向日葵生物技术研究进展

本文在广泛收集向日葵生物技术研究文献的基础上,对向日葵茎尖培养、幼胚培养、子房培养和原生质体培养的结果做了综述,并对向日葵基因工程做了简要介绍,提出向曰葵生物技术发展方向。     

向日葵的幼胚培养

实验所用的基本培基中以B_5培养基对向日葵幼胚培养为最适。激素萘乙酸主要促进幼胚的胚性生长。吲哚乙酸(IAA)与激动素(KT)的配合使用,对幼胚的分化起明显的调节作用。天然提取物则明显地促进幼胚生长、其中荸荠汁的培养基可使向日葵球形胚进行正常发育。 用两种改良的B_5培养基做胚胎培养系统,使向日葵种间杂交胚生长发育。先将杂交后的心形胚培养在胚胎生长培养基上,进行充分的胚性生长。然后把胚转移到萌发培养基,使其萌发形成幼苗,最后移入土壤直至开花。     

向日葵组织培养研究进展

向日葵(Helianthus annuus)是世界主要的油料作物之一.近几年来有关向日葵的研究很多,其中向日葵组织培养研究越来越受到重视.本文从向日葵外植体培养、植株再生影响因素、组培过程中存在的问题及解决方法等方面进行了综述.     

加强实践教学 培养创新型生物技术卓越人才

结合我校生物技术卓越人才培养,阐述了实践教学在培养创新型生物技术卓越人才中的重要作用,对目前生物技术专业实践教学存在的问题进行了探讨,提出了实践教学体系的构建,以及双师型教学模式、校企联合培养等加强实践教学的方法。     

细胞工程

植物细胞、组织及原生质体培养951656用于培养向日葵未成熟胚的简化、无需灭菌的技术[英]/Paul,M.H.…,AgfOflOmie(Paris).一1994,14(5).一281～284[译自DBA,1994,13(24),94—14207] 开发了培养向日葵未成熟胚的简化技术。此项     

Streptomyces rochei D74菌剂对向日葵、列当及其根际微生物的影响北大核心

【目的】研究娄彻氏链霉菌(Streptomyces rochei)D74菌剂促进向日葵生长和抑制列当寄生的作用,及其对根际微生物的影响。【方法】通过构建向日葵-列当-S.rochei D74共培养体系,观察D74菌株对列当寄生的影响;采用田间小区试验,测定D74菌剂接种对向日葵植物生理指标和列当出土数的影响;测定向日葵产量指标,研究D74菌剂对向日葵籽粒品质及产量的影响;利用16S rRNA基因高通量测序技术和传统微生物培养方法,分析添加D74菌剂对向日葵根际微生物群落结构的影响。【结果】D74菌剂能够促进向日葵生长[茎秆重和花盘重分别显著增加(P<0.05)37%-40%和21%-37%],同时抑制28%-46%(P<0.05)的列当出土;还可以提高向日葵籽粒中粗蛋白含量5%-9%、大粒占比约66%(P<0.05)和百粒重8%-18%,并且通过产量测定表明,D74菌剂可增产约30%(P<0.05),这对提高农民经济收益具有深远意义。D74菌剂对向日葵根际微生物群落具有显著影响,调节了群落有益微生物数量。【结论】D74菌剂可以显著降低向日葵根部列当寄生病害的发生,促进花盘生长,使籽粒饱满,具有实际应用价值和推广意义。     

向日葵对向日葵螟抗虫性的研究进展

向日葵螟是取食向日葵花盘及籽粒最为猖獗的一种害虫,可造成严重的产量损失。本文综述了向日葵对两种向日葵螟(欧洲葵螟Homoeosoma nebulellum Denis et Schiffermüller和美洲葵螟Homoeosoma electellum Hulst)抗虫性的研究进展,从向日葵的花药腺毛、瘦果性状、次生化合物(黑色素、倍半萜类化合物和花粉萃取物)等方面概括了向日葵和向日葵螟的互作关系,阐述了向日葵的形态结构及化学组成对向日葵螟抗虫性的作用,初步说明了向日葵对向日葵螟抗虫性的物理生化机制,并对未来在抗虫育种工作的启示及可能的应用进行了展望。     

人教版"生物技术实践"简析和教学建议

“生物技术实践”是我国普通高中首次开设的生物学选修模块之一,侧重于全面培养学生的科学探究能力。这一课程理念是传统的“照方抓药”式的做实验所难以实现的。针对这一情况．人教版“生物技术实践”改变了传统的实验编写方式,借助课题研究的形式,通过实验设计和操作实践,力求全面、真实地培养学生的科学探究能力。同时,应相应地改变教学策略。     

向日葵未受精胚珠培养再生植株

迄今,有关向日葵离体雌核发育的研究,仅蔡得田与周嫦(1983)、Gelebart与San(1987)由未传粉子房培养分别得到单倍体小苗和植株,而在未受精胚珠培养方面,阎华等对诱导胚状体形成的因素作了大规模研究,但未继续研究其植株再生问题。我们在上述基础上,经过三次重复实验,建立了向日葵未受精胚珠培养再生单倍体植株的技术流程,使其进一步用于育种及细胞工程成为可能。     

