兔肠缺血／再灌注损伤的超微结构改变及红花的保护作用

目的：观察红花注射液对兔肠缺血／再灌注损伤超微结构的影响,探讨其机制。方法：复制在体兔肠缺血／再灌注损伤模型。30只日本大耳兔,随机均分为3组（n=10）：假手术组（S组）,缺A／再灌注组（I／R组）和缺血／再灌注＋红花注射液组（SI组）。使用电镜观察各组肠组织标本超微结构的改变,作对比分析。结果：L／R组多数肠粘膜上皮细胞肿胀,胞质内液泡增多,大多数线粒体呈不同程度的肿胀,严重者可见嵴减少或消失,内质网扩张较明显,细胞表面微绒毛数量明显减少且排列较乱,部分微绒毛有肿胀、融合现象,上皮细胞间隙扩大,连接较疏松。粘膜下间质可见少量的浆细胞浸润现象,部分毛细血管周围可见水肿现象。SI组在上述部位的病理改变均明显减轻。结论：红花能有效减少炎性渗出,抑制微循环通透性的增加,阻断肠缺血／再灌注损伤进展的病理生理过程,对肠组织超微结构有良好保护作用。     

虎杖甙抗肺缺血/再灌注损伤作用及其机制初探

目的：探讨虎杖甙（PD）抗肺缺血/再灌注损伤作用及其机制。方法：采用在体兔单肺原位缺血/再灌注损伤模型。健康日本大耳白兔40只随机均分成4组（n=10）：假手术对照组（C组）;肺缺血/再灌注组（I/R组）;肺缺血/再灌注＋虎杖甙组（PD组）,缺血前20 min和再灌注即刻按2.5 mg/kg静脉注射0.2%PD溶液;肺缺血/再灌注＋PD＋多粘菌素B组（PMB组）,给PD同时按24 mg/kg静注PMB。各组分别在缺血前20 min,缺血1 h即刻,再灌注1 h、2 h、3 h各时点颈动脉抽血检测丙二醛（MDA）含量,超氧化物歧化酶（SOD）活性。实验结束时,取肺组织测湿干重比（W/D）,计算肺泡损伤率（IAR）,电镜观察细胞超微结构改变。结果：①I/R组和PMB组血清SOD活性随着缺血和再灌注时间的延长而逐渐下降,且两组间无差异;PD组则显著改善（均P〈0.01）。②I/R组、PD组、PMB组血清MDA浓度均随着缺血和再灌注时间的延长而逐渐上升,但PD组上升明显缓慢（均P〈0.01）。③I/R组、PD组和PMB组的W/D与IAR均高于C组（P〈0.05或P〈0.01）,但PD组显著低于I/R组和PMB组（均P〈0.01）。④I/R组及PMB组肺组织的超微结构损伤严重,PD组损伤程度明显较轻。结论：PD对肺缺血/再灌注损伤具有拮抗作用,其机制除抗氧化损伤外可能还有PKC参与。     

SMT对大鼠在体心脏缺血-再灌注损伤超微结构的保护作用

目的：研究ＳＭＴ对心脏缺血－再灌注损伤（ＩＲＩ）心肌超微结构的影响。方法：ＳＤ大鼠１８只,体重３２０￣３８０ｇ,随机分为三组：①缺血－再灌注组（ＩＲ）：夹闭冠状动脉左前降支６０ｍｉｎ,松夹２０ｍｉｎ。②缺血－再灌注＋ＳＭＴ组（ＳＭＴ）：再灌注前５ｍｉｎ,股静脉注射ｉＮＯＳ抑制剂Ｓ－ｍｅｔｈｙｌｉｓｏｔｈｉｏｕｒｅａ ｓｕｌｆａｔｅ（ＳＭＴ ５ｍｇ／ｋｇ ｗ）,余同ＩＲ组;③对照组（Ｃ）：暴露心脏后     

