斑点ELISA法检测幽门螺旋菌感染的研究

用幽门螺旋菌(HP)的超声粉碎物为抗原,建立了斑点ELISA法检测人血清中抗HP—IgG方法。该法敏感性为94.4％,特异性为87.5％,阳性预测值为97.1％,阴性预测值为77.8％。对271例儿童抗HP抗体调查,发现HP感染与儿童性别无关(P>0.05)。1月以内新生儿抗体检出率59.4％,1～12月婴儿抗体检出率最低(29.1％),1岁后开始逐渐上升,2岁后即可达到50％以上,接近成年人水平。结果表明,我国HP感染年龄早,感染率高。     

ELISA法和PCR技术检测孕妇风疹病毒感染的研究

对８７２例孕妇风疹病毒ＩｇＭ检测,结果阳性４１例,阳性率为４．７％;对ＩｇＭ阳性者进一步用ＰＣＲ检测风疹病毒ＲＮＡ,其中１９例阳性,占ＩｇＭ阳性的４６．３４％。风疹病毒感染与孕龄、职业无关,与孕次有关（χ２＝８．９４,Ｐ＜０．０５）,与不良孕产史有密切关系（χ２＝４．７４,Ｐ＜０．０５）。     

ELISA法和PCR技术检测孕妇风疹病毒感染的研究

对８７２例孕妇风疹病毒ＩｇＭ检测,结果阳性４１例,阳性率为４．７％,对ＩｇＭ阳性者进一步用ＰＣＲ检测风疹病毒ＲＮＡ,其中１９例阳性,占ＩｇＭ阳怀的４６．３４％,风疹病毒感染与孕龄,职业无关,与孕次有关,与不良孕产史有密切关系。     

沈阳地区婴幼儿RSV感染的病原学调查研究

查明冬春季沈阳地区婴幼儿RSV感染流行情况.采用APAAP法和IFA法对65例临床诊断为急性病毒性下呼吸道感染的婴幼儿进行了检查.在RSV感染的高发季节由RSV引起婴幼儿的急性下呼吸道感染的阳性率为44.60%(29/65),0～6个月婴幼儿感染率最高,为74.07%(20/27),并有明显的喘息倾向.以上结果表明RSV仍是引起婴幼儿急性下呼吸道感染,特别是肺炎和毛细支气管炎的重要病原体,沈阳地区仍有流行.为防止和控制RSV的流行及为RSV的防治提供了依据.     

成人下呼吸感染病例合胞病毒(RSV)RNA的检测分析

呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）被公认为婴幼儿呼吸道感染最常见的病毒性病原体,有关ＲＳＶ在成人急性下呼吸道感染中病原作用的研究,受检测技术制约,国内外很少报导［１］,近年来ＲＳＶ致成人下呼吸道感染病例有增加趋势,且引起的成人急性下呼吸道感染症状与其他呼吸道病...     

斑点ELISA检测感染华支睾吸虫兔血清抗体

许多报道表明,斑点ELISA用于单克隆抗体Ig型别和IgG亚类的鉴定及寄生虫病的检测,不仅有较好的敏感性及特异性,而且快速、简便。我们以此法试用于人工感染华支睾吸虫兔血清抗体的检测,结果如下。材料及方法硝酸纤维素膜:浙江黄岩人民化工厂产。华支睾吸虫抗原:冻干成虫可溶性抗原,1:200。检测血清:(1)华支睾吸虫兔血清:采自经口感染华支睾吸虫囊蚴后40—50天粪检虫卵阳性之兔;(2)免疫兔血清:以华支睾吸虫抗原免疫。方法按余等(1982)皮内免疫法进行。血清IgG提纯按北京医学院微生物学教研组(1980)方法分别用50%和33%饱和度(NH4)2SO4盐…     

狂犬病毒抗体ELISA检测试剂盒的改进研究

为了提高狂犬病毒抗体检测的灵敏度和特异性,采用狂犬病毒单克隆抗体包被酶标板,再分别加入重组的狂犬病毒糖蛋白或细胞培养抗原做固相层的方法(抗体捕捉法),用传统的间接ELISA法做对照,按常规方法检测抗狂犬病毒抗体。结果显示,抗体捕捉法的非特异性反应低于间接法,而灵敏度达到0．51U水平,高于间接法。在800份临床标本检测中,检出率明显高于间接法。用15份阳性血清作小鼠中和试验,并和抗体捕捉ELISA法比较具有高度的一致性。试验结果充分表明,该方法优于传统的ELISA间接法。因此可作为临床注射狂犬疫苗后检测血清中狂犬病毒抗体的常规方法。     

