孕酮与疼痛调节

孕酮(progesterone,PROG)不仅存在于生殖系统,而且在神经系统也有合成.孕酮受体在中枢和外周神经系统中均有分布,参与神经系统的各项功能,其中包括对疼痛的调节.孕酮及其代谢产物对生理性痛和炎性痛均有抑制效应,孕酮对雌激素介导的外周痛觉增敏也有抑制效应.另一方面,孕酮增强神经病理性痛的痛觉异常和痛觉过敏.孕酮可以通过调节某些痛觉相关的神经递质受体的表达和功能以及影响疼痛下行抑制通路,从而完成对痛觉调节.     

恒河猴血清孕酮含量测定方法

目的建立恒河猴血清中孕酮含量测定方法。方法本文采用放射免疫测定技术。结果孕酮的回收率为94％,批内CV为5．1％～8．3％,批间CV为4．5％～7．7％,灵敏度为5～10Pg。说明该方法具有较高的灵敏度、特异性、准确性。分别测定了幼年组、成年组和老年组的雌性恒河猴的血清中的孕酮含量分别为：（0．20±0．04）ng／mL、（6．26±0．17）ng,mL和（0．35±0．06）ng/mL;成年雌性恒河猴月经周期孕酮的变化范围为：滤泡期为（1．10±0．12）ng／mL,排卵期（2．36±0．18）ng/mL,黄体期（6．17±0．15）ng/mL,妊娠期随着妊娠月份的增加,孕酮浓度也增加,最高可达50ng／mL。结论经实验验证,该方法灵敏、可靠、适用,可作为恒河猴血清中孕酮含量测定的一种方法。     

孕酮和米非司酮对蒙古绵羊输卵管上皮细胞β-防御素mRNA表达的影响

β-防御素(β-defensin)在雌性动物生殖道广泛存在,起免疫防御作用.为了研究孕酮与雌性生殖道β-防御素mRNA表达的关系,本实验建立绵羊(Ovis aries)输卵管上皮细胞培养体系,添加不同浓度孕酮(10~(-6),10~(-7),10~(-8),10~(-9)和10~(-10) mol/L)和孕酮拮抗剂米非司酮后提取细胞总RNA,利用实时定量PCR测定β-防御素mRNA的相对表达量.结果显示,一定浓度的孕酮(10~(-6),10~(-7),10~(-8)和10~(-9) mol/L)对培养的输卵管上皮细胞β-defensin mRNA的表达有促进作用,且不同浓度的孕酮对β-defensin mRNA的表达的影响程度不同.米非司酮极显著抑制了孕酮诱导的β-defemin mRNA的表达.结果表明,孕酮通过与孕酮受体结合促进β-defensin mRNA的表达,推断雌性生理周期下孕酮可能通过作用于β-defensin等影响自身免疫.     

血清孕酮水平检测在克隆胚胎移植受体牛的筛选及妊娠诊断中的应用

目的:孕酮(progesterone,P4)作为一种生殖激素,在牛的发情期和妊娠期呈规律性变化,且在妊娠的建立和维持过程中发挥着重要作用。拟应用孕酮浓度测定辅助人工观察筛选克隆胚胎移植受体牛并监测其整个妊娠过程。方法:通过对自然配种牛不同生殖阶段血液中孕酮水平的分析,建立其在发情初期、妊娠期孕酮浓度的变化规律,以此为依据辅助人工观察筛选适合胚胎移植的受体牛。同时将在体外培养7天后的体细胞核移植重构囊胚移植到所筛选出的同期发情的受体牛子宫内,并应用孕酮测定监测其妊娠状态。实验结果:(1)运用孕酮检测筛选克隆胚胎移植受体牛时,当孕酮浓度在发情第0天和第5天分别为≤0.64nmol/L和2～8nmol/L时,适宜作为胚胎移植受体牛,根据此筛选指标能够排除50%左右假发情牛。(2)运用孕酮检测较传统的人工观察方法,胚胎移植的克隆牛出生率提高了7.1倍。结论:运用牛血清孕酮检测方法能有效提高母牛生理周期判断的准确性,有利于选择合适的胚胎移植受体牛,既能实时、有效地监测怀孕受体牛的妊娠状态,又避免了靠人工观察受体牛返情、流产时的人为疏漏和误判,有效地提高受体牛的利用率,提高克隆牛的生产效率,并能推广应用于畜牧行业牛的生产繁育中。     

