新型高效微生态制品的研制

正交实验结果表明 ,4%淀粉水解液 ,10 %酵母提取液 ,2 0 %豆水解液 ,9%肝汤为双歧联菌株混合培养的最佳促生因子配方。经此优化培养基混合培养所得的双歧联菌株 ,制成冻干粉后 ,采用微囊化技术包裹成双歧杆菌微胶囊 ,其耐酸性强 ,肠溶性好 ,保存期长 ,由此可制得一系列新型高效微生态制品。     

双歧杆菌包埋保存技术工艺研究

采用一种全新的思路和方法,从将双歧杆菌活菌完全隔绝空气和降低其对温度的敏感性出发,运用制备微囊的方法,采用一种药用成膜材料,将包埋与冷冻干燥有机结合起来,在冷冻干燥的同时迅速在双歧杆菌活菌体周围形成一层类似微囊的保护膜,即将双歧杆菌活菌体包埋在保护膜内,从而达到减少甚至避免菌体冻干损伤,提高活菌存活率和收率,延长活菌常温保存期,提高活菌常温稳定性的目的。同时,这种包埋保存技术完全去除了常规冻干辅料——脱脂奶粉,能有效减少冷冻干燥菌粉的吸湿性,更利于活菌保存。用双歧杆菌包埋保存技术制备出的冻干菌粉,其含菌量比用常规冻干保护剂作冻干辅料的冻干菌粉高几百亿个／克,双歧杆菌活菌在37℃的保存期达四个月(相当于常温下保存一年以上),有效地解决了双歧杆菌活菌制剂常温保存期短的技术关键问题。     

双歧杆菌对腹腔巨噬细胞ERK1/2蛋白激酶通道的影响

目的探讨双歧杆菌对巨噬细胞。ERK1／2蛋白激酶通道的调控。方法收集SD大鼠腹腔巨噬细胞,提取细胞浆蛋白及核蛋白,采用Western印迹分析双歧杆菌对巨噬细胞ERK蛋白激酶水平的影响。结果双歧杆菌呈浓度依赖性诱导巨噬细胞ERK1／2的活化。10^3／ml的双歧杆菌即可增加ERK1／2磷酸化。用10^3／ml的双歧杆菌刺激巨噬细胞,ERK1／2磷酸化30min达到高峰。特异性ERK蛋白激酶抑制剂PD98059能显著降低双歧杆菌诱导的巨噬细胞ERK1／2的活化。结论双歧杆菌可以通过ERK蛋白激酶通道调控巨噬细胞。     

双歧杆菌NQ1501双层微胶囊制备及其特性研究

目的提高双歧杆菌NQ1501对环境的耐受性。方法采用流化床底喷工艺,以蔗糖、麦芽糊精、海藻糖和改性淀粉为内层壁材,聚丙烯酸树脂为外层壁材制备双歧杆菌NQ1501微胶囊,并对制得微囊进行评价。结果制得4种双歧杆菌NQ1501微胶囊均具有较好的耐酸和肠溶能力,25℃贮存6个月后对照菌粉存活率为4.8%,采用4种不同内壁材的微胶囊存活率分别为蔗糖28.6%,麦芽糊精45.7%,海藻糖38.9%,改性淀粉55.2%。结论采用该制备工艺制得双歧杆菌NQ1501微胶囊具备较好的耐酸性、肠溶性和常温保存稳定性。     

成都地区母乳双歧杆菌对婴儿肠道双歧杆菌构建的影响

目的 观察不同喂养方式婴儿肠道双歧杆菌的构建规律，初步探索母乳双歧杆菌与婴儿肠道双歧杆菌之间的相关性。方法 在四川大学华西第二医院纳入57对母婴志愿者，根据喂养方式分为母乳（BF）组（n=31）和混合喂养（MF）组（1月龄内添加奶粉时间>8 d,n=26），收集产妇产后0天、第30天的母乳，以及婴儿出生后0天、第7天、第30天的粪便。采用实时荧光定量PCR测定母乳和婴儿粪便中双歧杆菌属、角双歧杆菌（B. angulatum）、链双歧杆菌（B. catnulatum）、齿双歧杆菌（B. dentium）、短双歧杆菌（B.breve）、两歧双歧杆菌（B. bifidum）、长双歧杆菌长亚种（B. longum subsp. longum）、长双歧杆菌婴儿亚种（B.longum subsp. infantis）及青春双歧杆菌（B. adolescentis）的丰度。观察2组婴儿肠道双歧杆菌0―7―30天的构建规律；分析母乳双歧杆菌与婴儿肠道双歧杆菌之间的相关性。结果 0―7―30天2组婴儿肠道双歧杆菌构建过程存在差异。母乳双歧杆菌与婴儿肠道双歧杆菌存在相关：0 d时，BF组母乳B. a...     

