抗体药物糖化检测方法及其生物学功能研究进展

糖化是一个重要的蛋白质修饰过程,可能影响治疗性蛋白药物（如单克隆抗体药物）的生物活性及分子稳定性。许多研究表明糖化血红蛋白水平升高与心血管疾病及动脉粥样硬化有着密切关系。人体的血浆蛋白,如白蛋白、球蛋白、纤维蛋白和胶原蛋白也可能被糖化,进而形成AGEs,蛋白药物的生产、储存以及药物在体内循环过程中都可能发生糖化反应。综述了治疗性抗体药物糖化的原因、分析方法,以及糖化对抗体药物生物学功能的影响,以期为临床抗体药物的开发、优化及贮存条件研究提供参考。     

炎症中出现的C-反应蛋白是高血压症的预兆

在炎症中出现的一种蛋白质可能是高血压的危险信号,研究者在首次大规模试验中报道了炎症与高血压的关系.该蛋白质称为C 反应蛋白(CRP) ,已知在心脏病与高血压中出现.以此为据,有些医生已开始常规测试CRP在血中浓度升高的情况.许多研究指出,低度的炎症引起血管损伤.当CRP对炎症或心脏病的作用远未搞清之时,高血压便成为心脏病及卒中的极佳的可识别的危险信号.研究者检查了2 0 5 2 5位妇女的血样,这些血样是早在2 0世纪90年代为“妇女生卫研究项目”中部分广范围研究而捐献的.进入该项研究的妇女都在4 5岁以上,无高血压、卒中或癌症病史,…     

肿瘤蛋白B7-H1破坏T细胞

把癌症看作是一种感染 .肿瘤细胞象病毒与细菌一样 ,会想出法子来避免人的免疫系统的探查与破坏 .现在研究者发现 ,许多人癌可利用正常时在某种免疫细胞中找到的一种蛋白质来逃避免疫系统的监督 .在即将出版的ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ上研究者报道 ,载有这种称为Ｂ7 Ｈ1的蛋白质分子的肿瘤细胞可加速与癌斗争的免疫卫兵Ｔ细胞的死亡 .这些发现迫使研究者重新考虑靠调动免疫系统来起作用的所谓癌症疫苗和其他癌症治疗的策略 .研究者认为 ,如果肿瘤为Ｂ7 Ｈ1阳性的话 ,这种免疫治疗就会发生困难 ,而如果阻断了Ｂ7 Ｈ1便会改善免疫治疗的…     

Pin 1酶破坏tau蛋白緾结

科学家报道 ,有一种酶阻止老年小鼠的脑细胞发生蛋白质结 ,而这种蛋白质结正是阿耳茨海默病的标志之一 .该酶称为Pin 1,其可形成记忆丧失疾患的新疗法的基础 .Pin 1是在 1995年发现的 ,研究者后来证明Pin 1与一种称为tau的蛋白质相互作用 ,tau是阿耳茨海默病中两种脑损害中一种     

用番茄根生产大量蛋白质

美国新泽西州Ｒｕｔｇｅｒｓ大学的ＩｌｙａＲａｓｋｉｎ及其同事在５月份的ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ上描述了一种新颖的生产蛋白质的方法。他们在含营养的溶液中,而不是在土壤中种植番茄,并从该溶液中收集番茄根分泌的所需蛋白质。众所周知,根从土壤中吸收养分,而根为了保护自身不受细菌和其他致腐因子的损害也分泌蛋白质。Ｒａｓｋｉｎ等人便想利用根分泌蛋白质这一功能来用根生产蛋白质。研究者修饰了某些基因,使其表达的蛋白质不再能发信号给根细胞而保留在细胞内;然后加入少量氨基酸来告知细胞分泌这种蛋白质,并…     

胶原蛋白肽增强小鼠免疫力的实验研究

目的 探讨用生物酶提取的胶原蛋白肽增强小鼠免疫力的作用及相关机制.方法 80只清洁级昆明小鼠被随机分成正常对照组、胶原蛋白肽低剂量组[3 g/(kg·bw)]、中剂量组[7.5 g/(kg·bw)]和高剂量组[12 g/(kg·bw)],每日给药2次,连续2周.检测免疫器官重量、抗体生成细胞数(Jerne改良玻片法)、半数溶血值(HC50)的测定及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验.结果 高剂量组可提高脾脏指数、胸腺指数、半数溶血值及吞噬细胞吞噬率和吞噬指数、可增加抗体生成细胞数;中剂量组可提高胸腺指数、增加抗体生成细胞数、提高小鼠半数溶血值及吞噬细胞吞噬率和吞噬指数;低剂量组可增加抗体生成细胞数、提高吞噬细胞的吞噬率和吞噬指数.结论 三种剂量胶原蛋白肽对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫均有显著的增强作用,高剂量组效果最强.     

