目的Ribozyme两侧长片段附加序列（LAS）的去除及其转录载体构建

选择小鼠腺苷脱氨酶ｍＲＮＡ特异Ｒｉｂｏｚｙｍｅ做为目的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ（Ｒｚ）,在目的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ两侧分别设计５＇－顺式Ｒｚ和３＇－顺式Ｒｚ,在目的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ上设计ＢａｍＨＩ酶切位点,并构建了上述Ｒｉｂｏｚｙｍｅ转录载体ｐＳＣＲｚ２６２,采用该质粒进行体外转录,并对转录靶ＲＮＡ分子进行了切割反应。结果显示ｐＳＣＲｚ２６２在转录过程中发生了自身切割,并释放出目的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ－Ｒｚ２６２,该目的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ不但去除了两侧长片段附加序列,而且保持了正确的生物学活性,通过ＢａｍＨＩ切点的设计简化了该质粒的筛选。     

目的Ribozyme两侧长片段附加列（LAS）的去除及其转录载体构建

选择小鼠腺苷脱氨酶ｍＲＮＡ特异Ｒｉｂｏｚｙｍｅ做为目的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ（Ｒｚ）,在目的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ两侧分别设计５－顺式Ｒｚ和３－顺式Ｒｚ,在目的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ上设计ＢｍＨＩ酶切位点,并构建了上述Ｒ８ｂｏｚｙｍｅ转录载体ｐＳＣＲｚ２６２,采用该质粒进行体外转录,并对转录靶ＲＮＡ分了进行了切割反应,结果显示ｐＳＣＲｚ２６２在转录过程哪生了自身切割,并释放出目的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ－Ｒｚ２６２,该目的     

Rib9ozyme在基因治疗中的研究进展

８０年代嫁妆 ，由美国科学家Ｃｅｃｈ和Ａｌｔｍａｎ发现了Ｒｉｂｏｚｙｍｅ（核酶），随着人类基因工程研究的深入，部分临床实验室工作者和基础科学研究人员开始注意到Ｒｉｂｏｚｙｍｅ在基因治疗中的应用潜力。近几年来，人们利用Ｒｉｂｏｚｙｍｅ可以特异性地切靶ＲＮＡ序列的特点，设计适合的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ阻断特定基因的表达，相继对艾滋病、肿瘤、生殖系统疾病、肝炎、白血病、移植排斥反应等疾病进行了大量研究。试验结     

核酶（Ribozyme）在剪切病毒核酸中的应用

核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）在剪切病毒核酸中的应用陈士友,金由辛（南京农业大学动物医学系,南京２１００９５）（中国科学院上海生化研究所,上海２０００３１）ＲｉｂｏｚｙｍｅＵｓｅｄｉｎＣｌａｖｉｎｇＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｏｆＶｉｒｕｓ￥ＣｈｅｎＳｈｉｙｏｕ...     

伙伴随时间而改变──Ribozyme的进化

伙伴随时间而改变──Ｒｉｂｏｚｙｍｅ的进化Ｒｉｂｏｚｙｍｅ能在没有蛋白质的情况下催化化学反应。但在许多已知事例中,ｒｉｂｏｚｙｍｅ在体内是与蛋白质结合在一起才能有效地执行功能的。根据“ＲＮＡ世界”假说,一般认为,在进化过程中,这些蛋白质会逐渐取代ｒｉ...     

对酶概念的挑战

概述了Ｒｉｂｏｚｙｍｅ、抗体酶、生物酶工程生产的酶、人工酶、模拟酶、博莱霉素等最新科研成果,对传统的酶概念提出了严峻的挑战,并提出生物催化剂与化学催化剂两概念之间的鸿沟必将被填平。     

核酶对bcl－2mRNA的体外切割

通过微机对ｂｃｌ－２ＲＮＡ二级结构的分析,设计针对ｂｃｌ－２片段５＇ＣＧＣＧＡＣＣＣＧＧＵＣＧＣＣＡＧＧＡＣＣＵＣＧ３＇的“锤头状”（Ｈａｍｍｅｒｈｅａｄ）核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ,ＲＤ）基因,平端连接于ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（－）ＨｉｎｃⅡ位点,克隆后经测序表明序列正确,ｂｃｌ－２和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因经体外转录,５０℃作用２ｈ,从１６５６－１６５７（Ｃ－Ｇ）位之间切断ｂｃｌ－２ＲＮＡ片段．     

