伪狂犬病新型疫苗研究进展

伪狂犬病是多种家畜和野生动物的一种重要传染病,给世界畜牧业特别是养猪业造成了巨大的经济损失,疫苗免疫是预防控制该病的主要手段。综述了伪狂犬病亚单位疫苗,核酸疫苗,重组疫苗,基因缺失疫苗等新型疫苗的研究进展。     

伪狂犬病基因缺失疫苗的研究进展

伪狂犬病是由疱疹病毒科伪狂犬病病毒引起的多种畜、禽及野生动物的一种急性传染病.动物感染后表现为从隐性临床症状到严重的呼吸道和神经症状综合症.该病给世界养猪业造成巨大的损失,目前预防该病主要是以疫苗接种为主.综述了当今广泛应用的伪狂犬病基因缺失疫苗的研究现状和进展.     

纯化狂犬病疫苗及其方法的研究进展

由于暴露前后的疫苗接种是预防狂犬病的唯一有效措施,而目前国内所用的浓缩狂犬病疫苗其保护性、副反应性等仍亟需改进,研制纯化疫苗以替代浓缩疫苗已成为当务之急。国家药管局对此非常重视,已将纯化狂犬病疫苗列为国家二类新药。目前国内已有十多家科研生产单位向国家新药审评中心申报了纯化狂犬病疫苗的新药申请,本文根据危险人群狂犬病发病及疫苗使用现状,就纯化狂犬病疫苗及其方法的研究进展作一综述。     

狂犬病病毒保护性抗原与亚单位疫苗的研究进展

本文论述了狂犬病毒糖蛋白,尤其是核蛋白或核糖核蛋白（ＲＮＰ）作为狂犬病重要保护性抗原的特性。鉴于核蛋白诱生狂犬病细胞免疫的重要保护作用,以及脂质体中同时加入核蛋白及糖蛋白后,其保护水平与狂犬病全病毒疫苗相似,故以研制狂犬病双价亚单位疫苗为妥。杆状病毒载体优点多,其表达的狂犬病病毒核蛋白及糖蛋白可制备安全、有效疫苗的大规模使用,乃至口服使用。     

狂犬病疫苗的发展与现状及评述

1885年7月6日,这是一个值得永久纪念的日子.法国巴斯德(PASTEUR,1822-1895)创制的第一支狂犬病疫苗首次用于人体,治疗获得成功,疫苗的疗效轰动了世界.巴斯德征服狂犬病的伟大功绩,拯救了无数狂犬患者的生命,开僻了一条崭新的免疫之路,在世界范围内掀起了以疫苗为武器与传染病的斗争,数以亿计的人免受疾病的痛苦而获得新生,巴斯德开创了人类文明健康历史的新纪元[1].在巴斯德狂犬病疫苗后的100多年中,狂犬病疫苗被不断地改进,不断地完善.本研究重点介绍与评述狂犬病疫苗百年关健性进展的历程.     

人狂犬病免疫球蛋白使用效果观察

为了解人狂犬病免疫球蛋白的作用效果,我们将观察对象随机分成了A、B、C三组,分别采用三种措施进行狂犬病的预防治疗,即：A组联合使用狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白;B组联合使用狂犬病疫苗与抗狂犬病血清(马源);C组仅注射狂犬病疫苗,并采用小鼠中和试验对这三组成员在免疫后3、7、14、45天及1年时的中和抗体水平进行检测。结果表明：狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白或抗狂犬病血清联合使用,可使体内更早出现抗狂犬病的中和抗体。注射人狂犬病免疫球蛋白后未发生临床副反应。     

精制原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗制备工艺的研究

通过ａＧ 株病毒在金黄地鼠肾细胞中培养,而制备的一种新型灭活狂犬病精制疫苗已获成功。该纯化方法包括醋酸锌沉淀和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４ＦＦ柱层析,所生产的疫苗质量完全达到新型狂犬病疫苗的要求。该工艺方法简单,成本低廉,是一种理想的狂犬病疫苗生产方法。     

精制Vero细胞狂犬病疫苗的灭活和纯化

通过狂犬病病毒灭活和纯化试验,试验精制Vero细胞狂犬病疫苗。疫苗经检测残余小牛血清白蛋白含量,Vero细胞残余DNA含量,疫苗效价,安全试验均能达到WHO规程要求。初步建立了适合大规模生产精制Vero细胞狂犬病疫苗的灭活和纯化工艺。     

一种新型原代地鼠肾细胞（PHKC）精制狂犬病疫苗的实验室质量评估

本文通过对一种新型疫苗－ＰＨＫＣ精制狂犬病疫苗的全面实验室检定并与法国Ｖｅｒｏ细胞狂犬病疫苗比较,认为该疫苗安全性良好,纯度较高,与法国Ｖｅｒｏ细胞狂犬病疫苗具有相同的免疫效果。     

伪狂犬病病毒gE基因在昆虫细胞中的高效表达

伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)属疱疹病毒科α-疱疹病毒亚科,能引起多种家畜及野生动物的伪狂犬病,尤其是猪的伪狂犬病,已成为危害当今养猪业的最严重的传染病之一[1].由于伪狂犬病病毒具有极强的潜伏感染特性和神经嗜性[2-3],80年代以前一直以为伪狂犬病无法根除.随着现代生物技术的发展,尤其是基因工程缺失标记疫苗和单克隆抗体技术的诞生与应用,才使该病的根除成为可能.     

