用中空纤维超滤膜浓缩酶

本文介绍了2709碱性蛋白酶及7658α-淀粉酶采用03型与05型中空纤维超滤膜进行中试规模的浓缩试验,所获得的有关浓缩倍数,酶的收率,Rf值及超滤流率等数据,对该超滤膜进行了评价;并对运行中压力,温度以及关于膜的清洗进行了讨论。     

膜分离浓缩芦荟原汁

目的：探寻膜分离浓缩芦荟原汁的最佳处理技术。方法：对超滤膜、超滤压力、温度进行三因素三水平正交实验法考察芦荟原汁分离浓缩的条件和方案。结果：膜分离浓缩芦荟原汁的最佳处理技术参数为UF-1组为超滤膜,操作压力为0.6MPa,温度35-45℃。结论：利用膜分离技术能很好地将芦荟原汁分成三部分：芦荟水、芦荟甙浓缩液、芦荟多糖浓缩液。     

HAV病毒液的3种浓缩方法比较

目的：对HAV病毒液的3种常见浓缩方法进行分析比较,为HAV病毒研究及规模化疫苗生产提供参考。方法：使用MILLIPOREPELLICON超滤、PEG6000沉淀、蔗糖．甘油垫三种方法对纯化HAV病毒液进行浓缩,用ELISA方法对浓缩液进行抗原滴度检测,计算不同浓缩方法的回收率。结果：HAV病毒液经过7次超滤循环浓缩,平均回收率为86％;PEG浓缩方法回收率平均72．5％;蔗糖．甘油离心浓缩方法平均回收率53．3％。结论：蔗糖／甘油超离心法,集纯化浓缩一体,适用于样品量较少,需要高浓度样品的试验;PEG浓缩得率适中,操作简单,应用范围较广;超滤膜浓缩在大规模疫苗生产或样品量较大时适用,但需控制样品浓度及浓缩倍数不能太高。以免样品损失。     

HAV病毒液的3种浓缩方法比较

目的:对HAV病毒液的3种常见浓缩方法进行分析比较,为HAV病毒研究及规模化疫苗生产提供参考。方法:使用MILLIPORE PELLICON超滤、PEG 6000沉淀、蔗糖-甘油垫三种方法对纯化HAV病毒液进行浓缩,用ELISA方法对浓缩液进行抗原滴度检测,计算不同浓缩方法的回收率。结果:HAV病毒液经过7次超滤循环浓缩,平均回收率为86%;PEG浓缩方法回收率平均72.5%;蔗糖-甘油离心浓缩方法平均回收率53.3%。结论:蔗糖/甘油超离心法,集纯化浓缩一体,适用于样品量较少,需要高浓度样品的试验;PEG浓缩得率适中,操作简单,应用范围较广;超滤膜浓缩在大规模疫苗生产或样品量较大时适用,但需控制样品浓度及浓缩倍数不能太高,以免样品损失。     

超滤法浓缩谷氨酰胺转胺酶的影响因素研究

对微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)超滤浓缩的工艺条件进行了探讨及优化。实验采用截留分子量为30 kDa的聚醚砜(PES)膜,当发酵液初始pH为7,超滤浓缩倍数为4倍时,可以得到理想的MTG回收率。同时对超滤液中蛋白酶的变化进行了分析,发现随着超滤倍数的提高蛋白酶也逐渐提高,但在浓缩4倍以后达到较稳定的水平。聚醚砜(PES)超滤膜使用后用稀释的NaOH溶液浸泡清洗处理50 min后,膜通量可以恢复98.12%。     

北京棒状杆菌AS 1.299噬菌体的研究

本文报道了用分子超滤膜法浓缩噬菌体溶液的效果以及用电镜对北京棒状杆菌AS 1.299噬菌体的观察。结果表明,这种浓缩方法简便易行,浓缩效果好。浓缩液适于电镜观察。根据我们比较,这是一种侵染北京棒状杆菌AS1.299的新噬菌体,命名为A_(519)。     

膜分离法纯化大蒜超氧化物歧化酶的条件研究

本文探讨了膜分离技术分离纯化大蒜超氧化物歧化酶(SOD )的工艺条件,研究了中空纤维超滤膜分离提纯大蒜SOD的工艺参数.通过单因素实验,分析了温度、压力、透过率对SOD活力回收率的影响;并通过正交实验确定出超滤膜分离法的最佳条件:温度32 ℃,压力0.15 MPa,透过率90%.在此基础上研究了纳滤膜对超滤液进行浓缩纯化的工艺条件,适宜的纳滤条件为:温度32 ℃,压力1.4 MPa.     

