转DBN9978基因抗虫抗除草剂玉米对大鼠的亚慢性毒性研究

目的：研究喂饲转DBN9978基因玉米对大鼠的亚慢性毒性。方法：选用断乳SD大鼠140只,随机分为7组,即3个转基因组（73.3%、36.65%、18.33%）、3个亲本玉米组（72.7%、35.35%、18.18%）、1个常规基础饲料对照组。每组20只,雌雄各半。动物2只/笼喂养,自由进食饮水,连续观察90d。观察大鼠体重、进食量、血液学指标、血生化指标,实验结束后摘取动物脏器进行病理组织学检查。结果：各剂量组动物的体重均呈增长趋势,转基因组、亲本对照组与饲养对照组每周体重及体重总增重、每周进食量、总食物利用率以及中、末期的血液学和血生化指标,各主要脏器系数及病理组织学检查比较,均未发现有生物学意义的改变。结论：现有试验结果不能证实该转DBN9978基因玉米对大鼠有亚慢性毒性作用。     

转Cry1Ab-ma基因玉米对大鼠的亚慢性毒性研究

目的：研究转Cry1Ab-ma基因玉米对大鼠的亚慢性毒性。方法：初断乳Wistar大鼠140只,随机分为7组：转基因玉米高中低3个剂量组（60%、30%、15%）、亲本玉米高中低3个剂量组（60%、30%、15%）以及1个常规基础饲料对照组,每组20只,雌雄各半。动物2只1笼喂养,自由进食饮水,连续观察90 d。每周称量饲料量及大鼠体重,在试验中、末期采集大鼠尿液和血液进行尿常规、血常规和血生化分析。实验末期称重脏器并计算脏器体重比,最后对大鼠脏器进行病理组织学检查。实验末期称重脏器并计算脏器体重比,最后对大鼠脏器进行病理组织学检查。结果：90 d的实验期内,各组大鼠均未发现中毒死亡情况。转基因玉米组个别评价指标虽与亲本玉米对照组或常规基础饲料对照组存在统计学差异,但指标水平在文献报道正常范围和历史对照范围内,且均未发现有生物学意义的改变。各受检脏器未见与受试物相关的病理改变。结论：现有实验结果不能证实转Cry1Ab-ma基因玉米对大鼠有亚慢性毒性作用。     

转基因棉籽亚慢性毒性的研究

目的：转基因棉籽对SD大鼠亚慢性毒性的研究。方法：选取出生6-8周的SPF级SD大鼠140只,雌雄各半,按体重随机分成7组,分别连续饲喂含普通棉籽5%、2.5%和1.25%的饲料和含转基因棉籽5%、2.5%和1.25%的饲料以及基础饲料30天。实验过程中监测动物体重、进食量和进水量,结束后分别测定各组动物的血常规、血生化、脏体指数等指标。结果：实验期间各组动物均生长发育良好,无中毒死亡现象发生。实验组实验动物的各项指标与对照组相比,无显著性差异（P≥0.05）。结论：本研究未发现转基因棉籽对实验动物有亚慢性毒性。     

转基因棉籽亚慢性毒性的研究

目的:转基因棉籽对SD大鼠亚慢性毒性的研究。方法:选取出生6-8周的SPF级SD大鼠140只,雌雄各半,按体重随机分成7组,分别连续饲喂含普通棉籽5%、2.5%和1.25%的饲料和含转基因棉籽5%、2.5%和1.25%的饲料以及基础饲料30天。实验过程中监测动物体重、进食量和进水量,结束后分别测定各组动物的血常规、血生化、脏体指数等指标。结果:实验期间各组动物均生长发育良好,无中毒死亡现象发生。实验组实验动物的各项指标与对照组相比,无显著性差异(P≥0.05)。结论:本研究未发现转基因棉籽对实验动物有亚慢性毒性。     