PCR—ELISA检测HBV DNA的研究

目的：建立一种敏感、特异的乙型肝炎病毒（HBV）DNA检测方法。方法：应用PCR扩增技术和核酸杂交技术结合酶促显色技术（即PCR－ELISA技术）来检测血清中的HBV DNA。结果：应用PCR－ELISA技术能够检出许多PCR琼脂张胶电泳所检测不到的HBV DNA,大大地提高了检出率,而且,特异性强。结论：PCR－ELISA方法灵敏度高,行异性强,检测结果数据化,不受主观因素的影响。     

植物细胞凋亡的ELISA检测

本文利用TUNEL方法在单个细胞水平上对苯胺灵诱导的玉米根尖细胞死亡进行了检测。结果表明,一定浓度的苯胺灵能诱导玉米根尖细胞发生主动性的细胞凋亡,具有细胞凋亡典型的形态和生化特征即细胞核浓缩并形成核碎片、染色质边缘化及DNA特异片段化等（Fig.1)。首次利用ELISA方法在群体水平上对这种细胞凋亡进行了进一步检测。结果表明：动物细胞研究常用的ELISA方法同样也适合用于植物细胞凋亡的检测。在凋亡前期,随着凋亡过程的进行,细胞质中的OD值逐渐上升（Fig.2)。剂量实验表明,0．2mg/mL苯胺灵最适合于诱导细胞凋亡（Fig.3)。     

ELISA检测HBsAg方法的改进

<正>检测HBsAg的方法要灵敏,特异性,可行,快速和简便。ELISA完全可以满足这些要求。 材料和方法 ELISA: 实验原则上同商品化的HBsAgEilSA方法相一致。现介绍四份不同批号的试剂。     

应用ELISA法检测SARS-Ab

探讨对SAPS病毒进行临床诊断,分析ELISA法检测SARS-Ab的情况。结果显示对照组检测均为阴性,测试组发病12d前、后阳性检出率分别为2．7％、92％,总检出率为94．7％。29例疑似病人阳性检出率为31％。提示该方法敏感性、特异性强,但12d以前检出率低,而13-16d以后阳性率明显提高。     

单克隆抗体夹心ELISA检测SARS病毒抗原的研究

目的:建立单克隆抗体(McAb)夹心ELISA法,用于检测SARS病毒(SARS-CoV)抗原。方法:用间接夹心ELISA法筛选捕捉和标记用单克隆抗体的组合,采用过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶(HRP),优化后用于检测SARS-CoV。结果:从12株抗SARS-CoV鼠单克隆抗体中筛选出2A3/1C5组合用于捕捉SARS-CoV,1A5/1B4组合标记HRP作为指示抗体。优化后2A3/1C5的最适工作浓度为1∶4000,HRP-1A5/1B4的最适工作浓度为1∶2000。本方法检测SARS-CoV的敏感度为105pfu/mL。结论:单克隆抗体夹心ELISA法可特异性检测SARS-CoV抗原。     

重庆烟草地区ELISA检测

为调查重庆主要烟草地区的病毒病种类,采用没脸免疫吸附法(ELISA)对采自重庆涪陵、彭水、万州、黔江、武隆、酉阳的258份的烟草样品进行了病毒病种类的检测.检测结果表明,其中274份样品呈阳性。主要受到7种病毒病的侵染,主要包括:烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)、蚕豆萎蔫病毒2号Broad bean wilt virus 2,BBWV-2)、烟草蚀纹病毒(Tobacco etch virus,TEV)。其中TMV的检出率最高,达50%,已成为重庆地区烟草优势病原。     

应用单克隆抗体ELISA检测淋球菌

利用抗淋球菌外膜蛋白的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）制备的淋球菌酶免疫试剂（ＧＯＮＯ－ＥＩＡ）检测实验室已知淋球菌的阳性低限值菌数为６．２５×１０~４／ｍｌ。对脑膜炎奈瑟氏菌、微黄色奈瑟氏菌、卡它布兰汉氏球菌、大肠埃希氏菌、绿脓杆菌和乳酸杆菌等无交叉反应。检测临床生殖泌尿系统标本４８４例,以淋球菌培养法对比,ＧＯＮＯ－ＥＩＡ的敏感性为８１．４３％,特异性为９４．９２％,,总符合率为９２．９７％。ＧＯＮＯ－ＥＩＡ方法简便,快速,整个实验不超过１２０分钟,是适用于临床实验诊断的理想方法。     

菊花总黄酮对RSV感染A549细胞趋化因子的影响

目的:探讨菊花总黄酮对小儿RSV感染A549细胞诱导RANTES及MCP-1释放作用影响。方法:实验分为细胞对照组,病毒对照组,菊花总黄酮组和病毒唑组。在Hep-2细胞和A549细胞分别加入菊花总黄酮和病毒唑的含药维持液,测定上述两种药物的最大无毒浓度;RSV病毒感染Hep-2细胞,观察药物对RSV的病毒抑制作用;RSV感染A549细胞,ELISA法测细胞趋化因子RANTES及MCP-1含量。结果:菊花总黄酮50%有效率优于病毒唑组,差异有统计学意义(P0.05);RANTES及MCP-1释放抑制作用比较中,菊花总黄酮组RANTES、MCP-1明显降低,优于病毒唑组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:菊花总黄酮能够抑制RSV病毒活性,明显降低A549细胞释放RANTES、MCP-1,缓解患儿的呼吸道症状,对临床具有指导意义,值得临床推广。     