天然橡胶乳清中白坚木皮醇的规模化提取技术研究

为了开发从天然橡胶乳清中规模化提取白坚木皮醇技术,课题组以膜分离技术替代传统的蒸发浓缩和柱层析工艺,对天然橡胶乳清进行除杂和浓缩,结合结晶法提纯,制备出高纯度白坚木皮醇成品。试验采用截留分子量为1000 Da的超滤膜处理乳清,最大化的去除了杂质,接着用纳滤膜对乳清进行浓缩,去除小分子无机盐,经过膜处理的乳清浓缩液极易结晶,大大提高了生产效率,实现了白坚木皮醇的规模化提取。提取样品经检测,各项指标与白坚木皮醇特征参数相符。     

高活力5′-磷酸二酯酶制备及水解RNA的研究

目的:获得高活力5′-磷酸二酯酶液,提高核酸RNA酶解效率。方法:采用超滤和盐析技术对从麦芽根浸提液中纯化5′-磷酸二酯酶工艺进行研究,采用单因子试验法优化酶解工艺条件。结果:浸提液依次经过5万Da超滤膜浓缩、40%饱和度硫酸铵盐析、5万Da超滤膜脱盐后,酶活力可达1 500U/ml;第1次超滤膜透过液可作为浸提液循环使用,酶活力是水浸提的1.15倍;第2次超滤膜透过液浓缩5倍后,可回收56.46%硫酸铵,浓缩母液可按1∶2比例循环使用;在底物浓度5.8%、酶用量8%、反应时间2h条件下,RNA酶解率可达95%。结论:初步建立了适合工业化规模的核苷酸生产新工艺。     

有机膜在谷氨酸发酵液分离中的应用研究

目的：采用有机微滤膜和超滤膜连续过滤谷氨酸发酵液,去除菌体蛋白,以利于后续的提取操作。方法：利用微滤膜去除菌体及大分子蛋白等杂质,微滤透过液进入超滤膜系统,进一步去除小分子蛋白及色素等,再利用浓缩连续等电法进行提取,得到谷氨酸。结果：发酵液经过滤后,可溶性蛋白、色素去除率分别可达到86.7%和63.2%,谷氨酸的损失率仅为0.6%;谷氨酸的提取收率和纯度分别可达到95%和99%。结论：利用有机膜系统处理谷氨酸发酵液,可高效去除发酵液中的菌体蛋白和色素等,明显地提高了谷氨酸的提取收率及纯度。     

白喉毒素超滤浓缩后膜通透性恢复试验的研究

应用超滤浓缩技术对白喉毒素培养液进行澄清过滤和超滤浓缩,已经早已为生产厂家所使用.但是,超滤膜的通透性下降很快,使膜的使用期限大大缩短,生产成本较高.因此在试验过程中,注重摸索超滤过程的中间控制以及超滤结束后的清洗方法,特别是使用0.5 mol/LNaOH+200ppm次氯酸钠作为清洗剂,在超滤结束以后对滤膜进行彻底的恢复性清洗,可以使澄清和浓缩过滤速度分别达到平均77 L/M2·h和75 L/M2·h,回收率分别达到93.1%和92.8%,使滤膜的滤过性能(NWP)基本恢复到滤前水平.     

超滤膜技术在环境工程水处理中的应用管窥

超滤膜技术区别于传统的水处理技术,是在原来水处理技术上的改进、创新。超滤膜技术应用时受到外部条件的影响相对较小,因此,近来在水处理工程中应用较为广泛。文章从超滤膜技术在环境工程水处理中应用所涉及的技术原理及应用特点入手,分析超滤膜技术试验实践中的数据,进行了超滤膜技术在环境工程水处理中的应用研究。     

应用超滤技术提取坛紫菜多糖的研究

以截留分子量为50 KD的超滤膜对坛紫菜粗多糖提取液进行超滤分离。结果表明,超滤对坛紫菜粗多糖提取液具有较好的脱色效果,脱色率达91.65%。超滤技术能很好地保留坛紫菜粗多糖中的生理活性物质,浓缩了坛紫菜粗多糖提取物,使粗多糖中总糖含量从超滤前的34.95%提高到52.07%,明显提高了坛紫菜粗多糖的糖含量,同时进一步纯化了样品。     

环境水体中GⅡ型诺如病毒浓缩研究

自行设计一种适合野外现场采样的病毒采集浓缩仪,采用一种新型阳离子膜NanoCeram,进行环境水体中GⅡ型诺如病毒浓缩研究。通过预实验,考察了预处理膜、不同的二次浓缩方法、不同洗脱液对病毒回收率的影响,随后优化整个浓缩过程并确定最佳的病毒浓缩方法。结果显示,预处理膜对病毒回收影响较大,PEG-NaCl沉淀、硅藻土吸附这两种二次浓缩方法的效果相当,选择0.15mol/L Na2HPO4作为硅藻土洗脱液。确定了NanoCeram阳离子膜的病毒回收率为3.02%。最后对北京市丰台区洋桥生活污水进行现场采样,成功检测到GⅡ型诺如病毒,证明该方法有效可行,适合于环境水体中诺如病毒的浓缩分离和检测。     

基于超滤技术的血塞通注射液的工艺优化

以HPLC和动态浊度法分别检测血塞通注射液超滤前后有效成分及细菌内毒素的含量变化,研究了10 kDa及50 kDa截留分子量的超滤膜对血塞通注射液中有效成分的影响及细菌内毒素的去除效果.结果表明,两种截留分子量的超滤膜均可有效的去除药液中的细菌内毒素,但10 kDa超滤膜对三七总皂苷有效成分有明显损失,50 kDa超滤膜对成分保留率均在95%以上.选用截留分子量为50 kDa的超滤膜即可保留有效成分,又可有效去除细菌内毒素,适用于血塞通注射液的生产.     

