不同预处理对切花百合寿命的影响

取花蕾大小、颜色、成熟度一致的东方型百合中的鹿子百合 (Liliumspeciosum)为花材 ;茎杆长约 70cm ,每支花 5个蕾 ,由上往下数留叶片 1 7片 ,其余的全部去掉 ,以防止蒸腾。配制硫代硫酸银 (STS)时 ,AgNO3与Na2 S2 O3比为 1∶6(摩尔比 )。 ( 1 )取 5 0 0mL 0 .2mmol·L- 1AgNO3和 5 0 0mL 1 .2mmol·L- 1 Na2 S2 O3;( 2 )取2 .5mmol·L- 1 AgNO3(定容到 5 0 0mL)和 1 5mmol·L- 1 Na2 S2 O3(定容到 5 0 0mL) ;( 3)取 4mmol·L- 1 AgNO3(定容到 5 0 0mL)和 2 4mmol·L- 1 Na2 S2 O3(定容到 5 0 0mL)。将 ( 1 )、( 2 )、( 3)…     

水浴回流与超声波辅助回流提取百合皂苷工艺比较研究

分别采用单因素试验法和正交试验法对水浴和超声波辅助回流提取法对百合总皂苷的提取工艺进行比较,获得最佳水浴回流提取工艺为:乙醇浓度为50%、温度为90℃、提取时间为3 h、固液比为1∶18。在该工艺条件下百合皂苷的提取率为1.98%;超声波辅助回流提取最佳工艺为:温度为90℃、乙醇浓度为70%、提取时间为25 min、固液比为1∶30、提取功率为105 W。在该工艺条件下百合皂苷的提取率为2.33%,超声波辅助回流提取法的百合皂苷提取率和稳定性、重复性都优于传统的水浴回流提取法。     

脱羰秋水仙碱诱导昆明白小鼠卵母 细胞去核的研究

在已有的demecolcine(以下简称Deme)诱导去核技术路线的基础上,以昆明白小鼠卵母细胞为实验材料,对影响去核率的几个因素（包括Deme浓度、Deme处理起始时间和作用时间、卵母细胞的卵龄）逐次进行实验。结果表明：（1）激活卵母细胞在浓度为0.4μg/mL和0.5μg/mL Deme-KSOM液中处理60 min均能有效去核,但0.5μg/mL组获得更高的去核率（33.3%）。（2）卵母细胞在激活后0~5 min之内迅速放入0.5μg/mL Deme-KSOM液中,处理60~180 min得到了相对较高的去核率（31.9%~24.5%）。（3）昆明白小鼠hCG注射后17~18 h收集的卵母细胞更有利于Deme诱导去核,去核率为27.1%。经比较分析,建立了优化的Deme诱导去核程序。 Abstract: On the basis of exiting technique pathway of demecolcine-induced enucleation(IE),several factors(Demecolcine concentration、time of demecolcine inition and treatment、oocytes age) affecting the IE rate were tested using Kunming mouse oocytes.The experiments’ results demonstrated that: In experiment 1,activated oocytes could be enucleated efficiently by treating with KSOM medium containing 0.4μg/mL or 0.5μg/mL demecolcine for 60 min,but 0.5μg/mL group gained the higher IE rate(33.3%).In experiment 2,maximum IE rate (31.9%~24.5%) were obtained when oocytes were exposed to 0.5μg/mL demecolcine between 0 and 5 min postactivition and treated for 60~180 min.In experiment 3,oocytes collected from Kunming mouse at 17~18h after hCG administration were favoriate to demecolcine-IE(27.1%). By comparision and analysis of the data,we established the optimized IE procedure.     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定血清中维生素A、E的方法研究

