食品包装用塑料中八种邻苯二甲酸酯的检测方法

反相液相色谱串联质谱(LC-MS-MS)分析方法,采用振荡萃取,LC-MS-MS,MRM多反应监测模式,对食品包装用塑料中(国内外作为环境污染物优先控制的)八种邻苯二甲酸酯:邻苯二甲酸二异壬酯(D INP);邻苯二甲酸(2-乙基已基)酯(DEHP);邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP);邻苯二甲酸二异癸酯(D IDP);邻苯二甲酸丁基苄酯(BBP);邻苯二甲酸二正丁酯(DBP);邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)同时进行检测,线性相关较好,方法回收率在80~120%之间,最低检出限为0.01 mg.kg-1.     

常见“食品非法添加物”的科学解读(二)

作恶多端的环境类素——塑化剂在日常及工业上被广泛使用的塑化剂是邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)。     

地膜使用年限对遵义市烟田土壤和烟叶邻苯二甲酸酯累积的影响

研究地膜使用年限对土壤和烟叶邻苯二甲酸酯(PAEs)积累的影响,以明确地膜持续使用条件下PAEs的土壤污染分布特征及在烟叶中的富集状况.在遵义市连阡村和沙湾村采集了不同覆膜年限的烟田土壤及相应的烟叶,采用气相色谱仪质谱联用技术(GC-MS),对土壤-烟叶中6种优先控制PAEs含量进行了测定.结果表明: 所有土壤和烟叶样品中6种邻苯二甲酸酯化合物累计(∑PAEs)分别为(2.66±0.60)和(3.58±0.64) mg·kg^-1,其中,邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)含量最高,邻苯二甲酸正二丁酯(DBP)次之,二者之和分别占土壤和烟叶∑PAEs的92.7%和88.9%.DEHP、DBP、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)和邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)检出率均为100.0%,邻苯二甲酸二甲酯(DMP)的检出率略低,邻苯二甲酸正二辛酯(DnOP)检出率最低.随着地膜使用年限的增加,土壤和烟叶中PAEs含量显著增加,且在地膜使用的前1~ 8年增加更为明显,后期趋于平缓.土壤和烟叶中的PAEs含量与覆膜年限呈显著正相关关系,覆膜年限的增加会显著促进土壤和烟叶中PAEs的积累.烟叶与土壤之间∑PAEs的累积量相关性不显著.     

邻苯二甲酸酯类(PAEs)对三角鲂的急性毒性研究

为了研究邻苯二甲酸酯对水生态系统的危害,以三角鲂(Magalobrame Tarminalis)幼鱼为研究对象,探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二-2-乙基己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)4种PAEs化合物对其急性毒性效应。结果表明:以上4种化合物在暴露24 h、48 h和96 h的半致死质量浓度(LC50)分别为2.75、2.41和2.08 mg/L;5.29、4.12和3.29 mg/L;6.56、6.15和5.41 mg/L和6.98、6.84和6.60mg/L。其安全浓度(SC)分别为0.55、0.79、1.62和2.00 mg/L。三角鲂幼鱼对4种PAEs化合物的中毒症状相似,但4种物质的致死浓度区间存在差别,4种物质对三角鲂幼鱼的毒性大小顺序为DBP>DMP>DEHP>DEP,三角鲂幼鱼对4种PAEs化合物均表现出显著的时间效应和剂量效应,呈正相关。结果表明,4种物质在试验浓度下对三角鲂幼鱼产生了明显的毒性作用,对水生生物存在危害,应对其水生态风险加以关注。为制定4种PAEs水质标准及对其进行生态风险评价提供科学依据。     

烟草幼苗根系分泌自毒物质种类及PAEs对根系抗氧化性能的影响

采用GC-MS技术鉴定水培烟草Burley及K326在幼苗期不同生长阶段的根系分泌物;并用不同浓度邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二异辛酯(DIOP)溶液浇灌盆栽烟草幼苗,研究其根系抗氧化性能变化。结果如下:(1)Burley根系分泌物主要有3类化合物,其中自毒物质邻苯二甲酸酯(PAEs)在二叶龄期、四叶龄期、六叶龄期的相对含量分别为7.6%、0.3%、未检出;而K326根系分泌物主要有9类化合物,PAEs在二叶龄期、四叶龄期、六叶龄期的相对含量分别为35.6%、51.3%、2.2%。(2)浓度高于0.1 mmol/L的PAEs使根中超氧阴离子自由基产生的速率显著(P0.05)增加;随着DIOP及DBP浓度的增加,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性增加,在0.5 mmol/L时达到最大,然后随着处理浓度的增加而下降。丙二醛的浓度随着这两种PAEs处理浓度的增加而增大。结果表明:烟草根系分泌的自毒物质PAEs达到0.5 mmol/L时,能降低根系的抗氧化性能,造成根尖细胞膜系统的氧化损伤,引起根吸收功能等一系列生理生化变化,并最终表现出自毒作用。     