缺血后处理对兔脊髓缺血再灌注微循环损伤的影响

探讨缺血后处理对兔脊髓缺血再灌注微循环损伤的影响.成年新西兰大白兔24只随机分为假手术组(C组),缺血再灌注损伤组(IR组),缺血后处理组(P组).IR组和P组采用Zivin改进法制备脊髓缺血再灌注模型,P组在缺血30 min后行复灌1 min/缺血1 min相同处理3次.采用激光多普勒检测缺血前,缺血时及再灌注各时点血流量值,在再灌注24 h时取兔脊髓组织作HE染色观察病理形态学,比色法检测脊髓组织一氧化氮(Nitric oxide,NO)的含量,放免法检测内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)及免疫组化法检测血红素氧合酶(Hemeoxygenase-1,HO-1)的表达.研究发现与缺血前基础值相比,再灌注10 min时IR组与P组血流量均有增高,在再灌注30、60、120 min,IR组血流量值有不同程度的降低;与IR组相比,P组血流量值在再灌注各时点均有不同程度的增高.与IR组相比,P组NO含量与HO-1表达均有增加,ET-1含量明显减少,NO/ET-1显著高于IR组(P<0.05或0.01),且P组脊髓病理学损伤轻于IR组.结果表明缺血后处理可减轻兔脊髓缺血再灌注微循环损伤,改善脊髓血流量,...     

缺血预处理及低温对幼兔心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的：探讨缺血预处理(ischemic preconditioning,IP)及低温对幼兔心脏缺血／再灌注损伤的影响。方法：采用Langendorff离体心脏灌注模型,取3～4周龄幼兔心脏,分别给予不同次数的IP后使其在20℃低温下缺血或给予同样次数的IP后使其分别在不同低温下缺血。常温再灌注30min。记录心脏缺血／再灌注前后左心室功能指标,测定再灌注末心肌组织中ATP和丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)及Ca^2 -ATP酶的活性。结果：再灌注末,IP2组左心室各功能指标的恢复率及心肌组织的ATP含量及Ca^2 -ATP酶的活性均显著高于Con组和IP3组;SIP1、SIP2组的左心室各功能指标的恢复率及心肌组织的ATP含量均分别显著高于SConn1组和SCon2组。其心肌组织MDA含量亦分别低于SCon1组和SCon2组。结论：IP可减轻低温缺血的幼兔心肌缺血／再灌注损伤,其效应与IP的次数和低温程度有关。     

缺血预处理对大鼠肺缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 :观察缺血预处理 (IPC)对大鼠肺缺血 /再灌注 (I/R)损伤的保护作用 ,并初步探讨其作用机制。方法 :建立离体大鼠肺灌流模型 ,36只wistar大鼠随机分为对照组、I/R组和IPC组 ,处理完毕后分别测定平均肺动脉压(MPAP)、肺组织湿 /干重比、支气管肺泡灌洗液中肺表面活性物质磷脂及表面张力改变 ,肺组织标本送电镜检查。结果 :①电镜下观察IPC组肺损伤明显减轻。②肺组织湿 /干重比值IPC组为 4.41± 0 .2 4,显著低于I/R组 ,但仍高于缺血前 (P <0 .0 1) ;③IPC组大鼠缺血 1h后MPAP为 ( 1.88± 0 .2 9)kPa ,明显低于I/R组 (P <0 .0 1) ;④IPC组支气管肺泡灌洗液中总磷脂为 ( 2 33 .42± 14.0 5 ) μg/kg ,大聚体为 ( 10 5 .39± 6 .17) μg/kg ,与I/R组相比显著增高 ,但低于对照组 (P <0 .0 1) ,三组之间小聚体含量没有显著差异 ;⑤IPC组表面张力为 ( 36 .88± 3.49)mN/m ,显著低于I/R组 ,与对照组相比则无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :缺血预处理对大鼠肺I/R损伤有保护作用 ,保护机制可能与促进肺表面活性物质 (PS)磷脂分泌、改善PS组成 ,从而提高PS功能有关。     