环境微生物基因组技术研究

绝大多数微生物难以有效地进行人工培养,而且实验室工程菌几乎没有野生型功能,因此限制了基于自然微生物多样性的生物技术的应用.为了把对生物群落的结构、功能和细菌在自然环境中进化的认识应用到微生物工艺学中、微生物学家们正致力于把基因组学和相关的高通量技术应用到微生物培养体系和环境样品中,而这必将增添对生态系统及其生物学功能的新见解并带动生物技术的发展.从微生物鉴别及其基因功能的分析、确证和评价等方面综述了基因组技术在环境样品中的应用,提出了现今面临的问题,同时也对环境基因组技术做了展望.     

黄瓜矿棉无土育苗效应的研究

本文报道了利用矿棉进行黄瓜无土育苗的效应及生长发育的研究结果。于1986年秋季进行了试验研究,两种育苗法的黄瓜幼苗干重对数值与时间的回归方程分别为: 矿棉培土培黄瓜幼苗LnW=6.0376 0.1068t LnW=5.8500 0.0960t 经F值检验达极显著。两种育苗法在生长量上的差距显著,试验结束时,矿棉培幼苗于重高于土培幼苗近两倍;经幼苗各器官分析,矿棉培幼苗根系效应最大,高出土培幼苗的3-4倍;其次是叶,高出2倍;再次是茎轴1.5倍左右。经矿棉育苗的幼苗质量好,移栽成活率高,有利于植物根系舒伸生长,证明矿棉是一种良好的植物育苗基质。本文详细地讨论了利用矿棉进行无土育苗的优越性和发展前景。     

一种早期胚胎体外培养新方法的建立

建立一种不依赖于液体石蜡的早期胚胎体外培养方法——套皿法,并比较了4种不同处理方法体外培养胚胎的效果。结果显示,采用套皿法进行胚胎培养,盖液体石蜡和不盖液体石蜡皿中的胚胎在各阶段的发育率差异不显著。与套皿法相比,用单皿微滴覆盖法(Brinster法)培养的胚胎在各阶段的发育率显著降低。不覆盖液体石蜡单皿中的胚胎则阻断于二细胞阶段。实验设计的套皿法是一种有效的早期胚胎体外培养方法,为早期胚胎体外培养提供了一种新方法。     

手工和仪器两种血培养结果差异性分析

目的对手工法双相血培养瓶和BACTEC9120全自动血培养仪的阳性率作回顾性分析。方法将血液标本同时接种双相血培养基和BACTEC9120全自动血培养仪配套血瓶中,将阳性结果移种血平板,如为阴性再移种巧克力平板。结果370例血培养,双相血培养瓶阳性25例,阳性率为6．76％（25／370）,树脂需氧（儿童）瓶BACTEC9120报警显示阳性59例,阳性率为15．9％（59／370）,阳性标本移种到血平板及巧克力平板阳性54例,阳性率为14．6％（54／370）,假阳性5例,假阳性率为1．4％（5／370）,共有29例树脂需氧（儿童）瓶阳性,而双相血培养瓶为阴性,P〈0．001。结论BACTEC9120全自动血培养仪提高阳性率,缩短阳性的报告时间优于传统的双相血培养基。     

Mechanical impedance increases aluminium tolerance of soybean (Glycine max) roots

The effect of aluminium (Al) on root elongation was studied in solution culture and sand culture. Compared to solution culture, in sand culture a ten times higher Al supply was necessary to inhibit root elongation to a comparable degree. This was due to a much lower Al uptake into the 5 mm root tips in sand culture. Fe concentrations in root tips were also lower in sand culture. Ca concentrations were higher and less depressed by Al, whereas Mg and K concentrations were not affected by the culture substrate. Regressions of Al concentrations in root tips versus inhibition of root elongation by Al revealed root damage at lower Al concentrations in sand culture. The effect of culture substrate on Al tolerance was independent of N source and could also be shown in flowing solution culture with and without sand. The results indicate that mechanical impedance in sand culture decreased Al uptake. This may be due to enhanced exudation of organic complexors thus reducing activites of monomeric Al species.     

