草履虫活体观察实验的一点改进

草履虫是原生动物的典型代表 ,在水里游动非常迅速。要观察活体草履虫必须设法将其固定。一般的实验指导书上通常都是用棉纤维来固定 ,棉纤维直接取于棉絮。这样所取的棉纤维不易分开 ,在显微镜下看到的仅是黑的一片 ,根本看不到草履虫 ,如果作如下改进效果较好。实验室里擦镜纸是必备的 ,擦镜纸既薄又细腻 ,纤维与纤维之间容易分开。我们可以就地取材 ,在载玻片上用镊子刮下少许擦镜纸上的纤维 ,再在刮下的纤维上滴上草履虫培养液 ,然后在显微镜下观察。可以看到在显微镜下一根根纤维纵横交错 ,把草履虫的活动空间隔成一间间小室。草履虫活…     

对草履虫培养和观察实验的改进

尾草履虫Paramecium caudatum Ehrenberg,又称草履虫、大草履虫,属原生动物门,纤毛纲,是动物界中较原始、较低等、较典型的单细胞动物。其个体较大、结构典型、繁殖快、观察方便、容易采集和培养,不仅生物学教学中以它做代表动物,也用作一种研究模型,在遗传学、细胞生物学、生物化学及生理学等领域广泛应用,在揭示生命的一些基本规律中显示出极大的科学价值。尽管草履虫很容易采集到,但培养和观察草履虫的实验多安排在初冬季节,此时室外温度一般在10℃左右,天然水体中的草履虫密度远远不能满足实验的要求,必须提前进行人工培养。     

几种常用草履虫培养和观察方法及改进

草履虫 Paramoecium caudatum是动物学教学最常用的实验材料之一,一般采用人工方法培养提高草履虫的纯度,以便于应用于教学和研究.本文记述了11种培养方法和8种观察草履虫的方法,并对其中的一些做了一定的改进,旨在为生物实验教学及科学研究提供参考.在培养过程中除应关注所用的培养物质外,还应综合考虑pH、温度、天敌、有机化合物、金属离子对培养过程的影响.     

大鼠肾小球微循环活体观察实验研究

结扎大鼠一侧输尿管,复制肾盂积水模型。在冷光源－光导纤维－导光棒的透射照明下,通过显微电视系统,成功地观察到完整肾脏皮质表层肾小球及其周围血管微血流动态的清晰图像。正常肾小球呈树状分布,密集、大小均匀。高倍镜下可清楚辨认入球及出球小动脉,其血细胞流态为直线状。并发现肾小球有交替开放现象。     

鼻的活体测量与观察

本文对九江地区汉族成年男女,共计950例(男467例,女483例),进行鼻的活体测量与活体观察。结果表明:男、女不仅在鼻的形态上有明显差异,而且外鼻各径亦存在显著差异。本文还对这些差异进行了初步讨论,分析了该地区鼻型特点,并且与国外一些民族鼻型资料进行分析比较,初步确定本地区鼻型属于狭鼻型。     

温度休克法诱导草履虫的同步分裂

运用细胞周期原理,采用温度休克法,对尾草履虫进行分裂周期同步化的研究,实验中草履虫经过3～5 h的处理后,就能观察到大量不同阶段的无性生殖横分裂状态,并获得了大量处于分裂阶段的草履虫.运用这种技术取材容易,获取率稳定,可达61%,可为细胞生理学等领域的研究提供大量的同步分裂个体.     

