柑橘叶片和果皮总蛋白质提取及双向电泳体系的建立

以春甜橘(Citrus reticulata Blanco‘Chuntianju’)果皮和叶片为材料,分别用Tris-HCl、尿素/硫脲(Thi/Urea)、三氯乙酸/丙酮(TCA)和酚(Phe)等4种方法提取柑橘总蛋白质,从蛋白质产量、单向SDS-PAGE和双向电泳等方面进行比较。结果表明,4种方法的分离效果存在较大差异,不论是以柑橘叶片还是果皮为材料,均以TCA法最好,且双向电泳图谱分辨率较好,蛋白点清晰、均匀、基本没有条纹,且蛋白点多。这说明TCA法不仅能很好地去除柑橘果皮、叶片中存在的大量干扰物质,而且还能得到稳定的蛋白点。     

陈皮话古今

<正>关于陈皮的记载最早的史料是《神农本草经》,其中提到"橘柚,味辛温……一名橘皮",此处的"橘柚"应是指芸香科植物橘的果皮。而"陈皮"两字首见于《本草害利》,"广东新会皮为胜,陈久者良,故名陈皮。福建产者名建皮,力薄。浙江衢州出者名衢皮,更次矣",此时陈皮常以产出地点命名。在《中医药大辞典》中,张寿颐也是如此记道:"新会皮,橘皮也,以陈年者     

名贵南药广佛手

佛手(Citrus medica var.sar-codactylis)为芸香科柑橘属树种香橼的变种,因其果顶分裂,或张开状似观音手指,或握拳如如来拳头而得名,又称五指柑、佛手柑、九爪木等。 佛手根据出产地不同可分为多个品种:产于广东、广西的药用佛手称为“广佛手”;产于福建的称“闽佛手”;产于浙江金华的称“金佛手”;产于四川、云南的称‘川佛手”。与其他品     

台湾香檬果皮川陈皮素分离制备及其抗肿瘤活性研究

以台湾香檬(Citrus depressa)果皮为原料,采用超声波提取川陈皮素并用高效液相分离鉴定,探讨台湾香檬果皮川陈皮素的抗肿瘤活性。采用MTT法检测川陈皮素对肺癌、肝癌、卵巢癌细胞株增殖的影响,通过流式细胞仪采用双染法检测川陈皮素对肝癌细胞凋亡的作用。结果表明,台湾香檬果皮川陈皮素对肿瘤细胞有一定的广谱抑制作用,并能有效促进肝癌细胞凋亡。     

南药广陈皮(茶枝柑)种植技术规范

广陈皮茶枝柑Citrus reticulata cv. Chachiensis为我国重要的道地药材,主产于广东省江门市新会区,开展规范化种植可为该药材的可持续发展提供技术支撑。文中根据2006～2023年新会区不同生态区域种植茶枝柑的技术措施,结合广东省南药(广陈皮)产业技术体系创新团队2019～2023年的实地调查,从种植品种、产地环境、种苗生产、大田种植、病虫害防治、果实采摘等方面进行总结,制定其规范化种植技术标准。     

立地性日照长短与甜橙生长发育的相关性

甜橙[Citrus sinensis(L.)Osbesk,本文中均指雪柑(Citrus sinensis var.sekkan)]对日照的需要量,比温州蜜柑(Citrus reticulata var.unshiu)等桔类要少些,即温州蜜柑比甜橙和杂柑类的耐荫性稍弱。然而,究竟可少到什么临界值呢?同一果园,同一管理水平,同一树龄,由于坡向、地形等的不同,而     

