环介导恒温扩增法检测肺炎链球菌的研究

目的 建立环介导恒温扩增(LAMP)检测肺炎链球菌的方法.方法 用LAMP技术扩增肺炎链球菌菌株,并应用50例临床标本采用传统培养法、PCR法、LAMP法进行检测,比较3种方法的检出率,同时检测方法特异性和灵敏度.结果 所测肺炎链球菌均获扩增产物,对其他非肺炎链球菌无交叉反应.LAMP检测灵敏度可达102 CFU/mL.50例临床标本使用LAMP法检出9例肺炎链球菌阳性(18.0％),使用传统培养法检出阳性4例(8.0％).结论 LAMP法较传统培养检测方法特异性强、灵敏度高、操作方便、快速,适合临床标本的肺炎链球菌检测.     

肺炎链球菌分型方法的研究进展

肺炎链球菌疫苗仍是全球最急需的前3位疫苗之一,为保证一个最佳的肺炎链球菌多糖菌苗和(或)蛋白多糖结合菌苗复合物,很有必要对肺炎链球菌进行菌型监测.近年来,WHO及许多国家开展了肺炎链球菌的菌型监测,取得了较好的进展,其分型方法也在不断改进.     

耐β-内酰胺类抗生素肺炎链球菌青霉素结合蛋白PBPs的氨基酸基因变异

目的 通过对台州地区耐β-内酰胺类抗生素肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因PBPs的研究,分析肺炎链球菌的耐药机制.方法 收集2009年至2010年浙江台州地区63例肺炎链球菌临床分离菌株,进行培养、鉴定及药敏试验,PCR扩增耐药株青霉素结合蛋白PBPs基因并测序分析结果.结果 PBPs基因的变异位点主要集中在保守序列STMK,SSN区域及其附近.与以往报道相一致.结论 肺炎链球菌的PBPs基因变异与β-内酰胺类抗生素耐药性密切相关.     

肺炎链球菌毒力基因体内荧光报告系统的构建*

以绿色荧光蛋白(GFP)作为体内研究的分子探针,将肺炎链球菌毒力基因与gfp融合构建肺炎链球菌自杀性荧光报告质粒,利用同源重组的原理,使gfp整合入肺炎链球菌基因组中,建立体内研究肺炎链球菌基因表达的荧光报告系统,并用荧光激发、生物学特征和生理活性测定等实验手段进行评价,证实这一肺炎链球菌荧光融合表达系统可在体内外报告肺炎链球菌的毒力基因表达,为进一步在体内分析和鉴定肺炎链球菌毒力因子的功能奠定基础。     

肺炎链球菌糖疫苗的研究进展

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是引起多种疾病的主要病原体,包括侵袭性感染(如败血症和脑膜炎菌血症),以及更常见的粘膜部位感染(如肺炎、中耳炎和鼻窦炎).根据肺炎链球菌表面荚膜多糖结构的不同可以分成不同的血清型,至今已经鉴定出98种,其中有20种具有高毒力.为了预防肺炎链球菌感染,已研制出...     

肺炎链球菌粘附和毒力因子A研究进展

肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae,SP）普遍定植于呼吸道,是人类重要的侵袭性病原菌之一,是社区获得性肺炎、中耳炎、脑膜炎、菌血症、鼻窦炎的主要病原菌。肺炎链球菌粘附和毒力因子A（pneumococcal adherence and virulence factor A,PavA）是肺炎链球菌早期感染和侵袭过程中关键的毒力因子。体外试验表明,缺失PavA的肺炎链球菌的突变株其粘附和侵入上皮细胞和内皮细胞的能力明显下降。作为一种保护性抗原,其诱导的细胞和体液免疫可以有效的抵抗肺炎链球菌的感染,是肺炎链球菌新一代疫苗的候选蛋白。但是,PavA在肺炎链球菌与人肺上皮细胞交互对话中作用机制的研究尚属空白,本文就肺炎链球菌粘附和毒力因子A得最新研究进展作一综述。     

肺炎链球菌相关毒力因子及其作用的研究进展

肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,S.pn)是导致黏膜疾病(如中耳炎、肺炎)和系统性疾病(包括败血症和脑膜炎)等严重疾病的主要病原体之一。肺炎链球菌毒力因子分为荚膜多糖、S.pn相关蛋白、细胞壁及细胞壁多糖三大类,其中荚膜多糖为最主要的毒力因子,也是疫苗中最有效的成分。毒力因子在S.pn入侵机体及引发疾病的过程中起着重要的作用。因此,毒力因子及作用的研究,不仅对预防和治疗肺炎链球菌的感染有着重要的意义,并为研发安全、有效的多糖疫苗提供一定的技术支持。现就肺炎链球菌毒力因子及其作用作一综述。     

肺炎链球菌菌种保存方法

肺炎链球菌是肺炎、脑膜炎和中耳炎的重要病原菌。自1982年以来我们参加世界卫生组织(WHO)所组织的在全世界进行肺炎链球菌的菌型监测和流行菌型分布的调查,一方面为WHO确定肺炎链球菌菌苗组分提供依据,同时也为在我国防治肺炎链球菌感染创造     

