甲型流感病毒M2e通用疫苗的研究进展

流感严重地影响人们的身体健康和工作生活,给社会带来巨大经济损失。疫苗接种是预防流感的有效措施之一,市场上的流感疫苗包括流感灭活疫苗、减毒活疫苗和亚单位疫苗等。这些流感疫苗只能预防相同亚型流感病毒的感染,无法预防不同亚型流感病毒引起的季节性流感和流感大流行,因此迫切需要研发广谱的能预防不同亚型的甲型流感病毒感染的通用疫苗。在此简要介绍甲型流感病毒M2e通用疫苗的研究进展。     

合成疫苗的研究

<正>疫苗预防疾病是免疫学最成功地实际应用之一。但在实践中还存在许多问题和困难。有的疫苗由灭活病原体制备,常常免疫效果不理想;有的疫苗用减毒的活病原体制备,不易生产和保存,有时会出现毒力返祖影响安全性。目前一些经常使用的疫苗所提供的保护作用,仅限于特异的一种细菌或一种病毒的感染,很少是多价制剂。此外,有     

流感HA疫苗鼻内接种中联合使用霍乱毒素B亚单位可加强DTH应答

<正>为提高普通疫苗和合成疫苗的功效,有必要寻找出安全、有效的用于人体的适宜佐剂。近来我们已报导了霍乱毒素B亚单位(CTB),它作为佐剂用于鼻内流感HA疫苗免疫大有希望。即:BALB/c小鼠以A型流感病毒HA疫苗和CTB联合鼻内接种后,即可产生高水平鼻内IgA抗体,这种抗体与不同的A型流感病毒HA疫苗有交叉反应性,又可诱发对病毒攻击的交叉抗性。     

Q热疫苗研究进展

本文对Q热疫苗的研究进行了回顾、总结。灭活疫苗能刺激机体产生较强的抗Q热特异性体液免疫和细胞免疫，免疫保护效果好且持续时间长。但是，灭活疫苗有较强的副反应，可引起局部脓肿等副反应。减毒疫苗虽然免疫保护效果好，但可能有毒力恢复的危险。亚单位疫苗主要有CMR、TCAE和LPS，其中CMR和TCAE具有与灭活疫苗相近的保护效果，副反应很小，已进入临床研究。目前研究较多的保护性抗原蛋白有27kD、30kD、34kD、热休克蛋白等主要表面抗原，它们有可能发展成为重组亚单位疫苗。多价亚单位疫苗、DNA疫苗以及以活菌为载体的重组菌苗将是有前途的新型Q热疫苗。     

特异性抗原融合蛋白结核病疫苗研究进展

结核病是一种严重危害人类健康的重大传染病,由于BCG预防效果不佳,研制新型结核病疫苗迫在眉睫。研究开发新型结核病疫苗应根据机体抗结核杆菌感染的免疫应答特点、结合BCG的不足来开展。新型结核病疫苗主要分为三类:重组BCG或重组结核菌;重组痘病毒或重组腺病毒载体疫苗;蛋白抗原亚单位或重组融合蛋白抗原亚单位疫苗。由于蛋白亚单位疫苗可以不受机体已被分枝杆菌刺激的影响,能特异性地诱导CD4+Th1细胞和CD8+细胞毒性T细胞活化,并且使用安全性好,而备受研究者的青睐。目前主要是以BCG或重组BCG初次免疫,然后选择亚单位疫苗加强免疫作为结核病疫苗序贯免疫策略。然而,单个蛋白制成亚单位疫苗,其免疫效果有限,因此将多个具有保护效果的抗原或多肽表达成融合蛋白,联合适当的佐剂,制成融合蛋白亚单位疫苗。目前,已有一些融合蛋白亚单位疫苗进入临床试验阶段,更多的融合蛋白正处于研究阶段。     

卡介苗载体及其在疫苗研究中的应用

卡介苗是发展多价疫苗最好的载体之一.把外源基因导入卡介苗有3种途径:一是分枝杆菌噬菌体衍生的基因转移系统;二是分枝杆菌质粒衍生的基因转移系统;三是同源重组基因转移系统.重组卡介苗多价疫苗的研制为各种疾病的预防开辟了广阔的前景.     

