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1.
为探讨紫外线对晶状体的损伤机制,用RT-PCR方法(reversetranscription-polymerasechainreaction,反转录聚合酶链反应),研究经紫外线照射后大鼠晶状体抗氧化相关酶,包括铜锌-超氧化物歧化酶(copper-zinc-superoxidedismutase,Cu-Zn-SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(glu-tathioneperoxidase,GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase,CAT)等mRNA的表达.结果显示,短时间的照射(2~5min),抗氧化相关酶的mRNA表达水平有增高表现,随后其mRNA表达水平开始下降,15min时抗氧化相关酶mRNA的表达下降更为明显,与对照组相比有非常显著性差异(P<0.001).照射后24h,抗氧化相关酶的mRNA表达有不同程度的恢复;照射后48h,其mRNA表达水平基本恢复,与对照组相比没有显著性差异.从而从基因水平上初步探讨了紫外线的氧化损伤机制 相似文献
2.
目的研究γ射线对人外周血淋巴细胞cx43和ANLN基因转录表达的影响。方法对数生长期的淋巴细胞,分别给予1、2、3、4、5、6 Gy的^60Coγ射线照射,照射后12h,以及2Gy照射后4、8、12、24、36、48、72h,分别提取总RNA,反转录成cDNA。利用实时荧光定量PCR技术,检测各组cx43和ANLN基因表达改变。结果人外周血淋巴细胞cx43 mRNA表达水平在2Gy照射后4、8、12h明显增高,分别为对照组(未照射组)的6.74、9.06、7.22倍(P〈0.05);24~72h,其表达水平与对照组相比没有明显变化。1、2、3、4、5、6Gy剂量照射后12h,cx43 mRNA表达水平显著增高(P〈0.05)。ANLN mRoNA表达水平在2Gy不同时间点及1~5Gy照射后12h,表达降低(P〈0.05),6Gy照射后12h其表达开始升高,为对照组的6.08倍(P〈0.05)。结论γ射线照射2Gy不同时间点及不同剂量照射后12h,cx43基因表达上调,ANLN基因表达下调。1~3Gy剂量照射后12h,cx43 mRNA表达在此范围内有时间和剂量的依赖性。cx43可能会发展为核事故受照射人员的分子生物学剂量标记物。 相似文献
3.
目的:探讨针对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的小干扰RNA(siRNA)对口腔鳞癌细胞(OSCC)化疗敏感性的影响。方法:用Western印迹检测OSCC和针对HIF-1α基因的siRNA导入OSCC后的HIF-1α蛋白表达水平;用MTT法检测细胞对化疗敏感性的影响;用流式细胞术检测化疗诱导细胞凋亡的凋亡率。结果:HIF-1α在OSCC中高表达,HIF-1α-siRNA转染后HIF-1α表达水平明显下降,细胞对化疗敏感性明显提高,化疗诱导肿瘤细胞凋亡率明显增加。结论:针对HIF-1α基因的siRNA能明显降低HIF-1α的表达,增强化疗对OSCC的凋亡诱导作用,有效提高OSCC对化疗的敏感性。 相似文献
4.
大鼠诱导型一氧化氮合酶基因转录调控区的克隆与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
采用单特异引物PCR克隆法,得到大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转录调控区DNA片段。核酸序列分析证实,大鼠iNOS基因的5'-侧翼区含有IFN-γ和TNF-α应答元件及NF-kB结合位点的保守序列。这些保守序列的位置及排列显区别于人和小鼠的iNOS基因。电泳迁移率改变分析(EMSA)表达,VSMC受IL-1和IFN-γ刺激后,细胞核内产生某种可与iNOS基因5'-侧翼区特异结合的核蛋白因 相似文献
5.
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采用单特异引物PCR克隆法,得到大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转录调控区DNA片段.核酸序列分析证实,大鼠iNOS基因的5′-侧翼区含有IFN-γ和TNF-α应答元件及NF-κB结合位点的保守序列.这些保守序列的位置及排列显著区别于人和小鼠的iNOS基因.电泳迁移率改变分析(EMSA)表明,VSMC受IL-1和IFN-γ刺激后,细胞核内产生某种可与iNOS基因5′-侧翼区特异结合的核蛋白因子. 相似文献
7.