一种新的微小RNA将神经元干细胞转变为神经元

科学家在探索脑细胞是如何形成的过程中 ,发现并证明了RNA在其中起了很大作用 .研究者发现有一种新的RNA ,它能将非特化的啮齿类脑细胞转变为成熟的、正式的神经元 .研究者在 2 0 0 4年 3月份的Cell上报道 ,该RNA靠与一个专一的蛋白质相结合而开启了许多神经元特异的基因 .令人     

狼疮神经疾患的关键性蛋白质

虽然狼疮较常见的症状是关节疼痛、出疹以及肾脏问题 ,但在测试中发现病人的记忆力和学习能力上也较差 ,比起正常人在记忆力与学习能力方面有精细的变化 .神经元损伤由神经元上一种易受伤的表面蛋白 ,称为ＮＲ2引起 .研究者认为 ,阻断ＮＲ2可提供一种方法来阻挡抗体攻击人自身的脑细胞 .研究者搜寻到一个蛋白质文库 ,其中有几种蛋白质与专一的抗体相结合 ,该抗体则与实验动物的ＤＮＡ相结合 ,而引起自身免疫疾病 .研究者发现 ,ＮＲ2是与该抗体相结合的 ,ＮＲ2在神经元表面很丰富 .在神经元表面ＮＲ2是受体的一部分 ,该受体是谷氨酸停靠的港…     

麻黃碱快速耐受性形成机制的探討

本文对于猫瞬膜,猫及大鼠血压对麻黄碱的快速耐受性进行了系統研究。在猫对麻黄碱快速耐受性产生过程中发现:(1) 麻黄碱对瞬膜的积累作用(机率)与积累剂量(对数)呈直线关系,(2) 瞬膜对电刺激交成神经的反应减弱,(3) 血压及瞬膜对静脉注射去甲腎上腺素的反应增加。与其他实驗动物相似,大鼠連续注射麻黄碱8毫克/公斤,其升压作用也易于产生快速耐受性。大鼠血压对麻黄碱产生快速耐受性后,酪胺的剂量反应曲线被压低,但去甲腎上腺素的曲线并无显著改变。猫预先注射利血平后,其瞬膜对麻黄碱的剂量反应曲线中部(2.5毫克/公斤)被压低。在猫和大鼠的剂量-升压反应曲线中,最大也卽最后一剂麻黄碱(猫:12.5毫克/公斤;大鼠:8毫克/公斤)的反应由于快速耐受性而有所降低;但用利血平后可使这个反应较对照組显著升高。大鼠预先用不同剂量利血平后,麻黄碱快速耐受性的产生趋于延緩;并且第一剂麻黄碱的升压作用,特别是在注射利血平5毫克/公斤,3—4小时后,有增强现象。切除腎上腺对上述結果似无影响。预先灌注去甲腎上腺素也可增强第一剂麻黄碱的升压作用,但与利血平化不同,对多数大鼠,反可促进快速耐受性的产生。大鼠产生快速耐受性后,灌注去甲腎上腺素可部分地恢复麻黄碱的升压作用。预先静脉注射可卡因2.5毫克/公斤可压低麻黄碱的剂量反应曲线。以上一系列实验資料提示麻黄碱快速耐受性的形成由于两种重要因素:(1) 麻黄碱直接作用的快速耐受性是由于受体的饱和,(2) 麻黄碱间接作用的快速耐受性是由于介质的耗竭。     