柑橘大实蝇对不同柑橘品种的产卵偏好和幼虫取食选择

【目的】掌握柑橘大实蝇Bactrocera minax对不同品种柑橘的产卵偏好,以及与幼虫取食喜嗜性的关系。【方法】我们用五点取样法分别调查了自然条件下不同品种柑橘果园的虫果率,统计了各品种柑橘虫果基半部和端半部产卵痕量和卵量,并在实验室内采用培养皿桔瓣选择法研究了其幼虫对不同柑橘品种果实的取食选择。【结果】在未采取防控措施的情况下,果树面朝杂树林的方位虫果率显著高于其他方位;同一片受害柑橘园内,不同柑橘品种的虫果率为脐橙Citrus sinensis cv. Navel、酸橙C. aurantium＞冰糖橙C. sinensis cv. Bingtang、天草(Amakusa)、蜜橘C. reticulata cv. Satsuma＞沙田柚C. maxima cv. Shatian＞椪柑C. reticulata cv. Ponkan;柑橘大实蝇产卵痕数和卵量均为橙类（脐橙、酸橙和冰糖橙）大于橘类（天草、蜜橘和椪柑）和沙田柚（P＜0.05）;除蜜橘外,所调查的其他柑橘品种端半部的产卵痕数显著多于基半部（P＜0.05）;幼虫对不同品种柑橘橘瓣肉的取食选择顺序依次为：脐橙、酸橙＞冰糖橙＞天草、南橘C. reticulata cv. Nanju＞蜜橘＞椪柑＞沙田柚。【结论】结果提示,柑橘大实蝇成虫偏向于选择幼虫所喜嗜的橙类品种产卵,且产卵量更多。     

真正柑橘果树类植物基于AFLP分子标记的分类与进化研究

用AFLP分子标记技术对芸香科Rutaceae柑橘亚科Aurantioideae真正柑橘果树类(the True Citrus Fruit Trees Group) 6属植物的59个生物类型以及九里香Murraya exotica L.、蚝壳刺Severinia buxifolia Tenore和酒饼簕Atalantia buxifolia Oliv.进行了分析。从64对引物组合中筛选出15对分辨率好的引物对全部材料进行了扩增, 共获得312条带, 其中多态型带305条, 多态位点达97.8%。利用PAUP软件构建了全部材料基于AFLP数据的UPGMA距离树。结果表明, AFLP证据支持基于形态特征建立的真正柑橘果树群以及群内各属的划分, 只是金柑属Fortunella Swingle作为一个独立的分支嵌于柑橘属Citrus L.内。对于柑橘属, 我们的分子证据支持Swingle关于亚属的划分以及Scora等关于C. medica、C. grandis和C. reticulata是真正柑橘亚属subgen. Eucitrus三个基本种的观点。AFLP分子证据显示宜昌橙C. ichangensis Swingle位于真正柑橘亚属中, 与香橙C. junos Sieb. ex Tanaka的亲缘关系最近, 而与大翼橙亚属subgen. Papeda中马蜂柑C. hystrix DC.相隔甚远。另外, 莽山野橘C. mangshanensis S. W. He &; G. F. Liu在系统树上居于宽皮柑橘类的基部。最后, 对真正柑橘果树群6属植物间以及柑橘属各主要类型(种)的进化关系进行了详细的讨论。     

柑橘木虱两地理种群的内共生菌群落组成及传菌能力

柑橘黄龙病（Huanglongbing, HLB）是经柑橘木虱Diaphorina citri传播的最主要柑橘病害之一, 危害严重时能对柑橘产业造成毁灭性的破坏。为了鉴定福建和海南2个地理种群柑橘木虱的内共生菌群落组成, 本研究对16S rRNA部分保守序列进行PCR扩增, 并利用特异性引物对不同内共生菌进行了感染率检测; 另外, 还通过人工接虫的方法, 探索柑橘木虱成虫在带黄龙病菌蕉柑Citrus reticulata cv. Tankan上的获菌能力, 以及带菌柑橘木虱成虫对黄岩蜜橘C. reticulata cv. Subcompressa的传菌能力。研究发现, 这2个地理种群的柑橘木虱含有相同的内共生菌组成, 包括α-Proteobacteria, Wolbachia spp., γ-Proteobacteria, mycetocyte symbionts, β-Proteobacteria, Oxalobacter和β-Proteobacteria, Herbaspirillum, 而且这2个地理种群柑橘木虱的4种内共生菌的携带率均在95%以上。柑橘木虱成虫在带菌蕉柑上饲菌28 d后, 带菌率可达到82%, 而带菌柑橘木虱成虫在黄岩蜜橘上传菌75 d后, 可导致橘树整体带菌。本研究为柑橘木虱的进一步研究和防虫治病途径提供了一些理论依据。     

