非洲菊试管苗叶柄愈伤组织的诱导与分化研究

以非洲菊(Gerbera janesonii Bolus)品种‘Sunanda'试管苗幼叶的带叶叶柄为材料,研究了培养基、外植体类型和继代次数等因素对愈伤组织诱导及分化的影响.结果表明:培养基上附加不同植物生长调节剂所诱导出的愈伤组织在形态和分化能力上存在显著差异,叶柄基部诱导愈伤组织的最适培养基是MS+TDZ 0.3 mg L-1+NAA0.1 mg L-1.外植体以叶片长度＞0.5 cm,叶片已舒展,颜色嫩绿的幼叶最佳,继代培养基以MS+KT 1.0 mg L-1较适宜,愈伤组织在分化培养基MS+6-BA 2.0 mg L-1+NAA 0.1 mg L-1上分化出芽的同时还会增殖,分化率达87.4%,继代培养2次的愈伤组织分化率可提高至95%.不定芽在生根培养基1/2MS+IBA0.6 mg L-1上的生根率达100%,试管苗移栽45 d后,成活率达97%以上.     

多效唑和三唑酮对非洲菊微繁的效应

培养基中加入多效唑0．2,0．4,0．6mg／L,可使非洲菊组培苗健壮、矮化,提高增殖系数,促进继代后生根;在生根培养基中加入0．2～1．0mg／L多效唑,可增加生根量,促进根的增粗,提高移栽成活率。0．1mg／L三唑酮可降低植株高度,提高增殖率。     

微型月季愈伤组织诱导及植株再生

选取微型月季(Rosa hybrida)幼嫩离体叶片(叶龄12天)为外植体, 以MS为基本培养基, 研究不同配比的植物生长调节剂对愈伤组织诱导、不定芽诱导和生根培养的影响。结果表明: (1) 诱导愈伤组织的最佳培养基配比为1.0 mg·L^–16-BA+3.0 mg·L^–12,4-D, 诱导率为100%; (2) 6-BA在微型月季不定芽诱导中起着关键作用, 诱导不定芽产生的植物生长调节剂配比为1.0 mg·L^–16-BA +(0.05–0.5) mg·L^–1NAA+(0.02–0.2) mg·L^–1TDZ, 其中最适配比1.0 mg·L^–16-BA+0.1 mg·L^–1NAA+0.02 mg·L^–1TDZ的愈伤组织再分化率达到92.6%; (3) 生长素对微型月季的生根有重要影响, 以1/4MS+0.1 mg·L^–1NAA为生根培养基可获得100%的生根率。实验最终建立了微型月季组织培养和高频离体再生体系。     

植物激素对大岩桐愈伤组织诱导和芽分化增殖的影响

以大岩桐(Sinningia specioca)的幼嫩茎、叶片为外植体,通过正交实验的方法探讨不同浓度和比例的植物激素对愈伤组织诱导和芽分化增殖的影响。实验结果表明:大岩桐愈伤组织的形成最佳激素组合为2,4二-氯苯氧乙酸2.0 mg/L 6苄-基嘌呤0.1 mg/L 萘乙酸0.3 mg/L;芽分化的最佳激素组合为6苄-基嘌呤0.5mg/L 萘乙酸0.1 mg/L。     

元宝草愈伤组织诱导和器官分化

在 2 ,4 D 1或 2mg·L-1的MS培养基上 ,愈伤组织极易诱导 ,生长速度快。在 6 BA 2mg·L-1的MS培养基上带芽愈伤组织继代培养能力强 ,繁殖系数高。带叶茎段在BA或KT的诱导下 ,结节可直接产生不定芽 ,并分化成一圈成簇的丛芽     