水稻雄核发育途径及游离花粉粒培养的活体观察

(1)在水稻雄核发育中,观察到 A—V、A—G、A—GV 和 B 途径,通常 B 途径占优势。在雄核发育早期,各种发育途径的花粉均有退化现象发生。(2)观察和统计表明,游离核型的多核花粉在发育过程中可转变为多细胞花粉,因而也是有发育前途的。(3)能够启动雄核发育的花粉通常是原生质稠密,在花粉群体中属中等大小(35—40μ)的花粉。多细胞花粉在突破花粉壁前。其细胞壁常常加厚,破壁时整个花粉有突然收缩的现象。(4)多细胞花粉内通常含有一些缓慢运动的小淀粉粒,它们可能积极参与了花粉雄核发育过程中的代谢活动。     

“观察草履虫的运动、取食和趋性”的实验教学

通过改进实验方法,学生在显微镜下清晰地观察到草履虫的结构、运动、趋性、取食、消化、排出残渣等生命活动,形成"单细胞生物能独立完成生命活动"的概念。     

应用活体荧光技术观察LDLR~(-/-)小鼠血管损伤后初期病变形成的动态变化

目的应用活体荧光技术,研究血管损伤后初期病变形成的动态变化。方法 112只雄性LDLR-/-小鼠随机分成14组,每组8只。将绿色荧光蛋白表达而低密度脂蛋白受体敲除(GFP+/LDLR-/-)小鼠的骨髓移植到LDLR-/-小鼠中,行血管损伤手术。从术后第1天至14天,麻醉小鼠,在荧光显微镜下直接观察股动脉血管病变变化的动态状况。结果术后第1天即见血管内大量荧光细胞随血液高速循环,术后第3天出现血液中的荧光细胞呈点状粘附于血管内壁,术后第6天,在血管内壁荧光细胞粘附的部位,外膜组织开始明显增生,增生的外膜组织中可见荧光细胞,此时血管内壁的病变呈不规则的片状分布。术后第9天,血管外纤维组织显著增生,并见大量的荧光细胞,同时可见外膜组织中有血液流动的新生营养血管。至病变第14天,受损血管的病变程度在以前的基础上继续增加,病变部位血管内膜上粘附聚集大量的荧光细胞,形成内衬而附着于血管内膜。结论血管损伤后的初期病变存在着由血管内到外的发展趋势。病变的形成与循环血中骨髓来源的干细胞在内膜部位粘附和聚集具有紧密的联系,血管内膜的病变对血管外纤维组织的增生具有明显的影响。     

培养液及其浓度和pH值对草履虫种群增长的影响

采用稻草、小麦、奶粉、酵母、玉米粒、荷叶等6种培养液培养草履虫,结果表明,稻草、玉米粒和奶粉培养液为草履虫的理想培养液。另外,对上述3种理想培养液的不同浓度和稻草培养液的不同pH值影响草履虫的生长繁殖进行了实验研究,统计分析表明影响较为明显。稻草培养液的最适浓度为1%~2%;奶粉培养液的最适浓度为0.1%~0.2%;玉米粒培养液的最适浓度为1%~2%;稻草培养液最适pH值为7.0。     

Intraflagellar Transport 80 Is Required for Cilia Construction and Maintenance in Paramecium tetraurelia

Intraflagellar transport (IFT) represents a bidirectional dynamic process that carries cargo essential for cilia building and the maintenance of ciliary function, which is important for the locomotion of single cells, intracellular and intercellular signalling transduction. Accumulated evidence has revealed that defects in IFT cause several clinical disorders. Here, we determined the role of IFT80, an IFT‐B protein that is mutated in Jeune asphyxiating thoracic dystrophy. Using the RNAi method in the ciliate Paramecium as model, we found that loss of IFT80 prevents cilia biogenesis and causes strong cell lethality. A specific antibody against IFT80 was also prepared in our study, which labelled IFT80 in cilia of Paramecium. GFP fusion experiments were performed to illustrate the dynamic movement of IFT‐A and IFT‐B proteins in cilia of Paramecium; then, we found that the depletion of IFT80 in cells prevents IFT‐A and IFT‐B proteins from entering the cilia. Our results showed the distribution change of other IFT proteins in cells that were depleted of IFT80, and we discuss the possible roles of IFT80 in Paramecium.     