溶血磷脂酸致大鼠离体心脏心律失常的作用

目的：研究溶血磷脂酸（LPA）对大鼠离体工作心脏的致心律失常作用。方法：将50只Wistar大鼠随机分成5组：正常对照组（单纯灌流不给药）;不同浓度LPA组（0.5μmol.L-1、5μmol.L-1、50μmol.L-1）;LPA受体阻断剂（ki16425）10μmol.L-1＋LPA5μmol.L-1组。用钝器击昏大鼠,立刻取出心脏置于Langendorff离体灌流装置上,待离体心脏稳定工作后通过RM-6000八导生理记录仪监测心脏表面心电活动,并观察各组室性早搏的发生情况。结果：LPA三个浓度组均能引起不同程度的室性早搏,且呈明显浓度依赖性,和对照组比差异显著（P〈0.01）,而且这种作用可以被ki16425阻断,和给药组比差异显著（P〈0.05）。结论：LPA可以诱导大鼠离体工作心脏心律失常的发生。     

三种植物多糖肽的镇痛作用观察

三种植物多糖KA -PSP、AB -PSP、B1 -PSP灌胃给药 6天后 ,小鼠热板法实验发现AB -PSP呈现明显的镇痛作用 (P <0 .0 1 ) ,大鼠电刺激尾巴—嘶叫模型亦显示同样结果 ,其作用在给药后 1小时即有明显差异并持续至给药后 1 .5小时 (P <0 .0 0 1 )。     

F_1-ATPase作为微型发动机

微型的机器需要微型的发动机 .现在 ,研究者已为一个微型发动机设计了一个开关 ,该微型发动机是一个仅为 11纳米 (nm)宽的旋转的蛋白质片段制成的 .这种微型发动机是以天然蛋白质为基础的 ,很可能有朝一日能开动纳诺规模的机器 ,例如药物传送系统 ,研究者在 2 0 0 2年 1月份的NatureMaterials上描述了他们的这种可控制的微型发动机 .他们所用的蛋白质是一种酶 ,称为ATP合酶 ,其可产生细胞燃料———ATP .研究者所专门研究的是一种ATP合梅的旋转片段 ,称为F1 ATPase .许多研究者已经考虑到这种蛋白片段以及其他的旋转蛋白质 ,他们着眼…     

蝇蛆油促进大鼠皮肤机械损伤愈合作用及机制研究

目的:本文拟研究蝇蛆油对皮肤机械损伤的治疗作用及作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、蝇蛆油组和重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)凝胶组,制作大鼠皮肤机械性损伤模型,在不同时间点采集样本,检测创面愈合率、创面愈合时间、血管内皮生长因子(VEGF)含量、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,并检测组织中胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、血小板衍生因子(PDGF)和细胞角蛋白19(CK19)表达情况。结果:模型组大鼠创面愈合时间为29.5±2.6 d,而蝇蛆油创面愈合时间为22.4±2.8 d,存在显著差异(P0.01)。VEDF含量在模型组和给药组均随着创面愈合时间增加,给药组在第1 d即显著高于模型组(P0.01),并在第21 d达到最大值(2051.5±148.2 ng/L)。模型组大鼠创面组织中MDA含量为6.47±0.92 nmo L/mg,SOD含量为7.52±3.21 U/mg,而蝇蛆油给药组大鼠创面组织中MDA含量为3.42±0.83 nmo L/mg,SOD含量为21.32±2.94 U/mg,存在显著差异(P0.01)。进一步研究发现,与模型组比较,蝇蛆油给药组大鼠创面组织中胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、PDGF和CK19含量均显著升高(P0.01)。结论:蝇蛆油能够促进机械性损伤皮肤创面愈合,其作用机制可能是通过促进血管生成,抗氧化损伤,促进胶原生成,诱导干细胞形成,从而促进创面愈合。     

胶原蛋白异源三聚体的理性设计

胶原蛋白是高等动物中最丰富的蛋白质,约占总蛋白质量的1/3.同时,胶原又是重要的生物医用材料,被广泛应用在伤口缝线、软骨缺损填充、骨骼金属植入物镀膜等.目前,在已知的人类28种胶原蛋白中,其中有1/4的胶原构型(7/28)是以异源三聚体的形式存在.由于缺乏对胶原蛋白链间特异性识别与折叠机制的了解,如何通过理性设计来制备清洁来源、纳米尺度可调控的胶原蛋白材料一直是蛋白质工程与生物材料工程交叉领域中的热点和难点问题.迄今为止,在胶原三螺旋中鉴定的最重要的成对相互作用是轴向电荷对,其可以在适当放置的赖氨酸与天冬氨酸或谷氨酸残基之间形成.这些成对氨基酸相互作用将允许制备具有高特异性的异源三聚体螺旋,以及对螺旋结构和稳定性的总体改进控制.此外,对这些相互作用的详细研究将帮助我们修改天然胶原蛋白序列,制造清洁来源、高度可控和成分响应的胶原蛋白生物材料.本综述将总结我们对这种相互作用和其他电荷对相互作用的理解,以及它们如何成功地用于控制胶原三螺旋自组装并探索新的蛋白质设计策略.     