乳酸菌微囊化工艺的初步研究

目的 对保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌的微囊化工艺进行摸索。方法 采用喷雾干燥方法。结果 以Ｃ胶（１３．３ｍｌ）＋Ｂ胶（２０ｇ）微囊化对乳酸菌的保护效果较好,菌体存活率达３４．６％,而Ｃ胶（７５ｍｌ）＋Ａ胶（５０ｇ）微囊化对乳酸菌的保护效果最佳,菌体存活率７８％,冷冻干燥工艺结合微囊化技术,可获得较高存活率的乳酸菌活性。结论 微囊化技术可提高菌体的抗热性。     

双歧杆菌表达ETEC CFA／I的免疫电镜定位分析

目的研究双歧杆菌表达的CFA／I在细胞中的分布。方法将培养8～10h的重组双歧杆菌固定后制作电镜切片，镜检合格后用镍网捞取3-5个切片与金标抗体作用，镜检CFA／I在双歧杆菌中的表达分布。结果自制的胶体金颗粒均匀，与抗体结合后能够示踪CFA／I在双歧杆菌中的表达分布。结论双歧杆菌表达的CFA／I主要集中在靠近细胞膜的周质腔一侧，利于向外分泌和释放。     

双歧杆菌的开发应用

双歧杆菌的开发应用曹虎（江苏省东海县教育局２２２３０）近年来，各国科学家对双歧杆菌的研究逐渐深人，发现了它与肠道生理共生菌的一些新功能，并迅速在食品和医药工业中进行生物工程开发，取得了令人瞩目的进展。互双歧杆菌开发现状１．回双歧杆菌因子的开发与应用微...     

健康动物肠道正常菌群的分离与鉴定

本文采用多种选择培养基,从健康动物猪、鸿、兔、鱼肠道中分离培养出２２株正常菌群,经过菌落形状、革兰染色、美兰染色镜检及生化反应,初步鉴定为链球菌８株、孔杆菌２株、双歧杆菌４株、芽胞杆菌５林、酵母菌３株。此为优选菌种、制备微囊及生产生态制剂等奠定了良好的基础．     

双歧联菌株微胶囊制剂的改进

目的：提高微胶囊制剂的安全性。方法：采用ESM2为囊材,代替原用的ESM1。同时以95％乙醇代替丙酮作为囊材溶剂。结果：经实验确定了ESM2微囊化的最佳浓度为8％,并进一步确定了复合囊材中各种辅料的添加量以及微囊化操作条件。结论：在上述优化条件制备的双歧联菌株微胶囊具有良好的耐酸性和肠溶性。     

双歧因子对双歧杆菌增殖的影响

应用含有不同浓度的双歧因子(微维乐)的培养基对双歧杆菌进行了定性、定量观察。其结果表明,微维乐对双歧杆菌有明显的促进作用;在双歧杆菌制剂的生产过程中,添加一定量的微维乐,不仅可以提高双歧杆菌收率,而且还可以缩短菌种发酵时间。最佳添加量为1.5%,最佳发酵时间为1.5 h。     