抗中华眼镜蛇毒鸡卵黄抗体的制备及其效价测定

目的探索免疫鸡制备高效价抗眼镜蛇毒抗体的新方法。方法用中华眼镜蛇原毒作抗原免疫22周龄的莱航母鸡,水溶法粗提抗体,DEAE Sepharos FF柱纯化,切向流超滤膜脱盐及浓缩,免疫电泳及双向免疫扩散法进行鉴定及效价测定,采用BCATMProte in Assay K it测定蛋白含量。结果鸡卵黄经水溶法的粗提物与中华眼镜蛇毒即有较明显沉淀反应,其效价随着纯度的提高而增强。将马源性抗血清的蛋白质含量调至与浓缩的IgY相同(2mg/m l),经双向免疫扩散及免疫电泳鉴定,该抗体不但对中华眼镜蛇毒有特异性结合,与孟加拉眼镜蛇毒亦有较强的交叉免疫活性,其效价较马抗眼镜蛇毒血清高4倍以上。结论用中华眼镜蛇原毒制备的IgY抗体,其效价较马抗血清有显著提高,并与孟加拉眼镜蛇毒有高度交叉免疫。本实验为抗眼镜蛇IgY的应用及其它抗蛇毒IgY的制备奠定了基础。     

超滤膜分离纯化加纳籽中5-羟基色氨酸的研究北大核心CSCD

研究了超滤膜从加纳籽中分离纯化5-羟基色氨酸的相关膜工艺条件及参数,并筛选出适合的聚砜超滤膜。研究结果表明,截留分子量为50 K的超滤膜分离纯化5-羟基色氨酸的效果要优于截留分子量分别为10 K和100 K的超滤膜。超滤膜分离纯化5-羟基色氨酸优化工艺条件:操作压力0.10 MPa、操作温度35℃、料液质量浓度1.141 mg/m L、p H值7.0,在此条件下5-羟基色氨酸转移率为83.5%,纯度可达90.5%。     

超滤膜分离纯化加纳籽中5-羟基色氨酸的研究

研究了超滤膜从加纳籽中分离纯化5-羟基色氨酸的相关膜工艺条件及参数,并筛选出适合的聚砜超滤膜。研究结果表明,截留分子量为50 K的超滤膜分离纯化5-羟基色氨酸的效果要优于截留分子量分别为10 K和100 K的超滤膜。超滤膜分离纯化5-羟基色氨酸优化工艺条件:操作压力0.10 MPa、操作温度35℃、料液质量浓度1.141 mg/m L、p H值7.0,在此条件下5-羟基色氨酸转移率为83.5%,纯度可达90.5%。     

毕赤酵母工程菌表达乙肝表面抗原结合蛋白(SBP)的发酵纯化工艺研究

乙肝表面抗原结合蛋白(HBsAg binding protein,SBP)是以HBsAg为探针,通过人肝cDNA噬菌体表达库筛选的一种人源蛋白。SBP可特异性结合乙肝表面抗原(Hepatitis B virus surface antigen, HBsAg),增强乙肝疫苗的免疫效果,是一种潜在快速高效的免疫佐剂。成功构建了分泌型高表达SBP的毕赤酵母工程菌。对该菌株进行了放大规模发酵表达,并对纯化工艺进行了研究。在发酵实时检测过程中,自诱导剂甲醇加入开始,SBP蛋白的分泌表达量随时间推移而逐渐增加,发现于38h达到最佳水平且此时杂蛋白含量最少,是放罐收集菌液的最佳时间。18L发酵液在低温离心除菌体和沉淀物后可得到15L的上清液,再利用截留量为5kDa的超滤膜包将上清液浓缩至2L,将浓缩后的上清液依次通过S200分子筛柱和TDEAE阴离子交换柱进行分离纯化,可得到300ml浓度为1.125mg/ml、纯度达98%的目标蛋白液,发酵液得率为22.5mg/L;最后将蛋白液定量分装冻干低温保存。所获得的放大规模SBP发酵诱导表达条件和SBP蛋白的分离纯化工艺,为SBP蛋白大规模生产奠定了坚实的基础。     

超滤膜纯化绞股蓝皂苷的工艺

探讨采用超滤膜分离纯化绞股蓝总皂苷的工艺。以固形物得率和绞股蓝总皂苷含量为评价指标进行正交试验,对操作压力、溶液温度和膜的规格等因素进行优选。发现最佳工艺条件为选择截留相对分子质量为3×104的超滤膜,在溶液温度40℃、操作压力2.0×106Pa条件下纯化效果较好;所选择的超滤膜纯化绞股蓝皂苷的工艺操作简单可靠,所得产品纯度高。