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AFLP分子标记及其在植物育种上的应用 总被引:64,自引:0,他引:64
扩增酶切片段多态性(AmplifiedRstricitonfragmentpolymorphism,简称AFLP)是由Zabeau等1992年发明的一项新的DNA指纹技术,它结合了RFLP和PCR技术的特点,具有RFLP技术的可靠性和PCR技术高效性,其基本原理是对基因组DNA酶切片段的选择性扩增,AFLP扩增片段的谱带数取决于采用的内切酶及引物3′端选择碱基的种类数目和所研究基因组的复杂性,实验 相似文献
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DNA分子系统学在爬行动物中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
爬行动物因其在脊椎动物中具有承上启下的作用,对其进行系统学研究,了解它们的进化关系显得尤为重要。本文DNA杂交、DNA指纹、RFLP、RAPD及测序等五个方面对爬行动物的DNA分子系统学研究工作进行了综述,对其中的一些问题进行了讨论。 相似文献
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用RFLP和PCR—RFLP技术研究东北虎和华南虎线粒体DNA多态性 总被引:5,自引:0,他引:5
采用mtDNARFLP和PCRRFLP技术研究了东北虎和华南虎的mtDNA的多态性。在mtDNARFLP研究中,分离纯化了东北虎和华南虎肝、肾和心脏组织的mtDNA,用20种识别6碱基对的限制性内切酶消化,结果只有1种限制性内切酶(XbaⅠ)检测到多态性片段,其余19种限制性内切酶消化产生的限制性格局在东北虎和华南虎完全一致。在PCRRFLP研究中,用PCR技术分别扩增了东北虎和华南虎mtDNA的控制区(controlregion),用8种识别4碱基对的限制性内切酶分别对扩增产物进行消化,结果只有1种限制性内切酶(RsaⅠ)检测到多态性片段。mtDNARFLP及PCRRFLP的结果均提示东北虎和华南虎之间的遗传距离极小。这可能与下列因素有关:两者分布区间无天然隔离屏障;具有强扩散能力;近几百年才被相互隔离。 相似文献
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DNA分子标记在柑桔中的应用 总被引:3,自引:1,他引:2
DNA分子标记是最为理想的遗传标记 ,依其多态性检出所用的分子生物学技术 ,大致可分为Southem杂交技术为核心的分子标记和PCR技术为核心的分子标记。前者的代表性技术有RELP(restrictionfragmentlengthpolymorphism)和DNA指纹技术 (DNAfingerprintingtechniques)。后者的代表性技术有RAPD(randomamplifiedpolymorphicDNA)、SCAR(sequencecharac teristicamplifiedregion)… 相似文献
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一种提取果树叶片DNA的简便方法 总被引:10,自引:5,他引:10
植物DNA的提取是分子遗传学及遗传工程的根本前提。通常DNA提取方法应满足以下几个主要条件:(1)所得DNA具备理想的纯度,如RFLP技术对DNA纯度要求高,因为纯度高的DNA便于酶切及膜转移等操作,而对于涉及PCR扩增的技术,DNA提取则尤为注意样... 相似文献
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传标记及其在作物品种鉴定中的应用 总被引:35,自引:0,他引:35
本文评述了用于作物品种鉴定的形态标记(morphological markers)、细胞标记(cytological markers)、生化标记(biochemical markers)、分子标记(molecular markers)的优缺点。重点评述了分子标记在作物品种鉴定中的应用。文中除对蛋白质电泳指纹图谱--同工酶和贮茂蛋白(包括醇溶性蛋白、清蛋白、谷蛋白、球蛋白等)电泳产生的指纹图谱的应用外,较详细地介绍了近年来DNA指纹图谱技术;包括限制片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,简称RFLP)、随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,简称RAPD)、小卫星DNA(minisatellite DNA)、微卫生DANmicrosatellite DNA),简单重复序列间扩增(intersimple sequence repeats,简称ISSR),扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymor-phism,简称AFLP)以及CAPS(cleaved amplified polymorphic sequences)和SNPS(single mucleotide polymor-phisms)对作物品种鉴定和新品种登记,品种纯度和真实性的检验以及品种间亲缘关系的探讨和在分类研究中的贡献等。 相似文献