肺炎链球菌荚膜多糖特异性IgG抗体定量ELISA检测及质量控制要求

检测肺炎链球菌荚膜多糖(PPS)特异性抗体的酶联免疫吸附试验多年来经历了两次主要改进。介绍了WHO推荐的人血清抗肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)荚膜多糖抗体IgG定量ELISA(Pn PS ELISA)检测方法、关键试剂、局限性以及方法验证等内容。ELISA定量检测法,为预防肺炎链球菌的婴幼儿侵袭性疾病提供准确的抗体水平,并对肺炎链球菌疫苗的临床评价提供血清学证据。人血清中肺炎链球菌荚膜多糖抗体IgG是判断肺炎链球菌疫苗效力的重要指标。     

肺炎链球菌疫苗的研究进展

肺炎链球菌疫苗研制对于肺炎链球菌感染的防治具有重要意义。常见的荚膜多糖疫苗存在很大缺陷,需要更为有效的疫苗来替代。本文综述肺炎链球菌疫苗研制中的一些进展,包括结合疫苗的研制、几种公认的蛋白疫苗因子的研究进展和新的蛋白疫苗因子的筛选。同时还介绍肺炎链球菌疫苗研制过程中的一些新思路（联合疫苗、活疫苗、DNA疫苗）,它们是对肺炎链球菌疫苗研制方法的丰富。     

影响肺炎链球菌感受态形成的双组分系统

肺炎链球菌在生长过程中可自发形成感受态,从而改变自身的毒力和生存能力,以适应环境的变化。肺炎链球菌的部分双组分系统与其感受态形成密切相关,对相关双组分系统的研究可为进一步探索肺炎链球菌感受态形成机制、深入理解肺炎链球菌的致病机制和耐药机制提供理论依据。     

肺炎链球菌在复发性阿弗他溃疡中定居部位的变化

目的探讨复发性阿弗他溃疡表面细菌的定居状态.方法 分别对病例组溃疡灶及对照组唇部粘膜进行了细菌学分离对比研究.结果 病例组溃疡灶以肺炎链球菌为主,而对照组唇部粘膜以甲型溶血性链球菌为主. 结论复发性阿弗他溃疡患者中肺炎链球菌定居部位发生改变.     

应用分子生物学方法鉴定6群肺炎链球菌血清型

目的利用分子生物学方法,鉴定26株6群肺炎链球菌的血清型。方法利用6群肺炎链球菌荚膜多糖相关基因设计合成6对特异性引物,PCR扩增26株肺炎链球菌,并对PCR产物进行基因序列的测定及分析。结果26株肺炎链球菌cpsD蛋白229个氨基酸中有7个突变点,第220~222位均没有缺失;其中,19株肺炎链球菌具有与wci Nα蛋白氨基酸序列完全一致的氨基酸组成,第150位均为Ala,第38位均为Asp,其余7株与wciN_α蛋白氨基酸序列没有相似性,但与wciN_β蛋白氨基酸序列相似性超过99%;15株wciP蛋白第195位为Ser,11株wci P蛋白第195位为Asn。综合分析比对后,26株6群肺炎链球菌中,11株属于6A型肺炎链球菌,8株属于6B型肺炎链球菌,4株属于6C型肺炎链球菌,3株属于6D型肺炎链球菌。结论分子生物学方法可用于6群肺炎链球菌血清型的鉴定,为完善6群肺炎链球菌的菌种档案提供了实验依据。     

新型肺炎链球菌疫苗研究进展

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是引发人类肺炎、中耳炎、脑膜炎的主要病原体。为了预防肺炎链球菌感染,人类已研制出了多种相关的疫苗。目前,常用23价肺炎球菌多糖疫苗(23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine,PPV23)预防成人和2岁以上儿童肺炎链球菌的感染,用7价、10价、13价肺炎球菌结合疫苗来预防婴幼儿肺炎链球菌的感染。虽然荚膜多糖类疫苗能预防其所包含的肺炎链球菌血清型的感染,但非疫苗血清型的菌株还是可以在鼻咽部定植,并引起感染,而且结合疫苗研制工艺复杂、价格昂贵,在发展中国家使用还不普及。鉴于上述原因许多疫苗公司开始研发具有保护力强、价格低廉的新型疫苗。近年来,肺炎链球菌全细胞疫苗和肺炎链球菌纯化蛋白疫苗由于其血清非依赖性和较低的生产成本已成为人们关注的焦点。现对肺炎链球菌新型疫苗的研制及临床应用作一概述。     

肺炎链球菌致病机理的最新研究进展

肺炎链球菌致病过程包括粘附 ,炎症反应 ,细菌产物的细胞毒作用。阻止肺炎链球菌粘附到宿主细胞受体和定植在粘膜表面 ,是预防其感染的最有效的途径。综述了肺炎链球菌粘附过程的最新研究进展和肺炎链球菌毒力因子及其可能的致病机理 ,对研制新一代疫苗 ,预防和治疗肺炎链球菌感染有重要意义。     