目的：建立超高效液相色谱 串联质谱（UPLC MS/MS）同时测定血清中维生素A、E的方法。方法：取标准系列工作溶液、空白替代血清样品（4% BSA牛血清白蛋白溶液）各50 μL,经硫酸锌、沉淀剂（甲醇/乙腈=50/50,V/V）沉淀蛋白,振荡,12 000 r/min离心5 min,取上清,低压离心挥干,复溶振荡,12 000 r/min离心5 min,取上清待测。采用Waters BEH Phenyl色谱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）分离,以0.1%甲酸 水溶液和0.1%甲酸 甲醇溶液为流动相等度洗脱,电喷雾（ESI）正离子模式、多反应监测模式（MRM）下检测,内标法定量。结果：UPLC MS/MS检测血清维生素A、α 维生素E、β 维生素E线性关系良好,相关系数分别为0.999 3、0.999 3、0.999 7;维生素A、α 维生素E、β 维生素E定量限分别为0.213、0.240、0.070 ng/mL,检出限分别为0.064、0.072、0.021 ng/mL;维生素A、E在低、高浓度加标回收率范围分别为89.7~107.4、97.6~118.1,RSD分别为2.45%~3.43%、1.48%~5.40%。结论：本研究建立的人血清维生素A、E超高效液相色谱 串联质谱法灵敏度高、准确稳定、重现性好,对血清中维生素 A 和维生素 E 的测定具很好的的应用价值。     

毛头鬼伞富铬深层发酵条件的优化*

在筛选出最佳发酵培养基的基础上,对毛头鬼伞富铬深层发酵培养条件进行了优化。以有机铬产量为主要指标,筛选出的最佳发酵培养条件为:CrCl₃·6H₂O的添加量为200mg/L,培养基初始为自然pH,接种量为8%~10%,装液量为80mL/250mL三角瓶,转速100r/min,26℃恒温培养5d,有机铬的产量达1597.88μg/100mL发酵液,铬富集率达9.09%。     

重组人BD3-BPI的内毒素中和活性及其在高盐环境中抗菌活性的稳定性

目的：验证重组人BD3-BPI（rhBD3-BPI）是否具有内毒素中和活性,研究其在高盐环境中是否能保持抗菌活性。方法：根据内毒素标准品绘制内毒素活性标准曲线,将100 μL梯度稀释的rhBD3-BPI-与100 μL 10EU／mL脂多糖（LPS）混匀,37℃水浴60min,同时设标准对照（只含10EU／mL LPS的标准品溶液）,并以无热源水作为空白对照,采用基质显色法进行鲎试验测定LPS的活性;将6×10^8 CFU／mL的革兰阳性和阴性标准菌株及临床分离的多药耐药菌株接种于含1mg／mL rhBD3-BPI和0～250mmol／L不同浓度NaCl的液体细菌培养基中,37℃培养3h后用10mmol／L磷酸钠按1：1～1：1000的比例稀释,铺LB培养基平板,37℃过夜培养,观察各平板菌落生长情况,计数并计算杀菌率。结果：在5EU／mL的标准内毒素体系中,当rhBD3-BPI的浓度高于4μg／mL时即开始表现出一定的内毒素中和活性,当rhBD3-BPI的浓度分别为16、32 μg／mL时,其内毒素中和率分别为23％和88％,随后rhBD3-BPI对内毒素的中和活性趋于平稳,50 μg／mL的rhBD3-BPI对所有受检菌均表现出100％的杀伤效应。当NaCl浓度低于150mmol／L时,rhBD3-BPI对各受检菌的杀菌活性均未受明显影响;NaCI浓度升高至150-200mmol/L,rhBD3-BPI对各受检菌的杀菌活性有所下降,但其杀伤率仍在90％以上;当NaCl浓度高于200mmol／L时,盐浓度对rhBD3-BPI杀菌活性的影响才较为明显,但即使NaCl浓度达到250mmol／L,rhBD3-BPI的杀菌活性仍保持在85％以上。结论：rh-BD3-BPI具有内毒素中和活性,在高盐环境中具有良好的抗菌活性稳定性。     

HPLC同时测定雪胆属植物中3种活性成分的含量

建立了高效液相色谱法同时测定雪胆属植物中雪胆乙素、竹节参皂苷Ⅳa和雪胆甲素含量的方法,可用于11种雪胆属植物中3种活性成分的同时测定。采用InertSustain C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~20 min,5%~20%B;20~60 min,20%~30%B;60~80 min,30%~64%B);流速1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长203 nm。经方法学考察,本方法具有准确快速、精密度高、重复性好的特点,雪胆乙素、竹节参皂苷Ⅳa和雪胆甲素分别在0.075~3.000μg、0.810~32.400μg和0.620~24.800μg范围内与峰面积呈现良好的线性关系(r≥0.999 5)。定量分析测得11种雪胆属植物中雪胆乙素含量在0.479~1.904 mg/g范围内,彭县雪胆中含量最高;竹节参皂苷Ⅳa含量在1.098~18.58 mg/g范围内,峨眉雪胆中含量最高;雪胆甲素含量在3.079~17.56 mg/g范围内,十一叶雪胆中含量最高。本方法可为雪胆属优质药用资源开发及综合利用提供参考。     

