糙皮侧耳染色体计数和担孢子形成过程中细胞核行为的研究

糙皮侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｏｓｔｒｅａｔｕｓ）菌褶经有丝分裂阻断剂预处理、原 生质体铺片和Ｇｉｅ－ｍｓａ染色并结合苏木精染色后,经过多次反复实验观察,证明糙皮侧耳的染色体条数为９（ｎ＝９）;糙皮侧耳从菌褶分化完成到子实体完全成熟的过程中,不断有少量新的双核担子产生,发生核配直到释放担孢子。其减数分裂同步性不高。减数分裂后,４个子核分别进入４个担孢子中,留下中空的担子。     

糙皮侧耳担孢子交配型的鉴定

以3个糙皮侧耳菌株为材料,用核迁移试验和OWE-SOJ技术对担孢子的4种交配型进行了鉴定。核迁移试验表明,核迁移仅出现于A=B≠交配反应而不出现于A≠B=反应中。而在OWE-SOJ试验中,发生核迁移的A=B≠交配反应形成无锁状联合的绒毛状菌落,而不发生核迁移的A≠B=反应形成无锁状联合的栅栏型菌落,两种菌落可以清楚地区别开来。核迁移试验的结果与OWE-SOJ试验的结果是一致的,可以相互印证。因此,将两者用于糙皮侧耳交配型的准确鉴定是可行的。     

草菇减数分裂和担孢子形成细胞核行为

本文用苏木精染色和双苯并咪唑(Hoechst 33258)染色法,从草菇子实体“纽期”菌褶分化完开始,每3小时对同一个子实体连续切取菌褶进行染色观察。结果表明草菇子实体“纽期”菌褶形成时,约10％的担子发生了核配;在子实体发育过程中,尤其是子实体成熟期后,不断有少量新的双核担子产生,并发生核配,使草菇减数分裂的同步性不高;草菇从菌褶分化完成(此时已有10％担子发生核配)到子实体完全成熟,菌褶变成深粉红至褐色(此时约70％担子完成减数分裂)需要28—30小时;担子减数分裂的持续时间为18小时,其中细线期和偶线期5.9小时、粗线期6.2小时、双线期和终变期3.4小时、中期10.5小时、后期Ⅰ到四分体2小时;经过对粗线期、双线和终变期以及中期Ⅰ染色体条数的多次反复观察,认为草菇的染色体条数为11(n=11);减数分裂后,4个子核分别进入4个担孢子中,留下无核的担子;绝大部分担孢子是单核的,有约5％的担孢子是双核的。     

机械损伤对糙皮侧耳原基形成的影响

原基期是糙皮侧耳Pleurotus ostreatus发育进程的关键时期。本研究以糙皮侧耳菌株New 831为试验材料,通过对糙皮侧耳菌丝机械损伤,探讨机械损伤对糙皮侧耳原基诱发的影响。菌丝满板后,经过机械损伤处理,到原基期每隔4d取样一次,测定了这些样品处理组与对照组的活性氧及脂质过氧化水平,并且通过荧光定量分析了Po.WC-1、Po.WC-2、fst3和fst4基因的表达量。结果表明：机械损伤组和对照组的活性氧水平随时间的增加均呈现“先升后降”的趋势,机械损伤总体提高了活性氧的水平,并且机械损伤导致原基提前形成,表明活性氧水平的提高,可能促进了糙皮侧耳原基形成;荧光定量分析发现糙皮侧耳菌丝机械损伤处理后,Po.WC-1、Po.WC-2、fst3、fst4基因的表达量均发生变化,这些基因的变化表明它们可能参与调控糙皮侧耳原基形成;Po.WC-2和fst3基因在第8天时的显著上调表达可能促进了糙皮侧耳原基形成。研究结果表明机械损伤能够促进糙皮侧耳原基提前形成,这将为进一步研究原基形成过程中机械损伤的作用机制奠定基础。     

原生质体再生对糙皮侧耳Pleurotus ostreatus病毒脱除的效果

以糙皮侧耳Pleurotus ostreatus菌株新831和豫6为材料,从这两个菌株的菌丝体中提取了糙皮侧耳病毒基因组,共有3个dsRNA片段,大小分别为8.2kb、2.6kb和1.1kb。采用菌丝尖端分离脱毒、原基组织分离脱毒和原生质体再生脱毒技术对糙皮侧耳菌丝体进行脱毒处理,利用dsRNA技术对脱毒效果进行检测。结果显示,原基组织分离脱毒后3个条带依然存在;菌丝尖端分离脱毒后,8.2kb和1.1kb 2个条带完全脱除,2.6kb的条带亮度有所减弱;原生质体再生脱毒后3个条带完全脱除;对3种脱毒技术得到的菌株进行生理生化指标测定,结果显示,原生质体再生脱毒菌株的菌丝生长速度、生物量、呼吸强度、纤维素酶活等均明显优于出发菌株、原基组织分离脱毒和菌丝尖端分离脱毒菌株;栽培结果表明,原生质体再生脱毒菌株前两茬菇的生物学效率达到96.4%－99.1%,比出发菌株提高19.9%－25.4%,并且菌盖宽度和长度有所增加,表明原生质体再生技术可以有效脱除糙皮侧耳菌株病毒,提高糙皮侧耳栽培产量。     