酪氨酸对表面灌流系统中大鼠离体大,小黄体细胞孕酮生成的影响

参照我室Ｗａｎｇ Ｘｉａｏ－Ｎｉｎｇ的黄体细胞制备方法，制成大鼠黄体细胞悬浮液，经蔗糖密度梯度离心分离大，小黄体细胞，经６０ｍｉｎ预培灌后，每１０ｍｉｎ收集一次培灌液，用ＲＩＡ测定其中孕酮含量，实验结果表明，在培灌系统中，大黄体细胞的基础孕酮分泌量明显高于小黄体细胞，但小黄体地ｈＣＧ的敏感性强于大黄体细胞，不同剂量的酪氨酸对ｈＣＧ致大，小黄体细胞孕酮生成有不同程度的抑制，对小黄体细胞的抑制作用较为     

干扰素—α和—γ对灌流假孕大鼠卵巢黄体的作用

利用假孕大鼠卵巢体外灌流方法研究了干扰素－α和－γ对黄体分泌孕酮和前列腺素Ｆ－２α作用,并测定灌流后卵巢中３β－羟甾脱氢酶和２０α－羟甾脱氢酶的活性。观察灌汉假孕第８天大鼠卵巢结果表明,三种不同剂量的干扰素α－和－γ均能抑制孕酮的分泌,但干扰素－α的抑制作用仅在短时间内发生,干扰素－α和－γ均有抑制ｈＣＧ诱导孕酮分泌的作用,但剂量和作用时间差异。     

大熊猫雌性个体发情期生殖内分沁变化的研究

本文首次报道了用黄体生成素的生物测定法测定大熊猫发情期黄体生成素的生物活性与雌二醇、孕酮的关系。雌性大熊猫在发情高潮后两天,尿中黄体生成素的生物活性与雌二醇同时出现峰值,并与雄性变配。随后尿中孕酮浓度迅速增长,其浓度远远大于发情前期的水平。生殖内分泌的变化证实:雌性大熊猫在发情期中有成熟的卵子排出。     

雌貉繁殖期血清雌二醇,孕酮水平的变化和阴道涂片的观察

本研究利用放射免疫分析法,测定了雌貉繁殖期血清雌二醇、孕酮水平的变化。分析并探讨了血清雌二醇、孕酮水平与阴道涂片中各类细胞数量比例和阴门开口宽度间的关系。结果表明,角化鳞状上皮细胞的数量比例及阴门开口宽度与血清雌二醇水平有显著的正相关。通过检测阴道涂片中角化鳞状上皮细胞的数量比例,可作为雌貉发情鉴定的方法之一。     

恒河猴(Macaca mulatta)生殖周期内性类固醇激素分泌规律的研究

本文用放射免疫测定法对7只雌性恒河猴(Macaca mulatta)的20个月经周期进行了雌二醇,孕酮和睾酮的动态测定分析,其中15个月经周期的中期都有睾酮和雌二酮峰(其峰值分别为1010.7±0.65ng/ml. 正常黄体期的血清孕酮水平不低于1ng/ml. 20个月经周期的平均天数为28.6±5.4天, 滤泡期和黄体期分别为11.9±2.6和19.2±6.3天. 月经周期可用公式Y=18.92±0.03×X²(Y:月经周期,X: 黄体期. R=0.9444)表示.实验结果表明, 测定周期内三种性类固醇激素可以准确确定排卵.睾酮在生殖受气内的分泌调节机制还待进一步研究.     

