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相似文献
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1.
通过基因组的cDNA克隆序列测定和与A组轮状病毒的比较分析,C组轮状病毒部分蛋白的编码基因已确定。现有资料表明在引起人类腹泻的A、B、C三组轮状病毒中,A组与C组的遗传学关系更为密切,不同来源的C组轮状病毒株之间存在高度的序列同源性。  相似文献   

2.
生物素标记寡核苷酸探针检测B群轮状病毒   总被引:1,自引:0,他引:1  
用5′端接氨基标记法,用生物素对B群轮状病毒(GBRV)IDIR株具有群特异性的3片段基因上23bp寡核苷酸序列进行标记,经高效薄层层析板(HPTLC)纯化,制备了B群轮状病毒生物素寡核苷酸探针,探针显色灵敏度达10Pg,与GBRV、KB63株基因杂交可检测到100pg靶序列,而与A群和C群轮状病毒及无关基因均不产生杂交信号,该探针可用于B群轮状病毒的检测、鉴定,以及同群不同毒株间基因相关性研究。  相似文献   

3.
本文研究人类轮状病毒基因DNA免疫及应用。通过构建重组质粒pCI/vp7,pCI/vp4及pCI/vp6,以肌注法导入BALB/c小鼠肌肉组织,其中pCI/vp7及pCI/vp4能 有效引起机体免疫应答,而且对轮状病毒Wa株有一定中和效应。从本次试验的结果来看 ,人类轮状病毒DNA疫苗能作为预防病毒性小儿腹泻的一种手段。  相似文献   

4.
HCV NS5B基因片段克隆入BAC-TO-BAC^TM重组杆状病毒表达系统的pFASTHTc载体质粒,转化DH10BAC^TM感受态细菌获得重组的Bacmid质粒,将重组Bacmid质粒转染Sf细胞,获得的重组杆状病毒可表达目的蛋白。免疫印迹和体外活性检测表明,所表达蛋白为HCV NS5B蛋白,具有多聚酶活性。  相似文献   

5.
应用基因重组技术,把编码EB病毒早期蛋白的BCRF1基因重组于真核表达载体pSG5中,并使该基因在乳地鼠肾(BHK)传代细胞中获得良好表达,表达率为0.5%。血清学实验证实,鼻咽癌、类风湿性关节炎病人和正常人血清中均不同程度地含有IgG/BCRF1抗体,抗体阳性率分别为92%、86%和77%,几何平均滴度(GMT)分别是1:16.35、1:14.72和1:10.15。两组病人和正常人血清中IgA/BCRF1抗体阳性率和滴度之间有较大差别,它们的阳性率分别是74%、71%和12%,GMT分别是1:12.32,1:10.56和1:2.35。还证实,鼻咽癌和类风湿性关节炎病人血清中IgA/BCRF1和IgA/EA(早期抗原)抗体阳性率和滴度间有很好的相关性,此为首次报导。重组表达质粒pSG5-BCRF1的构建和表达为进一步研究BCRF1基因在病毒感染和肿瘤免疫中的作用创造了条件。本文就质粒的构建和3组血清中IgA/BCRF1、IgA/BCRF1、IgA/EA和IgG/BCRF1抗体间的关系和有关问题进行了讨论。  相似文献   

6.
曾报道经化学诱变剂MMC、9-AA和EMS诱变的家蚕核型多角体病毒(BmNPV)多角体形态出现异常,继代分离的诱变BmNPV基因组对EcoRI、BglII和BamHI的酶切谱发生变化。研究进一步揭示,诱变BmNPV的多角体外层蛋白晶格排列呈现紊乱;多角体蛋白的SDS-PAGE电泳谱与对照组比较有显著差异;对多角体蛋白基因polh的测序结果显示,3组诱变BmNPV的polh基因发生了多处碱基(氨基酸  相似文献   

7.
重组轮状病毒SA11 Vp4抗原表位诱导广泛交叉中和抗体反应   总被引:10,自引:0,他引:10  
本文报导在RHV-RNA2载体系统中表达的轮状病毒(RV)Vp4胰酶切割位点区抗原位可诱导动物产生具有广泛交叉中和反应的血清抗体。携带有抗原表位REA、REB和REC,及其组合REA+REB+REC基因的pET重组质粒,高水平表达了这些与载体蛋白嵌合的抗原表位。进一步研究结果表明,这些抗原表位所诱导的动物血清抗体,具有广泛识别同源及异源血清型RV抗原的能力,和体外中和这些同源及异源血清型RV病毒感  相似文献   