高效液相色谱法测定食品中姜黄素类化合物检测方法的建立

建立高效液相色谱法测定食品中姜黄素类化合物含量的分析方法。利用单因素试验,对食品中姜黄素类化合物的提取试剂、提取方式、提取时间进行选择,确定最佳提取条件为甲醇振荡提取5 min。色谱条件：YMCTM C30色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-水（80∶20,v/v）,用磷酸调节pH 到3.0,流速1 mL/min,检测波长420 nm,柱温30 ℃。结果表明：3种姜黄素类化合物在0.10~10.00 μg/mL内与峰面积有良好线性关系,生姜和咖喱中3种姜黄素类化合物的平均回收率分别为87.86%~107.35%和87.08%~107.47%,RSD均小于5%,3种姜黄素类化合物含量的相对标准偏差（RSD）均小于5%。该方法简单可行、重复性好、准确度高,可广泛用于食品中姜黄素类化合物含量测定。     

响应曲面法优化马尾松中莽草酸的超声提取工艺

以马尾松松针为原料,采用超声波提取法从松针粉中提取莽草酸,通过考察料液比((VH2O∶m松针粉,mL:g)、提取时间、提取温度及超声波功率等因素对松针中总莽草酸含量的影响,并在单因素试验的基础上,选取料液比、提取时间、超声波功率3个变量,进行Box-Behnken中心组合设计优化,获得马尾松松针中莽草酸的最佳提取工艺参数为料液比1∶26,提取时间为46min,超声波功率为359 W,此条件下莽草酸的提取率为1.948%。     

HPLC法同时测定草苁蓉中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B

为建立高效液相色谱法同时测定草苁蓉干燥全草中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B的含量的分析方法,采用色谱柱:Klimail 100-5 C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:以乙腈为流动相A,以0.5%甲酸水溶液为流动相B,梯度洗脱条件:0~12 min,15%A;12~30 min,15%~20%A;30~40 min,20%~25%A;40~45 min,25%~30%A;45~60 min,30%~100%A;流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:260 nm;柱温:30℃;进样量:20μL。得到草苁蓉纳拉苷的线性范围为4.688~150μg·mL^-1(R²=0.999 5);草苁蓉苷B的线性范围为3.438~110μg·mL^-1(R²=0.999 1);平均回收率分别为97.86%、96.55%;RSD分别为1.01、1.23(n=9)。本研究利用高效液相色谱法建立了同时测定草苁蓉全草中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B两种组分的方法。方法学的验证结果证明,该方法简便、快捷,重现性好,可以用于草苁蓉中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B两种组分的含量测定。     

柱孢绿僵菌产抗氧化活性成分培养条件的研究

通过液体摇瓶培养,以自由基清除率为指标,对一株柱孢绿僵菌(Metarhizium cylindrosporae)在不同液体培养条件下的抗氧化活性进行了研究,确定了其产抗氧化活性物质的最佳培养条件。结果表明最佳培养条件为:碳源为葡萄糖和麦芽糖组成的组合碳源;氮源为蚕蛹粉;无机盐及生长因子为MgSO4.7H2O、柠檬酸铵和VB;起始pH值为6.5;装液量为40mL/100mL;接种量为5%~7.5%;摇床转速为160~180r/min;培养时间为8d。正交实验结果表明最佳培养基配方为麦芽糖10g/L、蚕蛹粉10g/L、MgSO4.7H2O0.1g/L、柠檬酸铵0.4g/L、VB0.3g/L时,其次生代谢产物的抗氧化活性最强,可达82.16%。     

