鼠抗人B血型物质单克隆抗体结合部位的特异性

应用ELISA定量结合试验和ELISA定量抑制试验,测定出三株鼠抗人B血型物质单克隆抗体3-3-D9(IgGl),3-5-D12(IgGl)和6-1-G11(IgA)结合部位的结构和特异性。研究发现三株抗B血型单克隆抗体仅结合B血型物质,而不结合A,H和L_e~a血型物质,表现出对B血型的高度特异性。同时这些单抗对B血型物质TijⅡ phenol-insoluble有较高亲和力,与另一B血型物质Beach phenol-insoluble亲和力较低,尽管Beach phenol-insoluble是6-1-G11免疫用抗原。3-3-D9和3-5-D12结合部位互补于含有双分子岩藻糖残基的。这一发现在世界上尚属首次。6-1-G11结合部位互补于含有单分子岩藻糖残基的02E.Glα1。这些单克隆抗体结合部位结构和特异性的揭示,为在临床血液分型试验中广泛应用这些抗B血型单克隆抗体,取代沿用已久的人多克隆抗血清奠定了基础。     

有关动物学国际会议消息

1985 年 (1)10月2—4日 单克隆抗体:基本原理在内分泌实验和实践应用国际讨论会。在意大利,弗洛伦萨召开。初步拟订的讨论题目是:1.单克隆技术基本原理;2.单克隆抗体与受体:甾类受体,乙酰胆碱受体,肾上腺素能的受体,胰岛素受体;3.单克隆抗体对甾类血浆结合蛋白质;4.单克隆抗体对激素,垂体前叶,垂体后叶,甲状腺,副甲状腺,胰脏,甾类激素;5.单克隆抗体作为激素作用的深测剂。环核苷酸     

抗大鼠巨噬细胞和多形核白细胞单克隆抗体的制备和应用

前言在研究工作中应用单克隆抗体在许多实验动物中鉴定淋巴细胞的群体和亚群是极其有用的。在一些实室验里已经制备成功几种与大鼠淋巴细胞表面抗原相反应的单克隆抗体OX—1 OX—6及抗T细胞的单克隆抗体。但是,迄今尚未涉及到抗大鼠巨噬细胞和多形核白细胞的单克隆抗体。而单核巨噬细胞和多形核白细胞则是免疫反应的重要组成部分。因此制备针对这些细胞的单克隆抗体,已成为大鼠角膜移植实验和其他有关实验的当务之急。这些单克隆抗体将会成为有用的标志,运用到实验大鼠模型中,以鉴定多形核白细胞、单核/巨噬细胞和淋巴细胞。本文将叙述     

动物细胞培养及单克隆抗体

980150 单克隆抗体的开发和生产[德]/Baron, D. ∥Pharm. Ztg. -1995,140(5).-9～16[译自DBA,1995,14(6),95-03301] 生产单克隆抗体(MAb)的起始步骤包括免疫接种小鼠以产生适宜水平的抗原特异性淋巴细胞。根据抗原的需求、应用途径、佐剂、免疫时间     

细胞工程

8 90742兽医诊断中单克隆抗体的应用一分泌单克隆抗体的杂文套的组珍〔会,法〕/Coppe,P.泌A红红.Med.Vet一19‘88,132(3)一243~250〔译自DBA.1988,7(16),88一08124」. 虽然代价比较昂贵,免疫荧光仍然是兽医诊断‘扣的一个重要工具。如果将荧光染料结合到单克隆抗体中,那么通过镜检就能观察到抗体及其所连接的组织。单克隆抗体可通过用纯化抗原免疫小鼠或大鼠而产生。然后用聚乙二醇(PEG)使鼠的B一淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,再将所产生的杂种细胞培养在HAT选择培养基中。然后便可获得产生单克隆抗体的杂交瘤,可以将它住人适当的动物中…     

