葱兰黄化病病原类菌原体的研究

葱兰为石蒜科(Amaryllidaceae)草本植物,是一种在我国各地普遍栽培的多年生观赏花卉.葱兰黄化病是1992年在杭州发现的一种新病害,该病对葱兰的生长和观赏价值有严重影响.罹病株(丛)最初表现为深红色斑点,逐渐扩大为鲜红色条斑或斑块并转为亮黄色,最后整株叶片大部分转为鲜艳的黄色,呈现典型的系统侵染.发病1—2月后整株(丛)地上部分枯死.发病一般始于早春(3月上旬),春末夏初有一个发病高峰期;秋末有另一个发病期,但病状较轻;感染株有恢复现象,即在下一个生长季能从地下部分重新生长出叶片,但病株叶片明显细小,有丛簇现象,病株开花少且花期短.作者从1992年春起,对该病害进行了病原分离、生物学测定和病组织超薄切片电镜检查,发现该病害可能与类菌原体有关,现将研究结果报告如下.1 材料和方法1.1 样品感病植株分别于1992年4月采自浙江农业大学校园和1992年6月采自杭州花圃,用盆栽保存于防虫温室中,同时采取健株作为对照.1.2 用病株分离病原和接种     

植物黄化病害中发现的一类新病原——类菌质体

在植物病害的研究中,有一类属于典型黄化的病害,病征特点:植株黄化、侧枝丛生、矮化、萎缩、花器变叶等。例如桑树萎缩病、枣疯病、泡桐丛枝病、柑桔黄龙病、翠菊黄化病、三叶草变叶病等均属黄化型病害。这类病害,最早认为是生理病害所致,后来有许多工作者又认为是病毒病害,因为在这类病株中未发现有真菌、细菌、线虫等病原,它们又能用人工嫁接方法感染或通过叶蝉、木虱以及菟丝子等媒介传播。但长期以来对这类病害未能采用通常分离病毒的方法分离出病毒粒子,电子显微镜观察也未能见到分离的病毒粒子。许多人把未能分离到病毒的原因归于病毒不稳定或含量过低。最近     

枝原体和类菌质体辨析

各类高等院校目前使用的《微生物学》教材中,有、些在述及枝原体(Mycoplasma)时,称“枝原体又称类菌质体”^[1,2],或将有关的微生物含糊其辞地称作“枝原体类”^[3],《英汉微生物学词汇》和《英汉生物学词汇》等权威性工具书中,对Mycoplasma的释义也有枝原体和类菌质体之说。其实,枝原体和类菌质体二者既密切相关,又不等同,对此甚有必要加以澄清,以利于在教学工作中有一个正确的概念传授给学生。     

柑桔黄龙病病原体的研究——Ⅲ.广东柑桔黄龙病病树中的类菌质体病原

1978年3月、7月、8月,在广东省普宁县的柑桔黄龙病病树上取样进行包埋切片,电镜观察。结果在病树叶脉筛管细胞中见到了类菌质体病原,形态不一,大小为60～700毫微米,双层膜的厚度为20毫微米左右。对病树加压注射盐酸四环素后,病状得以减轻,以至消失,长出新梢表现正常,提高了座果率,果实大小和品质正常。     

类菌原体研究现状与发展趋势

类菌原体研究现状与发展趋势黄文晋,崔晓江,林木兰,彭学贤（中国科学院微生物研究所北京１０００８０）引起植物病害的病原生物是多方面的,如病毒、类病毒、细菌、真菌、线虫等。长期以来,科技工作者一直在努力探寻各种病害的诱因,进而采取预防、治疗以至根除病害的...     

类菌原体引起的小麦蓝矮病

据对介体条沙叶蝉进行接种传毒试验发病的小麦病株和传毒的条沙叶蝉进行超薄切片电镜观察,在病株韧皮部筛管细胞和介体唾液腺中均可见类菌原体病原物(MLO),其直径为60- 700nm,单位膜厚度为8-10nm,形态多样．主要为球形、椭圆形、哑铃形等。四环素对麦苗接种发病具有明显的抑制作用．说明小麦蓝矮病是由介体条沙叶蝉传播的类菌原体病原物引起的。这是对小麦类菌原体蓝矮病首次进行的较系统的研究。     

利用光学显微镜观察泡桐丛枝病株中的类菌质体

应用Feulgen染色切片法检测了泡桐丛枝病株中类菌质体的存在。所得结果表明Kartha等1975年报道的方法是有效的。在病株不同部位取样,韧皮部或叶脉切成0.5厘米大小固定在Helly氏固定液中。染色操作与Kartha等相同。切片在光学显微镜下检视,类菌质体呈现暗色斑块或斑点,凝聚在树木细胞中心或细胞边缘,植物细胞作为背衬呈绿色。     

