共查询到20条相似文献,搜索用时 15 毫秒
1.
用猪血清代替小牛血清作人体外周血淋巴细胞短期培养,进行染色体分析及淋巴细胞转化的研究。在94例姐妹染色单体差别染色的培养中,培养液分别加入小牛血清与猎血清,细胞有丝分裂指数分别为3.91%和3.78%;21例常规法培养中,分裂指数分别为9.10%和9.21%;5例淋巴细胞转化试验,小牛血清和猪血清培养的转化率分别为69.52%和69.59%;16例阉割后公、母猪血清加入培养基中,细胞分裂指数(SCD法)分别为2.96%和3.14%。以上各项对照试验,均无显著性差异(P>0.05)本研究证实,猪血清可用于人体外周血淋巴细胞短期培养。 相似文献
2.
细胞培养生产人参寡糖素降低成本的途径 总被引:1,自引:0,他引:1
在人参(Panaxginseng)细胞悬浮培养中,以无离子水代替重蒸馏水,细胞生长速率和寡糖素产率分别降低2.3%和2.9%。用白糖代替蔗糖,细胞生长速率和寡糖素产生率分别降低1.74%和1.23%。综合上述两方面结果,以无离子水和白糖分别替代原培养基中的重蒸馏水和蔗糖组成替代培养基,用替代培养基培养人参培养细胞,其生长速率可达0.509gDW/L.d.寡糖素产率可达1.443g/L,和原培养基相 相似文献
3.
雪花莲凝集素基因转化菊花及转基因植株的抗蚜性研究 总被引:15,自引:0,他引:15
针对菊花存在的蚜虫虫害问题,采用农杆菌介导法将gna基因导入菊花叶片,共获得93个转化克隆。研究了影响转化频率的主要因素,得出在使用pH5.6的YEB培养基,菌液浓度OD600=0.4,45日苗龄中部叶片预培养1d,共培养4d,共培养的培养基中加入0.5mg/L GA3的条件下可使转化频率提高到11.21%。PCR、实时荧光PCR检测结果表明,外源基因已整合到植物细胞基因组中。转化植株幼苗饲虫实验表明,不同转化克隆的抗蚜性差异较大,蚜口密度抑制率从10%—84%不等,平均蚜口密度抑制率为39.4%。转化植株叶片蛋白提取液对小鼠红细胞具有凝集作用。 相似文献
4.
硝酸银对桑树遗传转化的作用(简报) 总被引:11,自引:0,他引:11
调查了硝酸银对农杆菌介导的桑(Morus alba L.)品种“新一之濑”遗传转化的作用。在抗性筛选培养基中添加2mg L^-1硝酸银,桑叶盘褐化死亡率减少7.2%,抗性芽分化率增加3.9%,外源基因转化频率增加9.6%,“假阳性”转化体减少42.5%。感染农杆菌的桑叶盘经MS培养基培养、农杆菌液体培养和固体培养基上划线培养等实验证实,硝酸银对工程农杆菌LBA4404的生长具有抑制作用,这可能是提高桑树转化频率的原因之一。 相似文献
5.
PEG法介导转化诸葛菜下胚轴原生质体获得转基因植株 总被引:3,自引:0,他引:3
采用诸葛菜无菌苗的下胚轴组织为材料,分离原生质体,在原生质体培养基中作液体浅层暗培养,植板率为5%,植株再生频率为100%。作者进而开展了遗传转化研究。为研究PEG介导转化诸葛菜原生质体的影响因素,通过瞬间表达,实验了PEG法转化子叶原生质体的过程,在此基础上将分离纯化后的原生质体与带HPT基因的质粒DNA(pBI222)混合,HPT基因作选择标记,PEG介导转化;重新收集转化后的原生质体,以5×104/ml的密度在原生质体培养基中作浅层培养;培养10—15天后用25mg/L的潮霉素(hygromycin)进行筛选,一月后出现少量细胞团,转入含潮霉素50mg/L的扩增培养基扩增愈伤组织,进而转入含50—100mg/L潮霉素的分化培养基诱导分化成苗,分化率为100%,转入生根培养基中生根成完整植株。抗性植株再生率为4×10(-5)。在获得再生转基因植株后,以再生植株叶片为材料,进行Southernblot分子杂交,证实外源基因已稳定整合到植物基因组中并表达,再生转基因植株频率为10(-5)。国内外首次转化诸葛菜属植物原生质体获得成功。 相似文献
6.
7.
人参细胞生物合成熊果苷转化体系的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
以人参(Panax ginseng C. A. Mey.)培养细胞为生物反应体系,利用外源氢醌为底物,对熊果苷的生物合成进行了研究.TLC鉴别表明,人参细胞可以将外源的氢醌转化为熊果苷;以熊果苷含量和氢醌的转化率为指标,对人参细胞生物合成熊果苷的基本条件(氢醌浓度、转化持续时间、细胞培养阶段)进行了探讨, 结果表明,MS固体培养基上培养32 d的人参细胞,在含有2 mmol·L-1氢醌的生物合成培养基中转化24 h后,合成的熊果苷含量占细胞干重的7.176%,氢醌转化率也达到79.15%. 相似文献
8.