陈皮黄酮提取工艺优化及抗氧化活性检测

本研究采用超声波辅助溶剂提取法提取陈皮(Citrus reticulata Blanco)黄酮类化合物,通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)法检测抗氧化活性.设计响应面实验,考察乙醇质量分数、超声时间和料液比对陈皮黄酮提取的影响,得到的最佳提取工艺为乙醇质量分数60％,超声时间36 min,料液比1∶25 (g/mL),所得黄酮提取率为24.75 mg/g;DPPH实验表明纯化前、乙酸乙酯萃取和AB-8树脂纯化后的陈皮黄酮的IC50值分别为427.83、129.76、87.44μg/mL,抗坏血酸当量(AEAC值)分别为1283.85、4266.04、6245.73mg/100 g;ABTS实验表明纯化前、乙酸乙酯萃取和AB-8树脂纯化后的陈皮黄酮的IC50值分别为181.67、50.87、43.3μg/mL,AEAC值分别为8584.79、30690.99、36006.24mg/100 g.并且陈皮黄酮的抗氧化能力具有剂量效应关系,纯化后的能力显著增强.     

柑橘体细胞杂种有性后代的创造及杂种鉴定

以异源四倍体柑橘体细胞杂种[哈姆林甜橙(Citrus sinensis Osbeck) 粗柠檬(C.jambhiri Luss)]为父本与二倍体单胚类型宜本杂4号[华农本地早橘(C.reticulata Blanco)×宜昌橙(C.ichangen- sis Swingle)]杂交,采用胚抢救技术获得了110株有性后代植株,通过染色体计数及倍性分析仪鉴定,其中93株植株为3倍体,余下的17林植株为2倍体。RAPD分析表明:获得的有性后代植株均为杂种。     

金华佛手

佛手(Citrus medica var.sarcodactylis Swingle)是香橼(或香圆,Citrus medica L.)的一个栽培变种。又称佛手柑,属于芸香科(Rutaceae)、柑桔属(Citrus)植物。佛手依心皮而裂成手指状,果皮甚厚,果肉几乎完全退化,不可食,     

广东曲江区柑橘园天敌瓢虫种类调查及食性观察 (鞘翅目：瓢虫科)

对广东曲江区4个柑橘园4种橘类植物（甜橙Citrus sinensis (Linn.) Osbeck, 沙田柚Citrus grandis (Linn.) Osbeck var.shatinyu Hort，温州蜜橘Citrus unshiuMarcovitch和沙糖桔Citrus reticulata Blanco cv.Shiyue Ju）上的瓢虫进行种类调查和食性观察，共采集320头瓢虫标本，鉴定结果为24属51种，多数为蚜虫的捕食性天敌，其中龟纹瓢虫、六斑月瓢虫、红肩瓢虫、黄斑盘瓢虫、台湾隐势瓢虫、后斑小瓢虫和细缘唇瓢虫为优势种。对大多数种类的食性作了观察或进行室内饲养，基本明确了它们在橘类上的猎物。      

柑桔叶点霉侵染琯溪蜜柚的超微结构观察及致病机理分析

为探明黑斑病对琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)果皮细胞的侵染破坏特点及作用机理,人工接种柑橘叶点霉亚洲种(Phyllosticta citriasiana)后,在扫描电镜与透射电镜下观察蜜柚真皮细胞的变化。结果表明,受到侵染后,真皮细胞的液泡膜首先发生褶皱、断裂,最终消失;叶绿体的淀粉粒消失、膜出现褶皱;质膜内陷、局部断裂;类囊体发生膨胀并解体;线粒体数量明显增加,基粒清晰可见,之后线粒体形态改变,双层膜消失,内部空胞化。未观察到细胞间隙及细胞内有菌丝分布,且细胞壁结构始终稳定。P.citriasiana危害蜜柚果皮细胞与毒素作用有关,侵染位点可能是细胞膜,信息通过胞间连丝穿过细胞壁,进入细胞内部。     