孕酮与疼痛调节

孕酮（progesterone,PROG）不仅存在于生殖系统,而且在神经系统也有合成。孕酮受体在中枢和外周神经系统中均有分布,参与神经系统的各项功能,其中包括对疼痛的调节。孕酮及其代谢产物对生理性痛和炎性痛均有抑制效应,孕酮对雌激素介导的外周痛觉增敏也有抑制效应。另一方面,孕酮增强神经病理性痛的痛觉异常和痛觉过敏。孕酮可以通过调节某些痛觉相关的神经递质受体的表达和功能以及影响疼痛下行抑制通路,从而完成对痛觉调节。     

恒河猴睾丸内激素调控的离体研究Ⅲ--雌激素对恒河猴睾丸Leydig细胞睾酮分泌的影响

目的采用体外无血清培养方法,研究雌激素(E2)对恒河猴睾丸Leydig细胞睾酮分泌的影响.方法恒河猴睾丸活体组织,经胶原酶消化,BSA密度梯度重力沉降分离细胞,得到的Leydig细胞置二氧化碳培养箱培养,收集培养液,应用放射免疫测定法测定培养液中的睾酮含量.结果不同剂量的睾酮前身物孕烯醇酮、孕酮和17α-羟孕烯醇酮都能促进睾酮的含量升高,其中以17α-羟孕烯醇酮的作用最为显著;当孕烯醇酮、孕酮和17α-羟孕烯醇酮分别与E2合并应用时,有明显地抑制作用,同样以17α-羟孕烯醇酮的抑制作用最为显著.结论E2抑制恒河猴Leydig细胞睾酮的分泌是由于影响了3β-羟类固醇脱氢酶、17α-羟化酶以及17,20-碳裂酶的活性所致.     

孕酮预防新生鼠缺氧/缺血性脑水肿的研究

目的:探讨孕酮对新生鼠缺氧/缺血性脑水肿的影响.方法:52只新生大鼠随机分成五组,预防组于缺氧/缺血前30min腹腔注射PROG,对照组腹腔注射生理盐水;24 h观察各组鼠脑水含量及Na 、K 含量变化.结果:预防组脑组织中H2O、Na 含量明显低于缺氧/缺血组,而K 含量明显高于缺氧/缺血组(P＜0.05).结论:孕酮对新生鼠缺氧/缺血脑水肿有明显的预防作用.     

孕酮和炔诺酮庚酸酯对靶细胞孕酮受体动态分布的影响

本实验采用未成熟的雌兔,经雌二醇诱发五天,以促进子宫中孕酮受体的合成。利用此动物模型,分析了孕酮及炔诺酮庚酸酯与兔子宫细胞质和核中孕酮受体的结合特性及在细胞内的动态分布。实验结果表明:如以孕酮与其受体结合的相对结合亲合性(RBA)值为100时,炔诺酮庚酸酯的为48.6。此外还发现,炔诺酮庚酸酯可以增进孕酮受体在细胞核内的贮留。虽然该化合物有较小的 RBA 值,但其颇强的且长效的孕激素样作用可能与该化合物能使孕酮受体在核内的长时间贮留有密切关系。     

小熊猫繁殖周期血清雌二醇和孕酮含量变化

为研究小熊猫繁殖周期血清雌二醇、孕酮含量变化规律,采用化学发光免疫分析法连续16 次测定了2只成体雌性小熊猫血清雌二醇和孕酮含量变化,历经发情间期、发情期和两次妊娠期;连续9次测定了7只小熊猫妊娠期的孕酮含量变化。结果:(1)发情间期,小熊猫血清雌二醇的水平一直维持在低水平(基础水平),进入发情前期,血清雌二醇水平明显升高,在发情期一直维持高水平,配种后迅速降至基础水平; (2)小熊猫血清孕酮含量在发情间期和发情期均维持在较低水平,直至发情期过后才出现升高,在妊娠期一直维持高水平,峰值出现在5 月;(3)发情的小熊猫不论妊娠与否,在妊娠期内血清孕酮含量均维持在高水平。研究表明:小熊猫血清雌二醇、孕酮含量变化能直接反映其繁殖规律,雌二醇对启动雌性小熊猫季节性繁殖起重要作用;在妊娠期内小熊猫血清孕酮含量升高不能作为判断小熊猫妊娠的标准;雌性小熊猫在妊娠期有假孕现象。     

