Glycine—SDS—PAGE测定小分子多肽分子量

小分子多肽分子量的测定 ,目前多采用Ｔｒｉｃｉｎｅ -ＳＤＳ -ＰＡＧＥ系统[1～ 3 ] ,但系统中的Ｔｒｉｃｉｎｅ价格昂贵 ,加之电泳时间较长 ( 3～ 4ｈ) ,为此 ,作者经过实验摸索 ,建立了Ｇｌｙｃｉｎｅ -ＳＤＳ -ＰＡＧＥ测定小分子多肽的方法。1　材料和方法表 1　制胶配方成分分离胶 (ｍｌ)浓缩胶 (ｍｌ)分离胶单体母液 1 3 3 -浓缩胶单体母液 -0 23 2ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ 1 3 3 -(ｐＨ8 8)0 5ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ -0 3 8(ｐＨ6 8)尿素 1 44ｇ -Ｈ2 Ｏ 0 40 910 %ＳＤＳ 40 μｌ 15 μｌ10 %ＡＰＳ 2 5 μｌ 12 μｌＴ…     

用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量

测定蛋白质分子量的方法有:氨基酸组成分析、渗透压计算、超离心沉降平衡和葡聚糖凝胶过滤等。这些方法各有独特之处。但也都有一定的局限性。 聚丙烯酰胺凝胶电泳方法具有较好的分离效果,样品不易扩散,热稳定性强,机械强度大,     

腮腺炎病毒的结构多肽——分子量的电泳测定

腮腺炎病毒感染鸡胚后收集尿液和羊水,通过差异离心和蔗糖密度梯度离心提纯宥毒。经SDS—PAGE分离,以铬银染色法结合溴化乙锭和考马斯亮兰染色,发现病毒含有13种结构多肽,分子量分别为79,74,70,65,61,59,56,53,50,45,41,34和31 x103d。     

SDS—PAGE电泳对小分子多肽的分析

对一些小分子多肽进行电泳分析时,在固定,染色,脱色过程中极易扩散丢失;即使用常规尿素－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ系统测定寡肽分子量,银染色后小于８ＫＤａ的标准品也无着色带显示。     

SDS盘电泳

一、特点 作为蛋白质分子量的测定;有超离心之沉淀平衡法及沉降速度法,凝胶过滤法,以及本章之凝胶电泳法。前二者,直接测定分子的重量,原理也比较清楚,但需要较贵的设备,而且计算结果时需要许多假定的变数,由于假设之方式不同,所得之分子量数,就发生差异是其缺点。后二者是测定分子大小的间接方法,原理尚不十分清楚,但用简单设备与短时间就能得到结果,而且所需之材料不需要特别纯净。本章所述之凝胶电泳法所得之结果较分子     

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染色新方法的研究

通过几种金融盐溶液对SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳染色的实验表明,0.25mol/L的CaCl2和MgCl2溶液能够对蛋白质进行有效的染色,经这2种溶液染色的蛋白质都能够从凝胶中洗脱回收。尤其是CaCl2法灵敏度更高,而且蛋白质条带形成之后也十分稳定,所以在运用制备电泳纯化蛋白质时这种新的染色方法较适用。     

电泳用水平聚丙烯酰胺干胶研制成功

聚丙烯酰胺凝胶电泳是快速低廉的生化分析技术。由于凝胶具有三维网状结构,电泳时兼具有分子筛效应和电荷效应,从而比其他电泳的分辨力大为提高,并在此基础上又发展了ＳＤＳ聚丙烯酰胺电泳、梯度胶电泳和等电聚焦聚丙烯酰胺电泳等技术。除大量用于各种蛋白质分析、分型...     

微量聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳

聚丙烯酰胺凝胶作为电泳分离的支持物于1959年首次得到应用,而聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳则是于1964年发展起来的。同年在分离脑蛋白时,首先应用了微量聚丙烯酰胺凝胶电泳。1965年有人将毛细管用于微量盘状电泳技术并报道了毫微克(ng)蛋白的分离及定量。     

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳纤维蛋白自显影法检测不同分子量的纤溶酶原激活剂

ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）纤维蛋白显影方法是经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ将不同分子量的纤溶酶原激活剂（ＰＡ）分开,然后再转溶纤维蛋白板使之产生溶带而检测ＰＡ物质活性及分子大小的方法。此法与Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹方法比具有检测更简便、灵敏、快速的特点,且是活性检测,但其分子量分析精度不如Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法。本研究用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纤维蛋白自显影方法对本室表达的重组组织型－ｐＡ（ｒｔ－ＰＡ）及突变体Ｎｌｌ７Ｑ／Ｎｌ８４Ｑ／△（Ｋ２９６——Ｇ３０２）及标准尿激酶（ＵＫ）和ｒｔ－ＰＡ进行了分析鉴定。     

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量

Shapiro于1967年首次报告了SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳系统,根据他对11种蛋白质电泳获得的结果,发现蛋白质(或亚基)分子量的对数与蛋白质分子的迁移率之间有直线关系。Weber等人的深入研究,肯定了Shapiro的发现,确立了SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量的新方法。 Shapiro和Weber所应用的SDS-凝胶电泳缓冲系统为连续的磷酸盐系统,后来     