柑橘叶片总RNA的两种提取方法比较

为了简便、快速提取高质量的柑橘(Citrus reticulata Banco)叶片总RNA,采用TRlzol法,对北京天根公司RNAplant Reagent和日本TaKaRa公司RNAiso Reagent两种RNA提取试剂进行比较并适当改进.结果表明:通过琼脂糖凝胶电泳,使用TaKaRa公司试剂提取的总RNA28S和18S条带清晰,紫外分光光度计检测分析A260/A280为1,820,A260,A230为2.088,RNA的浓度为2.840 μg μl-1,用于RT-PCR反应可成功克隆柑橘β-actin看家基因228 bp片段;采用天根公司试剂,琼脂糖凝胶电泳显示RNA带型较模糊,紫外分光光度计检测分析A260/A280为1.464,A260/A230为1.603,RNA的浓度为2.020 μg μl-1,达不到RNA的标准.TaKaRa公司RNAiso Reagent试剂提取的柑橘叶RNA纯度和完整性较好,能用于Northern杂交、cDNA文库的建立及基因克隆等分子生物学实验,为柑橘的进一步分子生物学研究奠定了基础.     

缺硼导致柑橘叶脉和果实导管分子形态畸形的观察

缺硼可导致柑橘叶片变厚而脆、发生木栓化、"猴头果"等现象,其原因是植物组织内部起运输作用的维管组织受到损坏。导管是维管组织重要组成部分,本实验以‘纽荷尔’脐橙(Citrus sinensis Osbeck ‘Newhall’)和HB柚[Citrus maxima (Burm.) Merr.‘HB You’]叶片、HB柚果实中果皮为材料,利用离析方法将导管分离,观察缺硼导管分子形态的变化。结果表明:(1)缺硼使纽荷尔脐橙叶脉中的孔纹导管数量增多;(2)缺硼使HB柚叶片和果实中果皮的孔纹导管大量增生,梯纹导管和网纹导管数量减少;(3)正常导管圆润饱满,而缺硼导管变形干瘪,且有侧壁穿孔现象;(4)缺硼导管变得短而窄,细胞壁变薄,无尾率增加,使维管组织功能丧失。(5)缺硼维管束受损,运输效率降低,是发生叶脉木栓化和"猴头果"现象的源头。     

奉节脐橙果实苯丙氨酸解氨酶活性及其基因表达与果皮褐变的关系

柑橘果皮褐变严重影响果实的商品价值和耐贮性．以奉节脐橙（Citrus sinensis Osbcck）果实为材料,通过采后常温、涂蜡、低温、机械损伤等处理研究了果实果皮褐变率、苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性及PAL上基因在果皮褐变过程中表达水平的变化。结果表明,涂蜡、损伤处理均极显著地提高果实的果皮褐变率,而低温贮藏可显著降低其发生率;贮藏期问各处理的PAL活性均呈上升趋势,损伤处理PAL活性显著高于对照。果实发生褐变或受到机械损伤后,PAL2、PAL6基因的表达均比对照明显增强。结果首次表明脐橙果实PAL活性变化以及PAL2基因的表达与果皮褐变具有非常密切的关系．     