防治猪伪狂犬病的活疫苗

在3月6日的日本中央药事审议常务会上介绍了批准、引进和生产猪伪狂犬病活疫苗的情况.被批准引进这种疫苗的有日本疫苗、松研药品工业,批准制造有共立商事等公司.日本疫苗公司和松研药品工业的制品是利用基因操作技术使部分染色体缺失的活疫苗.是日本批准的第一种基因操作的动物用活疫苗.预防对象都是伪狂犬病.通过肌肉注射接种. 农林水产省预计与农林水产大臣正式批准的同时,将公布活疫苗使用的防疫对策要点.要点中规定只限制在伪狂犬病的发生地区使用该疫苗,在各都道府县只能使用一种疫苗.农林水产省还准备补助疫苗接种的技术费.     

狂犬病免疫球蛋白应用研究进展

中国是全球第二大狂犬病流行国家,每年有数以百万计的狂犬病Ⅲ级暴露案例需要联合应用狂犬病免疫球蛋白和狂犬病疫苗。狂犬病免疫球蛋白价格较昂贵,使用方法较复杂,在狂犬病Ⅲ级暴露后处置中使用率长期以来偏低。降低狂犬病免疫球蛋白的使用剂量可以减少狂犬病Ⅲ级暴露后处置费用。简化狂犬病免疫球蛋白的使用方法可以使狂犬病Ⅲ级暴露后处置更加便于实施。降低狂犬病免疫球蛋白的使用剂量和简化狂犬病免疫球蛋白的使用方法有助于提高狂犬病Ⅲ级暴露后处置中狂犬病免疫球蛋白的使用率。狂犬病免疫球蛋白对狂犬病疫苗免疫效果的影响研究中存在矛盾的结论,探索狂犬病免疫球蛋白影响狂犬病疫苗免疫效应的机制有助于解释狂犬病免疫球蛋白对狂犬病疫苗免疫效果影响的复杂性。本文系统回顾关于狂犬病免疫球蛋白应用研究的进展,以期为制订新的具备实际操作可行性的狂犬病免疫球蛋白应用准则提供参考。     

高效价冻干人用狂犬病疫苗暴露后免疫程序的研究

初步确定高效价冻干人用狂犬病疫苗（6．0IU／剂）暴露后免疫程序。制备高效价的冻干人用狂犬病疫苗（6．0IU／剂）,以狂犬病街毒CNX8601和BD06分别攻击小鼠和比格犬的咬肌,接种不同效价的狂犬病疫苗,以RFFIT法检测中和抗体,根据动物死亡情况,计算暴露后疫苗保护率,对不同效价的疫苗进行中和抗体测定和保护率统计分析。在以小鼠为实验动物的疫苗保护率研究中,冻干人用狂犬病疫苗（3．1IU／剂）0／3／7／14／28免疫程序的保护率为40．6％,高效价的冻干人用狂犬病疫苗（6．0IU／剂）0／3／14免疫程序的保护率为56．2％,中和抗体比较,P〈0．05,2组间有显著性差异;在以比格犬为实验动物的保护效果研究中,冻干人用狂犬病疫苗的保护率（3．1IU／剂）为70％;高效价的冻干人用狂犬病疫苗（6．0IU／剂）的保护率为80％,中和抗体的比较,P〉0．05,没有显著性差异。高效价冻干人用狂犬病疫苗暴露后免疫程序可初步确定为0、3、14d免疫。     

创新科技 推动疫苗安全生产 GE医疗助力辽宁成大生物股份公司疫苗生产与国际接轨

据卫生部《中国狂犬病防治状况》指出,2008年中国狂犬病发病例达2466例,近几年来一直维持在年均2400人以上,仅次于印度,位居全球第二。狂犬疫苗属于二类疫苗,是自费接种疫苗。近年来中国犬、猫的饲养量快速增加,虽然我国目前的宠物犬数量已达1.5亿只,而动物狂犬病平均免疫率与国际公认的75%的免疫覆盖率差距甚大.可见,我国目前对狂犬疫苗有着巨大的市场需求,同时随着     

