玉米赤霉烯酮单克隆抗体和免疫酶技术研究

采用蛋白质连接技术合成玉米赤霉烯酮抗原,免疫Balb/c鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术建立六株分泌抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体杂交瘤细胞株。间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为1:2084(4H8)、1:256(6H9、4H3、2H5、2C8)、1:16(3F10);腹水抗体效价为10~9(4H3、4H8)、10~8(2H5)、10~7(6H9)、10~5(3H10)。竞争间接酶联免疫吸附试验测定六株单克隆抗体对玉米赤霉烯酮的敏感度为0.3—0.8ng/ml。六株抗体与玉米亦霉烯醇的交叉反应率为1.3—9.0％。六株单克隆抗体均属IgG类。细胞体外传代培养和冻存复苏后分泌抗体稳定。纯化抗体在37℃保存12天稳定,-30℃保存90天抗体滴度不变。用该抗体建立竞争间接酶联免疫吸附试验检测掺合玉米赤霉烯酮的玉米、小麦、饲料,平均回收率分别为105％、90％、103％,平均批间变异系数为5.8％、2.8％、6.8％,批内变异系数为3.8％、12.7％、15.7％。样品中玉米赤霉烯酮掺合量与竞争间接酶联免疫吸附试验检出量有良好相关性(r≥0.9996)。     

玉米赤霉烯酮的直接酶联免疫分析

玉米赤霉烯酮(zearalenone)是玉米赤霉菌(Gibberella zeae)的一种次生代谢产物,已被证明,它不但具有动物雌性激素的作用,还是某些真菌的性激素。我们已从多种植物体内分离出与春化作用密切的相关的活性物质,经分析与鉴定,证明它恰     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体酶联免疫测定方法的建立及初步应用

用ＺＥＮ－ＢＳＡ人工抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠,经融合,筛选和克隆化得到可稳定可泌抗ＺＥＮ单克隆抗体的杂交瘤细胞株ＺＥＮ－１Ｃ６。ＺＥＮ－１Ｃ６属ＩｇＧ１,纯化腹水抗体效价为１０＾－５,与５种衍生物的交叉反应系数为０．１６～１．２０％,用ＺＥＮ－１Ｃ６建立了检测食品（玉米,小麦,大米）中玉米赤霉烯酮的ＣＩＥＩＡ法。该法检测纯毒素的线性范围为５～１０００ｎｇ／ｍｌ,最低检出浓度为０．１ｎｇ／ｍｌ。平均回     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体酶联免疫测定方法的建立及初步应用

用ZEN—BSA人工抗原免疫BALB／c鼠,经融合、筛选和克隆化得到可稳定分泌抗ZEN单克隆抗体的杂交瘤细胞株ZEN—lC6。zEN一lC6属IgG₁,纯化腹水抗体效价为10^-5,与5种衍生物的交叉反应系数为0.16～1.20％。用ZEN一1C6建立了检测食品(玉米、小麦、大米)中玉米赤霉烯酮的CIEIA法。该法检测纯毒素的线性范围为5～1000ng／ml,最低检出浓度为0．1ng／ml,平均回收率为84．0～105．5％。用该法测定了81份样品,均有ZEN毒素检出。     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及间接竞争ELISA检测方法的建立

玉米赤霉烯酮具有较强的生物毒性,检测谷物中的玉米赤霉烯酮在食品和饲料安全中具有重要的作用.将玉米赤霉烯酮与牛血清白蛋白的偶联物免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,并建立基于单克隆抗体的酶联免疫法作为检测玉米赤霉烯酮的方法.结果共筛选到4株抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体,3株抗体亚类为IgG1,1株为IgG2b.选择其中的一株杂交瘤细胞2C9制备小鼠腹水,纯化后测定了抗体效价为1/40 000.以此单抗建立的间接竞争ELISA方法,其半数抑制率(IC50)为1.90 ng/mL,检测限(IC10)为0.051 ng/mL,检测区间(IC20-IC80)为0.115-13.900 ng/mL;且对玉米赤霉烯酮有很好的特异性.回收率检测在样品含1.46-93.80 μg/kg时回收率为96.5％-113.0％.本实验建立的检测方法可用于多种谷物及饲料样本中玉米赤霉烯酮的检测.     

玉米赤霉烯酮的放射免疫分析

将玉米赤霉烯酮转变成玉米赤霉烯酮-6’-羧甲氧肟,通过混合酸酐法将其与牛血清白蛋白结合并用以免疫兔获得抗体。抗体效价可达1:4×10~4,亲合常数为4.25×10~(10)L/mol,灵敏度提高为3.5pg。样品平均回收率达92％。批内与批间变异系数分别为6.1％和8.6％。     

真菌毒素玉米赤霉烯酮生物降解的研究进展

玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)及衍生物是一类主要由镰刀菌属的真菌产生的非甾体雌激素类真菌毒素,广泛存在于玉米、大麦、小麦和高粱等谷物饲料及其副产品中,严重危害牲畜及人类健康,迫切需要相关的技术对ZEN进行降解脱毒。传统的物理化学方法不能有效去除谷物中的毒素,并会破坏谷物的营养成分,影响食物口感,甚至造成二次污染,因此利用生物工程技术对ZEN及其衍生物进行脱毒是未来解决这一问题的主要方法。文中简要介绍了ZEN及衍生物和降解ZEN的微生物种类、降解特性,然后详细介绍了目前研究的ZEN降解酶种类、解析唯一的蛋白结构及其异源表达和应用情况,以期为通过分子酶工程和发酵工程等生物工程技术降低ZEN降解酶的成本提供指导,从而提高食品安全。     