五氯酚对大型溞的急性亚慢性和慢性毒性

本文采用换水式试验研究了五氨酚溞（ＰＣＰ）对大型（Ｄａｐｈｎｉａｍａｇｎａ）的急性、亚慢性和慢性毒性,稀释水硬度为８０─１００ｍｇ／Ｌ（以ＣａＣＯ３计）。急性和慢性试验均使用小于一日龄的幼溞,试验温度为２５─２６℃,慢性试验进行了２０ｄ。用小于一日龄幼溞进行的亚慢性试验暴露了１９ｄ,而用四日龄幼溞的亚慢性试验则进行了１６ｄ,水温均保持在１９─２０℃。ＰＣＰ对大型溞的２４ｈ和４８ｈＥＣ５０分别是４８９和２４５μｇ／Ｌ。依据第１胎所产幼溞数求得的最低可观察效应浓度（ＬＯＥＣ）和无可观察效应浓度（ＮＯＥＣ）,在慢性试验中分别是１６０和８０μｇ／Ｌ,在１９ｄ亚慢性试验中分别为２００和１００μｇ／Ｌ,二者相近。试验结果表明,第１胎所产幼溞数是敏感的指标。     

稀有Ju鲫亚慢性毒性试验

研究了一种快速评价有毒化学品对稀有Ｊｕ鲫慢性毒性的试验方法。选择〈３ｄ龄的稀有Ｊｕ鲫幼鱼开始暴露,试验药物为国际标准参比毒物Ｃｕ＾＋２,Ｃｒ＾＋,Ｚｎ＾＋２和ＰＣＰ;试验温度 为２５±１℃,每天更新试验液一次,试验持续５ｄ。     

稀有■鲫亚慢性毒性试验

研究了一种快速评价有毒化学品对稀有鲫慢性毒性的试验方法。选择＜3d龄的稀有峋鲫幼鱼开始暴露,试验药物为国际标准参比毒物CU( 2),Cr( 6),Zn( 2)和PCP;试验温度为25±1℃,每天更换试验液一次,试验持续5d。以现存量为测试指标,Cu( 2),Cr( 6),Zn( 2)和PCP对稀有鲫的无可观察效应浓度[NOEC]为20,2500,100,40ug／L;最低可观察效应浓度[LOEC]为40,5000,200,80ug／L,与7d亚慢性毒性试验结果相接近。试验结果表明,稀有鲫亚慢性毒性试验可从7d缩短为5d。     

华恢1号稻谷的大鼠慢性毒性试验研究

为了解长期喂养接触华恢1号稻谷是否会导致慢性毒性作用,尤其是进行性或不可逆的毒性作用以及致癌作用,本研究以SD大鼠为实验动物,进行了为期106周的慢性毒性试验.与普通稻谷对照组和基础饲料对照组比较,喂饲华恢1号稻谷106周的低、中、高剂量组SD大鼠,在一般临床症状、体重和食物利用率、血液学和血液生物化学指标、脏器重量和脏器系数、大体解剖学和病理组织学检查等各项观察指标上,均未见统计学意义和毒理学意义的差异.各组间,老年大鼠的肿瘤发生率为8.3%~10%,没有剂量反应关系,其发生部位主要在皮下,符合美国NIH Rodent 1980 catalogur SD大鼠乳腺肿瘤自然发病的正常范围.故认为华恢1号稻谷对SD大鼠没有明显的慢性毒性和致癌性.     

转基因在玉米中的遗传分离与整合特性的研究

用ＰＣＲ和ＤＮＡ分子杂交方法研究了转基因Ｂｔ在３种不同方法获得的８个转化体后代中的遗传分离、整合性质及其稳定性,结果表明：（１）转基因在大多数转化体后中呈简单的孟德尔遗传;在Ｒ１至Ｒ２代,部分家系中转化体比例偏低,有的发生转基因丢失,但到Ｒ３代以后均趋于正常的孟德尔遗传方式,在群体中固定下来;（２）转基因在不同转化体中的整合类型有一定差异,但整合的位点和拷贝数都较少,且多呈串联或紧密连锁的整合;（     