双歧杆菌防治鼠伤寒沙门菌感染的实验研究

目的　以小鼠为模型,研究双歧杆菌在体内对鼠伤寒沙门菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ,ＳＴＭ） 感染的防治作用。方法　分别用大剂量悉复欢、Ｂ．ｂｉｆｉｄｕｍ 、生理盐水（ＮＳ） 给三组小鼠灌胃,再用ＳＴＭ 攻击,观察小鼠经上述不同处理前后肠道双歧杆菌数量和ＳＴＭ 攻击后粪便ＳＴＭ 培养阳性率,阳性标本ＳＴＭ 分离值及小鼠ＳＴＭ 感染率;同时用双歧杆菌、悉复欢、双歧杆菌加悉复欢分别治疗ＳＴＭ 感染的小鼠,观察并比较疗效。结果　１． 大剂量悉复欢使用可使小鼠肠道内双歧杆菌明显降低,而双歧杆菌灌胃则肠道双歧杆菌明显增多。双歧杆菌灌胃的小鼠粪便ＳＴＭ培养阳性率、阳性粪便ＳＴＭ 值明显低于用大剂量悉复欢和ＮＳ 的小鼠,小鼠ＳＴＭ 感染发病率也明显较低。２． 对于ＳＴＭ 感染鼠,双歧杆菌与悉复欢联合治疗效果最好。结论　１． 双歧杆菌在体内对ＳＴＭ 有拮抗作用;能预防和减少ＳＴＭ 感染发生;２． 在ＳＴＭ 感染时,先用悉复欢,再用双歧杆菌可以达到预期疗效,双歧杆菌对鼠伤寒沙门菌感染有辅助治疗作用。     

海藻糖对双歧杆菌DM8504菌株冷冻干燥保护效果的研究

本文就海藻糖对ＤＭ８５０４双歧杆菌的冻干保护效果进行了研究,考察了海藻糖浓度、保护剂溶液与菌泥混合时间对ＤＭ８５０４冻干存活率的影响,结果证实该保护剂对ＤＭ８５０４双歧杆菌有良好的冻干保护效果,优于其它保护剂。     

Kinetic analysis of bifidobacterial metabolism reveals a minor role for succinic acid in the regeneration of NAD+ through its growth-associated production

Several strains belonging to the genus Bifidobacterium were tested to determine their abilities to produce succinic acid. Bifidobacterium longum strain BB536 and Bifidobacterium animalis subsp. lactis strain Bb 12 were kinetically analyzed in detail using in vitro fermentations to obtain more insight into the metabolism and production of succinic acid by bifidobacteria. Changes in end product formation in strains of Bifidobacterium could be related to the specific rate of sugar consumption. When the specific sugar consumption rate increased, relatively more lactic acid and less acetic acid, formic acid, and ethanol were produced, and vice versa. All Bifidobacterium strains tested produced small amounts of succinic acid; the concentrations were not more than a few millimolar. Succinic acid production was found to be associated with growth and stopped when the energy source was depleted. The production of succinic acid contributed to regeneration of a small part of the NAD+, in addition to the regeneration through the production of lactic acid and ethanol.     

双歧杆菌的分子生物学研究进展

双歧杆菌以其重要的生理功能在近几年成为研究的热点,其分子生物学的研究对它的应用具有重要意义。本文筒述了双歧杆菌的特性及生理功能,重点综述了近年来有关双歧杆菌的基因操作、分类鉴定、表面分子结构和抗肿瘤作用方面的研究进展。     

双歧杆菌对窒息新生儿红细胞免疫功能的影响

目的 :研究双歧杆菌活菌制剂对窒息新生儿红细胞免疫功能的影响。方法 :窒息新生儿 38例随机分为金双歧治疗组 (简称治疗组 ) 2 0例和非金双歧治疗组 (简称对照组 ) 1 8例。于生后 2 4h内采血检测红细胞C3b受体花环率 (E C3bRR)和红细胞免疫复合物花环率 (E ICR) ,随后予以脱水、止惊等常规治疗 ,治疗组加金双歧 (双歧杆菌活菌制剂 )口服 7d ,并于第 7～ 8天各组再次抽血进行上述检测。结果 :生后第 1天两组新生儿E C3bRR和E ICR差异无显著性 (P >0 0 5) ;7～ 8d时治疗组E C3bRR为 (1 9 2 0±4 1 2 ) %显著高于对照组 (1 2 2 7%± 3 63 % ,p <0 0 5) ,E ICR为 (1 1 53± 3 1 8) %显著低于对照组(1 5 40 %± 3 0 2 % ,p <0 0 5)。 结论 :双歧杆菌可使红细胞免疫功能上调 ,从而增强窒息新生儿的抗感染能力和减轻脑的缺血性损伤     