A Method for the Isolation of Macronuclei from Paramecium aurelia

SYNOPSIS. A method is described for the isolation of macronuclei from Paramecium aurelia. It has also been successfully employed with Didinium nasutum. The yield is up to 50% with P. aurelia. Some results on the DNA, RNA and protein contents are given. The isolated macronuclei of P. aurelia are able to incorporate ATP and UTP into acid-insoluble material, a process which is probably RNA synthesis mediated by RNA polymerase. The macronuclei were thus highly purified, and retained a measure of biosynthetic activity.     

Roles of Adenylate Cyclases in Ciliary Responses of Paramecium to Mechanical Stimulation

Paramecium shows rapid forward swimming due to increased beat frequency of cilia in normal (forward swimming) direction in response to various kinds of stimuli applied to the cell surface that cause K⁺‐outflow accompanied by a membrane hyperpolarization. Some adenylate cyclases are known to be functional K⁺ channels in the membrane. Using gene‐specific knockdown methods, we examined nine paralogues of adenylate cyclases in P. tetraurelia to ascertain whether and how they are involved in the mechanical stimulus‐induced hyperpolarization‐coupled acceleration of forward swimming. Results demonstrated that knockdown of the adenylate cyclase 1 (ac1)‐gene and 2 (ac2)‐gene inhibited the acceleration of forward swimming in response to mechanical stimulation of the cell, whereas that spared the acceleration response to external application of 8‐Br‐cAMP and dilution of extracellular [K⁺] induced hyperpolarization. Electrophysiological examination of the knockdown cells revealed that the hyperpolarization‐activated inward K⁺ current is smaller than that of a normal cell. Our results suggest that AC1 and AC2 are involved in the mechanical stimulus‐induced acceleration of ciliary beat in Paramecium.     

一种简便制作小型鱼类形态标本的方法

本文介绍一种简便制作小型鱼类形态标本的方法.包括以下步骤:1.制作前准备;2.剥离皮肤;3.支撑架制作与放置;4.缝合;5.配制填充材料;6.填充;7.装义眼与整理姿态;8.干燥,上色,生境制作与固定.与其他制作小型鱼类形态标本的方法相比,新方法中先缝合再填充的步骤,难度小,容易控制填充物的量,做出的标本形态更逼真.     

制作竹类秆箨标本的新方法

秆箨作为鉴别竹类植物重要的营养器官 ,自然脱落后易卷或易破碎。常规的压制方式所制作的腊叶标本通常质量都不高 ,这给竹种的鉴定带来很大的困难。本文介绍一种新的秆箨腊叶标本制作方法 ,即熨斗熨烫法 ,并就这种方法对秆箨性状所产生的影响作了客观分析 ,结果表明 :它对保存秆箨分类性状有很大的改进 ,对标本质量有明显的提高     

A Method for the Mass Collection of Axenically Cultivated Paramecium aurelia*

SYNOPSIS. A method is described for the collection of large numbers of axenically cultivated Paramecium aurelia free of contaminating particulate debris. The procedure takes advantage of the fact that the ciliates are negatively geotropic and involves migrating the organisms directly from the culture medium into an overlayer of salt solution of low density. Details are given for the construction of a simple apparatus used to carry out these migrations.     

一种便于丝状真菌显微观察的培养方法

在真菌培养过程中,对其个体形态与群体（菌落）形态进行实时观察与鉴定是很必要的。本文利用半培养基培养法结合显微操作技术,对丝状真菌个体与群体进行形态学观察。结果表明,该方法无需染色与制片,不破坏菌丝正常生长状态,可实时进行形态学检测,对多个菌种在自然生长状态下的菌丝与菌落特征进行观察,操作简单、方便、快捷,从而降低了成本及工作量。     

柑橘煤污病病原菌的研究

采用病菌标本直接观察和人工培养物观察两种方法对贵州柑橘煤污病病原菌进行了鉴定。结果表明,柑橘煤污病的优势病原菌为Chaetothyrium spinigerum、Triposporiopsis spinigera、Fumago vagans、Cladosporium cladosporioides、Alternaria tenuissima和A.alternate6种。