鞘内联合给予米诺环素和IL-6的中和抗体对脊神经结扎模型所引起的热痛敏的镇痛作用

目的:研究鞘内联合给予米诺环素和IL-6的中和抗体在大鼠脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模型所引起的神经病理性痛中的镇痛作用.方法:建立大鼠SNL模型,分别在手术前和手术后鞘内给予米诺环素100 μg、在手术后鞘内给予IL-6的中和抗体0.03 μg、手术后鞘内联合给予两种药物,观察给药3天各组大鼠热刺激的缩足反应潜伏期(paw withdrawal latencies,PWL).结果:①SNL手术前后给予米诺环素都可以提高大鼠的PWL(P＜0.05),但SNL手术前给药对大鼠PWL的提升明显高于手术后给药(P＜0.05).②手术后给予IL-6的中和抗体可以有效提升SNL组的PWL(P＜0.05),但是还是比给予生理盐水的假手术组大鼠的PWL明显减少(P＜0.05).③手术后联合给予两种药物可以明显逆转SNL组的PWL(P＜0.05).④联合给药对大鼠PWL的提高明显高于SNL手术后给予米诺环素组和给予IL-6的中和抗体组(P＜0.05),但与手术前给予米诺环素组的PWL相比无明显差异(P＞0.05).结论:鞘内联合给予米诺环素和IL-6的中和抗体对SNL引起的神经病理性痛有明显的镇痛作用.     

高频电刺激伏隔核对可卡因成瘾大鼠自身给药行为学的影响

目的:研究可卡因诱导的大鼠自身给药行为,为临床治疗药物成瘾提供新的思路.方法:24只雄性大鼠随机分为对照组,假手术组和DBS高频电刺激组,每组8只.3组大鼠全部行右侧颈静脉长期置管术,假手术组和刺激组同时进行双侧伏隔核电极植入术,术后第7天起进行每天2小时的自身给药训练,训练程序为固定比率的FRI程序(即大鼠触碰鼻触一次可获得药物注射一次).每次注射后20s内为不应期,当大鼠连续3天触鼻频率最高值与最低值的差值小于均数标准差的1/4后,FRI模式下的大鼠自身给药训练成功.模型建立成功以后对DBS刺激组进行高频电刺激.结果:刺激组大鼠在高频电刺激15天触鼻频率与自身给药动练第15天触鼻频率相比明显减少(P＜0.01),而对照组和假手术组无明显统计学差异(P＞0.05);剌激组大鼠触鼻频率与假刺激组和对照组相比明显减少(P＜0.01).结论:脑深部高频电刺激可抑制可卡因成瘾大鼠对可卡因的依赖.     

同种异体移植炎性因子-1：一种多功能的炎性蛋白质

同种异体移植炎性因子-1（allograft inflamuatory factor-1,AIF-1）是由143个氨基酸组成的小分子蛋白质,链内含有一个可与Ca^2＋结合的EF-手形结构域。AIF-1最初发现于同种大鼠的异体移植心脏。AIF-1被证明与机体的免疫应答、血管病变及生殖功能紧密相关,并能调节细胞的增殖及迁移,是一种多功能的炎症蛋白质。     

有证据:心脏存在肾素

已证明心肌细胞有血管紧张素Ⅱ结合位点,血管紧张素及其类似物对心肌具有正性变力作用,因而设想心肌可能存在局部性肾素血管紧张素系统。实验证明,雄性 CD-1小鼠及 SD 大鼠(sprague dawley rats)心脏有肾素样活性物质。这种心脏肾素和肾脏肾素具有类似的最适 pH,可被抗肾素抗体抑制。由于在体外分离出的雄性 Wistar-Kyoto 大鼠心室细胞仍可测到肾素样活性物质,以及低钠饮食小鼠心肌细胞和大鼠心脏中均存在肾素的 mRNA,因而认为肾素是在心肌局部合成的,不是来源于血液;同时还观察到硝苯吡啶可降低心室细胞肾素活性。心脏局部的肾素—血管紧张素系统的意义如下:(1)血管紧张素Ⅱ对心肌有正     