泡桐丛枝病病树中的类菌原体与病毒

在泡桐丛枝病病树中检出类菌原体和病毒质粒(15×250～300 nm)。在病叶叶脉筛管细胞中,观察到有些类菌原体似有穿透细胞壁现象,这种现象是否为通过筛孔或破坏细胞壁还有待阐明。这种病毒可以由病树分离、浓缩和接种到草本寄主(心叶烟、普通烟和洋酸浆),并引起系统花叶症状。可从这些病株分离得病毒质粒和回接到泡桐健苗上引起发病。泡桐丛枝病可能系由类菌原体和病毒一起感染所致,丛枝黄化症状可能由前者引起,而花叶症状可能由病毒引起。茶翅蝽(Halyomorpha halys Stal)与传播泡桐丛枝病有关,可能为媒介昆虫。     

泡桐丛枝病病树中的类菌原体与病毒

在泡桐丛枝病病树中检出类菌原体和病毒质粒(15×250～300 nm)。在病叶叶脉筛管细胞中,观察到有些类菌原体似有穿透细胞壁现象,这种现象是否为通过筛孔或破坏细胞壁还有待阐明。这种病毒可以由病树分离、浓缩和接种到草本寄主(心叶烟、普通烟和洋酸浆),并引起系统花叶症状。可从这些病株分离得病毒质粒和回接到泡桐健苗上引起发病。泡桐丛枝病可能系由类菌原体和病毒一起感染所致,丛枝黄化症状可能由前者引起,而花叶症状可能由病毒引起。茶翅蝽(Halyomorpha halys Stal)与传播泡桐丛枝病有关,可能为媒介昆虫。     

柑橘黄龙病株不同部位内生细菌群落结构的多样性

采用PCC(Pearson correlation coefficient)、系统聚类和多样性指数研究了柑橘黄龙病(citrus huanglongbing,HLB)植株不同部位叶片、枝条及其根部内生细菌的相互关系及其群落结构多样性.结果表明,从供试柑橘中分离得到26株内生细菌(叶片10株,枝条14株,根部2株)隶属于10个属19个种.Nested-PCR结果显示,柑橘植株不同空间叶片中,黄龙病病原的阳性检出率为58.3％.用LSD法比较显示,柑橘内生细菌在不同器官的分布量大小依次为根＞叶＞枝条.上、中、下不同部位叶片和枝条内生细菌分布量差异不显著,而东、西、南、北不同方位的叶片和枝条内生细菌分布量差异显著(P＜5％).柑橘内生细菌之间的PCC分析表明,Bacillus pumilus和Bacillus sp.与柑橘黄龙病病原菌呈显著负相关,Bacillus sp.和Bacillus pumilus与Bacillus subtilis呈显著正相关.Bacillus brevis和Escherichia hermannii与Bacillus vesiculariss存在显著正相关.对柑橘不同器官内生细菌的PCC分析表明,同种器官的内生细菌之间呈正相关,不同器官的内生细菌之间呈负相关.以内生细菌在各器官的分布量为指标分析不同器官之间的相关性,结果表明,叶片与枝条呈正相关,PCC为0.55,叶片与根部、枝条与根部均呈负相关,PCC分别为-0.19和-0.13.16S rDNA序列聚类分析表明,柑橘内生细菌可分为两大类,第Ⅰ大类为革兰氏阳性菌,第Ⅱ大类为革兰氏阴性菌.第Ⅰ大类又可以分为芽孢杆菌属和短小杆菌属两个亚类,第Ⅱ大类也可以分两个亚类.对柑橘黄龙病病原与叶片内生细菌进行聚类分析,可以分为三类,第Ⅰ类特征为内生细菌存在所有部位的叶片;第Ⅱ类特征为内生细菌与黄龙病病原菌存在负相关性;第Ⅲ类特征为内生细菌只存在特定部位叶片.当马氏距离为27.23时,可将柑橘黄龙病内生细菌群落结构聚为3类,第Ⅰ类特点是在不同部位叶片均有分布,为完全分布类型,且分布量较大,第Ⅱ类特点是在各器官中均为不完全分布类型,且分布量不均匀,第Ⅲ类特点是根部分布特性且分布量较大.分析多样性指数表明,SHANNON(H1)指数在叶片最高,根部最低.SIMPSON(D)指数在枝条最高,根部最低.Pielou指数在根部最高,枝条最低.     