1,25—二羟维生素D3的免疫调节作用 总被引:6,自引:0,他引:6
1,25(OH)2D3是维生素D3的形式,其生物效应是由1,25(OH)2D3受体(VDR)介导的。单核细胞、激活的淋巴细胞等免疫系统细胞均有VDR的表达,1,25(OH)2D3对免疫系统功能有重要调节作用,主要表现于:在分子水平上抑制白细胞介素2(IL-2)、γ-干扰素(INF-γ)及粒单系集落刺激因子(GM-CSF)等细胞因子的表达;细胞水平上调节免疫系统细胞的增殖分化及其免疫功能;在整体水平 相似文献
8.
一氧化氮合酶(NOS)活性与一氧化氮(NO)合成及血管功能关系密切,为了研究脑血管内皮细胞NOS表达及其调节作用,本文采用脑微血管内皮细胞培养技术和组织化学方法,观察了内皮细胞NOS的表达。未加刺激物对照组的脑微血管内皮细胞染色淡,阳性反应物主要聚集在细胞核周围胞浆中。加入肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)或酯多糖(lipopolysaccharide,LPS)5min后,NOS染色开始增加,1h达顶峰。以后呈下降趋势。LPS比TNF-α作用时间较长,NOS染色较深 相似文献
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放射诱导调控腺病毒介导gfp报告基因在肿瘤细胞内的表达 总被引:10,自引:1,他引:10
为建立放射诱导基因表达调控系统并用于肿瘤的基因治疗,利用PCR技术克隆出放射诱导基因Egr-1基因启动子,经测序证实后与报告基因gfp连接,并利用新型、高效的细菌内同源重组腺病毒载体制备方法制备出重组腺病毒AdEgr-GFP。感染腺病毒的肿瘤细胞给予不同剂量的γ射线照射,体外采用FACS方法检测GFP的表达发现,照射可明显提高GFP表达,并呈剂量依赖性,Western印迹检测也显示类似的结果,为进行体内实验,瘤内注射AdEgr-GFP腺病毒后48h,肿瘤局部接受不同剂量的γ射线照射,8h后制备肿瘤组织标本用于分析GFP的表达。肿组织图像分析结果显示,γ射线照射可显著提高肿瘤组织中GFP的表达,并呈剂量依赖性,结果说明,放射经Egr-1启动子可有效调控腺病毒介导gfp基因的肿瘤细胞内表达。 相似文献
11.
利用谷氨酰胺合成酶基因(GS)作扩增标记在CHO细胞中高效表达乙型肝炎表面抗原基因 总被引:1,自引:1,他引:0
利用谷氨酰胺合成酶基因(GS)[1]作扩增选择标记,结合CMV-IE启动子,在CHO细胞中高效表达乙型肝炎表面抗原基因。初筛克隆表达水平RPHA检测为1:64,经过谷氨酰胺合成酶基因的抑制剂MSX的两轮基因扩增,HBsAg的表达水平RPHA在1:256以上。方瓶静置培养收液,RIA检测HBsAg最高产量为9.5μg/毫升。表达水平较以前利用dhfr基因扩增选择系统所得到的高表达细胞系B43高一倍以上。利用GS基因扩增选择系统可以在哺乳动物细胞中高水平表达外源基因。 相似文献
12.
电离辐射能诱发超氧阴离子自由基(O-2·)的产生,同时也是细胞凋亡发生的诱因之一。锰超氧化物歧化酶(MnSOD)是一种存在于真核细胞线粒体、具有清除O-2·作用的抗氧化酶。为探讨MnSOD在辐射诱发细胞凋亡中的作用,采用基因转染技术分别将有义和反义MnSODcDNA真核表达载体直接导入CHO细胞,并用此细胞模型研究了MnSOD对X射线诱发细胞凋亡的调控。结果发现,稳定表达有义MnSOD的细胞克隆能明显抑制8GyX射线诱发的细胞凋亡,而表达反义MnSOD的细胞克隆对X射线诱发的细胞凋亡更加敏感,进一步的研究发现,线粒体膜电位的改变可能是MnSOD调控细胞凋亡的机制之一。 相似文献
13.
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1,25(OH)2D3是维生素D3的激素形式,其生物效应是由1,25(OH)2D3受体(VDR)介导的。单核细胞、激活的淋巴细胞等免疫系统细胞均有VDR的表达,1,25(OH)2D3对免疫系统功能有重要调节作用,主要表现于:在分子水平上抑制白细胞介素2(IL2)、γ-干扰素(INF-γ)及粒单系集落刺激因子(GM-CSF)等细胞因子的表达;在细胞水平上调节免疫系统细胞的增殖分化及其免疫功能;在整体水平上可以减少实验性自身免疫性疾病的发病率并改善病情,并能延长实验性移植器官的存活时间。 相似文献
15.