8.
轮状病毒(Rotavirus)是属于呼肠病毒科(Reoviridae)的双链RNA(dsRNA)病毒。至今已将轮状病毒分为七个组(A~G)。已经发现的B组轮状病毒分别来自人、大鼠、牛、猪、羊。近十年来,通过轮状病毒的研究,轮状病毒B组已被公认为引起人...  相似文献   

9.
苏云金芽孢杆菌毒蛋白基因在小麦基因组中的甲基化修饰   总被引:7,自引:1,他引:7  
郭亮  文玉香 《遗传学报》1997,24(3):255-262
通过花粉管通道法将苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)毒蛋白基因(Bt.toxingene)转进了小麦品种京花5号与86Al。利用点杂交、Southern杂交和PCR等技术鉴定了转化植株的当代和子代,证实了Bttoxingene的导入与对小麦染色体的整合。利用对腺嘌呤(A)与胞嘧啶(C)甲基化敏感与否的限制性内切酶组(medhylation-(un)sensitiverestrictionenzymegroup,MREG)酶切和RCR扩增(MREG-PCR),对转化子代中的Bt基因片段甲基化形式进行了研究。结果表明,整合在小麦基因组中的Bt基因的A和C的甲基化形式发生了变化  相似文献   

10.
1994年科学家首次认识到BRCA1基因突变可引起遗传性乳癌 ,后来别的科学家发现某些有该缺陷基因的妇女并无乳癌的家族史。现在科学家估计所有遗传性乳癌中约有 5 0 %是由BRCA1基因突变引起的 ,而几乎所有兼有卵巢癌与乳癌家族史的家族成员都携带BRCA1基因。BRCA1基因在正常时编码一个肿瘤抑制蛋白BRCA1。先前的遗传学研究提示该蛋白质抵抗癌症是靠其帮助修复损伤的DNA。新近有遗传学证据证明 ,缺乏该蛋白质的小鼠暴露于放射线后便发生高比率DNA突变。而且BRCA1基因在哺乳类基因组中的位置靠近其他的DNA修复…  相似文献   

11.
cAMP反应序列结合蛋白及其家族与转录调节   总被引:8,自引:0,他引:8  
cAMP反应序列结合蛋白(cAMP-responsiveelementbindingprotein,CREB)经磷酸化激活后,可参与cAMP诱导的多种靶基因的转录调控。新近研究表明,CREB的转录调节作用可能是通过CREB结合蛋白(CREB-bindingprotein,CBP)实现的。在神经系统中,CREB可能介导神经递质诱导的基因表达,并能通过放大神经营养因子的信号,参与神经细胞增殖、分化、存活等生物效应。  相似文献   

12.
苜蓿根瘤菌nodC蛋白是结瘤基因nodC编码的43kD多肽。应用噬菌体T7RNA聚合酶/启动子表达系统,pT7-5作为载体质粒,构建了带有nodC基因的pBF6克隆,经量生成NodC,占杆菌JAKE中获得表达,过量生成NodC,占细胞总蛋白量的5%。经细胞膜蛋白组份的分离,Bio-gel柱层析,SDS-PAGE电泳等获得了比较纯化的NodC。  相似文献   

13.
叶萍  李燕 《病毒学报》1998,14(3):215-220
将Epstein-Barr病毒(EBV)膜抗原(MA)BLLF1基因,插入含有CMV启动子的真核表达载体pcDNA3下游BamHI位点,构建成真核表达质粒pcDNA3-MA。将纯化的DNA注射Balb/c小鼠股四头肌。经免疫的动物产生抗EB病毒MA特异性的抗体和中和抗体,依赖抗体细胞介导的细胞毒作用(ADCC),特异性T淋巴细胞增生性反应及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤作用。基因免疫与基因-蛋白  相似文献   

14.
将抗癌胚抗原(CEA)单链抗体基因插入家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK-His,与修饰的家蚕核型多角体病毒Bm-BacPAK DNA共转染家蚕细胞,经同源重组得到含有在多角体蛋白基因启动子控制下的抗CEA ScFv基因的重组病毒Bm-BacScFv。用重组病毒分别感染家蚕细胞和幼虫,在两者中均得到了高效表达,产物分子量为28kD,前者占细胞总蛋白的6%,后者为0.3mg/蚕。目的基因在家蚕细胞和  相似文献   

