c-FLIP：外源性细胞凋亡途径的调控器

细胞型Fas相关死亡区域蛋白样白介素-1!转换酶抑制蛋白(FADD-likeinterleukin-1-"convertingenzymeinhibitoryprotein,c-FLIP),是一类含有死亡效应结构域(thedeatheffectordomain,DED)的天然存在的caspase抑制蛋白,在病毒、真核生物、哺乳动物等物种中广泛存在.近年发现,c-FLIP参与了细胞凋亡的调控,其过量表达能抑制Fas、TRAIL-R等死亡受体介导的细胞凋亡.随着对c-FLIP作用机理及其分子调节机制的深入研究,发现c-FLIP具有多种生物学功能,并与多种疾病的发生、发展相关.     

反义寡核苷酸抑制Fas表达用于治疗肝脏疾病

Fas(CD95)是肿瘤坏死因子受体(TNFR)家族成员。在肝脏中,Fas激活的凋亡信号可能对调节肝细胞动态平衡起作用。但在很多炎症情况下,肝脏Fas的表达水平增高。在多种临床肝病发展过程中,肝损伤与Fas表达和细胞凋亡相关。因此通过对Fas表达进行调控,从而控制肝脏中过量和异常的细胞凋亡,是一种极具潜力的保护肝脏的治疗途径。反义寡核苷酸技术已被广泛用于在许多组织中抑制特定基因的表达。用反义寡核苷酸抑制肝脏Fas表达,可以保护动物避免由细胞凋亡而造成的肝损伤以及爆发性肝炎死亡。讨论了Fas在几种肝脏疾病中的病理作用和利用反义寡核苷酸技术阻止和控制这类肝脏疾病的病变。     

c-FLIP的siRNA促进TRAIL诱导的癌细胞凋亡的研究

肿瘤凋亡因子TRAIL(TNF-related apoptosis-inducing ligand)是TNF家族的成员之一,其不论在体内还是体外均可选择性诱导癌细胞凋亡。初期临床试验已经证实TRAIL或死亡受体激动剂抗体在癌症治疗中的安全性。另外,也有研究表明,许多癌细胞对TRAIL有耐受性,究其原因是凋亡通路中抗凋亡蛋白c-FLIP和IAP等的阻遏。更多研究发现,si RNA靶向抑制c-FLIP的同时结合广谱IAP拮抗剂AT406,进一步提高了TRAIL诱导的癌细胞凋亡,因此联合使用c-FLIP抑制剂或拮抗剂、IAP拮抗剂以及TRAIL或死亡受体激动剂抗体这三类药物可能是理想的抗癌新方法。综述了c-FLIP的发现、结构、功能和其参与死亡受体介导的信号通路,以及多种si RNA应用于c-FLIP以提高癌细胞对TRAIL敏感性和si RNA条件优化中的一些进展,并讨论了目前癌症临床治疗中si RNA的应用前景及存在的问题,最后提出较安全有效的基于TRAIL介导的癌症治疗新方法。     

Fas介导细胞凋亡及相关免疫调节作用

Fas/CD95作为肿瘤坏死因子(TNF)/神经生长因子(NGF)分子受体超家族成员,在细胞凋亡及体内免疫调节方面发挥重要的作用。细胞在接收到经Fas传递的凋亡信号后,主要经胞浆caspase和线粒体两种途径引发细胞程序性死亡。Fas介导T/B淋巴细胞的凋亡,在这些细胞的早期分化发育和维持机体免疫平衡中起主要作用。CTL和NK等杀伤细胞也通过Fas-FasL介导的细胞凋亡而发挥对靶细胞的杀伤效应。因此,Fas-FasL系统在肿瘤、自身免疫性疾病、艾滋病等疾病过程中发挥重要的作用。     