缺血后处理对大鼠再灌注损伤肺细胞凋亡的影响

目的：探讨缺血后处理对再灌注损伤肺细胞凋亡的影响。方法：健康雄性sD大鼠24只,随机分为对照组（C组）、缺血／再灌注组（I／n组）和缺血后处理组（IPostC组）（n=8）。对比观察各组血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）活力及含量变化,原位缺口末端标记法（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡情况,免疫组化及RT-PCR法检测肺组织中Bax、Bcl一2蛋白和基因的表达。结果：I／R组与c组相比,MDA含量、MPO活力明显升高,SOD活力明显下降（均P〈0．01）,肺组织原位细胞凋亡检测示I／R组凋亡指数（AI）（39．03±3．46）显著高于C组（2．88±0．34）,Bcl-2／Bax比值在蛋白和基因水平明显降低（均P〈0．01）;IPostC组与I／R组相比MDA含量显著降低（P〈0．05）,MPO活力显著降低（P〈0．01）,SOD活性升高（P〈0．01）,AI为8．03±0．88显著低于L／R组,并能明显升高Bcl-2／Bax比值（均P〈0．01）。结论：缺血后处理通过减轻脂质过氧化反应及中性粒细胞聚集,降低Bax／Bel．2比值,使肺组织细胞凋亡减少,从而有效地减轻肺缺血／再灌注损伤。     

缺血预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤水通道蛋白-4表达的影响

目的探讨缺血预处理（IPC）对兔脊髓缺血再灌注损伤后水通道蛋白-4（AQP-4）表达的影响。方法日本大耳白兔72只,随机分为3组：假手术组（S组）、脊髓缺血再灌注损伤组（I／R组）和缺血预处理组（IPC组）。I／R组和IPC组阻断腹主动脉30min造成脊髓缺血再灌注损伤,IPC组在损伤前短暂阻断腹主动脉5min二次实施预处理,S组暴露肾动脉下腹主动脉但不阻断。分别于再灌注损伤后4h和24h进行神经功能评分,并取L4—6脊髓缺血节段,计算脊髓组织含水量,免疫组化法测定脊髓组织中AQP-4表达水平。结果与S组比较,I／R组神经运动功能评分降低,脊髓组织含水量增加,AQP-4表达增加（P〈0．05）。与I／R组比较,IPC组神经运动功能评分增高,脊髓组织含水量降低,AQP-4表达减少（P〈0．05）。结论IPC可抑制脊髓损伤后AQP-4的表达,进而减轻脊髓水肿,保护缺血再灌注损伤的脊髓。     

川芎嗪对肝缺血/再灌注损伤脂质过氧化的影响

目的：观察肝缺血／再灌注损伤时脂质过氧化的动态变化和川芎嗪的影响,并探讨其机制。方法：健康家兔20只,复制肝缺血／再灌注损伤模型。随机分为对照组（n=10）和川芎嗪组（n=10）。连续观察缺血前,缺血25min、再灌注25min、60min和120min时血浆中黄嘌呤氧化酶（XO）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和谷丙转氨酶（GPT）活性的动态变化及川芎嗪对不同时限上述指标的影响。结果：川芎嗪组的XO、SOD、MDA和GPT在再灌注的各时限与对照组比较均有显著或非常显著差异（P＜0．05或P＜0．01）。结论：川芎嗪能通过抑制氧自由基的生成,增强氧自由基的清除,对肝缺血／再灌注损伤起着良好的抗脂质过氧化作用。     

川芎嗪对兔肺缺血/再灌注损伤时血红素氧合酶-1表达与活性的影响

目的:探讨川芎嗪注射液对兔肺缺血/再灌注损伤时血红素氧合酶-1(HO-1)表达与活性的影响.方法:采用在体兔单肺原位缺血/再灌注损伤模型.实验兔20只,随机均分为肺缺血-再灌注损伤组(模型组)和川芎嗪注射液治疗组(川芎嗪组).用免疫组化、原位杂交方法观察HO-1在兔肺组织中的表达变化;测定肺组织湿干重比(W/D)及肺泡损伤数(IAR);电镜观察肺组织超微结构的改变.结果:HO-1在模型组、川芎嗪组肺血管内皮、部分血管平滑肌、外膜层及部分气道上皮均有阳性表达,免疫组化(原位杂交)的平均吸光度值分别为0.168±0.016(0.148±0.013)、0.186±0.014(0.158±0.012).川芎嗪组HO-1的表达水平明显高于模型组(P＜0.01),W/D、IAR值显著低于模型组(P＜0.01),肺组织形态学异常改变轻于模型组.结论:川芎嗪注射液可通过提高肺组织HO-1的表达水平,对肺缺血/再灌注损伤发挥积极的保护作用.     