鹿科动物血清蛋白质的SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

本文对鹿科动物(黑鹿、白唇鹿、黇鹿、白黇鹿、麋鹿、东北马鹿、甘肃马鹿、中亚马鹿、日本梅花鹿、东北梅花鹿、狍)的2个亚科、4个属、7个种进行了血清蛋白质的SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定。结果表明,鹿的血清蛋白在该种电泳方法中,共可分辨出分子量在1.24—9.5×10~4范围内的53个蛋白区带。其中最少的是白唇鹿,黇鹿为24条,最多的是日本梅花鹿为35条。     

SDS电泳半干新技术

在SDS薄层凝胶水平电泳中应用半干技术缩短了电泳时间,提高了分辨率,简化了操作,免除经常大量配制电极缓冲液的麻烦．用滤纸条代替电极缓冲液和纸桥或代替凝胶条的新技术更方便．     

疫毒蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳

对北京、河北、青海、山东、湖北、广东等地不同寄主上收集的,属于Phytophthora capsici, P. colocasiae, P. heveae, P. infestans, P. melonis P. nicotianae var. nicotianae和P.nicotianae var.parasitica 7个种和变种的17株菌的蛋白质,进行了聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳的分析和比较,经多批次试验,7个种和变种各自恒定地呈现典型的蛋白质图谱,显示出种间的差异。其中P.infestans占11株,它们虽采自不同地区和寄主,又分属5个生理小种,经多次电泳,电泳图谱基本相同,但不同菌株存在一些差异。同一株菌,培养条件对电泳图谱影响不大,不论是培养在含苹果酸盼培养基上,还是培养在延胡索酸培养基上,电泳图谱基本一致,只是电泳材料必须新鲜。     

疫霉蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳

对北京,河北、青海、山东、湖北、广东等地不周寄主上收集的,属于 Phytophthoracapsici,P．Colocasiae,P．Heveac,P．Infestans, P．Melonis P．Nicotianac var. nicotianae 和 P．Nicotianae var. parasitica 7个种和变种的17株菌的蛋白质,进行了聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳的分析和比较,经多批次试验,7个种和变种各自恒定地呈现典型的蚤白质图谱,显示出种间的差异。其中 P. infestans 占11株,它们虽采自不同地区和寄主,又分属5个生理小种,经多次电泳,电泳图谱基本相同,但不同菌株存在一些差异。同一株菌,培养条件对电泳图谱影响不大,不论是培养在含苹果酸的培养基上,还是培养在延胡索酸培养基上,电泳图谱基本一致,只是电泳材料必须新鲜。     

豆血红蛋白的分离——聚丙烯酰胺凝胶板电泳方法

豆科植物根瘤的红色素是一种类似于血红球蛋白,Virtanen等把它定名为豆血红蛋白(leghemoglohin用缩写号Lb代表)。Lb存在于植物界中,     

防止SDS-聚丙烯酰胺凝胶平板电泳中出现的异常现象

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳灵敏度高,分辨率高,广泛应用于医学,生物化学,分子生物学,免疫,遗传工程等方面。它要求有严谨的操作技术,在电泳过程中如某个环节掌握得不好,就很难得到理想的结果。下面介绍几年来我们在进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时常出现的一些异常现象以及预防的措施。 1、样品处理时,通常是用Tris-HCl pH6.8的缓冲液,要使样品均一的进入分离胶,必须确保缓冲液有精     

如何正确估计蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的样品加样量

在做蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）时,使用的仪器设备、做胶和制样的方法都差不多,但结果却五花八门,相去甚远。有的条带清新,背景干净,令人赏心悦目;有的却条带模糊、肥瘦不均,其貌不扬;有的甚至歪歪扭扭,画成了地图。看来并不困难的操作,结果为什么会有如此之大的区别？除了试剂质量、制胶过程和跑胶的具体细节外。失败的主要原因往往在于样品制备的缺陷和加样量不适当。只有在样品制备良好、加样量又适当的情况下,     

SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别口腔二氧化碳噬纤维菌的研究

细菌的全细胞蛋白的 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳是近年来国内外广泛采用的一种有效的鉴别细菌的方法。二氧化碳噬纤维菌(Capnocytophage)是近年来从人牙菌斑中分离的革兰氏阴性兼性厌氧的新菌属。文献报道该菌属包括三个种:黄褐二氧化碳噬纤维菌(c.orchraea),生痰二氧化碳噬纤维菌(c.sputigena)和牙龈二氧化碳噬纤维菌(c.gingivalis)。本实验采用 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别二氧化碳噬纤维菌的三个菌种,为口腔细菌的鉴定建立一个准确而经济的方法。1.细菌全细胞蛋白的提取用0.02MPBS 液分别收集在 BHI 血琼脂上富集的二氧化碳噬纤维菌标准菌株的菌落,离心收集菌细胞沉淀,TE 缓冲液溶解沉淀,分两种方法破碎细菌。一种是加入 SDS 并沸水浴破碎细菌;另一种是超声震荡破碎细菌。细菌破碎后,离心收集上清液,贮于-20℃。2.细菌全细胞蛋白的电泳实验采用垂直板状电泳,凝胶浓度7.5%,交     

防止SDS-聚丙烯酰胺凝胶平板电泳中出现的异常现象

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳灵敏度高,分辨率高,广泛应用于医学,生物化学,分子生物学,免疫,遗传工程等方面.它要求有严谨的操作技术,在电泳过程中如某个环节掌握得不好,就很难得到理想的结果.下面介绍几年来我们在进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时常出现的一些异常现象以及预防的措施. 1.样品处理时,通常是用Ttis-HCI pH6.8的缓冲液,要使样品均一的进入分离胶,必须确保缓冲液有精