共表达MDV糖蛋白B和鸡γ干扰素基因的重组鸡痘病毒的构建

鸡马立克氏病 (ＭＤ)是鸡的常见的淋巴组织增生性疾病 ,由α 疱疹病毒引起。由于该病既能引起免疫抑制作用 ,又能导致较高的病死率 ,一直是危害养鸡业发展的重要疾病之一[1] 。现使用的疫苗有马立克氏病病毒 (ＭＤＶ)血清 1、2、3型单价苗和混合多价苗 ,在疾病的预防中起重要作用。但ＭＤ冻干疫苗免疫保护力低而液氮疫苗保存运输不方便 ,并常因此造成免疫失败。为了研制免疫保护率高、使用方便新一代疫苗 ,国内外许多实验室开展了ＭＤ重组基因工程疫苗的研究 ,如ＭＤ亚单位疫苗、重组活病毒载体疫苗、基因疫苗等。目前研制成功的重组疫苗的…     

人-禽双价流感新型DNA疫苗构建及免疫保护实验研究

流感病毒是威胁人类和动物健康的重要病原. 研究表明, 流感大流行株的形成与人流感和禽流感毒株基因重配密切相关. 因此在目前流感流行趋势下, 在人流感和禽流感疫苗开发中考虑对人流感和禽流感流行亚型进行共预防具有重要意义. 本研究针对人-禽多价流感疫苗进行了尝试, 构建了共表达H5亚型HA和H3亚型主要抗原区HA1的DNA疫苗pVAX1-H5/H3, 并进行了小鼠免疫攻毒研究. 结果表明, 攻毒前pVAX1-H5/H3有效诱导小鼠产生了针对 H5HA和H3HA1的体液抗体和细胞免疫应答. 当采用H5亚型和H3亚型流感病毒攻击时, pVAX1-H5/H3实验组小鼠对病毒攻击产生了抵抗作用, 显示了更快的体重回复及肺部病毒清除速度. 在H3亚型流感保护方面, pVAX1-H5/H3作用显著优于单表达H3HA1的pVAX1-H3. 结果证实, 共表达双亚型HA策略可对相关流感病毒攻击产生保护, 不同HA间未发现免疫干扰现象, 同时存在潜在的增益效果. 本研究为人-禽多价流感疫苗的研发奠定了基础.     

疟疾疫苗的研究状况

ＳＰｆ６６疟疾疫苗已进行人体试验。三次免疫后２０天,接种者体内产生特异性抗体,有一定的保护率。大规模接种尚待研究。今后研究优良的疟疾疫苗仍应以单克隆抗体、分子生物学方法筛选能引起保护性抗体应答和细胞免疫应答的抗原决定簇,再用基因重组或人工会成方法制备多价亚单位疫苗。此外,尚需研制阻断疟疾传播的疫苗。     

阳离子脂质体DOTAP佐剂对H5N1流感病毒裂解疫苗免疫效果的影响

目的研究阳离子脂质体DOTAP佐剂对H5N1型流感病毒裂解疫苗免疫效果的影响。方法制备DOTAP阳离子脂质体流感病毒裂解疫苗(简称DOTAP流感裂解疫苗),检测其包封率。将BALB/c小鼠分为13组,分别用含0.1、1.0、10.0μg HA/只剂量以DOTAP、Al(OH)3、CPG-ODN为佐剂以及不含佐剂的流感裂解疫苗于0、21天皮下免疫,PBS作为对照组,用血凝抑制试验检测小鼠初次免疫后21、42天血清HI抗体滴度;用ELISA检测初次免疫后21、42天血清特异性IgG抗体、IgG1、IgG2a亚类抗体滴度,以及初次免疫后42天小鼠脾脏单个核细胞体外经抗原刺激后细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的分泌水平。将BALB/c小鼠分为3组,分别用含不同DOTAP剂量(100、300、600μg/只)的DOTAP流感裂解疫苗于0、21天皮下免疫,检测初次免疫后21、42天小鼠血清HI抗体滴度和IgG抗体滴度。结果 DOTAP流感裂解疫苗粒径在300~400 nm,带正电荷,包封率在50%以上;DOTAP流感裂解疫苗诱导的HI抗体水平和特异性IgG抗体水平均高于流感裂解疫苗,而与铝佐剂和Cp G-ODN佐剂间差异无统计学意义;DOTAP流感裂解疫苗产生的抗体仍以IgG1亚类抗体为主,免疫后42天诱导的IgG2a亚类抗体水平高于流感裂解疫苗和铝佐剂,低于Cp G-ODN佐剂;DOTAP流感裂解疫苗免疫后既分泌高水平Th1型细胞因子IFN-γ,同时也分泌高水平Th2型细胞因子IL-4;不同DOTAP剂量的DOTAP流感裂解疫苗免疫后,其HI抗体滴度和IgG抗体滴度在低、中、高剂量组之间存在明显的量效关系。结论 DOTAP作为H5N1型流感病毒裂解疫苗的佐剂可显著提高流感裂解疫苗的免疫原性,其对体液免疫应答的增强作用不低于铝佐剂和Cp G-ODN佐剂,并具有诱导细胞免疫应答的能力。     