启动子替代构建糙皮侧耳漆酶高产菌株

POXC是糙皮侧耳合成最多的一种漆酶。应用启动子替代技术,用构巢曲霉的甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因（gpd）启动子替代POXC基因的启动子,构建了超量表达POXC糙皮侧耳转化子。转化子中POXC基因表达量比出发菌株提高了0.72–3倍。在PDA平板培养、PD摇瓶培养和棉籽壳试管培养条件下,转化子漆酶活力显著提高,比出发菌株提高了1.5倍以上。用棉籽壳栽培,转化子菇产量比出发菌株提高了16.2%,培养料中木质素含量比出发菌株减少21%。结果表明,应用高效启动子替代能够显著提高糙皮侧耳漆酶基因的表达量、漆酶活力及其木质纤维素降解能力。     

糙皮侧耳不同生长时期发酵料中微生物和代谢物的变化

为了解糙皮侧耳栽培期间发酵料中的微生物及代谢产物变化,分别采用宏基因组测序、非靶向代谢组学技术对糙皮侧耳5个生长时期发酵料中微生物及代谢物进行分析.结果 表明:糙皮侧耳生长发育过程中,发酵料中的Bacillus EGD-AK10、Cellulosinicrobium aquatile、Cellulosinicrobiu...     

野生糙皮侧耳多糖的提取、分离纯化和组分分析

以野生糙皮侧耳子实体为材料,用水浸法及乙醇沉淀法提取多糖;用过氧化氢、重蒸酚、不同含量的活性碳进行脱色;然后用氢氧化锌法、三氯醋酸法、sevag法、胰蛋白酶与sevag法相结合的方法进行脱蛋白;再通过透析和柱层析作进一步分离纯化;最后以纸层析法进行组成糖分析.结果表明:野生糙皮侧耳的水溶性多糖以1.5%活性碳脱色效果最...     

棘尾虫接合期间染色体行为的观察

本文对棘尾虫接合生殖各时期的小核发育及染色体行为进行了观察,见到接合期间每种属于小核的分裂均有染色体的形成。获得了小核减数分裂的清晰图象。在蛋白银制品上发现了核内非染色体成分的细微细微结构、初充了前人观察的不足。     

氮源浓度对平菇菌丝生长和子实体形成的影响

本文报道了合成培养基中不同氮素水平对平菇菌丝生长和子实体原基产生的影响。平菇菌丝对基质中氮含量的要求较宽。在０．０２８－０．０９３％范围内生长都良好;但缺氮时严重抑制生长,菌丝也不发生扭结。实验结果还表明,硫胺素可能对氮素利用有促进作用,较高的起始氮浓度（０．０４７－０．０９３％）有利于子实体原基的形成。     

缺素对平菇菌丝生长速率和菌落形态的影响

当全培养基中分缺乏氧,磷,钾,钙,镁及硫元素时,平菇菌丝的干重增加受到不同程度影响,以缺时为最严重,其次是缺氮等。除钙外,其它五种的缺乏都导致菌落形态发生特写改变,菌落扩展速度也不同,仍以无磷,无氮时影响最大。     

平菇丰收一号高产特性的研究

通过野生种分离选用的平菇丰收一号,染色体数为９（ｎ＝９）,菌丝生长速度比一般品种快２—３４ｃｍ／ｈ,平均投料０．５ｋｇ（块）产鲜菇０．６～２．５ｋｇ,个别单株重１０～２０ｋｇ左右,生物效率１００～１５０％,高者达２００％以上,是一种高产优质、适应性强的新菌种。     

凤尾菇与平菇的鉴别及其分类地位

凤尾菇韧伞（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ ｓａｊｏｒ－ｃａｊｕ）和糙皮侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｏｓｔｒｅａｔｕｓ）为两种广泛栽培的食用菌,在中文文献中经常与侧耳属（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ）的其它几种食用菌统称为平菇。为了种类鉴别和澄清分类上的关系,本文对两种真菌进行了详细的形态描述和特征比较,确认凤尾菇是韧伞属（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ）的成员,不应归放在侧耳属内。凤尾菇韧伞与糙皮侧耳,或韧伞属与侧耳属的最显蓍的差异在     

秦岭六种提灯藓的染色体研究

本文以藓类植物的幼嫩孢蒴及茎尖为材料,对产于中国秦岭的六种提灯藓的染色体进行了观察计数。首次报道了M．pseudolycopodioides的染色体数目为n＝6;M．marginatum和M．lycopoidioides的染色体数分别为n=12及n＝6,与前人报道的结果一致;M．Laevinerve、M．heterophyllum以及M．thomsoii的染色体数目均为n＝6,与前人的报道不完全相同。本文旨在为本属的研究提供一定的细胞学资料。     

凤尾菇和盖囊侧耳原生质体非对称融合的研究

盖囊侧耳的双核体原生质体经过灭活处理作为供体与带有营养缺陷型标记的凤尾菇单核体原生质体受体融合,得到大量生长速度和菌落形态差异较大的融合子,这些融合子主要显示了供体菌株的特性,数次转接和进行原生质体再分离后,有的融合子再生菌株恢复了供体亲本的遗传特性,同时获得了一些新的生理特证。结果表明原生质体非对称融合可以作为食用菌原生质体融合育种的一种有效方式。     

卵巢发育阻滞的人工三倍体鱼减数分裂染色体配对的光镜观察

采用界面铺张制片和硝酸银一步染色的方法,对人工三倍体水晶彩鲫卵巢发育阻滞型个体的减数分裂染色体配对进行了光镜观察。在分化有初级卵母细胞的卵巢发育阻滞型的三倍体鱼中,减数分裂粗线期细胞主要的由二价体和单价体组成,也见有少量三价体和其它多价体,其染色体成员数大多在９０左右;在不同细胞间,染色体的大小变化较大;配对联会过程中形成的配对叉和产生的特异蛋白在一些细胞中明显可见。文中讨论了三倍体染色体配对紊乱