其它药剂

<正> 854145单克隆抗体:技术及其对革兰氏阴性菌感染的应用[英]/Young,L.S.//In-fection.-1984,12(4).-303～307[译自DBA,1984,3(22),84-10607]讨论了用于传染性疾病诊断和治疗的单克隆抗体生产的基本技术和原则。最好的研究系统涉及BALB/c小鼠脾细胞在抗原刺激     

应用A蛋白亲和层析法纯化单克隆抗体

应用Protein A亲和层析法,从采集的小鼠腹水中纯化出了抗凝血因子Ⅶ单克隆抗体,用SDS-PAGE和ELISA法分别检测了纯化后单克隆抗体的纯度及效价,结果显示,电泳为两条带,分别为免疫球蛋白G(IgG)的重链和轻链,纯化后的单克隆抗体纯度达到电泳纯,应用间接ELISA法测定腹水效价为1×10-7左右,与未纯化前无差异。结果表明,应用A蛋白亲和层析法能够得到纯度较高的单克隆抗体,适用于高纯度单克隆抗体的制备。     

人用鼠源单克隆抗体的生产和质量控制的指南——药品专门委员会、生物工程学/药学特别工作组

<正>1.引言 免疫动物的B-淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合结果形成杂交细胞,即杂交瘤细胞,该细胞不断生长并产生抗体。这种细胞可经克隆化后筛选,使其稳定分泌特定的专一性抗体。这些克隆细胞系的连续培养可以大量制备单克隆抗体。这种方式生产的单克隆抗体可用于各种治疗目的,如抗肿瘤治疗,免疫调节,被动免疫以及体内诊断和生物制品的制备方法。下述要求是对得自鼠源杂交瘤细胞的单克隆抗体拟在人体治疗和体内诊断应用时的要求。拟用于纯化其它制品的单抗应经本文所述方法证明为纯品不含杂质。本文不涉及用于体外诊断目的的单抗。 鼠源单克隆抗体在临床应用方面的一个重要考虑是该抗体可能与人体组织抗原(除已有描述者外)有非特异的免疫交叉反应以及可能有病毒和/或潜在致癌大分子物质。 鼠单抗用于人体治疗的基本问题可能是受者对鼠免疫球旦白或产品中的其它旦白产生抗体。这些可引起有害反应并且会限制有效抗体治疗的持续。对患者采用不能自己合成免疫球旦白链的亲代骨髓     

研制确定特异性兔单克隆抗体的稳定的兔-鼠杂交瘤

<正> 杂交瘤技术现已达到可制备抗大多数抗原的单克隆抗体的程度。可是,某些免疫原在小鼠体内免疫应答较差,并且通常很难得到具有确定表位特异性的高亲和力鼠单克隆抗体。这些问题通过曾报道的为数不多的分泌抗A群链霉菌(GAS)特异单克隆抗体的鼠杂交瘤而有所反映。     

单克隆的制备时间大大减少

约翰·霍普金斯(John Hopkins)大学的科学家发明了一种技术,这种技术能大大减少培育产生需要的专性单克隆抗体杂交瘤的时间。诺法(Nova)药品公司(莫里斯城)得到了这项技术在全世界的专利权,并计划向单克隆抗体生产者发技术许可证,以及应用这些技术发展诺法药品公司的治疗学和诊断学。据诺法公司说,新技术(已提出申请专利权)大大增加了杂交瘤生产需要的抗体的产量,使之从通常的1～5％提高到100％,因而大大减少了分     

岩藻糖特异的金橙黄网孢盘菌凝集素亲和层析分离肿瘤相关抗原的简单方法

<正>近年来已叙述了大量的抗肿瘤相关抗原的单克隆抗体,从用单克隆抗体对这些抗原的研究中看出,一些抗原对肺瘤的诊断和治疗有着重要的临床潜力是很清楚的,这些抗原有癌胚抗原(CEA)、CA19—9,Sialyl Lewis x-i,CA125,Du-PAN-2和甲胎蛋白。虽然已从不同类型肿瘤病人的血清或腹水以及培养细胞系中分离出这些抗原,除了用单克隆抗体亲和层析分离相应抗原物质外,还未见报道分步提取抗原性物质的简单有效方法。     

