油樟悬浮培养及次生代谢产物的诱导

以油樟（Cinnamomum longepaniculatum）叶片为外植体在附加6-BA和NAA不同激素浓度组合的MS培养基上筛选质地疏松、生长旺盛的愈伤组织,分别接种在MS、B5、WPM三种液体培养基中进行细胞悬浮培养,并检测诱导产生的次生代谢产物。结果表明：2mg·L^-16-BA＋0.5mg·L^-1NAA能诱导质地疏松、生长旺盛的愈伤组织,B5基本培养基中细胞长势最好;愈伤组织在B5＋2mg·L^-16-BA＋0.5mg·L^-1NAA中悬浮培养,继代2次后形成均一的单细胞;从油樟悬浮培养物中检测出50%以上的成分是苯甲醇。     

文冠果的体细胞胚胎发生

文冠果种子在MS 6-BA 1.0 mg·L-1 2,4-D 1.0 mg·L-1 NAA 1.0 mg·L-1 3%蔗糖的固体培养基上暗培养,形成愈伤组织,愈伤组织在B5 6-BA0.5mg·L-1 NAA0.5mg·L-1 2%蔗糖的培养基中弱光悬浮培养形成体细胞胚.在蔗糖为1%时,子叶状胚萌发形成完整小植株.细胞学观察表明,文冠果体细胞胚源于胚性愈伤组织的外层细胞,此区域细胞富含淀粉粒.     

生姜离体叶片愈伤组织悬浮细胞系建立与植株再生

以‘莱芜大姜’为试材,研究了生姜离体叶片愈伤组织的诱导以及细胞悬浮系建立与植株再生。结果表明,以生姜试管苗叶片为外植体,接种到MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖的培养基上,可有效诱导出生长迅速、质地疏松的愈伤组织。将获得的愈伤组织接种到MS+0.15 mg/L 2,4-D+6.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖的液体培养基上,25℃黑暗条件下震荡培养25-30 d,可建立分散性好、生长迅速的悬浮细胞系,细胞悬浮系培养的适宜参数为:初始接种量为1.0-1.5 g,继代培养的适宜间隔期为15 d,继代培养液体培养基更新比例为3/4。将悬浮细胞接种到固体培养基MS+0.2 mg/L NAA+10.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖上可获得再生植株。     

蓝花楹组织培养与快速繁殖研究

以蓝花楹(Jacaranda mimosifolia Humb.et Bonpl.)胚轴为外植体进行组织培养和快繁体系建立的研究。结果表明,蓝花楹种子经40℃-45℃温水浸泡后发芽率较高,达到55.7%。蓝花楹不定芽和愈伤组织诱导的最适培养基分别为MS+6-BA2.0 mg L-1+NAA 0.1 mg L-1+2,4-D 0.1 mg L-1和M S+6-BA 0.5 mg L-1+NAA 1.0 mg L-1+2,4-D 1.0 mg L-1。不定芽和愈伤组织增殖的最适培养基分别为改良MS培养基+6-BA 0.5 mg L-1+NAA 0.5 mg L-1+IBA 0.5 mg L-1和MS+6-BA 1.0 mg L-1+NAA 0.5 mg L-1+ZT 3.0 mg L-1。愈伤组织分化最适培养基为M S+BA 1.0 mg L-1+NAA 0.5 mg L-1+2,4-D 0.5 mg L-1。最适生根培养基为1/2MS+蔗糖20 g L-1+NAA 0.1 mg L-1+活性炭2.0 g L-1,生根率达78.3%。     

芨芨草愈伤组织器官发生及植株再生

芨芨草(Achnatherum splendens (Trin.) Nevski)种子消毒并在MS培养基上萌发获得无菌苗, 以幼苗的叶鞘和胚轴为外植体诱导愈伤组织, 经继代后进一步诱导不定芽及生根。研究结果表明, 诱导愈伤组织最适合的培养基为B5+1.5 mg.L-12,4-D+0.5 mg.L-1 NAA; 诱导芽分化较适合的培养基为B5+0.5 mg.L-1 6-BA +0.2 mg.L-1 NAA; 1/4 B5+1.0 mg.L-1 NAA+0.2 mg.L-1 IBA +1.0 g.L-1活性炭培养基则有利于芨芨草试管苗的生根。本实验建立了完整的芨芨草植株再生体系, 移栽成活率高。     

