联合用药对嗜水气单胞菌耐药性影响研究进展

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是威胁水产养殖业安全最严重的病原微生物之一,同时还存在人畜共患的典型特征。随着抗生素、抗菌药物的主动使用和被动暴露(医院生活废水、畜禽养殖污水排放至养殖水体环境),嗜水气单胞菌多重耐药问题日益突出,给水产养殖和人体健康均带来潜在风险。而合理联合用药不仅可减缓和阻控细菌耐药性产生,还能减少药物残留。本文首先分析联合用药遵循的原则及应关注的方向,阐述耐药产生的原因及联合用药影响耐药性的作用机制,综述研究联合用药阻控嗜水气单胞菌耐药性的动态进展,最后提出如何推进的思考和展望,旨在为水产养殖业通过联合用药手段控制嗜水气单胞菌耐药性提供防控策略和解决手段。     

嗜水气单胞菌感染现状及耐药分析

目的调查湖州市中心医院嗜水气单胞菌感染现状和耐药情况。方法采用常规方法分离,用VITEK-32全自动微生物分析仪进行菌种鉴定为嗜水气单胞菌或豚鼠气单胞菌,依据葡萄糖产气反应鉴定为嗜水气单胞菌。并根据配套药敏卡进行药敏试验。结果共分离到34株嗜水气单胞菌,主要来自痰液、胆汁、腹腔引流液或腹水。嗜水气单胞菌对哌拉西林、替卡西林、阿莫西彬克拉维酸、妥布霉素、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、环丙沙星、复方新诺明耐药率为52．9％～73．5％。结论目前嗜水气单胞菌也呈现多重耐药现象,临床上应予以重视。     

水产品中嗜水气单胞菌耐药性研究进展

嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila具有广泛的致病性,是水生动物最常见的致病菌之一。由于抗生素不合理使用、质粒以及耐药基因的水平转移等因素,来自零售市场、超市和餐厅的即食海鲜产品中,均可分离出大量的嗜水气单胞菌耐药菌株及其耐药基因。因此,探明关键控制点、寻求有效缓解抗生素耐药性的防控策略至关重要。文中介绍了我国嗜水气单胞菌的耐药现状,嗜水气单胞菌的主要侵染及耐药机制,以及目前削减和防控耐药性的主要手段和策略,并对水产品耐药性研究方向和重点作出展望。     

嗜水气单胞菌中类组蛋白HupB生理功能的研究北大核心

【目的】DNA结合蛋白HU蛋白是一类组蛋白样蛋白,其参与细菌DNA的重组与修复,在细菌的转录调控中发挥重要作用,但目前该蛋白对细菌生理功能的影响尚不完全清楚。为了更好地理解HU蛋白,本研究探讨HupB的生理功能。【方法】以嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)ATCC7966为研究材料,利用同源重组技术构建编码HU蛋白β亚基的hupB基因缺失菌株,并对其常见生理表型进行测定。【结果】hupB基因缺失菌株的溶血性、胞外蛋白酶活性和运动性均显著增强,而生物被膜形成能力显著下降,并且ΔhupB::hupB菌株中生物被膜形成能力恢复。进一步利用基于label-free的定量蛋白质组学技术比较了野生株和ΔhupB突变株的差异表达蛋白,发现235个蛋白表达上升,224个蛋白表达下降。生物信息学分析显示hupB敲除后导致蛋白质翻译、生物被膜生成以及信号转导等多个生物过程相关蛋白表达发生变化。【结论】研究结果表明嗜水气单胞菌HupB蛋白能显著影响细菌生物被膜形成能力,以上研究为更好地探究嗜水气单胞菌HupB蛋白对细菌生理功能的调控机制提供理论基础。     

我国鱼类病原——嗜水气单胞的耐药性研究

采用琼脂扩散法和稀释法研究26株嗜水气单胞菌对21种菌药物的敏感性,分析了其耐药状况。结果表明：从不同地区分离收集到的26株嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）对青霉素类和头孢菌素类药物全部具耐药性,对万古霉素多数不敏感。21种药物中最敏感的是氟哌酸、氯霉素、呋喃呋酮,总体耐药率分别为7.7％、7.7％和11.5％。氨基糖甙类药物和四环素类药物的耐药频率介于其间,对磺胺药的耐药菌比例也很高,高达73.1％的A.hydrophila对磺胺及复方磺胺其有耐药性,但耐磺胺比耐复方磺胺的现象更为普遍,对3种常用药物具有耐药性的菌株比例最高。同时对鱼类病原菌耐药性的判定标准以及两种方法在鱼类病原菌耐药性研究中的适用性问题进行了讨论。     

嗜水气单胞菌致病性研究进展

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)是我国养殖鱼类的重要病原,对其侵袭机制和毒力因子的研究有重要的意义。本文对嗜水气单胞菌的生物学特性、致病机制、毒力因子及其防治措施进行了综述。     