表达RSV融合蛋白的重组Ad26和Ad35载体在棉鼠诱导抗RSV感染的保护性免疫

正RSV(呼吸道合胞病毒)是儿童、老人和医学条件低下者下呼吸道感染的主要病原体。尽管沉重的疾病负担迫切需要RSV疫苗的出现,但到目前为止,仍没有RSV疫苗上市。作者基于编码RSV融合蛋白(F)基因的人低血清阳性率腺病毒血清型26和35(Ad26和Ad35)研发了一种RSV候选疫苗。当用这两种载体中的     

抗生素诱导的呼吸道菌群缺失对小鼠RSV感染的影响

目的 探究抗生素雾化暴露引起的呼吸道菌群缺失对小鼠呼吸道合胞病毒(RSV)感染的影响,为临床合理使用抗生素提供指导意见。 方法 32只BALB/c小鼠分为2组:雾化ddH2O对照组和雾化ABX组合抗生素组,处理6 d后,进行细菌16S rRNA基因PCR检测,构建呼吸道菌群缺失小鼠模型。上述2组组内再随机分为2小组,即PBS对照组(ddH2O+PBS,ABX+PBS)和RSV感染组(ddH2O+RSV,ABX+RSV),饲养至第14天。检测和分析各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞和相关细胞因子(TNFα、IL8、IL10及MCP1)的数量和水平,观察肺组织病理学状况及检测病毒载量。 结果 BALF中细菌DNA提取和16S rRNA基因PCR检测显示,雾化ABX组合抗生素处理能够有效地剔除呼吸道菌群。BALF中炎症细胞和相关细胞因子检测显示,ABX+RSV组炎症细胞总数明显增多(P2O+RSV组和ABX+RSV组小鼠肺部损伤明显加重(均P≤0.01),与ddH2O+RSV组相比较,ABX+RSV组的病毒载量明显升高(t=2.716 0,P=0.021 7)。 结论 雾化ABX组合抗生素不仅能够有效地剔除呼吸道菌群,而且明显增加了小鼠感染RSV的风险,导致呼吸道炎症加重,以及病毒载量升高。     

急性下呼吸道感染患儿中RSV的分离鉴定及分析

目的对2015年兰州单中心急性下呼吸道感染患儿中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)进行分离鉴定及分析。方法收集临床急性下呼吸道感染患儿痰分泌物226份,在HEP-2细胞中连续盲传培养3代,收获的培养物用半巢式RT-PCR进行检测,选取强阳性样品进行测序以确定其型别,并对其流行病学特征进行分析。结果 226份样品中RSV阳性样本为76份(阳性率为34%)。RSV阳性患儿中,男女性别比为3∶1;年龄分布6月龄患儿占45%,6月龄~2岁占35%,2~5岁的占20%。冬季为发病高峰。76例RSV阳性患儿中,临床诊断依次为毛细支气管炎31例(40.79%)、喘息性支气管炎21例(27.36%)、支气管肺炎20例(26.32%)和支气管哮喘4例(5.26%)。40份强阳性RSV样品经测序确定为B亚型。结论 RSV是引起婴幼儿急性下呼吸道感染的重要病原之一,2015年RSV的流行株主要为B亚型。     

ELISA法检测流行性腮腺炎病毒感染特异性IgM抗体的研究

用流行性腮腺炎(流腮)病毒Enders株接种鸡胚尿囊腔培养,尿囊液经聚乙二醇6000处理制备流腮病毒抗原,用ELISA法检测流腮患者血清中特异性IgM抗体,其敏感性,特异性、重复性和稳定性都很高。 79份流腮患者血清,检出特异性IgM72份,阳性率为91％,32例非流腮患者IgM全部阴性、两者有极显著差异(P<0.01)。 10份血清作血清倍比稀释至1∶3200测IgM仍全部阳性,1∶6400稀释仅1例阴性,1∶12800稀释5例中仍有2例阳性。 10份血清作流腮抗原特异性抗体阻断试验,光密度抑制率均大于50％,平均为87％,10份标本作2-ME和SPA阻断后检测IgM抗体,结果2-ME阻断标本全部阴转,而SPA阻断标本仍阳性,证实所检测为流腮特异性抗体。 24份标本2次重复检测流腮IgM,其阴、阳性结果一致,这期间抗原放4℃ 1个月,提示抗原的稳定性和方法的重复性都很好。本方法敏感性明显高于血凝抑制试验,其阳性率分别为91％和61％,两者有显著差异。而且所用试剂简单经济,操作简便,快速,适用于临床早期诊断,易于广泛推广应用。