灯盏细辛的组织培养与快速繁殖

本研究以野生高含量灯盏花的叶片为外植体,在7个不同浓度NAA和BA组合的MS培养基上进行愈伤组织诱导、不定芽分化和增殖及生根的培养,确定了灯盏花快繁体系的最适培养条件：(1)初代培养基：(MS+6-BA) 0.5 mg.L-1+NAA0.1 mg.L-1;(2)丛生芽增殖培养基：(MS+6-BA) 2 mg.L-1+NAA 0.7 mg.L-1;(3) 生根培养基：(2/3MS+NAA) 0.5 mg.L-1+IBA0.8。     

金线莲外植体筛选及愈伤组织诱导研究

以金线莲茎段、叶片、茎片、不定芽为试材,分别在添加6-BA、ZT、NAA、KT 5个不同处理的MS及1/2MS培养基上培养,诱导愈伤组织。结果表明,以茎段、茎片、不定芽为外植体,在MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA0.5 mg/L、MS + NAA 2.0 mg/L + KT 0.1 mg/L和MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L + ZT 0.2 mg/L培养基中培养,均能成功诱导愈伤组织。不定芽为诱导愈伤组织最佳外植体,最佳培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L + KT 0.2 mg/L。     

罗布麻愈伤组织诱导及植株再生

以罗布麻(Apocynum venetum L.)当年的成熟种子和5周龄的幼苗叶片为外植体,研究了不同激素组合、暗培养对愈伤组织及植株再生的影响.结果表明,幼苗作外植体诱导愈伤的最佳培养基为添加1.0 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IBA的MS培养基;继代培养中1.0 mg/L 6-BA与0.2 mg/L IBA组合愈伤致密而生长迅速,长时间培养硬化的愈伤组织可用添加0.5 mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA培养基和初期暗培养获得大量质地疏松、增殖迅速的愈伤组织;再生苗诱导以0.5 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IBA组合为佳;1/2MS附加NAA 0.6 mg/L为适宜的生根培养基,初步建立了罗布麻离体再生体系.     

万寿菊杂交亲本的离体培养

以万寿菊‘钻石’雄性不育株的幼嫩叶片和子房为外植体进行离体快繁,结果表明:培养基MS+0.8 mg·L-1 IAA+0.6 mg·L-1 6-BA+30 g·L-1蔗糖既有利于叶片愈伤组织的诱导也有利于不定芽的分化,愈伤组织诱导率达97.9％,不定芽诱导率达45.8％;培养基MS+0.5 mg·L12,4-D+0.5 mg·L-16-BA+ 30 g·L-1蔗糖为诱导子房愈伤组织的最佳培养基,出愈率为77.8％;培养基MS+0.05 mg·L -1 NAA+0.5 mg·L-1 6-BA+ 30g·L-1蔗糖为诱导子房愈伤组织不定芽分化的最佳培养基;将不定芽接至MS培养基上,7d后即可生出不定根,生根率可达98％,移栽成活率达90％以上.     

多花黄精诱导愈伤组织与不定芽培养基筛选

以多花黄精Polygonatum cyrtonema的根状茎为外植体,通过L9(34)正交试验比较不同植物生长调节剂及其组合对多花黄精愈伤组织诱导的影响,筛选最适生长调节剂配方,同时筛选通过器官发生方式直接成芽较为合适的培养基。结果表明,含有2,4-D和KT的培养基诱导愈伤组织效果显著,多花黄精愈伤组织诱导的最适培养基为MS + 6-BA 2.0 mg·L-1 + 2,4-D 0.5 mg·L-1 + NAA 0.1 mg·L-1 + KT 1.0 mg·L-1,该培养基的愈伤组织诱导率可达39.10%;培养基MS + 6-BA 4.0 mg·L-1 + NAA 0.2 mg·L-1可诱导多花黄精根状茎直接产生不定芽。     

灯盏细辛的组织培养与快速繁殖

本研究以野生高含量灯盏花的叶片为外植体,在7个不同浓度NAA和BA组合的MS培养基上进行愈伤组织诱导、不定芽分化和增殖及生根的培养,确定了灯盏花快繁体系的最适培养条件:(1)初代培养基:(MS 6-BA)0.5 mg·L-1 NAA0.1 mg·L-1;(2)丛生芽增殖培养基:(MS 6-BA)2 mg·L-1 NAA0.7 mg·L-1;(3)生根培养基:(2/3MS NAA)0.5 mg·L-1 IBA0.8.     

