的不饱和脂肪酸则起促进作用,另外,荔枝多酚氧化酶活性还明显受ＦｅＳＯ４和ＳｎＣｌ２所抑制,但能补Ｃａ     

臭氧水对荔枝采后若干生理生化指标的影响

用不同浓度臭氧水对荔枝果实进行采后处理,测定其花色素苷、类黄酮、可滴定酸和糖含量以及多酚氧化酶和过氧化物酶活性。结果显示,处理后荔枝果皮中花色素苷、类黄酮含量下降速度低于对照,PPO活性低于对照,POD活性高于对照,而果汁中可滴定酸及糖含量与对照相比无显著变化。表明一定浓度臭氧水对荔枝果实保色护色有一定效果,并有防褐变作用。     

裂果易发性不同的荔枝品种果皮中细胞壁代谢酶活性的比较

“糯米糍”荔枝裂果率极显著高于“淮枝”,前者果皮中的果胶酶、纤维素酶和果胶甲酯酶的活性高于后者,其中以果胶酶活性差异最明显,其次是纤维素酶,果胶甲酯酶差异最小;“糯米糍”细胞壁结合型的过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PP0)活性明显高于“淮枝”,而水溶性POD和PP0的活性则两个品种间无明显差异。据此认为,果皮细胞壁水解酶活性以及细胞壁结合型的POD和PPO的活性高的荔枝品种,其裂果率也高。文章对细胞壁代谢相关酶类在果皮抗裂性形成中的作用进行了讨论。     

荔枝果皮过氧化酶的纯化与性质研究(英)

荔枝果皮采后褐变是影响这一重要热带水果经济价值的主要问题,酚类物质的酶促氧化一直被认为是造成植物组织褐变的关键因素,其中多酚氧化酶被研究得最多.过氧化物酶在植物体中分布很广,能够氧化多种底物,在荔枝果皮中的含量也很高.非结合性过氧化物酶已经被证明在果实的采后成熟与老化过程中参与多种过程.在这项研究中,用磷酸缓冲液提取荔枝果皮的非结合性过氧化物酶,并通过硫酸铵沉淀,DEAE Sephadex A-50离子交换柱层析以及Sephadex G-100凝胶过滤进行纯化.对得到的酶溶液进行了酶学性质的研究,发现荔枝果皮过氧化物酶具有较高的热稳定性和高的最适反应pH值（6.8）,能够氧化许多底物尤其是单酚和各种多酚类物质,反应抑制剂专一性与其他植物来源的过氧化物酶略有不同.显示了过氧化物酶参与荔枝果皮褐变过程的可能性,并为提高荔枝采后贮藏性提供了新的思路.     

荔枝果皮过氧化酶的纯化与性质研究

荔枝果皮采后褐变是影响这一重要热带水果经济价值的主要问题,酚类物质的酶促氧化一直被认为是造成植物组织褐变的关键因素,其中多酚氧化酶被研究得最多.过氧化物酶在植物体中分布很广,能够氧化多种底物,在荔枝果皮中的含量也很高.非结合性过氧化物酶已经被证明在果实的采后成熟与老化过程中参与多种过程.在这项研究中,用磷酸缓冲液提取荔枝果皮的非结合性过氧化物酶,并通过硫酸铵沉淀,DEAFSephadex A-50离子交换柱层析以及Sephadex G-100凝胶过滤进行纯化.对得到的酶溶液进行了酶学性质的研究,发现荔枝果皮过氧化物酶具有较高的热稳定性和高的最适反应pH值(6.8),能够氧化许多底物尤其是单酚和各种多酚类物质,反应抑制剂专一性与其他植物来源的过氧化物酶略有不同显示了过氧化物酶参与荔枝果皮褐变过程的可能性,并为提高荔枝采后贮藏性提供了新的思路.     

烟草多酚氧化酶的分离与固定化技术研究

多酚氧化酶属于氧化还原酶类,国际酶学委员会推荐名为儿茶酚氧化酶（ＥＣ１．１０．３．１ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅ,ＰＰＯ）．该酶与食品工业、三废处理、医药卫生关系较为密切,因而研究较多．如近年来鸭梨［１］、蘑菇［２］、香蕉果肉组织［３］、荔枝果皮［４］等等中的多酚氧化酶均有研究报道．目前研究用固定化多酚氧化酶检测废水中酚类物质含量,进行环境检测;及其从工业废水中除去酚类,达到治理三废的目的．Ｍｏｓｂａｃｎ［５］（１９７６）研制成多酚氧化酶固定化酶柱,与氧电极检测器组合联用,可检测水中２０…     

棘托竹荪子实体多酚氧化酶特性及其抑制剂的研究

以邻苯二酚为底物采用分光光度法对棘托竹荪(Dictyophora echinovolvata)子实体多酚氧化酶的酶学特性和不同抑制剂对多酚氧化酶活性的影响进行了研究。结果表明,棘托竹荪子实体多酚氧化酶的最适反应pH为8.0,最适反应温度为45℃,高温短时处理能显著抑制多酚氧化酶的活性;L-半胱氨酸(L-Cys)、氯化钠(NaCl)、维生素C(Vc)和柠檬酸(C6H8O7)等对多酚氧化酶均有抑制作用。经正交实验筛选的抑制剂组合(5.0 g/L L-Cys、20.0 g/L NaCl、1.5 g/L Vc、10.0 g/L C6H8O7)可以完全抑制多酚氧化酶的活性。     