15.
苜蓿根瘤菌(Rhizobiummeliloti)nodC蛋白是结瘤基因nodC编码的43kD多肽(NodC)。应用噬菌体T7RNA聚合酶/启动子表达系统.pT7-5作为载体质粒.构建了带有nodC基因的PBF6克隆.经诱导在大肠杆菌JAKE中获得表达,过量生成NodC,占细胞总蛋白量的5%。经细胞膜蛋白组份的分离,Bio-gel柱层析,SDS-PAGE电泳等获得了比较纯化的NodC。  相似文献   

16.
周天鸿  王宁霞 《遗传学报》1997,24(3):206-211
利用MPCR技术从乳腺组织分离到抑癌基因BRCA1的cDNA片段,将此914bp的片段克隆进质粒pUC118,并经全序列测定证实。序列分析表明,BRCAIcDNA编码的肽链NN2-末端有一锌指结构,抑癌基因BRCAI的产物可能是DNA结合蛋白,cDNA序列存在两个变异位点:一个是第409位的C→A(Asp→Glu):另一个是第879位的A→T(MIa同义突变)。以该片段为探针,检测6例乳腺癌组织中BRCAImIMA表达,一例表达明显下降,一例没检测到表达的mIMA产物,说明一些乳腺癌组织的BRCA1基因转录水平降低  相似文献   

17.
Epstein-Barr病毒膜抗原基因免疫的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
叶萍  李燕  谷淑燕 《病毒学报》1998,14(3):215-220
将Epstein-Bar病毒(EBV)膜抗原(MA)BLLF1基因,插入含有CMV启动子的真核表达载体pcDNA3下游BamHI位点,构建成真核表达质粒pcDNA3-MA。将纯化的DNA注射Balb/c小鼠股四头肌。经免疫的动物产生抗EB病毒MA特异性的抗体和中和抗体,依赖抗体细胞介导的细胞毒作用(ADCC),特异性T淋巴细胞增生性反应及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤作用。基因免疫与基因-蛋白联合免疫效果相似。不同启动子控制下的MA基因,诱发小鼠免疫应答无明显差异。  相似文献   

18.
脑缺血再灌流大鼠海马hsp70及bcl—2基因的表达   总被引:10,自引:0,他引:10  
为进一步了解中枢神经系统中选择性易损伤的分子机制,采用大鼠短暂前脑缺血再灌流损伤动物模型,应用Northern杂交、原位杂交及免疫组织化学方法,检测了hsp70及bcl-2基因的表达及其组织学分布。发现易损伤的海马CA1区锥体细胞出现hsp70基因的诱导表达,BCL-2蛋白合成受抑制;而耐受缺血的海马CA3区锥体细胞则明显地持续表达BCL-2蛋白,却未见明显的hsp70基因表达。因此提示,hsp70基因的表达是神经元缺血的应激指征,也可能对神经元有保护作用;BCL-2蛋白对神经元有保护作用  相似文献   

19.
将抗癌胚抗原(CEA)单链抗体基因插入家蚕杆状病毒转移载体pBacPAKHis, 与修饰的家蚕核型多角体病毒BmBacPAKDNA共转染家蚕细胞, 经同源重组得到含有在多角体蛋白基因启动子控制下的抗CEAScFv 基因的重组病毒BmBacScFv。用重组病毒分别感染家蚕细胞和幼虫, 在两者中均得到了高效表达, 产物分子量为28kD, 前者占细胞总蛋白的6 % , 后者为0 .3 mg/ 蚕。目的基因在家蚕细胞和幼虫中表达产物经Ni2+IDASepharose6B亲和柱纯化, 前者纯度可达90% 以上, 后者纯度较低; 纯化后的融合蛋白具有CEA 结合活力, 其亲和常数分别为5 .4×108/mol·L- 1 和2.3 ×108/mol·L-1 , 略低于其亲本单抗E7B10 2.7 ×109/mol·L- 1 。  相似文献   

20.
B组轮状病毒RT—PCR来源的cDNA探针核酸诊断方法的建立   总被引:2,自引:0,他引:2  
韩新兵  王正党 《病毒学报》1998,14(2):183-187
近十年来,国内外学者相继报道在人以及牛、羊、猪、大鼠的腹泻粪样中检出B组轮状病毒〔1-3〕。洪涛等于1983年首次报道成人腹泻轮状病毒(ADRV)属于B组轮状病毒〔4〕。目前,轮状病毒B组已被公认为引起人及不同动物腹泻的流行病学的重要因素。由于B组轮...  相似文献   

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