蓝斑在刺激视上核镇痛中的作用 总被引:11,自引:1,他引:10
应用核团微量注射、放射免疫测定(RIA)和高压液相(HPLC)观察了刺激视上核(SON)对蓝斑(LC)灌流液中催产素(OT)、精氨酸加压素(AVP)、去甲明上素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的含量的变化以及斑注射O笔AVP的拮抗剂对痛阈(PT)的影响。结果表明;刺激SON后30到90min,LC灌流液中OT的含量,30minAVP的含量,60min5-HT的含量明显增加,而NE的含量在30和60 相似文献
16.
利用谷氨酰胺合成酶基因(GS)作扩增标记在CHO细胞中高效表达乙型… 总被引:1,自引:1,他引:0
利用谷氨酰胺合成酶基因(GS)作扩增选择标记,结合CMV-IE启动子,在CHO细胞中高效表达乙型肝炎的基因。初筛克卫表达水平RPHA检测为1:64,经过谷氨酰胺合成酶基因的抑制剂MSX的两轮基因扩增。HBsAg的表达水平RPHA在1:256以上。方静置培养收液,RIA检测HBsAg最高产量为9.5μg/毫升。表达水平较以前利用dhfr基因扩增选择系统所得到的高表达细胞系B43高一倍以上。利用GS基 相似文献
17.
野生型及启动子区突变的HPFHAγ基因在MEL细胞中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了野生型Aγ珠蛋白基因、中国型胎儿血红蛋白持续存在综合症(HPFH)Aγ基因(启动子区-196C-T突变)及希腊型HPFHAγ基因(-117G-A突变)在鼠红白血病(MEL)GM979细胞中的表达,比较每个整合的Aγ基因明显增加的表达水平,而-117G-A196C-T突变Aγ基因未显示比野生型Aγ基因明显增加的表达水平,而-117G-A空变Aγ基因在未分化的及HMBA或丁酸钠诱导分化的MELG 相似文献
18.
大鼠尾部痛刺激后脊髓骶尾段一氧化氮合酶的变化 总被引:3,自引:0,他引:3
用NADPHd(还原型辅酶Ⅱ)组织化学方法观察大鼠尾部电流致痛刺激后不同时间脊髓骶尾段NOS(一氧化氮合酶)阳性神经元的反应变化。同时用FOS的免疫组织化学观察痛刺激后FOS的表达。本文观察显示:电流致痛刺激后15min脊髓骶尾段NOS反应明显增强,持续相当长时间,至痛刺激后8小时才逐渐减弱,刺激后24小时反应强度相当于对照动物。而FOS免疫组织化学反应,在痛刺激后30min起有少数神经元胞核浅染。由于NO极易通过细胞膜以弥散方式作用于附近细胞,激活靶细胞的鸟苷酸环化酶,从而引起靶细胞一系列反应。提示NO可能影响cfos的表达 相似文献
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碱性脂肪酶产生菌扩展青霉W—1382的诱变育种 总被引:2,自引:0,他引:2
以扩展青毒(Penicilumexpansum)S-14作为出发菌株,分别比较UV、Co60-γ射线、NTG单因子的诱变效应和以NTG、Co60-γ射线、UV+NTG作为诱变剂及自然分离在内四代的诱变育种。单因子诱变剂最适剂量分别为UV150s,Co60-γ射线48000rad,NTG300μg/ml80min,比较诱变效果表明:NTG最佳,Co60-γ射线次之,UV较差;连续三代诱变各代诱变剂及剂量分别为NTG300μg/ml100min,Co60-γ射线20000rad,UV30s+NTG150μg/ml,40min。复合处理比单因子处理效果好。实验中选育成功高产酶变株W-1382,结合自然分离和诱变育种,其酶活力较出发菌株提高了53.6%。 相似文献
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镰刀菌(Fusarium)经γ射线、紫外线辐射诱变后,接种于大米培养基中,经10℃低温产毒培养,采用薄层层析方法定性定量分析培养物中的镰刀菌毒素-玉米赤霉烯酮(zearalenone简称ZEA)。结果表明:不同蓖株对诱变剂的反应不同。产毒菌株NF5232、NF5946在较大剂量γ射线处理后,ZEA产是显著增加,但其产生的色素量下降。或者用紫外线处理,仍然产生ZEA。不产毒菌株NF6127、NF61 相似文献