芹菜素对雌性大鼠生殖轴的影响

目的：探讨芹菜素在10-9mol/L浓度时对雌性大鼠生殖功能的影响。方法：应用侧脑室注射方法观察芹菜素对雌性大鼠生殖轴激素含量的影响。在侧脑室注射后第3天取血浆,采用放免技术测定血浆中促性腺激素释放激素（GnRH）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）的含量。结果：在给药后第3天血浆中促性腺激素释放激素（GnRH）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）的含量增加而雌二醇（E2）、孕酮（P）的含量降低,差异有显著性。结论：芹菜素抑制雌二醇（E2）合成中芳香化酶的活性实现对雌二醇（E2）、孕酮（P）分泌的抑制。芹菜素通过影响雌激素受体而使下丘脑的促性腺激素释放激素（GnRH）和腺垂体的卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）分泌增加。     

血小板活化因子对大鼠黄体细胞孕酮分泌及血管内皮生长因子表达的作用

本文旨在研究血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)对大鼠黄体细胞孕酮分泌及血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)mRNA表达的作用.将未成年(25～28 d)Sprague-Dawley雌性大鼠颈部皮下注射50 IU孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotrophin,PMSG),48 h后注射25 IU人绒毛膜促性腺激素(human chorionicgonadotrophin.hCG)诱导卵泡发育和黄体生成,第6天(hCG注射日为第1天)收集卵巢黄体细胞,体外培养24 h后,不加或加入不同剂量(0.1 μg/mL、1 μg/mL、10 μg/mL)PAF,37℃、5%CO2培养箱内培养24 h.用放射免疫方法测定培养液中孕酮的含量,流式细胞仪和RT-PCR方法检测黄体细胞凋亡以及VEGF mRNA的表达.结果显示,PAF促进黄体细胞孕酮分泌,1 μg/mL PAF作用最强(P<0.05);PAF促进黄体细胞凋亡无明显剂量依赖性,但10 μg/mL PAF显著促进大鼠黄体细胞凋亡(P<0.05):PAF刺激黄体细胞VEGF mRNA表达,1 μg/mL PAF效果最显著(P<0.01).结果提示,PAF可通过调节黄体细胞孕酮的分泌和VEGF mRNA的表达来促进黄体形成.     

注射LHRHa对泥鳅血清性类固醇激素变化研究

研究了注射促黄体激素类似物(LHRHa)后,泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)血清性类同醇激素的变化规律,并探讨在泥鳅繁殖季节时.孕酮(P)、睾酮(T)和雌二醇(E2)对性腺发育的作用及调节机制.实验共分两组,对照组和实验组;对照组只注射生理盐水;实验组注射LHRHa,雌鱼0.2 μg/g,雄鱼减半.注射前尾静脉采血,作为血液样本分析基础水平(Oh),注射药物后分别在7、24、48、72和96h尾静脉采血.测定雌鱼睾酮、雌二醇和孕酮,雄鱼孕酮和睾酬血清浓度.实验结果表明:注射LHRHa,雌鱼血清睾酮和雌二醇浓度显著高于对照组,雄鱼血清睾酮和孕酮显著高于对照组(P<0.05);24h浓度较高.雌鱼孕酬、睾酮和雌二醇分别为(0.710±0.082)ng/mL、(9.00±0.57)ng/mL和(696.4±26.2)pg/mL,雄鱼孕酮和睾酮分别为(0.527±0.121)ng/mL和(9.62±0.62)ng/mL.实验组雌鱼孕酮变化基本规律为,基础水平(0-7h)-逐渐升至最高(7-24h)-逐渐降至基础水平(24-48h)-维持基础水平(48-96h).实验组雌鱼睾酮和雌二醇与雄鱼孕酮和睾酮变化规律基本相似,其规律为,逐渐上升至最高(0-24h)-逐渐降至基础水平(24-72h)-维持基础水(72-96h).24h对照组雌鱼睾酮和雌二醇显著升高,浓度分别为:睾酮(2.20±0.18)ng/mL,雌二醇(269.1±36.6)pg/mL.对照组雄鱼血清孕酮和睾酮浓度实验期间均无显著变化.研究认为:LHRHa能够刺激泥鳅性类同醇激素分泌,特别是睾酮的分泌,显著提高雌鱼性腺指数(GSI).但刺激P的分泌调控能力有限,实验期间处于较低水平,诱导排卵效果差,泥鳅的性类固醇激素可能有特殊的调节机制.雌二醇和睾酮对性腺成熟有重要作用,孕酮对介导卵细胞最终成熟和排卵可能起重要作用,而雌二醇和睾酮无明显效果.     