广东省典型区域农业土壤中邻苯二甲酸酯含量的分布特征

采用气相色谱方法,对广东省典型区域农业表层土壤(0～20cm)样品中的6种邻苯二甲酸酯(PAEs)进行了测定.结果表明:6种PAEs化合物的总含量(∑PAEs)为nd(未检出)～25.99mg.kg-1,其中92.8%的样品分布在≤1mg.kg-1的范围;各种土地利用类型中∑PAEs的顺序依次为水田>香蕉地>菜地>甘蔗地>果园地;不同地区土壤中∑PAEs的顺序依次为东莞市>汕头市>佛山市顺德区>湛江市>中山市>珠海市>惠州市.邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(DEHP)的检出率最高(85.1%),邻苯二甲酸二正丁酯(DnBP)含量最高(nd～17.51mg.kg-1).与美国土壤PAEs控制标准相比,除邻苯二甲酸二正辛酯(DnOP)外,其余5种PAEs化合物均有不同程度的超标,其中DnBP、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)和邻苯二甲酸二乙酯(DEP)3种化合物超标率较高.广东省典型区域农业土壤受到不同程度的PAEs污染.     

一株黄色杆菌的分离鉴定及对邻苯二甲酸酯的降解研究

邻苯二甲酸酯(PAEs)是环境中普遍存在的有机污染物,具有环境雌激素效应,对人体健康和生态安全造成严重威胁。菌株YC-JY1分离自受石油长期污染的土壤中,可以利用邻苯二甲酸二丁酯(DBP)作为唯一的碳源进行生长;经16S rDNA鉴定,确定其属于黄色杆菌属(Xanthobacter sp.)。菌株YC-JY1降解DBP的最适条件为30℃,pH 7.0,无NaCl添加;在此条件下,100mg/L DBP在5 d内能被完全降解。随着DBP浓度的升高,菌株YC-JY1在5 d内对200 mg/L-400 mg/L DBP的降解率在94%以上;通过底物谱实验发现,菌株YC-JY1对其它邻苯二甲酸酯具有广泛的利用能力,其中邻苯二甲酸二戊酯(DPeP),邻苯二甲酸二己酯(DHP)的降解率均在90%以上;通过高效液相色谱-质谱联用确定DBP中间代谢产物为邻苯二甲酸单丁酯(MBP),邻苯二甲酸(PA)。由此推断,在菌株YC-JY1的作用下,DBP的起始代谢途径为DBP首先水解为MBP,继而水解为PA。     

传统补酒中邻苯二甲酸酯类化合物测定方法的优化及产生原因的分析

建立了传统补酒中十八种邻苯二甲酸酯类化合物的气相色谱-质谱测定法,所建方法各目标化合物在各自浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.9990,方法定量限0.025 mg/kg或者0.125 mg/kg,比国标方法规定的定量限0.3 mg/kg~9.0 mg/kg降低了许多。仪器精密度0.8%~3.4%,对于黄酒基传统补酒的加标回收率93.8%~108.8%,相对标准偏差0.2%~5.6%,对于白酒基传统补酒,加标回收率84.3%~111.3%,相对标准偏差0.3%~8.6%。本方法对于传统补酒企业的内部质量控制起到了重要的作用。同时,对该企业全品类传统补酒成品及关键原料进行了分析,找到了传统补酒中邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)偏高的原因,是生产设备内衬高分子材料引起的,建议全部改用食品级不锈钢设备。     

电子垃圾拆解地区土壤和植物中邻苯二甲酸酯分布特征

近年来,电子垃圾不当拆解带来的环境问题引起国际社会的极大关注.本研究对浙江省台州市不同电子垃圾拆解地区土壤和植物样品中5种邻苯二甲酸酯类（PAEs）污染物进行了测定分析.结果表明：土壤（以干质量计）中PAEs类污染物的浓度为12.566~46.669 mg·kg^-1,其中邻苯二甲酸二异辛酯（DEHP）、邻苯二甲酸二丁酯（DBP）和邻苯二甲酸二乙酯（DEP）相对含量较高,约占PAEs总量的94%以上.拆解地区蚕豆（Vicia faba L.）中PAEs总量明显高于同地区其他植物,且土壤和所有植物体内PAEs浓度相关性均不显著(P>0.05).与美国国家环保局制定的土壤PAEs治理标准比较,台州电子垃圾拆解地区土壤PAEs污染较为严重.     