以中国传统菊花品种‘小林静’叶片为外植体,建立了‘小林静’较好的再生体系及遗传转化体系.结果表明,‘小林静’叶盘最适不定芽分化培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA,不定芽分化率为92.76%,平均再生不定芽数为2.3767个;试管苗最佳生根培养基为1/2MS,生根率达100%.移栽采用灭菌的蛭石,再生苗移栽成活率达90%以上.采用根癌农杆菌C58C1介导的叶盘转化法进行‘小林静’的遗传转化试验,农杆菌OD600=0.5-0.6,侵染10 min后,将叶片外植体接种到MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5mg/L NAA的培养基中黑暗共培养2d,之后转接到附加10 mg/L硫酸卡那霉素和400 mg/L羧苄青霉素的分化筛选培养基中进行转化细胞的筛选,待长出抗性芽后转接至生根培养基中进行培养,最终建立了菊花品种‘小林静’的遗传转化体系. 相似文献
9.
目的:设计适用于Vero细胞微载体培养的化学成分明确无血清培养基。方法:以商品化的DMEM/F12合成培养基为基础培养基,应用Plackett—Burman实验设计和响应面分析法设计支持Vero细胞微载体培养的化学成分明确无血清培养基。结果:以细胞密度为评价指标,在单因素实验的基础上采用Plackett-Burman实验设计考察10种培养基添加成分对Vero细胞生长的影响,确定了3种对Vero细胞生长起明显促进作用的培养基添加成分,为胰岛素、血清素和腐胺。继而利用响应面法分析了这3种添加成分的最佳水平范围,设计了一种支持Vero细胞贴附培养的无血清培养基(VERO—SFM—A)。在Bellco搅拌式培养瓶中采用VERO-SFM.A和Cytodex1微载体培养Vero细胞,细胞密度由接种时的4×10^5cells/ml增加到培养6d后的22.3×10^cells/ml,细胞活力保持在96%以上。结论:VERO—SFM—A能够有效地支持Vero细胞在微载体表面固定化生长并达到较高的细胞密度,具有实际应用于Vero细胞微载体规模化培养的应用潜力。 相似文献
10.
南苜蓿组织和原生质体培养及转化试验 总被引:2,自引:0,他引:2
主要探讨南苜宿子叶和下胚轴外植体,子叶原生岳体培养中的器官发生及遗传转化。南苜蓿子叶和下胚细外植体培养在附加1AA0.5-1mg/L和细胞分裂素(BA或ZT)0.5-2mg/L的MS培养基上,在有当照的条件下诱导形成不定芽,进而再生成完整植株。子叶原生质体培养在附加2,4-D0.5mg/L和KT0.2mg/L的B5液体培养基中,细胞分裂频率可达30-41%,原生质全来源的愈伤组织在MSB培养基(M 相似文献
11.
利用紫花曼陀罗细胞悬浮培养转化外源对羟基苯甲醛合成天麻素,并应用多种色谱技术进行分离纯化,根据转化产物的理化性质和光谱数据分析鉴定结构。实验表明,紫花曼陀罗细胞成功将对羟基苯甲醛转化为天麻素(Ⅱ),同时也得到了由对羟基苯甲醛生成天麻素的转化中间体对羟基苯甲醇(Ⅰ)。在培养基中添加0.1mg/L的水杨酸能显著提高细胞对外源对羟基苯甲醛的糖基化率,而保持气升式发酵罐(25-L)罐内压力为低压(0.001MPa)也能提高细胞对外源对羟基苯甲醛的糖基化率。实验证明,紫花曼陀罗细胞悬浮培养能有效转化对羟基苯甲醛合成天麻素。 相似文献
12.
亚麻下胚轴离体培养和转化的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
报道了亚麻(Linum usitatissimum)的高频率植株再生和细胞转化。亚麻下胚轴切段培养在MSB分化培养基上,诱导分化出不定芽。最佳的激素组合是BA2mg/L+IAA0.5mg/L,分化频率可达97%。在附加BA1mg/L和NAA0.02mg/L的MSB培养基上,亚麻下胚轴外植体的不定芽分化频率也可达90%以上。用根癌农杆菌(Agrohacterium tumefaciens)感染亚麻下胚轴外植体,在含卡那霉素50mg/L的选择培养基上筛选获得卡那霉素抗性苗,并检测到GUS基因活性表达。表明它们是转化植株,转化频率约为2%。 相似文献
13.
14.
柞蚕蛹卵巢细胞的初代培养 总被引:2,自引:0,他引:2
采用MGM-448加20%胎牛血清作培养基对柞蚕蛹卵巢进行组织块培养,细胞可维持良好的生长状态达2个月之久。在此期间,细胞形态不一,且细胞聚集产生分化现象。本研究证明MGM—448培养基对柞蚕细胞原代培养来说是比较理想的培养基。 相似文献
15.