不同种类寄主对柑橘黄龙病菌侵染能力及虫媒适应性的影响

柑橘木虱Diaphorina citri是柑橘黄龙病菌“Candidatus Liberibacter asiaticus”的主要媒介昆虫,探明不同植物种类寄主对柑橘黄龙病菌侵染能力及柑橘木虱适应性的影响,在设计黄龙病防控策略及寄主抗性研究中具有参考价值。本文选取蕉柑Citrus reticulata、蜜柚Citrus grandis、黄皮Clausena lansium和九里香Murraya exotica为研究材料,对比其田间植株黄龙病发病率和柑橘木虱数量及带菌情况,并在实验室条件下比较柑橘木虱对不同寄主的适应性（包括发育历期、存活率、携菌能力和传菌能力）。结果发现：（1）田间蕉柑和蜜柚的感染率最高,分别为47%和37%;而黄皮和九里香的带菌率较低,分别为18%和4%,且菌浓度均较轻微;（2）田间九里香上柑橘木虱卵、若虫及成虫数量均最多,蕉柑和黄皮其次,蜜柚最少,但蕉柑和蜜柚上柑橘木虱的携菌率和携菌量最高;（3）4种寄主上柑橘木虱卵和1~3龄若虫的发育历期没有显著性差异,柑橘木虱4龄、5龄若虫和总若虫历期在九里香上最短,而在蜜柚上最长;4种寄主上4龄、5龄若虫存活率没有显著性差异,但蜜柚上木虱卵的孵化率、1~3龄及总若虫存活率最低。（4）蕉柑和蜜柚上带菌木虱的携菌能力及传菌能力最高,其次为黄皮,九里香最低。该研究证明了除了寄主植物本身抗病性差异外,虫媒对寄主植物的适应性差异也是造成田间黄龙病发病差异的重要因素。     

叶面肥对柑橘全爪螨生长发育和繁殖及柑橘苗生长的影响(英文)

【目的】柑橘全爪螨Panonychus citri在中国是一种重要的柑橘害虫,叶面肥在橘园的应用很普遍。本研究是为了明确柑橘施用尿素和复合氨基酸2种叶面肥对这种害螨生长发育和繁殖及柑橘苗生长的影响。【方法】在室内分别用尿素(0.50%)和复合氨基酸(0.17%)2种叶面肥喷施盆栽沙糖橘Citrus reticulata Blanco cv. Shatangju苗,以喷施清水为对照,探究叶面施肥对柑橘全爪螨生命表参数［净 增殖率(R₀)、平均代时(T)、内禀增长率(r_m)、周限增长率(λ)和种群趋势指数(I)］及柑橘苗生长参数(叶长、宽和面积, 茎长, 株高, 新梢的长度和数量)和叶片养分(N, P和K)含量的影响。【结果】柑橘全爪螨未成熟螨态的发育历期没有受到叶面肥的影响,但施用0.50%尿素的柑橘苗上第2若螨的存活率(95.40%)显著高于施用清水的对照(78.26%)和喷施0.17%复合氨基酸的处理(75.61%),其雌螨的繁殖力(42.1/♀)也显著高于对照(33.1/♀)。复合氨基酸处理柑橘苗上的雌螨寿命(19.5 d)显著长于尿素处柑橘苗上的雌螨寿命(14.8 d)和对照(14.5 d),复合氨基酸处理柑橘苗上的雄螨寿命(17.6 d)也显著长于对照(13.1 d)。总体上,在尿素处理的柑橘苗上柑橘全爪螨的净增殖率(R₀)(17.88)和种群趋势指数(I)(18.08)值最高,2个参数都显著高于对照(分别为10.08和11.17)。施用2种叶面肥显著促进了柑橘苗叶片生长(叶长、叶宽、叶面积),其N, P和K含量以及氮钾比(N/K)也显著增加。【结论】柑橘苗叶面喷施尿素和复合氨基酸都可促进柑橘苗生长,喷施尿素会导致柑橘全爪螨种群的显著增长,而喷施复合氨基酸没有导致柑橘全爪螨种群显著增长。因此,推荐使用复合氨基酸代替尿素作为柑橘的叶面肥施用。但是,喷施复合氨基酸可显著延长柑橘全爪螨成螨的寿命,所以在使用时还应该加强对其种群的监测。     

利用DNA片段测序方法探究枳属和富民枳的分类地位

富民枳(Poncirus polyandra)属于芸香科(Rutaceae)枳属(Poncirus Raf.).自发表以来,分类地位一直备受争议,其中在Flora of China中认为富民枳为柑橘杂交种(Poncirus polyandra),把枳属归并于柑橘属(Citrus).该研究选取枳属的富民枳、枳(Ponci...