产肠毒素大肠杆菌亚单位疫苗3STaM(G)-K99和3STaM(S)-K99的纯化及其免疫学性质的研究

产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是一种导致新生犊牛和仔猪腹泻的主要病原体之一.ETEC的毒力因子主要有黏附素(CFs)、不耐热性肠毒素(LT)和耐热性肠毒素(ST)三种.在前期研究中,利用PCR和酶切连接技术成功构建了两种ETEC亚单位疫苗3STaM (G)-K99和3STaM(S)-K99,且在大肠杆菌中获得高效表达.本研究利用阴离子交换层析纯化融合蛋白3STaM (G)-K99 and 3STaM(S)-K99,辅以弗氏佐剂免疫新西兰大白兔,通过Elisa分析其免疫学性质,并利用肠毒素中和实验在昆明系乳鼠中评价其激发抗STa中和抗体的能力.实验结果表明:亚单位疫苗3STaM(G)-K99 and 3STaM (S)-K99能够激发相对较高水平、可针对天然STa、ETEC和融合蛋白STa-K99的特异性抗体.其次,亚单位疫苗中STa突变体(STaM)组分的肠毒素活性显著降低,且其所激发的特异性抗体属于中和抗体,能有效抑制天然STa的肠毒素活性.亚单位疫苗3STaM (G)-K99 and 3STaM(S)-K99为研制预防ETEC感染性腹泻的多价基因工程疫苗提供了基本素材和理论指导.     

钩端螺旋体外膜疫苗的反应性和免疫效果研究

对国内首次研制的钩端螺旋体外膜疫苗接种人体的反应性,血清学效果和流行病学效果进行研究。先后对两价（含黄疸出血群赖型,七日热群七日热型）,三价（含黄疸出血群赖型,七日热群七日热型,流感伤寒群流感伤寒型,五价（含黄疸出血群赖型,七日热群七日热型,流感伤寒群流感伤寒型,秋季热群秋季热型,犬群犬型）外膜疫苗,菌体疫苗和安慰剂,分组进行全身和局部反应观察;并以显微镜凝集试验测定各型抗体;对两价外膜疫苗进行流行病学保护效果考核。结果两价和多价钩体外膜疫苗反应轻微,安全性良好;血清学效果显示,抗体阳转率和滴度均高于同期相应菌体疫苗诱导的同型抗体水平2倍以上,提示外膜疫苗有较好的免疫原性,流行病学效果在湖北省荆州和石首两市考核,按血清学阳性病例统计,其保护率可达95．57％以上。说明上述疫苗性质稳定,反应轻微,安全性良好,血清学效果理想,两价疫苗有较好的保护效果,可以逐步推广应用。     

流感病毒表面抗原血凝素基因在枯草杆菌中的克隆和表达

前言 流行性感冒仍然是全世界最严重的流行病之一。其病原主要是甲型流感病毒,分为甲_1、甲_2、甲_3三个亚型。当前流行的是甲_1和甲_3型。能有效预防流感的措施是用疫苗免疫。血凝素(HA)是流感病毒表面最重要的抗原,能诱导产生流感病毒中和抗体。从纯化的流感病毒颗粒中提取的血凝素,其免疫性与灭活的流感疫苗相似,但作为亚单位疫苗使用,因生产成本过高,并未广泛推广。     

分支状多抗原肽系统在疫苗研制中的应用

疫苗接种是预防和控制传染病流行的一种重要措施。常用的疫苗包括减毒活疫苗、灭活疫苗和亚单位疫苗。目前的亚单位疫苗多是采用重组DNA技术用微生物或哺乳动物细胞产生。但分子量较小的抗原很难用重组DNA技术制备,化学合成便成为较为简便的途径。合成肽疫苗是根据抗原的氨基酸序列设计的用化学方法合成的一种安全性很高的     