Effects of molsidomine on retinal ischemia/reperfusion injury in rabbits

We investigated the effect of molsidomine (MOL) on ischemia/reperfusion (I/R) injury. Rabbits were assigned to four groups: group 1, sham; group 2, I/R; group 3, MOL treatment for 4 days after I/R; group 4, MOL treatment for 1 day before I/R and 3 days after I/R. Retinal I/R was produced by elevating the intraocular pressure to 150 mm Hg for 60 min. Seven days after I/R, the eyes were enucleated. Retinal changes were examined using histochemistry. The levels of malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px) and catalase (CAT) also were measured. We found a significant increase in the thickness of the outer nuclear layer of group 3 compared to the other groups. In groups 3 and 4, caspase-3 stained cells in the ganglion cell layer were decreased compared to group 2. We found a significant increase in caspase-3 stained cells in the inner nuclear layer (INL) of group 2 compared to the other groups. We found a significant increase in caspase-3 stained cells in group 3 compared to group 4 in the INL. The MDA level in group 2 was significantly higher than group 1 and MOL significantly decreased MDA levels in groups 3 and 4. We found that MOL protected the retina from I/R injury by enhancing antioxidative effects and inhibiting apoptosis of retinal cells.     

环孢素A对大鼠肺缺血/再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的:探讨线粒体膜通透性转换孔(MPTP)抑制剂——环孢素A(CsA)对大鼠肺常温缺血/再灌注后细胞凋亡的影响。方法:健康SD大鼠30只,随机分为3组(n=10):假手术组、缺血/再灌注组(I/R组)和环孢素A干预组(CsA组)。复制在体肺缺血/再灌注损伤模型。采用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测肺组织细胞凋亡,免疫组化技术检测肺组织细胞细胞色素C(CytC)的含量,以及分光光度计测定肺组织细胞caspase-3的活性。结果:I/R组肺组织细胞胞浆CytC的含量、caspase-3活性明显高于假手术组(P0.01),并观察到大量肺组织细胞凋亡的发生。CsA组与I/R组相比,CytC释放明显减少(P0.01),caspase-3活性减弱,细胞凋亡的发生率明显下降(P0.01)。结论:环孢素A可能通过抑制MPTP开放,减少缺血/再灌注后线粒体CytC的释放,从而减少肺组织细胞的凋亡。     

参麦注射液对肢体缺血/再灌注时肺脂质过氧化损伤的防护作用

目的:探讨参麦注射液对肢体缺血/再灌注时肺脂质过氧化损伤的防护作用。方法:复制家兔缺血/再灌注(I/R)损伤模型,分别从右颈外静脉和左颈总动脉取血,代表入肺血和出肺血,观察入、出肺血及肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及参麦注射液对上述指标的影响。结果:与对照组比较,缺血再灌组松夹后4h入、出肺血及肺组织SOD活性明显降低,MDA含量增高(P<0.01);再灌前30min静脉给予参麦注射液后,SOD活性升高,而MDA含量降低(P<0.01)。相关分析显示MDA与SOD间存在明显负相关(P<0.05)。结论:缺血再灌注时伴有肺脏氧自由基代谢紊乱,参麦注射液通过清除氧自由基,对抗脂质过氧化,减轻肺损伤。     