双歧番茄醋的实验研究

目的以番茄为主要原料,对双歧杆菌和醋酸杆菌共同发酵研制双歧番茄醋的工艺进行研究。方法通过正交试验筛选最适工艺。结果双歧番茄醋的最终醋酸度为27 g/L,含双歧杆菌总菌为1.9×1011CFU/mL,5 d内双歧杆菌活菌为5.5×107CFU/mL。双歧番茄醋棕黄色,光泽度好,有成熟番茄香味,入口酸甜适中。结论双歧杆菌与醋酸杆菌在可以番茄汁中共生,此方法制备双歧番茄醋可行。     

Quantitative real-time PCR assays to identify and quantify fecal Bifidobacterium species in infants receiving a prebiotic infant formula

A healthy intestinal microbiota is considered to be important for priming of the infants' mucosal and systemic immunity. Breast-fed infants typically have an intestinal microbiota dominated by different Bifidobacterium species. It has been described that allergic infants have different levels of specific Bifidobacterium species than healthy infants. For the accurate quantification of Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium dentium, Bifidobacterium infantis, and Bifidobacterium longum in fecal samples, duplex 5' nuclease assays were developed. The assays, targeting rRNA gene intergenic spacer regions, were validated and compared with conventional PCR and fluorescent in situ hybridization methods. The 5' nuclease assays were subsequently used to determine the relative amounts of different Bifidobacterium species in fecal samples from infants receiving a standard formula or a standard formula supplemented with galacto- and fructo-oligosaccharides (OSF). A breast-fed group was studied in parallel as a reference. The results showed a significant increase in the total amount of fecal bifidobacteria (54.8% +/- 9.8% to 73.4% +/- 4.0%) in infants receiving the prebiotic formula (OSF), with a diversity of Bifidobacterium species similar to breast-fed infants. The intestinal microbiota of infants who received a standard formula seems to resemble a more adult-like distribution of bifidobacteria and contains relatively more B. catenulatum and B. adolescentis (2.71% +/- 1.92% and 8.11% +/- 4.12%, respectively, versus 0.15% +/- 0.11% and 1.38% +/- 0.98% for the OSF group). In conclusion, the specific prebiotic infant formula used induces a fecal microbiota that closely resembles the microbiota of breast-fed infants also at the level of the different Bifidobacterium species.     

一株具降胆固醇功能乳酸菌的机制研究

目的对动物双歧杆菌SQ-0001的体外环境耐受性及其降胆固醇作用进行研究。方法用邻苯二甲醛法对pH 3.0和0.3%牛胆酸钠有一定耐受性的动物双歧杆菌SQ-0001的体外降胆固醇机制进行了研究。结果动物双歧杆菌SQ-0001对pH 3.0及0.3%胆盐环境具有一定的耐受性;该菌在胆盐浓度为0.2%,培养时间为24 h时,胆固醇脱除率最高,达到91.59%;该菌降胆固醇的作用主要以吸收为主,吸收率达到63.87%,其次是降解率,为23.81%。结论动物双歧杆菌SQ-0001的环境耐受能力良好,具有很好体外降胆固醇作用,该菌株可以作为日后降胆固醇的潜在益生菌。     

爱灵生乐（2036）螺旋藻双歧胶囊对抗生素相关性腹泻小鼠的治疗作用

目的采用盐酸林克霉素诱发小鼠相关性腹泻模型,观察螺旋藻、婴儿型双歧杆菌及其混合物爱灵生乐（2036）螺旋藻双歧胶囊（胶囊内容物,含婴儿型双歧杆菌、螺旋藻,下同）对抗生素相关性腹泻小鼠的治疗作用。方法经口投予盐酸林克霉素0.15 g/（d.鼠）,连续3 d,然后经口分别给予螺旋藻、双歧杆菌及爱灵生乐（2036）螺旋藻双歧胶囊1.66 g/（kg.b.w）,连续5 d。结果经口投予螺旋藻、婴儿型双歧杆菌及爱灵生乐（2036）螺旋藻双歧胶囊1.66 g/（kg.b.w）,连续5 d,能有效改善盐酸林克霉素诱发的小鼠相关性腹泻症状,特别是给予爱灵生乐（2036）螺旋藻双歧胶囊组,可有效治疗盐酸林克霉素诱发小鼠相关性腹泻。结论螺旋藻与双歧杆菌复合制剂对抗生素相关性腹泻有明确治疗作用。