伪狂犬病新型疫苗研究进展

伪狂犬病是多种家畜和野生动物的一种重要传染病,给世界畜牧业特别是养猪业造成了巨大的经济损失,疫苗免疫是预防控制该病的主要手段。综述了伪狂犬病亚单位疫苗,核酸疫苗,重组疫苗,基因缺失疫苗等新型疫苗的研究进展。     

结核分枝杆菌蛋白亚单位疫苗与疫苗诱导的T细胞免疫记忆研究进展

牛分枝杆菌减毒活疫苗--卡介苗(bacillus Calmette-Guérin,BCG)对预防严重的儿童结核病有效,但其免疫保护效率随儿童年龄增长而降低。BCG不能提供终身免疫保护可能与其诱导的记忆性T细胞主要是寿命较短的效应记忆性T细胞有关。新型结核分枝杆菌蛋白亚单位疫苗将有效的抗原有机组合起来,在适宜的疫苗佐剂辅助下诱导Th1型免疫应答。动物实验表明,增加抗原谱可有效提高亚单位疫苗的保护效率。更重要的是,亚单位疫苗在体内持续时间较短,可诱导寿命较长的中央记忆性T细胞,提供比BCG更持久的免疫保护力。记忆性T细胞的分化受抗原特性与剂量、细胞因子、转录因子及雷帕霉素等的调控。对亚单位疫苗及其诱导的免疫记忆进行研究将对新型结核分枝杆菌疫苗的设计与评价产生积极影响。     

伪狂犬病新型疫苗研究进展*

伪狂犬病是多种家畜和野生动物的一种重要传染病 ,给世界畜牧业特别是养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是预防控制该病的主要手段。综述了伪狂犬病亚单位疫苗、核酸疫苗、重组疫苗、基因缺失疫苗等新型疫苗的研究进展。     

猪瘟疫苗研究进展

猪瘟是猪的一种重要传染病,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是预防该病的主要手段。本文综述了猪瘟流行现状、传统疫苗、亚单位疫苗、活载体疫苗、标记疫苗、核酸疫苗的研究进展,并对它们的发展趋势作了初步探讨和展望。     

流感通用疫苗的研究现状与展望

流感在全球范围内的不断暴发引起了世界的高度关注。预防流感最有效和最经济的手段是疫苗免疫。流感病毒的多宿主和高度变异性,使得流感疫苗的有效性受到限制。目前使用的疫苗只对与疫苗株相同或高度相近的病毒株具有保护效力。一旦变异较大或新亚型的流感病毒出现,现有疫苗就会失去其保护效力。因此,研制一种可抵御变异较大或不同亚型流感病毒的通用疫苗成为流感疫苗研究的热点。选择流感病毒的保守蛋白做抗原是研制流感通用疫苗的主要方法,已有至少3种流感通用疫苗进入临床研究阶段。改变疫苗免疫途径和免疫程序,也能提高疫苗的交叉免疫效果。本文对流感通用疫苗的研究进展进行了综述与展望。     

乙型脑炎病毒DNA初免-蛋白加强策略在小鼠模型上的免疫效应评价

为了评价基因Ⅰ型乙型脑炎病毒prM-E DNA疫苗与prM和EⅢ融合抗原亚单位疫苗采用DNA初免-蛋白加强免疫策略对小鼠的免疫效果,本研究将prM-E融合基因插入到pVAX1真核表达载体中,构建重组表达载体prM-E-pVAX1作为DNA疫苗进行初免,利用原核表达系统获得的prM和EⅢ融合抗原作为亚单位疫苗进行加强免疫。将32只4−6周龄雌性BALB/c小鼠随机分成4组,设置prM-E-pVAX1 DNA疫苗组、DNA初免-蛋白加强免疫组、prM和EⅢ融合抗原亚单位疫苗组及pVAX1载体对照组,通过ELISA检测血清中特异性抗体水平;通过噬斑减少中和试验滴定中和抗体滴度;通过细胞因子表达丰度和淋巴细胞增殖试验分析不同疫苗免疫组诱导产生的细胞免疫反应。结果表明,用DNA初免-蛋白加强策略免疫的小鼠诱导产生的中和抗体滴度略高于prM和EⅢ融合抗原亚单位疫苗免疫组,显著高于prM-E-pVAX1 DNA疫苗免疫组。DNA初免-蛋白加强策略在小鼠模型中诱导产生了有效的Th1/Th2型免疫反应,特别是显著诱导了Th1型细胞免疫反应。本研究为预防流行性乙型脑炎提供了新的免疫策略和理论参考依据。