大岩桐花萼切块离体培养直接再生花芽的形态观察(简报)

前文发现在基本培养基上添加赤霉素和细胞分裂素能促进离体培养的大岩桐花蕾直接再生花芽[1],后又发现细胞分裂素能协同赤霉素促进离体培养大岩桐花萼切块高频率直接再生花芽[2,3],所得结果提示,这可能是一个研究赤霉素和细胞分裂素在花分化发育中作用的良好实验系统。为了完善这一实验系统,明确离体培养的大岩桐花萼切块培养物直接再生花芽的起源以及花分化的形态进程是十分必要的。为此我们对离体培养大岩桐花萼切块的形态变化在体视显微镜下进行了系统观察,并进行了石蜡切片及电镜扫描观察。进行大岩桐(Sinningia speciosa Hiern)花萼切…     

水牛腔前卵泡的体外培养方法

本研究旨在建立一套适合水牛腔前卵泡体外生长发育的培养体系.取用来自本地屠宰场的中国沼泽型水牛卵巢,采用梳刮法回收腔前卵泡,以McCoys 5a作为基础培养液,分别用微孔板培养法、二维培养法、三维培养法进行体外培养.结果表明:不同培养方法对水牛腔前卵泡的体外发育能力有显著差异.培养至10 d,三维培养法的卵泡存活率显著高于微孔板培养法和二维培养法的卵泡存活率(65.05% vs 33.08%,49.52%,P<0.05);二维培养法的卵泡成腔率为1.91%(2/105),三维培养法的卵泡成腔率为1.94%(2/103),而微孔培养法的卵泡未发现成腔;三维培养法的卵泡直径平均增长显著高于微孔板培养法和二维培养法的卵泡直径增长(13.03±5.37 μm vs 7.53±2.26 μm,10.27±4.24 μm,P<0.05).由此可见,三维培养法是水牛腔前卵泡的有效体外培养方法.     

一种新型生物反应器在造血干/祖细胞体外扩增中的应用

针对造血干/祖细胞体外扩增对培养环境的需求, 结合静/动态培养的特点, 开发了一种新型的生物反应器用于造血干/祖细胞的体外扩增。在该生物反应器内, 采用SCF+TPO+Flt-3细胞因子组合, 比较了静态和循环培养两种方式体外扩增脐血CD34+细胞的效果。培养7 d后, 总细胞分别扩增了(13.86 ± 4.26)和(7.23 ± 2.67)倍, 显示静态培养有利于总细胞的扩增; CD34+细胞扩增倍数、培养物中CD34+细胞含量均相近, 无显著性差异; 而CD34+CD38-细胞扩增倍数以及培养物中CD34+CD38?细胞的百分含量分别为(1.82 ± 0.58)和(3.90 ± 0.85)倍以及(9.45 ± 4.85)和(37.47 ± 14.06)%, 循环培养明显高于静态培养。可见, 在该生物反应器内, 采用静态和循环两种培养方式, 均能实现造血干/祖细胞的体外扩增, 但静态培养促使造血干细胞向定向祖细胞分化, 而循环培养则更有利于早期造血干细胞的扩增。     

一种新型生物反应器在造血干/祖细胞体外扩增中的应用

针对造血干/祖细胞体外扩增对培养环境的需求, 结合静/动态培养的特点, 开发了一种新型的生物反应器用于造血干/祖细胞的体外扩增.在该生物反应器内, 采用SCF TPO Flt-3细胞因子组合, 比较了静态和循环培养两种方式体外扩增脐血CD34 细胞的效果.培养7 d后, 总细胞分别扩增了(13.86 ± 4.26)和(7.23 ± 2.67)倍, 显示静态培养有利于总细胞的扩增; CD34 细胞扩增倍数、培养物中CD34 细胞含量均相近, 无显著性差异; 而CD34 CD38-细胞扩增倍数以及培养物中CD34 CD38-细胞的百分含量分别为(1.82 ± 0.58)和(3.90 ± 0.85)倍以及(9.45 ± 4.85)和(37.47 ± 14.06)%, 循环培养明显高于静态培养.可见, 在该生物反应器内, 采用静态和循环两种培养方式, 均能实现造血干/祖细胞的体外扩增, 但静态培养促使造血干细胞向定向祖细胞分化, 而循环培养则更有利于早期造血干细胞的扩增.     

Embryogenesis and ribosomal DNA in carrot cell suspensions cultured in vitro

The contents of nucleic acids and rDNA were estimated during the development of carrot cell suspensions cultured under two different conditions. The cells transferred from stock culture to the medium without 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) induced the embryogenesis (embryogenic culture), while the cells inoculated to the medium with 0.2 mg/l 2,4-D did not form any embryos (non-embryogenic culture). The ratio of RNA to DNA of both cultures increased in the early stage of the culture. The rise of the ratio in embryogenic culture was much higher than that in non-embryogenic culture, which showed that embryogenic culture accumulated RNA prior to the formation of embryos. The rDNA amount of non-embryogenic culture remained constant throughout the culture period. Although embryogenic culture showed a slight change in rDNA amount, the differences were at most 12% and the quantitative stability of the rDNA was demonstrated during the development of carrot cell suspension cultures.     

Tissue culture of human skin--a review of experimental methods and applications to dermatologic problems

The usual methods of skin culture composed of organ culture, explant culture and cell culture were described. In organ culture of normal human skin, some blister diseases models have been used for the study of the mechanisms for producing the skin damage in pemphigus, bullous pemphigoid and epidermolysis bullosa hereditaria. Recent advances in epidermal cell culture system have furnished a potent tool for the study of keratinization at the molecular level. In the present status on tissue culture of human skin, these applications to clinical and laboratory investigations were discussed.