一株高效DEHP降解菌的分离、鉴定及其降解特性

【目的】分离得到高效的邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)降解菌。【方法】采用富集培养法筛选分离菌株,并对菌株进行驯化;通过PCR扩增得到其16S rRNA和gyrB基因序列,进行同源序列分析及分子系统发育树的构建,同时结合形态学观察和生理生化实验对菌株进行初步鉴定;采用高效液相色谱(HPLC)分析菌株对DEHP的降解特性。【结果】分离得到一株能以DEHP为唯一碳源和能源生长的菌株,命名为HS-NH1,初步鉴定其为戈登氏菌(Gordoniasp.)。菌株HS-NH1最适的生长和降解条件为30°C、pH 7.0,在此条件下,该菌株60 h内能够将浓度为500 mg/L的DEHP降解90%以上。高效液相色谱(HPLC)分析表明,菌株HS-NH1在降解DEHP过程中产生了一种重要的中间代谢产物——邻苯二甲酸。底物广谱性试验证明,菌株HS-NH1能够有效地利用多种常见的邻苯二甲酸酯(PAEs)与芳香族衍生物。【结论】筛选得到了一株DEHP降解菌Gordonia sp.HS-NH1,该菌降解效率高,具有良好的底物广谱性,在邻苯二甲酸酯类化合物的污染治理中将会有一定的应用潜力。     

螺内酯对单肾切除糖尿病大鼠肾脏保护作用研究

目的：研究螺内酯对单肾切除糖尿病SD大鼠的肾脏保护作用及机制。方法：48只雄性SD大鼠随机分为单肾切除对照组C组、单肾切除糖尿病模型组D组、单肾切除糖尿病螺内酯干预组S组（50mg/kg/day灌胃）。给药6周后观察各组大鼠生化指标改变,肾组织形态学改变,RT-PCR及Western Blot检测肾组织中HGF水平的变化。结果：给药6周后,D组与C组相比,血糖、24h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐和肾重/体重显著增高（P〈0.05）,螺内酯治疗后可降低糖尿病大鼠的24h尿蛋白定量和肾重/体重,但对其它指标无明显影响;形态学显示,D组与C组相比肾小球系膜区细胞外基质增多及系膜细胞增生,肾小球基底膜增厚,足细胞足突融合、消失;螺内酯治疗后上述病理改变均有不同程度的减轻;RT-PCT、Western Blot结果显示D组和S组HGF表达均增加（P〈0.05）,而D组HGF表达明显低于螺内酯治疗组。结论：螺内酯可能通过上调HGF的水平从而起到保护糖尿病大鼠肾脏作用。     

也门与中国产香丝草挥发油的化学成分分析和比较

目的：分析也门与中国产香丝草挥发油的化学成分,比较两者差异。方法：采用水蒸气蒸馏法提取也门及中国产香丝草的挥发油,运用气相色谱-质谱联用法（GC—MS）对挥发油进行组分分析,将两者的成分差异进行了比较。结果：从也门产香丝草挥发油中鉴定了34个成分,相对含量最多的分别为醇类（47．77％）、烯类（29．15％）、酯类（9．64％）,主要为雪松烯醇（18．54％）和环氧化香橙烯（18．75％）;从中国产香丝草挥发油中鉴定了56个成分,以酯类（31．20％）、烯类（28．05％）、醇类（14-29％）等挥发性物质为主,包括异戊酸香叶酯（18．81％）、反式--佛手柑油烯（10．31％）。结论：也门与中国产香丝草挥发油的组成具有较大的差异,是两者香味迥异的物质基础,也是也门产香丝草制作香料、美食的科学依据;     