人造Ribozyme

人造Ｒｉｂｏｚｙｍｅ“ＲＮＡ世界”的假说认为,生命所需的所有化学反应可由ｒｉｂｏｚｙｍｅ催化。但自然界中ｒｉｂｏｚｙｍｅ种类很少,催化速率比蛋白质酶慢很多很多。于是,科学家就想制造有新功能的ｒｉｂｏｚｙｍｅ。１９９３年,美国的ＤａｖｉｄＰ．Ｂａｒｔｅ...     

植物反义寡核苷酸的研究进展

本文介绍了近年来植物中反义寡核苷酸的研究现状,它包括反义ＤＮＡ、反应ＲＮＡ和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ。反义寡核苷酸能特异地拮抗内源或外源基因表达,这为研究某特定基因功能提供了更有效的方法,此外也为培育抗病植株,建立植物反向筛选系统,次生代谢调控及农艺性状改良提供了可能途径。     

植物反义寡核苷酸的研究进展

本文介绍了近年来植物中反义寡核苷酸的研究现状,它包括反义ＤＮＡ、反义ＲＮＡ和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ。反义寡核苷酸能特异地桔抗内源或外源基因的表达,这为研究某特定基因功能提供了更为有效的方法。此外也为培育抗病植株、建立植物反向筛选系统,次生代谢调控及农艺性状改良提供了可能途径。     

核酶的抗病毒作用研究

自然界核梅（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）的发现已近１０年,通过对其结构功能关系的研究,能够找出不同核酶的结构功能区域及其必需基因,同时进行分子改造,获得新的、高效的切割靶序列的核酶。本文简述了核酶的种类及两种目前常用于分子间切割核酶的分子结构,及其应用于抗病毒研究的近况。     

针对乙型肝炎病毒（HBV）前S2基因三靶位串联核酶的实验研究

核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）是一类具有核酸内切酶活性的ＲＮＡ分子,可特异地切割靶ＲＮＡ序列。核酶的催化中心有相对固定的序列,而切割特异性则由催化中心两侧序列与何种靶分子序列互补而决定。根据核酶这一特性,可以人工设计针对某一病毒ＲＮＡ的核酶分子,破坏病毒转...     

抗家蚕核多角体病毒（BmNPV）即刻早期蛋白基因的三联核酶的设计和性质

以ＢｍＮＰＶＩＥ基因为靶序列,通过计算机设计了３个切割靶序列不同位点的锤头状核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）（Ｒ４７,Ｒ２０８和Ｒ６８７）为了提高核酶的切割效率,把３个核酶串联在一起形成三联的核酶（Ｒ４２６）为使单个核酶之间不相互干扰,改变了茎区ＩＩ的碱基序列,核酸二级结构计算机模拟显示,这种改变非常成功,为了减少长的侧翼序列对Ｒ４２６的影响,将Ｒ４２６基因克隆到ｐＲＧ５２３质粒的ｃｉｓ－核酶之间,限制性     

特异切割12-脂加氧酶mRNA的核酶体外活性及动力学研究

根据锤头状核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割１２－脂加氧酶（１２－ＬＯ）ｍＮＲＡ的核酶基因。以合成的２５个核苷酸长的１２－脂加氧酶ＲＮＡ片段为底物与转录的核酶ＲＮＡ一起保温检测其体 割活性。实验结果表明,在３７℃保温时,核酶在体外对１２－脂加氧酶具有较高的特异切割活性,其Ｋｍ值为１３００ｎｍｏｌ／Ｌ,其ｋｃａｔ值为０．０８３／ｍｉｎ,在５０℃保温时,核酶具有很高的切割     