百合鳞茎淀粉磷酸化酶提取条件的优化

为深入研究百合鳞茎淀粉磷酸化酶（SP）的性质及其在鳞茎淀粉代谢中的生理作用,本试验确定了兰州百合鳞茎内SP的最佳提取和测定条件,并对部分酶学性质进行了初步探索。结果表明：SP的最适提取缓冲液为pH5.8的琥珀酸缓冲液;最佳反应体系为以25 mmol·L^-1的Glc-1-P为底物,在30℃条件下反应10 min。在pH5~6范围内,SP活性最高;百合鳞茎的SP不易保存且不耐热,4℃条件下保存12 h,酶活力最高残留50%;40℃条件下保存30 min后,SP活力几乎完全丧失。     

硫色曲霉β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的组成型分泌表达

目的：构建硫色曲霉β-甘露聚糖酶的毕赤酵母组成型分泌表达菌株,研究重组菌株的产酶水平。方法：EcoR I／Xba I双酶切质粒pPIC-mann-opt,琼脂糖凝胶电泳、回收目的基因片段后,与组成型毕赤酵母表达载体pGAPzαA连接,转化大肠杆菌,经筛选获得含有pGAP-mann-opt的重组克隆;提取pGAP-mann-opt,用限制性内切酶BspH I线性化后,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,进行Zeocin抗性筛选和PCR鉴定。结果：获得了重组菌株,重组菌株在YPD培养基中摇瓶发酵24h,上清液酶活达到343U／mL,产酶蛋白约为1.0mg／mL。结论：构建的硫色曲霉β-甘露聚糖酶组成型表达菌株具有较好的应用前景。     

HPLC同时测定药用白菊花中绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素

采用高效液相色谱法(HPLC)建立同时测定药用白菊花中绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素含量的方法,样品采用离子液体分散液相微萃法提取。采用Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%冰醋酸溶液(65∶35);检测波长350 nm;柱温35℃;流速0.8 mL/min。绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素的质量浓度与峰面积分别在0.0005~100(r=0.9999)、0.00095~190(r=0.9999)、0.0008~160(r=0.9997)、0.00061~122μg/mL(r=0.9996)呈良好的线性关系;回收率分别为90.52%~100.44%、90.88%~98.58%、94.40%~98.82%、93.68%~100.54%。该方法快速,简便,重复性好,适合于同时测定药用白菊花中绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素的含量。     

散囊菌黄色素的提取及稳定性研究

为寻找优质黄色素生产资源及研究其在不同条件下的稳定性,以冠突散囊菌（Eurotium cristatum）为材料,利用有机溶剂辅助超声波破碎等方法从固体平板和液体培养的菌丝体中提取黄色素,并分别研究了光、温度等理化因子对该色素的影响。结果表明,采用有机溶剂辅助超声波等方法成功提取出黄色素;该色素耐受日光灯光、室内散射光,不耐阳光和紫外光;耐酸,不耐碱;对温度敏感。各种金属离子对该色素有不同程度的影响;磷酸的破坏性显著;H2O2、NaHSO3对该色素有较强的破坏力;柠檬酸有一定的破坏作用;同等条件下,苯甲酸钠的破坏大于山梨酸钾;EDTA-Na2和Vc有一定的护色作用;糖类、NaCl、草酸和乳酸几乎无影响。     

紫外照射对葡萄果实莽草酸途径相关基因表达的影响

本文以花后11周的‘赤霞珠’葡萄果实为试材,应用荧光实时定量PCR技术,研究6种剂量的UV-A、UV-B和UV-C照射对莽草酸途径及后分支酸途径关键酶基因表达量的影响。结果表明,这些基因在转录水平上对紫外诱导的响应不同步,且有照射剂量的依赖性。一定剂量的紫外照射可显著地诱导莽草酸途径的大部分基因和后分支酸途径的VvCM-1、VvCM-2和VvAS的表达;高于或低于该剂量,表达量明显降低。不同基因对紫外诱导的响应也存在差异：3种类型紫外线对莽草酸途径入口酶的两个同源基因VvDAHPS-1和VvDAHPS-2的诱导效应均最为显著。随紫外波长减小,这两个基因受诱导表达的量有所下降。VvSK和VvCS的表达只受1.2kJ·m^-2UV-A的诱导,而不受UV-B和UV-C照射的影响,在后分支酸途径中紫外对VvCM-1表达的诱导作用明显大于VvCM-2和VvAS。     