《生物工程当代进展》

《生物工程当代进展》第1卷(Biotechnology current progress)由Paul N. Cheremisinoff和Louise M. Ferrante编著,1991年Technomic出版公司出版,357页。该书有下列章节:1.生物传感器;2.生物工程和遗传学:领域和应用;3.cDNA克隆离析;4.病毒的浓缩和提纯:病毒学和分子生物学实用领域;5.单克隆抗体最新发展;6.自然杀伤细胞和淋巴激活素杀伤细胞(LAK):它们同单克隆抗体反应;7.早期病毒基因在诱变中     

应用单克隆抗体鉴定人类肝脏线粒体蛋白质组中的抗原优势蛋白

对线粒体蛋白质组的鉴定和分析有助于理解线粒体的功能和相关疾病的发病机制, 包括能量代谢、凋亡、自由基产生、产热作用、钙离子信号通路等. 本实验旨在鉴定人类肝脏线粒体蛋白质组中的抗原优势蛋白. 用线粒体蛋白质作为免疫原, 经过细胞融合、筛选和克隆, 制备了240多个单克隆抗体杂交瘤细胞系. 单克隆抗体识别的线粒体蛋白抗原通过人类肝脏cDNA表达文库筛选方法鉴定, 相应的线粒体蛋白质的亚细胞定位通过免疫组化证实. 发现了肝脏线粒体中6个抗原优势蛋白, 分别被至少两种特异性的单克隆抗体所识别. 这6个蛋白分别是乙酰辅酶A酰基转移酶(线粒体3-酮酯酰辅酶A硫解酶)2、醛脱氢酶1家族A1、氨甲酰磷酸合成酶1、二氢硫辛酰胺S乙酰转移酶(丙酮酸脱氢酶复合物的E2组分)、烯酰辅酶A水合酶1和羟基类固醇(11β)脱氢酶1. 这些单克隆抗体有望应用于人类肝脏蛋白质组计划的相关研究, 如去除优势蛋白、蛋白与蛋白之间相互作用的研究和验证等.     

组织与原生质体培养

931350桩物的单克隆抗体工程〔英〕/Hiatt,A.…/FEBS Lett一1992,307(1)。一71~75〔译自DBA,1992,11(20),。z一1135。〕 从以下方面综述了单克隆抗体(MAb)工程的研究状况:植物的转化及抗体的生物合成,F。区的特征,使植物表达抗体的远景策略i以及铸物一衍生MAb的应用。产生MAb的     

与顶体反应相关的抗人精子单克隆抗体及其抗原的特性 Ⅰ顶体反应的诱导及抗顶体反应精子的单克隆抗体的制备

精子必须经过获能和顶体反应(AR)才具受精能力。利用获能和AR 前后精子细胞内和精子表面大分子的变化,可探索新的避孕办法和男性不育诊断及治疗的新途径。本文将正常人精子于体外在BWW-BSA 培养基中获能,用钙离子载体A 23187诱导人精子进行AR(以三重染色和金霉素荧光染色两种方法检测这些精子的AR 率为50%左右),然后用这些新鲜的人精子作为免疫原,制备了23个抗人精子单克隆抗体,其中21个为IgM,2个分别为IgG_1和IgG_2。根据23个单克隆抗体与经获能和AR 处理的精子以及未处理精子的不同免疫反应,将它们分为A(AR 精子反应组)、B(未处理精子反应组)和C(双重精子反应组)三组,并测定了这些单克隆抗体与人的某些白血病细胞系的交叉反应。     