利用PCR技术行反义寡核苷酸体外抗丁型肝炎病毒基因组RNA中核酶的研究

设计一对ＰＣＲ引物,其中上游引物的５’端除目的基因外,还加Ｔ７ＲＮＡ聚合酶启动子序列,以质粒（ｐＳＶＬＤ３）为模板,通过ＰＣＲ扩增出带有Ｔ７ＲＮＡ聚合酶启动子序列的１３９ｂｐ的ｃＤＮＡ片段,它含有丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）基因组ＲＮＡ中核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）区的ｃＤＮＡ该核酶具有自身裂解功能,经测序发现该ｃＤＮＡ有２个碱基变异,以此ＰＣＲ产物为模板,通过Ｔ７ＲＮＡ聚合酶,转录出核酶的前体,并观察到其     

相反相成药物治疗马骡结症的理论探讨

“对立统一规律是宇宙的根本规律。”动物体是完整统一的有机体,其各系统、各器官的机能活动是矛盾的,对立的,同时又是统一的。心脏的跳动,肺脏的呼吸,肌肉的伸缩,胃肠的蠕动等,都是由相互联系、相互制约的对立统一的活动完成的。在这些活动当中,神经系统起着主要的调节作用。中枢神经系统是支配全身活动的中枢,而内脏器官的活动是由相对自主的植     

云南一些植物特征成分与古夷平面的相关性

生理生态学的原则是随着纬度的升高,物种分布的海拔高度将随之降低。但是,云南一些植物特征成分的分布却与之相反,它们的分布与云南残留的古夷平面的分布相似,即随着纬度的升高,其分布的海拔高度也随之升高。二者的区别是云南古夷平面分布的趋势线的仰角大于那些特征成分分布的趋势线的仰角。可能的原因是：相对于剧烈的地质运动,物种的适应能力总是相对滞后的,并且物种的分布也受到其生长特性的制约;根据分布区形成的原则,这些成分的发生应早于夷平面的隆起。     

学案导学在高中生物教学中的应用

制作学案的过程,就是老师理解通透所传授的知识的前提下,阅读大量的相关的资料,根据学生的认知水平与知识的积累能力,为指导学生进行主动的知识建构而编制的学习方案,以便积极引导和帮助学生的自主学习的能力进行探究思索的方案。高中生物的教学研究问题,通过学案的方式向学生传授知识,是教师在教学理论与学习标准的指导下对高中生物的教学所提高的一个新层次。     

植物保护与农业可持续发展关系探究

随着社会的发展经济的进步我国在各个领域的发展上都得到了相应的提升,从农业的发展情况来看,由于我国在科学技术上进步故此在农业的发展上也取得了重大的成效,但是在农业发展的过程中也出现了一些严重的问题,就是对于化学药品的使用所造成的农产品的污染以及环境的污染。本文主要针对当前的一些植物保护的现状进行阐述,并对植物保护和农业的可持续发展间的关系进行了详细的分析探究,希望能够在此领域的学术发展起到一定的参考作用。     

自然和热凝固的人肝组织对KTP/YAG激光的光学特性的比较研究

本文采用双积分球测量系统和Inverse Add ing-Doub ling方法,研究了自然和热凝固的人肝组织对532nm的KTP激光和1 064 nm的Nd:YAG激光的光学特性。结果表明:热凝固的人肝组织对532 nm的KTP激光的吸收系数较自然的肝组织的吸收系数增大了23.5%(P<0.05),热凝固的肝组织对1 064 nm的Nd:YAG激光的吸收系数较自然的肝组织的吸收系数减小了34.3%(P<0.05)。热凝固的人肝组织对532 nm的KTP激光的散射系数较自然的肝组织的散射系数增大了4.50倍(P<0.05),热凝固的肝组织对1 064 nm的Nd:YAG激光的散射系数较自然的肝组织的散射系数增大了6.41倍(P<0.05)。热凝固的人肝组织对532 nm的KTP激光的各向异性因子较自然的肝组织的各向异性因子减小了5.47%,热凝固的肝组织对1 064 nm的Nd:YAG激光的各向异性因子较自然的肝组织的各向异性因子减小了1.95%。