益气活血通络解毒方对小鼠肺缺血/再灌注损伤的作用及其机制

目的：探讨益气活血通络解毒方（YHTJF）对小鼠的肺部缺血/再灌注（I/R）损伤,及对I/R引起的氧化应激反应的作用。方法：成年雄性10~12周龄C57BL/6J小鼠70只,体重（21~25） g,采用在体左肺门夹闭法复制缺血/再灌注损伤模型。随机分为7组：正常对照组（C）,羧甲基纤维素钠carboxyl methyl cellulose-Na（CMC-Na）+正常对照组（CC）,羧甲基纤维素钠+假手术组（CS）,羧甲基纤维素钠+I/R模型组（CIR）,羧甲基纤维素钠+YHTJF低、中、高浓度干预组（CYL、CYM、CYH）。CN、CS、CIR组术前连续7 d腹腔注射CMC溶液,CYL、CYM、CYH组术前连续7d腹腔注射低、中、高浓度的YHTJF溶液。术毕,取左肺测定肺组织干湿比（W/D）及总肺含水量（TLW）,行肺组织损伤评估（IQA）,光镜观察肺组织形态学结构改变。TUNEL测组织细胞凋亡指数（AI）。检测血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）。结果：相比C组,CC组和CS组所有检测指标均无明显差异,CIR组的W/D、TLW、IQA、AI明显升高（P < 0.01）,肺组织形态学破坏显著;MDA含量、MPO活力明显升高,SOD活性显著降低。与CIR组比较,CYL组、CYM组、CYH组W/D、TLW、IQA、AI的表达均明显下降（P < 0.01）,组织损伤明显减轻,CYM组各项指标数值改善最明显,组织损伤最轻;3个用药组的MDA含量、MPO活力明显下降,SOD活性显著升高,其中中剂量用药组氧化应激指标变化最突出。结论：YHTJF可有效减轻小鼠缺血/再灌注性肺损伤,以中剂量效果为最佳,其机制可能与其抑制体内氧化应激反应、减轻肺组织细胞凋亡有关。     

内质网过度应激在肺缺血/再灌注小鼠心肌损伤中的作用

目的：探讨内质网过度应激与肺缺血/再灌注小鼠心肌损伤的关系。方法：雄性健康SPF级C57BL/6J小鼠40只,随机将其分为4组（n=10）：假手术组（Sham组）、肺缺血/再灌注组（I/R组）、ERS通路激动剂衣霉素（TM）组、ERS通路抑制剂4-苯基丁酸（4-PBA）组。采用夹闭左侧肺门30 min再灌注180 min的方法制备肺缺血/再灌注损伤模型。Sham组仅行开胸处理,不夹闭肺门,机械通气210 min;TM组、4-PBA组分别于造模前30 min腹腔注射衣霉素1 mg/kg和4-苯基丁酸400 mg/kg。于再灌注180 min时眼眶取血行心肌酶检测,处死后取心肌组织,行光镜、TUNEL Caspase 3酶活性、RT-PCR和Western blot检测。结果：与Sham组比较,光镜下I/R组、TM组和4-PBA组心肌细胞均有损伤性变化,肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）活性及心肌细胞凋亡指数、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（Caspase 3）酶活性升高,p-Jun氨基末端激酶（p-JNK）、Caspase 12、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）及其mRNA表达上调（P<0.01）;与I/R组比较,TM组光镜下心肌细胞损伤加重,血清CK-MB、LDH活性及心肌细胞凋亡指数、Caspase 3酶活性升高,p-JNK、Caspase 12、CHOP和GRP78蛋白及mRNA表达增加（P<0.01）,4-PBA组以上指标均下降,光镜下心肌细胞损伤减轻（P<0.01）;与TM组比较,4-PBA组光镜下心肌细胞损伤减轻,血清CK-MB、LDH活性及心肌细胞凋亡指数、Caspase 3酶活性降低,p-JNK、Caspase 12、CHOP和GRP78蛋白及mRNA表达下降（P<0.01）。结论：内质网过度应激参与肺I/R诱发的心肌损伤,抑制内质网过度应激能减轻心脏损伤。     