花粉介导法获得玉米转基因植物株

利用花粉作为外源基因的载体进行遗传转化在玉米（Zea mays L.）上获得了成功。以玉米自交系太9101、综31等为受体,以pGLⅡ-RC-1质粒为供体,在玉米开花期,用花偻与质粒DNA混合并附加超声波处理,然后辅以人工授粉的方法将个源基因导入到受体中。DNA斑点杂交和PCR扩增以及PCR－Southern blot杂交检测结果证明,几丁质酶基因确已导下玉米自交系中。所得结果表明：玉米花粉可以介导外源基因的转化。利用花粉作为载体介导外源基因转化,避免了传统的基因枪法和土壤杆菌法转化所要求的组织培养技术,转化方法简单,易操作,具有很强的实用性。     

crylA基因在转基因玉米中的遗传与表达

通过Southern杂交、ELISA分析等方法,研究了crylA基因在转基因玉米中的遗传与表达。结果表明,crylA基因在转基因玉米中呈单位点显性基因遗传。crylA杀虫基因在转基因玉米不同株系中的表达量存在显著差异;在转基因玉米同一植株不同组织中的表达量也明显不同,在叶片,苞叶等绿色组织中的表达量显著高于在髓、花粉等非绿色组织中的表达量;在玉米叶片中的表达量随着发育期的推进有上升的趋势,在研究的3个转基因工程株系中,crylA杀虫蛋白的表达量在R2、R3、R4代之间无显著差异。     

红剑鱼、孔雀鱼、食蚊鱼亚慢性毒性试验

目的研究一种快速评价有毒化学品对红剑鱼、孔雀鱼、食蚊鱼慢性毒性的试验方法。方法选择<3d龄的红剑鱼、孔雀鱼、食蚊鱼幼鱼开始暴露,试验药物为国际标准参比毒物Cr6 、Cu2 、Zn2 和Cd2 ,试验温度为25±1℃,每天更换试验液1次,试验持续5d。依据试验鱼的每尾干重和现存量作为观察指标,测定了铬、锌、铜、镉对红剑鱼、孔雀鱼和食蚊鱼的无可观察效应浓度(NOEC)和最低可观察效应浓度(LOEC)。结果铬、锌、铜、镉对红剑鱼和食蚊鱼的NOEC分别是2500、100、10、10μg/L,LOEC分别是5000、200、20、20μg/L。铬、锌、铜、镉对孔雀鱼的NOEC分别是2500、100、10、20μg/L,LOEC分别是5000、200、20、40μg/L;这与7天亚慢性试验结果相接近。结论红剑鱼、孔雀鱼、食蚊鱼,亚慢性毒性试验可从7d缩短为5d。     

cryIAc基因在转基因玉米中的遗传规律及对抗虫性影响

旨在研究目的基因在转基因植株和后代植株(株系)中的遗传规律及其对转化植株抗虫性的影响。以花粉介导法将cryIAc基因导入玉米自交系‘郑58’和‘昌7-2’,对转化植株及其后代株系进行分子检测和田间抗虫鉴定。结果表明:(1)转化‘郑58’和‘昌7-2’,T1代分别获得转基因植株24和41个,转化率高达20%以上;(2)转基因T2代、杂交F2代及回交1代(B1)的分子检测结果证明,外源基因的遗传符合孟德尔的3∶1、3∶1和1∶1的遗传分离规律;(3)连续多带的分子检测结果还表明,外源基因可稳定遗传并有效表达,表达水平在9.8-14.3 ng/g叶片鲜重之间;(4)抗虫鉴定结果显示,在阴性对照全部感虫情形下,转基因纯合株系仍表现出较高抗虫活性;(5)此外,回交试验结果还证明外源基因通过杂交可传递给下一代;(6)最终经筛选得到SZ003、SZ005、SC001、SC004和SC007五个高抗虫转基因株系。结果表明,花粉介导法是一种高效、快捷的转化方法,cryIAc基因导入玉米自交系植株后赋予和提高了转基因植株的抗虫活性。     

含转人乳铁蛋白奶粉对SD大鼠亚慢性毒性的研究

目的:研究人乳铁蛋白奶粉对SD大鼠营养状况、生理、生化指标等亚慢性毒性的影响.方法:取初断乳SD大鼠140只,雌雄各半按照体重随机分为7组.分别饲喂添加比例为7.5%,15%和30%转基因成分奶粉的饲料、添加比例为7.5%,15%和30%不舍转基因成分奶粉的饲料和基础饲料90天.在实验中期和未期采血检测血液常规指标.实验结束时处死实验动物,计算脏器指数,并对主要脏器进行病理组织学观察.结果:试验期间各组动物生长发育情况良好,给予含转基因成分奶粉实验组动物的血常规与不含转基因成分奶粉组和常规饲料组相比均无显著性差异(P≤0.05),未见各组实验动物的脏器组织出现任何病理形态学改变.结论:未发现含转基因成分的奶粉对实验动物有亚慢性毒性.     