孕酮调节途径在着床过程中的作用

孕酮对于哺乳动物排卵、受精、着床、蜕膜化及妊娠维持均起到重要作用.孕酮主要通过孕酮受体(PR)起作用,PR基因敲除的小鼠表现为多种生殖障碍.此外,PR作用的发挥还需要类固醇受体辅助激活因子(SRC)和FK506结合蛋白4(Fkbp52)等辅助因子的参与.目前采用高通量基因芯片技术,筛选出许多直接或间接受孕酮调节的基因,其中同源盒基因、免疫反应基因-1、Indian hedgehog、12 / 15脂肪氧合酶、钙离子结合蛋白等在胚泡着床过程中起重要作用.本文就孕酮调节途径在胚泡着床研究方面的进展作一简要综述.     

长爪沙鼠血清雌性激素的比较研究

目的测定长爪沙鼠、NIH小鼠和SD大鼠的血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,为研究长爪沙鼠的生殖和胚胎工程提供基础资料。方法用放射免疫分析法测定上述动物生产前后血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,进行统计学处理和分析。结果不同阶段雌性沙鼠E2值差异无显著性(P>0.05),P值差异有显著性(P<0.01);E2值比较,处女期沙鼠与同期NIH和SD差异有显著性(P<0.01),而在经产期的动物间水平接近(P>0.05);P值比较,处女期沙鼠与NIH接近,与SD差异有显著性(P<0.01);而经产期沙鼠在三种动物中是最高的(P<0.01)。结论长爪沙鼠血清E2、P的含量具种属特异性,并随动物的生理发育时期而变化。     

干扰素-α和-γ对灌流假孕大鼠卵巢黄体的作用

利用假孕大鼠卵巢体外灌流方法研究干扰素－α和－γ对黄体分泌孕酮和前列腺素Ｆ－２α的作用,并测定灌流后卵巢中３β－羟甾脱氢酶和２０α－羟甾脱氢酶的活性。观察灌流假孕第８天大鼠卵巢结果表明,三种不同剂量（５０、１００、１０００ｕ／ｍｌ）的干扰素－α和－γ均能抑制孕酮的分泌,但干扰素－α的抑制作用仅在短时间内发生,干扰－α和－γ均有抑制ｈＣＧ诱导孕酮分泌的作用,但有剂量和作用时间差异。两种不同类型的干扰素对卵巢分泌前列腺素Ｆ２α无显著作用。干扰－α对灌流８小时后卵巢中３β－羟甾脱氢酶的活性无显著作用,但是干扰素－γ显著抑制３β－羟甾脱氢酶的活性,两种类型的干扰素对２０α－羟甾脱氢酶的活性无显著作用。实验结果提示：两种类型的干扰素都能降低灌流假孕大鼠卵巢黄体孕酮的水平,但是呈现不同的抑制机制。