苯那普利联合氯沙坦治疗早期糖尿病肾病的临床研究

目的：研究苯那普利联合氯沙坦对2型糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）患者肾功能以及血浆脂联素（adiponectin,APN）和高敏C反应蛋白（highsensitivity-C responseprotein,hs-CRP）的影响。方法：选择我院心血管内科住院的2型糖尿病肾病患者42例,均符合早期糖尿病肾病的诊断标准,给予苯那普利10-20mg治疗3个月后,给予苯那普利10mg联合氯沙坦50mg-100mg再治疗3个月,检测和比较治疗前后患者血肌酐（Scr）和24小时尿蛋白定量（24h—UPE）以及血浆hs-CRP和APN水平。结果：苯那普利治疗3个月后,患者的Scr、24h—UPE和hs-CRP水平较治疗前明显降低;血浆APN水平较治疗前明显升高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。而苯那普利联合氯沙坦再治疗3个月后,患者的Scr、24h-UPE水平和hs-CRP水平较苯那普利治疗3月时更低,血浆APN水平较苯那普利治疗3个月时更高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：苯那普利联合氯沙坦治疗可更好地保护早期糖尿病肾病患者的肾功能,这可能与其提高血浆APN水平和降低CRP水平有关。     

外源性铜对SD鼠脑内铜稳态与γ-氨基丁酸、谷氨酸含量影响的实验研究

目的：探讨脑内铜稳态与γ-氨基丁酸、谷氨酸含量之间的关联性,了解脑内铜代谢参与神经疾病的作用机制.方法：把实验动物分为8组：对照组,戊巴比妥组,腹腔注射CuCl2组（剂量分别为2 mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kg）,CuCl2-戊巴比妥混合组（先腹腔注射CuCl2,再注射戊巴比妥）.检测SD鼠血清和海马内不同形态铜、γ-氨基丁酸和谷氨酸含量.结果：单一铜胁迫下发现随着外源铜升高血清和海马总铜及血清非蛋白结合铜和海马内谷氨酸含量显著升高,在50 mg/kg注射剂量下达到最高（P＜0.02）;海马非蛋白结合铜和神经递质γ-氨基丁酸含量在2 mg/kg注射剂量下达到最高（P＜0.02）,并随着外源铜浓度升高而降低.单一注射戊巴比妥后海马游离铜含量明显降低（P＜0.02）.铜胁迫1小时后注射1％戊巴比妥结果表明,戊巴比妥能明显降低铜胁迫下海马及血清总铜和游离铜含量（P＜0.05）.结论：外源铜能改变体内铜稳态;铜稳态失衡导致神经递质γ-氨基丁酸、谷氨酸含量变化,γ-氨基丁酸含量与非蛋白结合铜呈正相关.     

抗RA33抗体、RF、CRP、ANA与ENA联合检测在类风湿性关节炎患者诊断、治疗及预后中的作用

目的：探讨血清抗RA33抗体、RF、CRP联合检测在类风湿性关节炎患者诊断、治疗及预后中的作用。方法：采用ELISA法对35例类风湿性关节炎患者和30例健康对照者进行抗RA33抗体的检测,间接免疫荧光法检测ANA、免疫印迹法检测ENA,免疫比浊法进行类风湿因子（RF）及CRP的检测。结果：类风湿性关节炎患者组RF水平为：[（104．51±153．88）KIU／L]与健康对照组[（10．89±2．78）KIU／L]比较,差异非常显著（p〈0．01）;类风湿性关节炎组CRP[（11．60±23．24）mg／L]与健康对照组[（2．57±2．18）mg／L]比较,差异显著（p〈0．05）;类风湿性关节炎组抗RA33抗体水平：[（17．81±35．11）U／mL]与健康对照组[（8．10±8．40）U／mL]比较,差异非常显著（p〈0．01）。RF、抗RA33抗体、CRP及ANA诊断类风湿性关节炎的灵敏度分别为：80．00％,34．29％,42．86％,62．86％;RF、抗RA33抗体、CRP及ANA诊断类风湿性关节炎的特异性分别为：93.33％,93.33％,90．00％,96．67％;ENA的检出率均较低。结论：类风湿性关节炎患者抗RA33抗体检出的灵敏度低,但特异性强。对类风湿性关节炎患者进行抗RA33抗体、ANA、RF、CRP、ENA联合检测,对于疾病的进展、病因分析、指导治疗和改善预后均具有重要意义。     