金属催化剂有效快速裂解SARS冠状病毒和其他微生物

目的研究两种金属催化剂Ag/Al2O3和Cu/Al2O3对SARS冠状病毒和其他呼吸道疾病传播的阻断作用。方法100μL 106TCID50/mL SARS-CoV,100μL 106PFU/mL。表达重组仓鼠朊蛋白的杆状病毒和106大肠杆菌分别缓慢地滴加至两种圆形金属催化剂的表面,吸附5~20 min。使用不同培养液洗涤金属催化剂表面,检测洗涤物的病毒感染性和细菌的增殖。结果病毒和细菌分别吸附5和20 min后,SARS-CoV和杆状病毒的病毒滴度下降到非常低的水平,甚至难以检测到;大肠杆菌组经培养后无克隆生长。5 min吸附后,杆状病毒表达的重组PrP的表达下降到21.8%;20 min吸附后,没有PrP的表达。电镜检测发现大肠杆菌的细胞壁崩解,细胞破碎。结论与金属催化剂Ag/Al2O3和Cu/Al2O3表面接触后,破坏了SARS-CoV,杆状病毒和大肠杆菌的复制增殖能力。两种金属催化剂利用空气中的氧分子有效的杀灭吸附于其表面的病毒和细菌,有希望用来作为医院、家庭和公共场所的空气消毒。     

三种消毒剂对大黄鱼致病性弧菌的体外杀灭作用研究

为了解不同消毒剂对大黄鱼中致病性弧菌的抑菌效果。采用纸片扩散法比较了聚维酮碘(PVP-I)、聚六亚甲基双胍(PHMB)和过氧化氢(H2O2)对溶藻弧菌和副溶血性弧菌的抑菌效果,再以肉汤稀释法测定了三种消毒剂的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)及MBC/MIC比值,在此基础上,获得了抑菌效果相对较优的H2O2、PHMB对溶藻弧菌、副溶血性弧菌及其混菌的杀菌动力学曲线。结果表明,H2O2(3%)对两种弧菌具有最大的抑菌圈直径(19~21mm),PHMB(30mg/mL)次之(约为15mm),PVP-I(10%)的抑菌效果最弱(小于10mm)。3种消毒剂的MIC值由小到大依次为PHMB相似文献   

不同叶色三叶海棠叶片成色色素分析

结合民族植物学和药理学的研究方法,对西双版纳地区傣族、哈尼族和基诺族等3个少数民族民间利用番石榴（Psidium guajava）、余甘子（Phyllanthus emblica）和水柳（Homonoia riparia）的传统知识进行调查研究及体外抗菌活性实验。结果表明：番石榴和余甘子在村寨中较为常见,当地少数民族将其种植于庭院中,常作为果蔬食用,食用番石榴嫩叶可缓解拉肚子的症状,治疗腹痛、腹泻。水柳生长在水边,傣族会将其叶作为腌酸鱼的配料之一。根据文献记载,番石榴、余甘子和水柳的叶部位作为药使用时,常煎水外洗,治疗皮肤瘙痒。对这3种药用植物叶部位采用80%乙醇浸泡制备的提取物进行体外抗菌实验,结果显示番石榴、余甘子和水柳3种药用植物对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌均有较好的抑菌和杀菌活性,其最小抑菌浓度MIC在98~390 μg·mL 1之间,最小杀菌浓度MBC在98~781 μg·mL 1之间。番石榴和水柳叶对铜绿假单胞菌有一定抑菌和杀菌活性,其MIC和MBC范围均为6 250~12 500 μg·mL 1。由此可见,这3种药用植物的民间利用具有一定的合理性和药用开发价值。     

青海蚕豆中原花青素和左旋多巴的含量测定和品种间差异的比较

目的：建立青海蚕豆中左旋多巴和原花青素含量测定方法,测量22批样品的含量。方法：采用紫外分光光度法测量原花青素的含量,检测波长为554nm。采用HPLC法检测蚕豆中L-多巴含量：色谱柱：汉邦ODS-2（250mm×4-6mm,5μm）,流动相：甲醇-0-1mol/L冰醋酸溶液（5∶95）;流速：0-8 mL/min;测定波长：280 nm;柱温：25/3℃;进样量：20μL。结果：原花青素在75~375μg/mL范围内线性良好、L-多巴在75~375μg/mL范围内线性良好。结论：青海蚕豆中左旋多巴和原花青素含量测定方法稳定可靠。