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AFLP标记及在植物中的应用 总被引:9,自引:0,他引:9
AFLP是 1 992年由荷兰Keygene公司Zabeau、Vos在PCR和RFLP的基础上发展起来的一种检测DNA多态性的新方法[1] ,并于1 993年获得欧洲专利局专利。与RFLP类似 ,AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。由于RFLP是以传统的Southern杂交为基础的 ,操作繁琐 ,对DNA多态性的检出的灵敏度不高 ,在连锁图上有很多大的空间区。随着PCR技术广泛应用 ,对分子标记技术的发展产生了巨大的推动作用。除了RFLP(限制性内切酶酶切片段长度多态性标记 … 相似文献
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耐力运动员及普通人群线粒体DNA调控区遗传多态性分析 总被引:13,自引:0,他引:13
目的:通过PCR技术对优秀耐力项目运动员以及普通个体的mtDNA调控区遗传多态性进行分析,以期发现与运动能力相关联的基因标记。方法:以单根毛发为检材,运用PCR技术分析中国优秀耐力性项目运动员(n=67),一般水平运动员(n=33)以及普通人群(n=20)的线粒体DNA调控区(D-Loop)的RFLP。结果:优秀耐力性项目运动员线粒体特定区域RFLP分布与普通人群至显著性差异。结论:一些在优秀运动 相似文献
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分子标记技术及其发展 总被引:11,自引:0,他引:11
认识到生物个体之间DNA序列差异并以此作为标记的分子标记技术的研究始于1 980年 ,之后随着分子生物学技术的发展 ,DNA分子标记技术也得到迅速发展 ,现在DNA标记技术已有数十种 ,它们被广泛应用于作物遗传育种、基因组作图、基因定位、植物亲缘关系鉴别、基因库构建、基因克隆等方面。本文仅就几类主要分子标记技术作一简单介绍。1 .基于分子杂交技术的分子标记技术1 .1 限制性片段长度多态性 (restrictionfrag mentlengthpolymorphism ,RFLP) RFLP是研究最早的分子标记技术 ,1 … 相似文献
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常用实验用近交系小鼠粒体DNA遗传变异的分析 总被引:5,自引:0,他引:5
应用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术,研究了分析了国内常用的实验用近交系小鼠线粒体DNA(mtDNA)的品种间遗传变异。PCR-RFLP分析发现,小鼠mtDNA的D-loop、tRNA^Met Glu Ile及ND3基因核酸序列,在46个限制性内切酶酶切位点上均无差异;用PCR-SSCP分析方法对这些小鼠mtDNA的高变异区D-Loop的5′及3′端作进一步分析,亦未发现品种间遗传变异。结合mtDNA具有的母系遗传方式的特点,这一结果提示:常用的实验用近交系小鼠形成中可能只有1种雌性血统起了作用。 相似文献
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影响籼稻DNA限制性片段长度多态性检测的因素分析 总被引:1,自引:0,他引:1
对窄叶青(籼稻)和京系17(粳稻)的RFLP进行了系统分析。结果表明,某种酶多态性检测能力与同时检测到此多态性的其余酶的数目之间存在极显著的正相关(r=0.962**)。由此推论,籼粳稻大部分RFLP可能来自大范围DNA的结构变化而不是碱基取代。cDNA克隆虽然具有高度的保守性,但却具有比基因组克隆更高的多态性检测能力。在实验使用的探针范围内,探针长度和检测到多态性无相关性。由探针检测到的多态性位 相似文献
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胡枝子属根瘤菌的多相分类研究 总被引:5,自引:0,他引:5