玉米赤霉烯酮浸种对玉米幼苗抗旱性的影响

玉米赤霉烯酮浸种（２４ｈ）可提高玉米幼苗的抗旱性,在干旱条件下,经玉米赤霉烯酮浸种的玉米幼苗叶片中含水量下降缓慢,相对电导率较低,超氧化物歧化酶活性较高,游离脯氨酸含量升高。０．１ｍｇ·Ｌ＾－１玉米赤霉烯酮浸种的抗逆效果优于０．０１ｍｇ·Ｌ＾－１。     

冬小麦种子萌发过程中的结合态玉米赤霉烯酮

冬小麦种子萌发过程中的结合态玉米赤霉烯酮陈新建（河南农业大学农学系,郑州１５０００２）孟繁静（北京农业大学生物学院,北京１０００９４）关键词结合态玉米赤霉烯酮,冬小麦玉米赤霉烯酮（ｚｅａｒａｌｅｎｏｎｅ）是玉米赤霉菌（Ｇ～ｔｈｅ－）的一种次生代谢产物...     

赤霉烯酮的微生物还原

用Rhodtorula sp.Saccharomyces sp.Arthorbacter sp.和Candida sp．四属20株菌对由Fusarium graminearum 产生的类雌激素——赤霉烯酮(Zearalenone)的还原转化进行了研究。实验结果证明,Rhodotorula sp和 Arthrobacter sp．的还原产物主要是α-赤霉烯醇(α-Zearalenol,经HPLC鉴定含量分别为96％和84％)。Saccharomyces sp．和Candidasp.的主要还原产物是β-赤霉烯醇(β-Zearalenol,经HPLC鉴定含量分别为91％和92％)。产物均经HPLC、13C—NMR和MS鉴定确证。     

微生物降解玉米赤霉烯酮的研究进展

玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEN）是霉变谷物中常见的霉菌毒素之一,主要出现在霉变的玉米、小麦等谷物中,给畜禽和人类带来一定程度的健康危害,如生殖毒性、免疫毒性、肝毒性和肾毒性等。目前,解决玉米赤霉烯酮污染问题的方法包括物理、化学和生物3个途径。虽然传统的物理和化学脱毒方法已经运用在许多的饲料生产中,但同时也存在着二次污染的风险。生物降解法是一种利用微生物吸附和降解玉米赤霉烯酮的脱毒方法,具有安全环保、高效、特异性强和脱毒率高的特性,且不影响谷物的营养价值,已成为玉米赤霉烯酮降解研究的热点。本文主要介绍了近年来降解玉米赤霉烯酮的微生物种类,并将其归纳分类,从微生物的脱毒能力、脱毒方法和脱毒产物进行了叙述,综述了微生物脱毒的优点及前景,以期为微生物降解玉米赤霉烯酮的理论研究及实际应用提供新的视角。     

芹菜中玉米赤霉烯酮的分离与鉴定

芹菜属于冬性长日植物,它需要经过低温春化阶段才能开花结实,但低温仅是外界条件,还必需通过植物体内部的生理生化变化才能起作用。关于春化作用机理的研究,自 Melchers(1939)提出低温诱导植物形成春化素(vernalin)的假说以后,Purvis等(1953),Highkin(1955)和Tomita(1959,1964)曾自不同植物中分离出能代替低温或促进开花的物质,但都     

玉米和小麦种子中束缚态玉米赤霉烯酮的分离与鉴定

玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEN）是玉米赤霉菌（o双湖咄h一）的一种代谢产物,它不仅具有动物雌性激素的作用,还是某些真菌的性激素（Stob等1962）。自80年代初李季伦等（1980）发现在植物体内有玉米赤霉烯酮的存在以来,越来越多的证据（孟繁静等1988）表明玉米赤霉烯酮是一种能活跃地参与植物体生长发育过程的类似植物激素的内源活性物质。已知植物激素在植物体内存在着自由态和束缚态两种形式,通过两者之间的相互转化,影响和控制着某些生理生化过程的进行（Cohen和Bandurski1982）。为了探索玉米赤霉烯酮在高等植物体内是否也如…     

玉米赤霉烯酮在大豆花序建成中的作用

大豆在光周期诱导过程中,短日（SD）诱导下真叶及顶芽中的玉米赤霉烯酮（ZEN）含量始终比连续光照（CL）下的高。花芽名始分化期间,展叶内的ZEN含量在记期到来之前有一含量峰值出现;花芽形成前期,生殖芽中ZEN含量较低;花芽出现后,在其发育至开花的过程中,ZEN含量迅速增加,花期达到最高值。     

春化冬小麦的玉米赤霉烯酮结合蛋白（简报）

玉米赤霉烯酮是八十年代初从高等植物中鉴定出的一种微量生理活性物质,已证明它在植物成花过程中起重要作用。为了阐明玉米赤霉烯酮的作用机制,我们用放射配体竞争结合分析法研究了春化冬小麦的ＺＥＮ特异结合蛋白。结果表明在春化冬小麦胚芽中存在着可溶性的ＺＥＮ特异结合蛋白（ＺＢＰ）。结合反应的ＰＨ范围在６－８,加热、蛋白酶和尿素处理破坏结合活性。玉米赤霉烯酮的同系物α－玉米赤霉醇和β－玉米赤霉醇,以及动物雌性激