转基因玉米中目的基因的遗传表达及其抗病性研究

采用花粉介导方法将几丁质酶基因和潮霉素基因导入玉米(Zea maysL.)自交系海92-1中,以筛选抗玉米丝黑穗病的转基因品种.对转化植株及其后代植株的PCR、Southern blot检测表明,目的基因已导入转化植株并整合到其基因组中,且能够稳定遗传.ELISA分析证明转基因植株中目的基因可高效表达,表达产物量在9.8~16.3 ng?g-1鲜叶左右.统计分析显示,目的基因产物表达水平与转基因植株的抗病性呈极显著正相关(r=0.925,P<0.01).接种病毒鉴定结果揭示转基因株系的抗病性比对照提高3~4级.结合农艺性状筛选,选育到401、403这2个抗丝黑穗病且其它农艺性状优良的转基因纯合株系.     

转基因抗矮花叶玉米对大白鼠骨髓细胞遗传毒性的影响

以SD大鼠为研究对象,研究了转基因抗矮花叶玉米和常规玉米对大白鼠骨髓细胞微核率与染色体畸变率的影响,以观察该转基因玉米对大白鼠可能产生的遗传毒理效应。实验结果表明：饲喂30%和50%转基因玉米日粮组的大白鼠骨髓细胞微核率和染色体畸变率与饲喂常规玉米相比均没有显著差异,而与阳性对照组之间存在极显著差异,这说明转基因玉米与常规玉米对大白鼠骨髓细胞均无遗传毒性。     

转基因玉米C63-1种植对土壤跳虫的影响

【目的】转基因玉米种植在吉林已经开展环境释放试验,但是对土壤动物影响并不清楚。【方法】本文通过一年野外实验,研究了转植酸酶玉米田间种植对土壤跳虫的影响。【结果】研究结果发现,转植酸酶玉米种植对跳虫多度、类群丰富度、群落多样性指数及群落结构均未产生显著影响。但是可以使其中一些稀有类群消失。而不同的玉米生长期显著影响了跳虫的群落结构。同时玉米生长期也显著影响了跳虫的多度,跳虫多度在玉米成熟期最高。这可能与玉米凋落物对跳虫的食物供应有关。【结论】转植酸酶玉米C63-1田间种植一年,对跳虫并未产生显著影响,但是未来还需要进行长期野外监测试验和室内控制实验最终确定转基因玉米的环境安全性。     

转基因玉米外源基因通过花粉漂移的频率和距离

基因漂移是转基因生物可能引起生态环境安全性问题的主要风险之一,选用美国孟山都公司的转基因抗除草剂玉米GA21进行了外源基因向周边环境遗传漂移的距离和频率的研究,结果表明:转基因玉米的外源基因可以向周边玉米品种进行漂移,其最大漂移频率为45.10%,150m处仍能检测到外源基因的漂移,防止转基因玉米基因向外扩散的最佳途径为设置隔离带,隔离距离以200m以上为好。     

美洲鲽抗冻蛋白基因的亚克隆及构建转基因鱼的表达载体

用限制性内切酶Ｐｓｔ Ｉ部分消解含有美洲鲽抗冻蛋白基因的ｐＣＴ５质粒,分离得到３２４ｂｐ的片段,将此片段亚克隆到ｐＵＣ１９质粒中,筛选到ｐＵＣ－ＡＦ重组子。从ｐＵＣ－ＡＦ重组子中,用ＢａｍＨＩ和ＨｉｒｄⅢ切下３２４ｂｐ的抗冻蛋白基因,再重组到含有ＳＶ４０病毒启动子的ｐＫＳＶ－１０的载体中,构建成转基因鱼的表达载体,此表达载何可用于鱼的基因转移的研究。