白背三七的组织培养和高频再生

以白背三七不同生长时间的叶片及茎段作为实验材料,利用含有多种不同植物生长调节剂及其浓度配比的MS培养基分别诱导愈伤组织、不定芽和根,建立了组织培养和高频离体再生体系。结果表明：（1）最适外植体为生长15d的叶片和茎段;（2）诱导愈伤组织的最适植物生长调节剂及其浓度配比为0．5mg·L-1 2,4．D、0．8mg·L-1 6-BA和0．1mg·L～NAA,茎段和叶愈伤组织的诱导率分别为95．6％和97．8％;（3）诱导不定芽的最适植物生长调节剂及其配比为1．0mg·L-1 6-BA、0．2mg·L-1 NAA和0．1mg·L-1 TDZ,诱导率可达87．4％;（4）以MS＋0．2mg·L-1 NAA作为生根培养基可获得100％的生根率。将生长良好的的植株进行移栽,存活率可达95％。     

水杉愈伤组织诱导及植株再生

通过愈伤组织诱导器官发生途径,建立了水杉（Metasequoia glyptostroboides）的植株再生体系,探讨了不同外植体（种胚、幼叶切块、茎段、根段）和植物生长调节剂对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响。结果表明：以种胚、无菌苗叶片、茎段和根作为外植体,在MS补加2,4-D、NAA和6-BA不同组合的培养基上都能诱导得到愈伤组织,其中种胚诱导愈伤组织效果最好,诱导率可达100%,茎诱导效果次之,诱导率为97.1%。诱导愈伤组织效果较好的培养基有：MS＋1.0mg·L-12,4-D＋0.5mg·L-16-BA、MS＋0.1mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋0.5mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋1.0mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋0.5mg·L-16-BA＋2.0mg·L-1NAA、MS＋1.0mg·L-16-BA＋2.0mg·L-1NAA和MS＋0.5mg·L-12,4-D＋0.5mg·L-1NAA。以愈伤组织在MS培养基上植株再生效果最好,再生率为62.5%。     

也门铁的组织培养技术研究

以4品种也门铁的茎段为外植体进行组织培养技术研究。结果表明,控制普通也门铁茎段褐化效果最理想的培养基为MS + 0.25 g·L-1 VC + 0.50 g·L-1 Na2S2O3;诱导也门铁不定芽萌动的最佳培养基为MS + 3.0 mg·L-1 6-BA + 0.2 mg·L-1 NAA + 0.1 mg·L-1 KT;诱导也门铁不定芽增殖的最佳培养基,因品种不同而异,普通也门铁和金心也门铁为MS + 2.0 mg·L-1 6-BA + 1.0 mg·L-1 NAA + 0.1 mg·L-1 GA3,扭纹铁和金心扭纹铁为MS + 1.0 mg·L-1 6-BA + 0.5 mg·L-1 NAA + 0.1 mg·L-1 GA3;也门铁壮苗的最佳培养基为MS + 0.05 mg·L-1 6-BA + 0.05 mg·L-1 NAA + l g·L-1AC;也门铁生根最优培养基为1/2MS + 0.5 mg·L-1 IBA。     

毛白杨悬浮细胞系的建立及再生植株的获得

以毛白杨基因型TC152无菌苗为材料,研究毛白杨悬浮细胞系建立与植株再生,结果表明,通过悬浮培养和固体培养两种方法诱导毛白杨悬浮细胞分化不定芽,最终获得无菌生根苗。愈伤组织在MS＋1.5mg·L-12,4-D＋30g·L-1蔗糖的液体培养基中振荡培养,12d可建立悬浮细胞系;悬浮细胞系继代培养基为MS＋0.8mg·L-12,4-D＋30g·L-1蔗糖,继代周期为7d,悬浮细胞在MS＋1.0mg·L-16-BA＋0.1mg·L-1NAA＋0.5～1.0mg·L-1ZT＋30g·L-1蔗糖培养基中悬浮培养,可分化大量不定芽,每个培养瓶中可得到40～50个芽,个别不定芽玻璃化;不定芽在1/2MS＋0.6mg·L-1IBA＋20g·L-1蔗糖＋5.5g·L-1琼脂培养基上可分化不定根。悬浮细胞通过固体平板培养增殖为愈伤组织块后,在MS＋1.0mg·L-16-BA＋0.1mg·L-1NAA＋1.0mg·L-1ZT＋30g·L-1蔗糖＋5g·L-1琼脂的固体培养基上,不定芽分化率可达到70.00%。