16.
按常规植物细胞培养技术获得的20天种龄的番木瓜(Carica papaya)愈伤组织,悬浮于分别含有0.3%酵母膏的MS_3-CM及B_5培养基中,于25℃、100 r╱min 进行振荡培养,测定细胞生长(根据细胞湿重)和过氧化氢酶活性的结果表明:1.在MS_3-CM培养基中,经过144小时的培养,番木瓜细胞达到最大生长量,然后逐步降低。细胞达最大量后,pH值逐步上升,过氧化氢酶开始大量产生(图1A)。2.在B_5培养基中,细胞生长迅速,84小时达到最大生长量,过氧化氢酶的产生与在MS_(?)—CM培养基中一样,同属于滞后型(图1B)。从两种培养的效 相似文献
17.
前列腺癌DU145细胞在普通培养基中培养至对数生长期,无血清培养基重悬细胞培养至形成球状体,以细胞三维(3D)培养和二维(2D)培养方法分离前列腺癌类干细胞,观察细胞球的形成及其生长情况,通过CCK-8细胞增殖实验和细胞划痕修复实验检测所分离细胞的增殖能力,结果显示前列腺癌DU145细胞在普通培养基中呈长梭形贴壁生长,无血清培养基培养72 h形成大量细胞球聚集体,细胞3D培养分离的细胞球的透明度和形态比2D培养分离的细胞好,3D培养分离细胞的增殖能力和划痕修复能力明显强于2D培养分离细胞.因此,细胞3D培养技术联合无血清培养基有利于前列腺癌干细胞的分离. 相似文献
18.
发根农杆菌A4菌株转化苜蓿悬浮培养物 总被引:6,自引:0,他引:6
将苜蓿无菌苗下胚轴切割后,在附加2mg/L2,4D的MS培养基上诱导愈伤组织。愈伤组织在附加05mg/L2,4D的SH培养基中悬浮培养。悬浮培养物在用于转化之前,用045mol/L甘露醇处理1h,然后用016mol/LCaCl2·2H2O洗涤两次。预处理后的悬浮培养物用SH培养基悬浮(10ml/g悬浮培养物),再加02ml农杆菌悬浮液,于25±2℃共培养2d。共培养的悬浮培养物洗涤后在附加05mg/L羧苄青霉素的无激素培养基上选择培养。悬浮培养天数、悬浮培养基激素组成和选择培养基种类明显影响转化频率。纸电泳分析表明70%的转化体可以合成农杆碱和甘露碱。染色体观察显示转化组织细胞存在严重的数目和结构变异 相似文献
19.
与在正常重力条件培养下的对照相比,经回转器水平回转处理的人参细胞鲜重和干重均增加,人参皂苷含量提高10%左右。在去Ca2 培养基上生长的人参愈伤组织细胞,经回转器水平回转3周后,人参皂苷含量约为正常重力条件下培养细胞的2倍。另外,在试验范围内,如果培养基中起始钙离子浓度越高,则其培养的人参细胞中人参皂苷含量越低。 相似文献
20.
火炬松(Pinus taeda L.)是我国亚热带和部分地区最重要的绿化和造林树种。它的生长周期长,杂合程度高,难以用常规的杂文进行品种改良。建立火世松的原生质抗体胚胎发生体系,有可能、进而以遗传转化为基础进行火炬松等针叶树的品种改良。本研究以湖南省绍阳市的火炬松成熟种子为材料,建立胚性细胞悬浮系。将其培养至对数生长期,用1%RS、2.5%和0.2%Y-23的酶混各液分离原生质体,活力达90%以上(Fig.1)。纯化原生质体,在再生培养基上培养2天后,细胞壁再生(Fig.2);6天后,(65%的原生质体第1次分裂(Fig.3);培养3周后,形成小细胞团(Fig.4);6周后,形成大细胞团(Fig.5);8周后,形成胚性胚柄细胞团(ESM)(Fig.6);10周后,形成早期体细胞胚(ESE)(Fig.7);12周后,形成后期体细胞胚(LSE)(Fig.8)。火炬松原生质体胚形成过程中的关键结构是ESM,ESE和LSE。它们形成的最佳基本培养基是1.25LP培养基。再生培养基中高浓度的BA和低浓度的肌醇有利于ESM的形成,但不利于ESE和LSE厮。再生培养基中高浓度的BA和低浓度的肌醇有利于ESM的形成。但不利于ESF和LSE的形成;反之,低的BA和高的浓度的肌醇不利于ESM的形成,但有利于ESE和LSE的形成。因此,用不同的再生培养基对火炬松原生质体培养物所形成的ESM,ESE和LSE进行分步培养可能更有利于火炬松原生质体胚胎发生效率的提高。 相似文献