凋亡信号调节激酶1对细胞凋亡的调节作用

细胞存活与凋亡之间的平衡是多细胞生物正常发育与稳态的关键。细胞凋亡是受多种因素高度调控的细胞程序性死亡过程。凋亡信号调节激酶 1 (ASK1 )是促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶家族的成员之一 ,它分别激活SER1 JNK和MKK3 MKK6 p38途径 ,在细胞因子及应激诱导细胞凋亡过程中起着关键作用。TNF受体和Fas信号转导系统在抗凋亡与促凋亡过程中发挥重要作用 ,其中包括TNF受体Ⅰ相关死亡域蛋白 (TRADD)、Fas相关死亡域蛋白 (FADD)等多种蛋白因子。细胞色素C是线粒体依赖性死亡信号 ,受Bcl 2家族蛋白的调节。反应性氧化合物的氧化激活使硫氧还蛋白 (Trx)氧化 ,并与ASK1分离 ,从而激活ASK1造成细胞凋亡。总之 ,许多促凋亡与抗凋亡因子组成复杂的、相互拮抗的机制。在信号转导的各种不同的关卡上 ,这些因子的平衡作用最终决定细胞的生与死。     

hDaxx与细胞肿瘤抑制子p53在体内外的相互作用

与急性早幼粒细胞性白血病蛋白(promyelocytic leukemia protein,PML)在体内相互作用共定位于细胞核PML致癌结构城(PML oncogenic domains,PODs)的人Daxx(human Daxx,hDaxx),能结合Fas死亡结构域诱导细胞凋亡.细胞肿瘤抑制子p53抑制细胞及病毒转录,提高细胞内Fas的表达并调节细胞凋亡.为了探索hDaxx与p53在诱导细胞凋亡中有无相互作用及其作用效果,利用酵母双杂交体系测定发现p53通过C端与hDaxx结合,共免疫沉淀反应及Western blot结果显示hDaxx与p53能在体内外直接结合.hDaxx与p53结合并发生相互作用可能对细胞周期有一定的调节作用.     

Fas／Fas L调亡作用机制

Fas(又称APO-1,CD95)及其配体Fas L,诱导编程性死亡的细胞表面分子,参与机体免疫调节。本文主要讨论了Fas/Fas L 相互作用诱导细胞凋亡的可能机制,包括表达调控,特异结合蛋白,蛋白水解链等。     

人脑星形细胞瘤中p53，Fas/FasL 的表达及其与凋亡关系的研究

目的:探讨细胞凋亡在星形细胞瘤中的作用及其与p53、Fas和Fas配体(Fas ligand,FasL)的关系。方法:对43例星形细胞瘤的标本分别进行HE染色,TUNEL及免疫组化分别标记p53,Fas和FasL。结果:高级别肿瘤和低级别肿瘤间的凋亡无显著差异(P>0.05)。高级别星形细胞瘤的p53,Fas和FasL的表达均显著高于低级别肿瘤(P均<0.05)。结论:突变型p53可作为评价星形细胞瘤生物学行为的参考指标。与低级别星形细胞瘤相比,高级别肿瘤中的细胞凋亡受到了抑制,且Fas与FasL的过表达对细胞凋亡可产生明显影响。     

c-FLIP在DATS诱导入胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用

目的:探讨二烯丙基三硫(diallyl trisulfide,DATS)诱导入胃癌SGC-7901细胞凋亡及凋亡过程中c-FLIP的变化及意义.方法:采用MTr,westem-blot和细胞免疫组化分别检测DATS对SGC-7901细胞的增殖抑制率及c-FLIP的表达情况.光学显微镜现察凋亡形态,流式细胞术检测凋亡率.结果:MTT结果显示,不同浓度DATS(6,8,10,12,14,16mg.L~(-1)DATS处理SGC-7901细胞24,48小时后,生长抑制率分别为20.4%-79%和36%-90%,DATS抑制作用随浓度及时间逐渐增强(P<0.05).细胞免疫组化和western-blot显示:9.5mg..L~(-1)DATS处理SGC-7901细胞24,48小时后,与对照组相比,c-FLIP的表达下调(P<0.05).光学显微镜:通过9.5mg..L~(-1)DATS作用后24,48小时后,胃癌细胞出现了凋亡形态学改变.流式细胞术检测:经过9.5mg..L~(-1)DATS处理SGC-7901细胞24,48小时后,细胞凋亡率逐渐升高.结论:DATS促进SGC-7901细胞凋亡的机制可能与抑制c-FLIP蛋白的表达有关.     

Fas/Fas L 凋亡作用机制

Fas(又称APO-1,CD95)及其配体Fas L,诱导编程性死亡的细胞表面分子,参与机体免疫调节.本文主要讨论了Fas/Fas L 相互作用诱导细胞凋亡的可能机制,包括表达调控,特异结合蛋白,蛋白水解链等.