红景天对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用及对VEGF的影响

目的:探讨中药红景天对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用及其对血管内皮生长因子(EGF)蛋白和mRNA表达的影响.方法:52只SD大鼠随机分成单纯手术组、术后给药组、提前给药组、假手术组和正常对照组.采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,4周后处死动物.Ⅷ因子免疫组化染色后对各组大鼠梗死边缘区微血管进行计数;免疫组化技术及Western blot技术检测各组缺血心肌VEGF蛋白质水平表达变化;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测缺血心肌VEGF mR-NA表达变化.结果:术后给药组和提前给药组血管计数均较单纯手术组增多(P＜0.01),且提前给药组明显多于术后给药组(P＜0.01);术后给药组和提前给药组缺血心肌VEGF及其mRNA表达较单纯手术组增加(P＜0.01),提前给药组缺血心肌VEGF及其mRNA表达明显高于术后给药组(P＜0.01).结论:红景天能够促进心梗后大鼠缺血心肌血管新生,其作用机制可能与上调局部心肌VEGF及其mRNA表达有关.预给红景天可能增强对心梗大鼠的上述作用.     

四种蛋白质促进乳癌扩散

虽然科学家在发现和抗击癌生长上已取得重大进展,但是在确实哪些蛋白质促进了癌的扩散和转移上则较少成功.科学家用小鼠进行研究,现已证明有4种蛋白质协作对肿瘤细胞的生长与扩散起作用.这4种蛋白质出现在肿瘤转移之前.这4种蛋白质包括1种称为环加氧酶的炎性酶,1种称为表皮调节素(epiregulin)的蛋白质,它包含在细胞生长中,还有2种酶与营养肿瘤的血管生长有关.为了测试这些蛋白质的作用,研究者将转移的人乳癌细胞移植到小鼠健康的乳腺组织中去.研究者是将基因工程化的乳癌细胞转入小鼠中去,故而这些癌不能产生部分或全部这4种蛋白质.癌出现快速生长是由于补足了这4种蛋白质.已证明,癌缺乏其中1～2种蛋白质便放慢生长,而缺乏这所有4种蛋白质便完全停止生长.在进一步的试验中,缺乏这种蛋白质的癌所生长的血管分支少而短,而有这种蛋白质的癌所生长的血管分支很多且发生渗漏.研究者在2007年4月12日的Nature上作了报道.这种渗漏使癌细胞逃逸进入血管.然而,癌的转移比其单纯移动条件更高,癌细胞必须扎根于不同类的器官中,并在那里生长.在一项单独的试验中,将乳癌细胞静脉注射于小鼠,证明减少所有这4种蛋白质便抑制癌细胞在肺的定居.研究者也分析了含有充分补足的这4种蛋白质的乳癌细胞迁移到肺的情况.这些小鼠中有些接受了抑制这4种蛋白质的药物.在不同类的组织中,24天内未见癌生长的小鼠,用药物治疗者仅见研究者所称的“微量转移”,即仅被肺毛细血管捕获,而不是扩散到肺中.有科学家在Nature附件中说,该实验揭示了癌转移的新细节,并鉴定了癌特定蛋白质在各阶段的作用.然而,人要治愈癌症是在小鼠试验之前.虽然已经过革新,新试验只须历经数星期,但在此时间框架内,许多癌症病人对转移的治疗反应也还良好.在小鼠身上癌症的负担按比例来说,要比人乳癌所面临的负担小得多.将蛋白质亚组单独立出来研究其与癌转移的关系是极其有力的措施.可以抑制这4种蛋白质的药物有2种已见市场：即西妥昔单抗(cetuximab),其商品名为艾比特思(Erbitux),是一种抗癌药;环氧化酶 2抑制剂(cele coxib),其商品名为塞来昔布(celebrex),是一种抗炎药.有一种药物抑制其他2种蛋白质,已在人身上试验,但尚未上市.