我国鱼类病原——嗜水气单胞的耐药性研究*

采用琼脂扩散法和稀释法研究 2 6株嗜水气单胞菌对 2 1种抗菌药物的敏感性 ,分析了其耐药状况。结果表明 :从不同地区分离收集到的 2 6株嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)对青霉素类和头孢菌素类药物全部具耐药性 ,对万古霉素多数不敏感。 2 1种药物中最敏感的是氟哌酸、氯霉素、呋喃唑酮 ,总体耐药率分别为 7.7%、7.7%和 11.5%。氨基糖甙类药物和四环素类药物的耐药频率介于其间。对磺胺药的耐药菌比例也很高 ,高达 73.1%的A.hydrophila<     

谷氨酰胺对嗜水气单胞菌致病中华鳖的保护作用

为探讨谷氨酰胺(Gln)对嗜水气单胞菌致病中华鳖的保护作用,本试验选取健康中华鳖270只,随机分为5组(A~E组),每组3个重复,每个重复18只。A~D组腹腔注射嗜水气单胞菌(1.3×109cfu/mL,0.5 mL),E组注射等量生理盐水。6 d后,A、E组注射生理盐水,B、C、D组分别注射100 mg/kg·BW、200 mg/kg·BW、400 mg/kg·BW Gln注射液,隔天注射,共注射3次。观测各组中华鳖的存活率,血浆总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、溶菌酶(LZM),脾脏、肝脏和肠道的组织学以及肠道菌群变化。结果表明,A组血浆LZM极显著低于C、D、E组(P0.01),C、D组LZM含量极显著高于A组(P0.01);A组T-AOC极显著低于E组(P0.01),D组T-AOC极显著高于A、B、C组(P0.01);A组GSH-PX极显著低于其余各组(P0.01);A组MDA极显著高于E组(P0.01),B、C、D组MDA显著低于A组(P0.05);A组中华鳖脾脏的红髓脾窦淤血扩张,红髓和白髓的淋巴细胞和血细胞坏死。肝脏充血严重,大量肝细胞破裂,肝细胞间有大量红细胞浸润。中肠黏膜萎缩,较多皱襞断裂。随着Gln注射剂量的增加,B、C、D组脾脏红细胞充斥逐渐减少,红白髓的分界逐渐明显。肝脏出血点减少,肝细胞的大小与排布也渐趋正常。中肠皱襞破损脱落程度逐渐减轻;A组肠道嗜水气单胞菌和大肠杆菌明显高于E组(P0.05),而乳酸杆菌和芽孢杆菌明显低于E组(P0.05);D组嗜水气单胞菌和大肠杆菌明显低于A组(P0.05),而乳酸杆菌和芽孢杆菌明显高于A组(P0.05)。注射Gln可缓解嗜水气单胞菌对中华鳖的致病作用,有效恢复机体抗氧化及非特异免疫力,降低死亡率。     

嗜水气单胞菌合成含3-羟基戊酸单体的聚羟基脂肪酸共聚酯的研究

分别利用葡萄糖或葡萄糖酸钠与十一碳酸、月桂酸与十一碳酸为混合碳源进行嗜水气单孢菌 (Aeromonashydrophila)菌株 4AK4的摇瓶培养 ,实现了含有 3 羟基戊酸 (3HV)单体的聚羟基脂肪酸酯的微生物合成。当使用葡萄糖或葡萄糖酸钠与十一碳酸为混合碳源时 ,野生型A .hydrophila 4AK4及含有 3 羟基丁酸辅酶A合成基因phaA和phaB的重组A .hydrophila 4AK4 (pTG01)能够合成-3-羟基丁酸(3HB)与-3HV的共聚物 ,且葡萄糖或葡萄糖酸钠与十一碳酸比例为 1∶1时最利于细胞生长和PHA的积累。当使用月桂酸和十一碳酸为混合碳源时 ,A .hydrophila4AK4能够合成-3HB、3HV与 β-羟基己酸 (3HHx)的共聚物 ,且随着混合碳源中十一碳酸的含量增加 ,A .hydrophila4AK4合成的PHA中-3HV的比例增加 ,而-3HB和-3HHx的比例降低.     