枣疯病类菌原体抗血清的制备及其应用的初步研究

以确证枣疯病类菌原体抗原性的有无为目的,采收病树新梢茎皮用差速离心法进行了抽提分离。将此类菌原体抽提物用作抗原,对家兔免疫注射,制备了枣疯病类菌原体抗血清。用血清学方法测定了免疫原的抗原性及抗体效价。结果表明,枣疯病类菌原体具有抗原性。但其特异性抗体效价不高,仅是1/32.实验还证明了ELISA技术可以用予枣疯病类菌原体抗血清的研究。     

RFLP在植物类菌原体鉴定和分类中的应用

ＲＦＬＰ在植物类菌原体鉴定和分类中的应用林含新,谢联辉（福建农业大学植物病毒研究所,福州３５０００２）植物类菌原体（ＭｙｃｏｐｌａｓｍａｌｌｋｅＯｒｇｇ－ｎｉｓｍ,简称ＭＬＯ）为１９６７年日本学者土居原二首次发现,现已报道了近６００种植物上有这类病害...     

泡桐丛枝病类菌原体DNA的分子克隆与序列分析

以部分纯化的泡桐丛枝病类菌原体为材料,抽提ＤＮＡ,进行ＥｃｏＲ Ⅰ－Ｈｉｎｄ Ⅲ双酶切,回收的ＤＮＡ 片段插入到载体ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋ ）中,转化Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ ５α。经双重杂交初筛以及Ｄｏｔｂｌｏｔ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交的回交确证,获得两个仅与患丛枝病泡桐总核酸有杂交而与健康对照无杂交的克隆（Ａ４,１．６９ ｋｂ;Ｃ４２,２．０８ ｋｂ）。部分测序的结果表明：Ａ４ 和Ｃ４２插入片段中Ａ＋Ｔ含量分别为７２．５％ 和６７．９％ ,具有典型支原体属微生物的碱基组成特征     

海洋中病原性嗜盐菌

长期以来,国内外屡次报道了人们由于吃了海产品而引起食物中毒,但以往均认为这是鱼品腐败后的有毒分解产物所引起,一般推想海洋中盐度高、水温低、有机质少等不利因素,不会发现为害人类病原菌。1960年日人泷川严首次报道了从食物中毒患者的粪便中分离出一种嗜盐性病原菌,以后又在许多人     

桑萎缩病的类菌原体病原物及其超微病变特征

对感染桑萎缩病的桑叶及嫩梢进行超薄切片的电镜观察发现,其韧皮部组织,筛管及伴胞内有多型性类菌原体。菌体为圆形及椭圆形,大小约为50～160nm,双层膜,厚度约为8～10nm,内含物中具有核质样的纤维状物质,而在健株叶梢中未观察到任何病原体．随着病害的发展,可观察到细胞成份的降解。第一,在感病植株叶肉细胞内存在部分细胞核的降解、核膜破裂或核质流失甚至核仁分散消失。第二,叶绿体内有不同程度的淀粉粒和嗜锇颗粒累积,部分叶绿体外膜破裂,基质流失,基粒降解。第三,线粒体及粗面内质网在数量上有所增加,部分线粒体嵴已降解。     

四环素对多年生草本植物类菌原体病害的施用时间与效果

影响四环素对多年生草本植物的类菌原体病害处理效果的限制因素是蒸腾作用,其中尤以适量的叶片和发达的根系(抗生素营养液处理)是必不可少的。渗透吸收是不能把药液输送到感病植物组织的全部维管束组织中。     

百合细胞中内生菌的发现

在健康的百合鳞茎、地上茎、叶和幼胚等组织的细胞中发现了“内生菌”。通过光学显微镜、电镜和组培等观察,“内生菌”不影响百合细胞的正常分裂和分化,再生植株健壮。这些细菌还能随着宿主细胞的分裂转移到子细胞。“内生菌”椭圆形或近圆球形。电镜切片菌壁厚,单层,均质,为典型革兰氏阳性菌壁结构。电镜观察结果与光学显微镜观察内生菌的革兰氏染色反应是一致的。     

发现新病原微生物的分子生物学途径

近年来,分子生物学方法已成为寻找人类疾病新病原微生物的有效方法,使一些不能正常培养的致病因子得以鉴定。利用代表性差异分析（ＲＤＡ）,基于共有序列的聚合酶链反应（ＰＣＲ）,简称共有序列ＰＣＲ和ｃＤＮＡ文库的筛选已成功地发现了卡波济肉瘤（ＫＳ）,惠普尔病,汉坦病毒肺型综合征,非甲非乙型肝炎等疾病的病原体。