钼营养对甘草生理和生长特性的影响

目的：探讨不同浓度的钼营养水平对甘草生长和生理特性的影响。方法：以一年生的甘草移栽苗为试验材料,采用盆栽蛭石的试验方法,共设置4个钼浓度水平,分别为0mg·L-1,0.52mg·L-1,5.2mg·L-1和10.4mg·L-1,其中0.52mg·L-1即正常Hoagland营养液中钼的浓度。每周向盆内浇灌营养液,以达到处理的目的。采用LI-6400光合仪测定其光合生理指标以及植物生理学常规方法进行甘草叶片色素和抗氧化酶活性的测定。采用电子天平分别测定不同处理下的甘草地上、根的鲜重和干重等。结果：结果表明,甘草的各项生理和生长指标随着钼处理浓度的增加而增加,显著增加了甘草植株的叶绿素a,总叶绿素,类胡萝卜素和净光合速率（Pn）、胞间CO2浓度（Ci）等光合指标以及显著提高超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）活性,统计分析结果表明,各处理间差异显著（P〈0.05）。同样,钼营养显著增加了甘草株高、芦头直径、生物量等生长指标。其中,10.4mg·L-1钼处理时的甘草根鲜重和干重最大,与0 mg·L-1处理相比,分别显著增加了55.35%和38.08%。结论：钼不足会抑制甘草的各项生理功能,进而影响甘草的生长,而5.2mg·L-1和10.4mg·L-1的钼营养浓度可以促进一年生甘草各项生理和生长指标的增加,进而促进甘草干物质的积累,提高甘草药材的产量。     

油桐叶片愈伤组织诱导及植株再生

以油桐无菌苗叶片为试材,研究不同种类及浓度的植物生长调节剂对愈伤组织诱导、分化、增殖及生根的影响。结果表明：叶片愈伤组织的最佳诱导培养基为1／2MS＋2．omg·L-16-BA＋1．0mg·L～2,4-D,诱导率达100％;最佳分化培养基为1／2MS＋3．0mg·L～6-BA＋0．1mg·L-1。IBA＋0．05mg·L—IAA,分化率为86．36％;最佳继代增殖培养基MS＋3．0mg·L～6-BA＋0．05mg·L。IBA;最佳生根培养基为1／2MS＋O．1mg·L-1。IBA,生根率93．83％。炼苗后移栽到泥炭土：珍珠岩：蛭石=2：1：1的基质中,成活率达92％以上。     

利用RNAi抑制PARs防治脑缺血性损伤的实验研究

目的：利用RNA干扰技术,通过重组腺病毒导入,抑制脑组织中PARs基因的表达,观察神经功能缺陷评分、缺血脑组织梗死体积的变化,为缺血性脑血管疾病的基因治疗提供实验依据。方法：雄性Wistar大鼠随机分组。以重组腺病毒介导的无序PARs基因shRNA片段、生理盐水进行干预,干预3天后以线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉永久闭塞模型,各组分别于线栓后24h、72h进行神经功能缺陷评分并断头取脑,应用4％TTC染色测脑梗死体积。结果：1．缺血后24h、72h同一时间点：①实验组分别与对照组、生理盐水组对比,神经功能缺陷评分明显降低（P〈0．05）,脑梗死体积明显减小（P〈0．05）;②对照组与生理盐水组对比,神经功能缺陷评分、脑梗死体积无明显差异（P〉0．05）。2．各组组内缺血后24h、72h对比,神经功能缺陷评分、脑梗死体积各组均有明显差异（P〈0．05）。结论：重组腺病毒介导的RNAi能有效抑制脑组织中PARs基因的表达,缩小脑梗死体积,改善神经功能缺陷评分。     

碳酸酐酶靶向性抑制剂甲苯磺烷唑胺对机体缺氧耐力的影响

目的:探讨甲苯磺烷唑胺对提高小鼠缺氧耐力的影响及其机制.方法:将健康昆明小鼠放入缺氧装置瓶中,测定密闭缺氧存活时间;将雄性昆明小鼠放入梯形笼中,置于小动物低压舱进行减压低氧,测定小鼠减压低氧存活时间;观察小鼠组织碳酸酐酶Ⅱ(CAⅡ)活性改变.采用预防给药方式,研究碳酸酐酶靶向性抑制剂甲苯磺烷唑胺对提高低氧耐力的作用.结...     

HPLC法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量。方法：色谱柱为DiamonsilTM C18（250×4.6 mm,5滋m）,流动相为甲醇-0.05mol.L-1磷酸溶液（93∶7）为流动相,检测波长210 nm,进样量10滋L。结果：熊果酸在21.28滋g.mL-1～212.8滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率为97.79%（RSD=1.30%）;齐墩果酸在24.02滋g.mL-1～240.2滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,平均回收率为98.36%（RSD=1.11%）。结论：该方法简便、灵敏、准确,可用于鸡矢藤药材的质量评价。