嗜水气单胞菌疫苗

嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila是引发其爆发性败血症的主要细菌性病原之一,自20世纪80年代末在我国南方出现并引起了许多种淡水养殖鱼类爆发性死亡以来,一直频繁地在许多养殖鱼类中发生。目前对嗜水气单胞菌病的治疗药物主要为抗生素,大量长期使用易产生耐药株。所     

O-Serogrouping and surface components of Aeromonas hydrophila and Aeromonas jandaei pathogenic for eels

Abstract The relationship between virulence, O-serogroup, and some cell-surface features (self-pelleting [SP] and precipitation after boiling [PAB], profile of lipopolysaccharides [LPSs]) and outer membrane proteins [OMPs] was investigated in strains of the pathogenic species Aeromonas hydrophila and A. jandaei isolated from eels. Virulent strains of A. hydrophila reacted mostly with O:19 antiserum, and those of A. jandaei reacted with O:4, O:11, O:15 and O:29 antisera (Guinée and Jansen system). Regarding the PAB and LPS profiles two groups could be distinguished; (i) five PAB⁺ strains of serotype O:19 that possessed a homogeneous O polysaccharide side chain and (ii) thirteen PAB⁻ strains antigenically diverse that either exhibited a heterogenous side chain or were side chain deficient. A major 50 kDa protein was only found in the PAB⁺ strains, whereas major OMPs detected in PAB⁻ strains ranged from 33 to 45 kDa irrespective of the species. Epizootic eel isolates of A. hydrophila belong to serotype O:19 and share cell-surface features with the Aeromonas highly virulent for other hosts. In contrast, epizootic A. jandaei isolates were antigenically diverse. These findings reinforce the importance of an O-serotype as an epidemiological marker in motile Aeromonas strains pathogenic for eels.     

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的化学修饰

 蛋白酶是嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)的重要致病因子 .为研究其结构与功能之间的关系 ,用DEPC、EDC、PMSF、N AI等 9种化学修饰剂处理嗜水气单胞菌J 1株胞外蛋白酶ECPase54,然后检测残余酶活力 ,借以研究酶分子中氨基酸侧链基团与酶活性中心的关系 .结果表明 ,羧基、丝氨酸、ε 氨基、胍基等残基与酶活性无关 ;半胱氨酸残基与酶活性也无直接关系 ;而色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基侧链以及二硫键的化学修饰引起酶活性的大幅度的下降 ,说明色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基以及二硫键是酶活力所必需的基团     

Effect of oral immunization with Aeromonas hydrophila ghosts on protection against experimental fish infection

Aims:  To investigate whether oral immunization with Aeromonas hydrophila ghosts (AHG) vaccine can elicit mucosal and systemic immune responses of Carp ( Carassius auratus gibelio ) compared to conventional formalin-killed bacteria (FKC).
Methods and Results:  Fish were fed diets coated with AHG, FKC or phosphate buffered saline (PBS) alone, after immunization, more antigen-specific antibody was significantly detected in serum and intestinal mucus in AHG group than FKC group and PBS group. In addition, after challenged with the parent strain J-1, the survival of bacterial ghost-vaccinated fish was higher than PBS group and FKC group, the relative per cent survival (RPS) being 76·8%, 58·9%, respectively.
Conclusions:  Oral immunization with A. hydrophila ghosts can elicit systemic and mucosal adaptive immune responses and has higher potential to induce protective adaptive immunity than normal vaccine.
Significance and Impact of the Study:  Oral immunization with bacterial ghosts is a promising new solution with potential application to prevent diseases in fish.     

嗜水气单胞菌若干毒力因子同时缺失的突变株的构建及特性分析

以携带质粒pAM12 0 (Tcr Tn916 )的大肠杆菌CG12 0株为供体菌 ,采用滤膜接合法与受体菌嗜水气单胞菌J_1株 (cfzr)进行接合转移 ,在含Tc和cfz选择平板上进行筛选。共获接合转移菌落 380 0个 ,其接合频率为 3× 10 - 5(按供体细胞计算 )。任取 38个接合子 ,提取基因组DNA ,以嗜水气单胞菌特异性 16SrDNA引物进行PCR扩增 ,所有接合子均阳性。为证明Tn916确实插入基因组 ,以四环素基因 (tet)引物进行PCR扩增 ,结果所有抗性接合子均扩增出一条特异条带。与亲本J_1株相比 ,所有接合子的主要毒力因子如蛋白酶、溶血素、DNA酶和淀粉酶等均不表达 ,对小鼠失去致病力 ,其LD50 大于 10 9CFU。接合子连传 10次后 ,四环素抗性消失 ,但毒力未恢复 ,说明通过转座子Tn916的插入可获得稳定的无毒嗜水气单胞菌突变株。Tn916引起嗜水气单胞菌毒力性状改变的机制有待研究 ,推测可能与该菌染色体上存在Tn916的热点或毒力岛有关。     

The cell division genes (ftsE and X) of Aeromonas hydrophila and their relationship with opsonophagocytosis

A transposon mutant from Aeromonas hydrophila AH-3 was obtained which was highly resistant to opsonophagocytosis. The mutation was identified in the ftsE gene and we characterised the operon ftsY, E and X from this bacterium. These genes, as in enteric bacteria, are neighbours to rpoH. The A. hydrophilia ftsE and X genes were fully able to complement Escherichia coli ftsE mutants, and also complement the opsonophagocytosis-resistant phenotype of the A. hydrophila mutant strain. This phenotype seems to be related to the filamentous phenotype at 37 degrees C exhibited by the A. hydrophila ftsE mutant.