钦州市自然流产人群肺炎链球菌携带率研究

目的探讨钦州市自然流产人群肺炎链球菌携带率状况与自然流产的相关性。方法构建基于肺炎链球菌特征目标基因lyt和ply基因的实时荧光PCR检测体系,检测自然流产人群肺炎链球菌携带率,并与常规孕检的对照组进行比较。结果自然流产组人群的肺炎链球菌特征基因检出率为15.26%,对照组的肺炎链球菌特征基因检出率为15.09%,两组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论肺炎链球菌感染与自然流产不存在相关性,不是引起流产的主要因素,但建议孕期个体应注意预防肺炎链球菌感染,避免由此带来的不良结局。     

肺炎链球菌C多糖的研究现状

自肺炎链球菌C多糖(C-Ps)发现以来,关于C多糖抗体是否具有保护性一直是人们研究的热点。C-Ps含有磷酸胆碱基团(PC),该基团在肺炎链球菌基因转化、子代细胞分离、人体呼吸道定植和增强病原菌毒力等方面具有重要作用。有研究发现,肺炎链球菌培养时必需加入胆碱成分以促进PC的合成;PC是C-Ps主要的抗原决定簇,并且PC抗体具有保护性,可抵抗多种肺炎链球菌血清型的感染。本文就肺炎链球菌对胆碱的营养需求、PC在肺炎链球菌感染过程中的作用、C-Ps抗体研究和C-Ps的应用四个方面的研究现状作一综述。     

儿童链球菌性肺炎的季节特点及病原菌的耐药性分析

目的:回顾性分析因肺炎就诊我院的儿童其感染肺炎链球菌对青霉素等临床常用抗生素的耐药性.方法:调阅2008年一月-2012年1月间,所有因肺炎入住我院并在我院治愈的患儿病历及呼吸道标本中的细菌分离、培养、耐药性报告单,剔除其他病原菌所致的儿童肺炎,仅针对分离出的388株肺炎链球菌药敏结果进行回顾性分析.结果:选定的研究期间内,肺炎链球菌所致的儿童肺炎有鲜明的季节特点,以冬春,秋冬交替时段高发.肺炎链球菌对青霉素的耐药率呈逐年上升趋势,分别为48.9％、53.8％、52.6％和55.7％.另外,统计还发现SP对临床常用的抗生素如头孢呋辛(77.8％)、阿奇霉素(82.0％)、红霉素(86.9％)、四环素(79.9％)、克林霉素(80.9％)、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑(69.1％)等的耐药性也较以往的报道为高.尽管SP的耐药性较为严峻,但SP对临床部分抗生素尚具有较高的敏感性,这其中比较敏感的包括头孢噻肟、头孢曲松、美罗培南、万古霉素、氧氟沙星以及利奈唑胺,这给临床使用抗生素治疗SP所致的感染性肺炎提供了很好的取舍参考.结论:链球菌所致的儿童肺炎具有鲜明的季节特点,经典的治疗药物青霉素的耐药逐年升高,本地区儿童肺炎链球菌的耐药情况较为严峻,使用抗生素治疗SP感染时应注意参考药敏试验结果.     

肺炎链球菌与宿主炎症小体的相互作用机制

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是一种定植于上呼吸道的革兰阳性胞外菌,是导致侵袭性肺炎的主要原因,所致疾病具有较高的发病率和死亡率。炎症小体(inflammasome)是胞浆内重要的蛋白复合体,在先天免疫应答过程中起着重要作用。大量研究表明,肺炎链球菌感染可诱导宿主炎症小体的激活、半胱天冬酶1的活化和促炎性细胞因子的分泌。在长期选择压力的作用下,肺炎链球菌的部分突变菌株可以逃避炎症小体的识别。本文就肺炎链球菌感染过程中炎症小体的激活、炎症小体在抗肺炎链球菌过程中的作用以及肺炎链球菌逃避宿主炎症小体识别的机制三方面对肺炎链球菌与炎症小体之间相互作用的研究进展进行综述。     

肺炎链球菌结合疫苗的发展和评估

由于肺炎链球菌对青霉素等多种抗生素的高水平耐药性以及对万古霉素耐受性的出现,强调了采用其他方法预防肺炎链球菌感染的重要性,即进行免疫接种。应用与在b型流感嗜血杆菌疫苗中所用相同载体蛋白偶联的肺炎链球菌偶联疫苗,与多糖疫苗作比较能较好地增强婴儿和儿童的免疫应答,并且能在世界范围内增强预防肺炎链球菌疾病的能力。本文综述了有关多价肺炎链球菌偶联疫苗临床试验结果,包括对疫苗的评估、为了疫苗的进一步发展而对有效载体蛋白的鉴定、有关临床试用新型疫苗和质量控制,以及预防肺炎链球菌的其他疫苗。