采用了数值分类、全细胞可溶性蛋白电泳分析、DNAG+Cmol%和DNA相关性的测定以及16SrDNAPCRRFLP分析等多相分类技术对来源于不同地区的16种寄主的胡枝子根瘤菌进行了系统的分类研究。数值分类的结果表明,在67%的相似性水平上,全部供试菌可以分为快生型根瘤菌和慢性型根瘤菌两大群,在80%的相似性水平上又可分为四个亚群。在此基础上,对各亚群的胡枝子根瘤菌进行了DNA相关性的测定,以进一步证实和确定它们的分类地位,并通过16SrDNAPCRRFLP分析对各亚群的系统发育关系进行了初步研究。 相似文献
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植物分子分类与鉴定综述 总被引:7,自引:0,他引:7
以高等植物为对象,首先从nDNA、cpDNA、mtDNA三方面对植物分子分类与鉴定的分子基础进行综述,然后阐述RFLP、RAPD、AFLP及SSR等分子分类方法的特点及应用。 相似文献
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斜茎黄芪根瘤菌的16S rDNA和23S rDNA PCR-RFLP比较分析 总被引:2,自引:0,他引:2
在表型性状数值分析和AFLP指纹图谱分析的基础上,选取54株斜茎黄芪根瘤菌的代表菌株及已知根瘤菌参比菌株,进行16SrDNA和23SrDNA的PCR-RFLP比较分析。结果表明斜茎黄芪根瘤菌具有极大的系统发育多样性,分别具有24个16SrDNA遗传图谱类型和22个23SrDNA遗传图谱类型,16SrDNA与23SrDNAPCR-RFLP聚类分析树状图谱有较好的一致性,但也存在一些差异。在对较大类群的划分上,它们的结果与表型性状数值分析结果有较好的一致性。将16SrDNA和23SrDNAPCR-RFLP分析 相似文献
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小麦K型及V型细胞质雄性不育系线粒体DNA的比较分析 总被引:8,自引:0,他引:8
采用RFLP和RAPD技术对具有相同核遗传背景的小麦K型不育系K149A,V型不育系V149A及相应保持系149B的线粒体DNA进行了比较分析。结果表明它们之间线粒体DNA的结构显著不同,atpA,atp9,coxⅡ,cob等线粒体功能基因有组织结构上的差异。 相似文献
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扩增片段长度多态性(AFLP)——一种新的分子标记技术 总被引:40,自引:0,他引:40
AFLP(扩增性片段长度多态性)是一种新的DNA分子标记。与RFLP、RAPD相比,AFLP具有在一次试验中可同时观察到大量的限制性片段的优点。本文阐述了AFLP的原理和方法,综述了AFLP目前在植物遗传育种研究中的应用进展,并对AFLP技术在植物遗传育种中的应用前景提出了初步设想。 相似文献
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在表型性状数值分析和AFLP指纹图谱分析的基础上,选取54株斜茎黄芪根瘤菌的代表菌株及已知根瘤菌参比菌株,进行16SrDNA和23SrDNA的PCR-RFLP比较分析。结果表明斜茎黄芪根瘤菌具有极大的系统发育多样性,分别具有24个16SrDNA遗传图谱类型和22个23SrDNA遗传图谱类型,16SrDNA与23SrDNAPCR-RFLP聚类分析树状图谱有较好的一致性,但也存在一些差异。在对较大类群的划分上,它们的结果与表型性状数值分析结果有较好的一致性。将16SrDNA和23SrDNAPCR-RFLP分析数据合并在一起进行分析时,得出26个综合遗传图谱类型和1个综合聚类分析树状图谱。很明显,16SrDNA与23SrDNA的合并,能够得出更可靠的系统发育结论。 相似文献
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玉米CMS材料线粒体DNA遗传多型性的研究 总被引:19,自引:0,他引:19
选用11×4=44个探针/酶组合,50个(10mer)随机序列引物对25种不同胞质来源的CMS玉米,5种正常胞质玉米线粒体DNA进行RFLP和RAPD研究。研究结果表明:(1)45%的探针/酶组合可检测到玉米线粒体DNA的多型性,共表现15种RFLP类型,其中S组CMS材料内有7种,正常胞质材料内有2种;80%的随机引物可检测到RAPD。(2)基于RFLP资料的聚类分析结果,可将30种胞质明确地划分为T、C、S、N4组,其结果与恢复专效性测定结果一致。其中pHJ2-7-1/BamHI的RFLP类型可成为利用RFLP技术进行胞质分组的鉴定体系。(3)“双”型胞质线粒体DNA常表现S+C胞质的RFLP图谱。 相似文献