狂犬病细胞培养疫苗近况与重组活载体疫苗研究进展述评

利用细胞培养技术生产狂犬病疫苗,利用重组DNA技术发展狂犬病重组活载体疫苗,是近十年来狂犬病疫苗研究领域的两大突破性进展,前者已广为应用,后者已有制品。文章概述了狂犬病细胞培养疫苗生产使用方面的研究近况,并着重从以复制性的痘病毒和腺病毒及非复制性的家禽痘病毒与野鸟痘病毒作载体构建的重组狂犬病毒糖蛋白或核蛋白疫苗方面,对狂犬病重组活载体疫苗及其免疫研究进展作了述评,对病毒载体疫苗研究作了展望。     

双抗体夹心ELISA与NIH法在狂犬病疫苗抗原检测中的比较

通过用单克隆抗体制备双抗体夹心ELISA,快速检测狂犬病疫苗中狂犬病毒糖蛋白(G)的含量,将狂犬病疫苗的检定时间由28天缩短至2个工作日,以此缩短疫苗库存待检时间,提高疫苗的生产和销售效率,并最终替代NIH动物法.将待检的狂犬病疫苗样品在同一性别12～14g昆明鼠体内作效力检定试验(NIH),同时用双抗体夹心ELISA检测狂犬病疫苗中狂犬病毒G蛋白含量,用Microsoft Office Excel做出标准品和各样品疫苗的线性关系图并计算出疫苗效力值E-NIH.结果用双抗体夹心ELISA所得的E-NIH与对应的小鼠效力试验所得结果M-NIH之间呈正相关性;同一批狂犬病疫苗分次测得E-NIH值在2.41～5.85之间,而相应的M-NIH值在5.11～10.19之间.从而得出E-NIH与相应的M-NIH之间存在明显的线性关系;与NIH法比较,ELISA具有重复性好、成本低、快速等优点;用双抗体夹心ELISA替代小鼠效力试验是可能并可行的.     

精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺的建立

分别用Srpharose4B、Sephacryl-200HR和Sepharose6-Fastflow柱色谱进行地鼠肾细胞狂犬病疫苗浓缩原液纯化试验,试制精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗.对疫苗的残余牛血清含量、效力、收获率和安全性进行检测,优化和建立了精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺.     

双抗体夹心ELISA与NIH法在狂犬病疫苗抗原检测中的比较

通过用单克隆抗体制备双抗体夹心ELISA,快速检测狂犬病疫苗中狂犬病毒糖蛋白(G)的含量,将狂犬病疫 苗的检定时间由28天缩短至2个工作日,以此缩短疫苗库存待检时间,提高疫苗的生产和销售效率,并最终替代 NIH动物法。将待检的狂犬病疫苗样品在同一性别12～14g昆明鼠体内作效力检定试验(NIH),同时用双抗体夹 心ELISA检测狂犬病疫苗中狂犬病毒G蛋白含量,用Microsoft Office Excel做出标准品和各样品疫苗的线性关 系图并计算出疫苗效力值E-NIH。结果用双抗体夹心ELISA所得的E-NIH与对应的小鼠效力试验所得结果M- NIH之间呈正相关性;同一批狂犬病疫苗分次测得E-NIH值在2．41～5．85之间,而相应的M-NIH值在5．11～ 10．19之间。从而得出E-NIH与相应的M-NIH之间存在明显的线性关系;与NIH法比较,ELISA具有重复性好、 成本低、快速等优点;用双抗体夹心ELISA替代小鼠效力试验是可能并可行的。     

伪狂犬病毒固有免疫逃避机制

伪狂犬病毒能引起多种动物伪狂犬病,严重威胁养殖业发展。尤其自2011年新毒株在我国的大面积流行,使伪狂犬病的防控研究再次成为兽医学和病毒学的热点。其中,伪狂犬病毒介导的固有免疫逃避机制是其防控困难的重要原因,对于这一问题的探讨将有助于新疫苗和特效治疗药物的研发。因此,本文旨在对伪狂犬病毒固有免疫逃避机制的研究进展进行综述,为伪狂犬病的有效防控提供理论指导。     

进口、国产人用狂犬病疫苗免疫后中和抗体水平测定

应用间接免疫荧光法（ＩＦＡ）检测１６６例不同产地（国产、进口）人用狂犬病疫苗免后血清抗体水平,结果：国产苗抗体阳转率为９５．４２％,ＧＭＴ为９．４８,进口苗抗体阳转率为６２．８５％,ＧＭＴ为４．３５。经统计学处理,二者差异有非常显著性意义（Ｘ２＝２８．６１Ｐ＜０．００５）,初步提示了国产的（浓缩）原代地鼠肾组织培养狂犬病疫苗比某进口ＶＥＲＯ细胞狂犬病疫苗免疫效果要好,是一种高效、安全、价格便宜的预防狂犬病免疫制品