香蕉芒果果皮中酶活性与炭疽病菌潜伏侵染的关系

在树上正生长发育的香蕉果实,随着果实长大,果皮中过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性不断升高。采后的香蕉和芒果果实的果皮中,POD和PPO活性变化与呼吸代谢相关。苯丙氨酸解氨酶(PAL)主要分布在果皮中,并随着果实成熟度的提高,其活性呈极显著下降趋势。感病果实的果皮中三种酶活性均比健康果皮高。说明果皮中三种酶活性的变化与炭疽菌的潜伏侵染有关。     

成熟和褐变荔枝果实呼吸作用和脂氧合酶活性

荔枝果实完全成熟和果皮变鮮红时,呼吸速率降低,仅相当于果皮带绿时的39.4％。此时果皮和果肉的脂氧合酶活性亦明显降低,分别相当于后者的60.2％和49.1％。成熟荔枝果实果皮呼吸作用对KCN抑制敏感。2mM KCN抑制果皮总呼吸的91.8％,而仅抑制果肉的56.9％。荔枝果皮呼吸的电了传递主要是通过细胞色素氧化酶途径,而果肉則可能一半是通过其它氧化酶途径。2mKCN和1.5mM SHAM抑制成熟果皮总呼吸97.9％,为SHAM抑制的交替途径呼吸占总呼吸5.28％。相同浓度KCN和SHAM抑制褐变果皮总呼吸79.7％,则SHAM抑制的交替途径呼吸占27.1％。果实褐变时,果成交替途径呼吸比例增高。这一变化可能促进H_2O_2积累、乙烯产生和果皮褐变深化。     

槐尺蠖多酚氧化酶的纯化及酶学特征

经40%饱和度硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-100凝胶过滤等步骤,将槐尺蠖Semiothisa cinerearia Bremer et Grey 多酚氧化酶纯化,纯化倍数为6.96倍。该酶对焦性没食子酸,邻苯二酚和L多巴的Km值分别为0.23 mmol/L, 0.48 mmol/L和0.49 mmol/L。多酚氧化酶在pH 7.0,37℃时活性最高,并在40℃以上条件下,随着保温时间的延长酶活力下降。用槲皮苷和硫脲作抑制剂对该酶活性的抑制结果表明,这两种抑制剂分别属于竞争性和非竞争性抑制剂。     

不同浓度氧贮藏荔枝的几种酶活性变化

在空气和高浓度氧下贮藏荔枝1至2天,果皮和果肉脂氧合酶活性增高;而在低浓度氧下则无此酶活增高。3天后酶活降低,5天后果实酶活很低。三种浓度氧下3天,果皮过氧化物酶活增至最大值,随后则略有降低。在高浓度氧和空气下,果皮多酚氧化酶活性增高,酶活性较低浓度氧的高。在高浓度氧下,黄嘌呤氧化酶活性鞍空气和低浓度氧下的高。几种酶活性增高,可能导致氧化和过氧化作用加剧和引起果皮褐变。     

不同浓度氧贮藏荔枝的几种酶活性变化

在空气和高浓度氧下贮藏荔枝1至2天,果皮和果肉脂氧合酶活性增高;而在低浓度氧下则无此酶活增高。3天后酶活降低,5天后果实酶活很低。三种浓度氧下3天,果皮过氧化物酶活增至最大值,随后则略有降低。在高浓度氧和空气下,果皮多酚氧化酶活性增高,酶活性较低浓度氧的高。在高浓度氧下,黄嘌呤氧化酶活性鞍空气和低浓度氧下的高。几种酶活性增高,可能导致氧化和过氧化作用加剧和引起果皮褐变。     

PRO-LONG涂膜对采后贮藏荔枝果实色泽和酶活性变化的影响

本文以荔枝品种“槐枝”为材料,以1．5％和2．5％Pro-long涂膜处理果实,研究Pro-long涂膜对果后贮于4℃的荔枝果皮色泽变化和有关酶活性的变化。对照和处理的HunterL值和b值均随贮藏时间的延长而降低,处理的比对照的下降慢。采后贮藏开始21d内,对照和处理的HuntCra值变化很小,保持相对稳定,之后的贮藏时间内有较显著的下降,说明贮藏初期果实的红色特性变化较少,之后变化很明显,这与果皮花色素苷、类黄酮、总酚的变化是相对应的。在贮藏后期,处理的HuntCra值下降明显较对照慢。Hunter值的变化与在贮藏过程中果实外观逐渐变成暗红和揭变以及在果实的来后根变中起着重要作用的多酚氧化酶和部分地涉及褐变过程的过氧化物酶的变化相对应。处理的过氧化物酶活性增加较对照慢,而且,与对照比较,多酚氧化酶的峰值稍稍延迟了。未发现l‘5％和2．5％处理间有明显差别。因此,Pro-long涂胶对荔枝的应用可以部分地降低多酚氧化酶和过氧化物酶,影响果皮花色素苷的降解、类黄酮和总酚的变化,延迟了褐变过程的发生。     

彩绒革盖菌CV—8漆酶和多酚氧化酶活性

彩绒革盖菌（Ｃｏｒｉｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）是一种具有木质素降解能力的白腐菌,其降解木素的能力主要取决于木质素过氧化物酶、漆酶、多酚氧化酶和愈创木酚氧化酶的活力高低,所以研究其活力和分泌情况对木质素的生物降解、生物制浆和环境保护具有十分重要的意义。国外已有彩绒革盖菌漆酶的报道［１,２］,但主要集中在漆酶对木质素作用后所造成的木质素结构上的变化,有关漆酶和多酚氧化酶的活性分析报道较少［３］;国内有关的研究报道更少［４,５］,至今未见彩绒革盖菌漆酶和多酚氧化酶的研究报道。本文主要测定了彩绒革盖菌…