细胞工程

<正> 853037抗神经元γ-γ烯醇化酶专一性单克隆抗体免疫测定法的性质和应用[英]/Ki-mura,S.…//Biochem.Biophys.ActaG.-1984,799(3).-252～259[译自DBA,1984,3(18),84-08812]本文报告了抗人和牛γ-γ烯醇化酶单克隆抗体的生产与特性。用纯化的人或牛γ-γ烯醇化酶皮下注射免疫6～8周龄的BALB/c小鼠,重复免疫7次,每周1次。最后以腹     

纳米抗体技术及其在疾病诊断和治疗中的应用

单克隆抗体具有特异性结合抗原的能力,已被广泛应用于疾病诊断及治疗领域.但因单克隆抗体的组织渗透能力较差、体内的保留时间较长以及制备过程繁琐,从而限制了其在临床中的应用.自1993年首次报道在骆驼体内天然存在的单链抗体(HCAb)以来,由于其可变区间VHH(纳米抗体)具有体积小、溶解度高、特异性强以及可在细菌中大量表达等优点,较之传统单克隆抗体,VHH在疾病的诊断治疗及药物开发等医学领域具有更广阔的应用前景.本文综述了:纳米抗体的骨架区及互补决定区与传统抗体重链相应区间的结构比较;纳米抗体库的构建以及运用噬菌体展示技术对VHH库的筛选;纳米抗体技术在疾病诊断中的应用及其用于分子显像的优势,以及纳米抗体作为抗肿瘤免疫偶联物的靶向组分在癌症治疗领域中的最新进展.     

疫苗研制的新方法

<正>免疫学和细胞生物学的最新进展使现有的疫苗得到改进已有可能,甚至在将来可获得抗复杂生物体如寄生虫的疫苗。 应用现代技术如单克隆抗体,目前有可能鉴定保护性表位(能够诱导保护性免疫应答的抗原决定簇),应用化学方法或DNA重组技术,可在实验室内得到这些表位。然而,这些潜在疫苗中的大多数不能够刺激充     

抗大肠埃希氏菌F41粘附素特异单克隆抗体的研制及其初步应用

应用杂交瘤技术获得7株能稳定分泌F41特异单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为Ll0、B10、C32、B1、E7、E40和B49。在直接凝集试验、酶联免疫吸附试验和间接荧光试验中,这7株单克隆抗体对所试的31株肠道菌中所有F41阳性菌株都发生反应,与F41阴性菌株则无反应性。抗原竞争ELISA试验结果发现,这些单克隆抗体是针对F41粘附素上相同或十分相近的抗原决定簇。采用肢体金标记技术和免疫电镜证实,这些抗原决定簇在F41粘附素的每条纤毛上多次重复出现。体外肠吸附抑制试验表明,7株F41l特异单克隆抗体对B41M菌株具有很强的抑制能力,对B41菌株则必须用F41和K99单克隆抗体同时作用才具有完全的肠吸附抑制效果。本文用直接酶标单克隆抗体建立的酶联免疫斑点试验具有高度的特异性和灵敏性,可广泛用于现场快速诊断。     

单克隆抗体药物与血液系统恶性肿瘤的治疗

单克隆抗体凭借其特异性强、副作用较小的优点,越来越广泛地应用于疾病的诊断与治疗。单克隆抗体药物在血液系统恶性肿瘤的治疗中也发挥了重要作用。目前,经美国食品与药品管理局(FDA)批准用于治疗血液系统恶性肿瘤的单克隆抗体药物已有六种,在临床取得良好的治疗效果。单克隆抗体药物主要通过对肿瘤细胞的直接杀伤作用、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性反应(ADCC)、补体依赖性细胞毒性反应(CDC)和改变信号通路等机制达到治疗肿瘤的效果。另外,将单克隆抗体与放射性核素、化疗药物和毒素等偶联,用于肿瘤等疾病的靶向治疗研究,成为生物治疗领域的热点。该文对近年来国际上用于血液系统恶性肿瘤治疗的单克隆抗体药物进行了概括和总结,讨论了治疗性单克隆抗体药物存在的问题和应用前景。