异丙酚对家兔肝缺血/再灌注后抗氧化能力改变的影响

目的: 探讨氧自由基(OFR)在肝缺血/再灌注损伤(HI/RI)中的作用及异丙酚对其的影响.方法: 实验兔随机分为假手术对照组、肝缺血/再灌注组和肝缺血/再灌注加异丙酚治疗组,分别在肝缺血前、缺血45 min、再灌注45 min共3个时相点,检测血浆及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、黄嘌呤氧化酶(XO)活性、丙二醛( MDA)浓度及谷丙转氨酶(ALT)值,并行肝组织电镜观察.结果: 肝缺血/再灌注期间,血浆XO、MDA及ALT显著高于、SOD明显低于假手术对照组(P<0.05和P<0.01);肝组织XO及MDA显著高于、SOD明显低于假手术对照组(P<0.05和P<0.01);肝组织超微结构发生异常改变.异丙酚可逆转上述指标的异常变化,与肝缺血/再灌注组相比有显著性差异(P<0.05和P<0.01).结论: OFR在HI/RI发生发展中起介导作用;异丙酚可通过降低氧自由基水平(增强SOD活性、减弱XO活性),拮抗脂质过氧化反应(降低MDA浓度),从而减轻HIRI.     

虎杖甙对家兔肺缺血／再灌注损伤肺组织TLR4和ICAM-1表达的影响

目的：研究家兔肺缺血／再灌注损伤时Toll样受体4（TLR4）信号转导通路变化及虎杖甙（PD）对其影响。方法：复制在体肺缺血／再灌注损伤模型。健康日本大耳白免30只,随机分为对照（C）组、缺血／再灌注（I／R）组、PD组。鲎试剂试管法检测血浆内毒素（ET）;RT-PCR法检测肺组织TLR4、核因子-KBp65（NF-KBp65）和细胞间粘附分子-1（ICAM-1）mRNA表达;苏木素-伊红（HE）染色,光镜观察肺组织形态学变化。结果：I／R组、PD组与C组相比血浆ET无显著差异（均P〉0．05）。I／R组肺组织TLR4、NF-KBp65及ICAM—1mRNA表达较C组显著升高（均P〈0．01）;PD组上述改变较I／R组明显下降,但仍高于C组（均P〈0．01）;光镜见PD组肺组织结构损伤明显轻于I／R组。结论：PD治疗可以下调肺组织TLR4、NF-kBp65表达,进而抑制ICAM-1等炎症介质的转录和分泌,减轻肺缺血／再灌注损伤。     

细胞自噬在大鼠缺血/再灌注肺损伤中的调控作用

目的: 探讨细胞自噬在大鼠缺血/再灌注肺损伤中的作用。方法: 随机将40只SD大鼠分为5组(n=8),分别为 ① 假手术组(Sham组):只开胸3.5 h;② 缺血/再灌注组(I/R组):开胸夹闭肺门缺血0.5 h后再灌注3 h;③ 溶剂组(DMSO组):术前1 h腹腔注射DMSO溶液;④自噬激动剂组(Rap组):术前腹腔注射雷帕霉素溶液;⑤自噬抑制剂组(3-MA组):术前1 h腹腔注射3-MA溶液;后三组的其余操作同I/R组。实验结束后处死大鼠,取肺组织,记录并计算肺组织湿/干重比(W/D)、总肺含水量变化(TLW) ,光镜和电镜观察肺组织及细胞形态,计算肺泡损伤率(IAR),Western blot检测自噬相关蛋白的表达情况。结果: 相对于sham组,其余四组肺W/D、TLW、IAR均明显升高,自噬相关蛋白表达明显上升,p-AMPK、Beclin 1、LC3 II 蛋白明显增多,p-mTOR、p62蛋白明显减少(P＜0.05或P＜0.01),光镜下其余各组肺组织有不同程度的水肿渗出,肺泡结构紊乱,电镜下细胞超微结构损伤加重,部分可见自噬小体;与DMSO组相比,3-MA组肺W/D、TLW、IAR明显下降(P＜0.05或P＜0.01),自噬相关蛋白表达明显下降,肺间质水肿较轻,细胞渗出较少,细胞超微结构损伤减轻,未见自噬小体。而I/R、DMSO、Rap组的各项指标变化无统计学差异(P＞0.05)。结论: 肺缺血/再灌注可诱发细胞自噬增强,从而引起大鼠肺损伤。