云南红豆杉愈伤组织诱导和组织培养

云南红豆杉愈伤组织的诱导频率为Ｗｈｉｔｅ〉ＭＳ〉Ｂ５,其中最高达８０％,叶片和种子之间差异不大,但不同时期的叶片差异较大,以嫩叶诱导为佳,激素配比以２,４－Ｄ２．０－３．０ｍｇ／Ｌ,ＢＡＰ０．５－１．０ｍｇ／Ｌ为宜,在继代培养阶段,Ｂ５比Ｗｈｉｔｅ和ＭＳ更适合细胞的快速生长、繁殖,并且有利于克服组织的褐化,适合于细胞生长的激素配比也以２,４－Ｄ２．０－３．０ｍｇ／Ｌ,ＢＡＰ０．５－１．０ｍｇ／Ｌｏ     

LED光质对非洲菊组培苗增殖及生理特性的影响

为提高非洲菊增殖培养的效率并降低生产能耗,通过发光二极管(LED)设置不同比例的红蓝光组合,研究光质对非洲菊离体培养增殖阶段的影响,通过对丛生苗形态指标和生理生化指标的测定,筛选出最适LED光质条件,并初步探讨其生理机制。结果显示:(1)不同LED光质条件下,非洲菊组培苗的增殖系数差异显著,其中RB4(红蓝光比例为4∶1)处理显著高于其他处理。(2)丛生苗的株高在复合光处理下显著低于R(单一红光)和B(单一蓝光)处理;鲜重和干重在红蓝复合光RB2、RB4、RB8(红蓝光比例分别为2∶1、4∶1和8∶1)处理下均显著高于R、B和对照处理。(3)RB4处理下丛生苗的可溶性糖含量显著高于其他处理,比对照提高了89.62%。(4)LED复合光处理下丛生苗的丙二醛含量显著低于对照,并呈现随红光比例增加而不断降低的趋势;RB2、RB4和RB8处理的超氧化物歧化酶活性显著低于其他处理;除R处理外,其他LED光质处理的丛生苗过氧化氢酶活性均显著高于对照,并以RB4处理丛生苗过氧化氢酶活性最强。研究表明,RB2、RB4和RB8处理有助于提高非洲菊组培苗的增殖系数和干鲜重,并能够促进可溶性糖含量的增加,增强植株自身对活性氧的解毒能力,减轻植株的膜脂过氧化作用,且以RB4处理表现最优,其非洲菊丛生苗的增殖系数和可溶性糖含量显著高于其他处理,干鲜重和过氧化氢酶活性均为最高,丙二醛含量显著低于除单一红光外的其他处理。     

小桐子愈伤组织的诱导

本文以小桐子的叶片、叶柄、茎段及下胚轴和子叶作为外植体,研究不同外植体类型对愈伤组织诱导的影响,结果表明叶柄的诱导率最高,其次为茎段的诱导率。同时以小桐子的下胚轴作为外植体,研究植物生长调节剂种类及浓度配比对愈伤组织诱导的影响,结果显示6-BA与2,4-D的组合更适宜小桐子愈伤组织的诱导,MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D0.1mg/L为小桐子愈伤组织诱导的最佳培养基,其愈伤组织诱导率高达96.7%。本研究为小桐子愈伤组织的分化、植株再生及相关的遗传转化研究提供了参考。     

百合叶片愈伤组织的诱导和植株再生

植物名称:百合(Lilium concolor)。材料类别:实生苗叶片切段。将百合种子(来源于日本TAKII种子公司)用水浸泡1d,经70％乙醇处理30s,0.1％升汞溶液灭菌15min,用无菌水淋洗5次后接种于MS培养基上。培养温度25±2℃,光周期12h光照/12h黑暗,光照度1500～2000lx。培养1月后种子萌发,40d后无菌苗高8～10cm,线形叶片宽度2～3mm,叶片淡绿色,于无菌条件下将叶片     

唐菖蒲的愈伤组织诱导和植株再生

以唐菖蒲品种‘Advanced red’的籽球、花柱、子房和花丝为外植体,研究了不同种类和浓度生长调节物质以及籽球的不同接种方式对愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明：唐菖蒲籽球的中部切片为最佳外植体,倒接（形态学下端向上）是最佳接种方式,诱导非胚性（NEC）和胚性（EC）愈伤组织形成的最佳诱导培养基分别为MS＋6mg·L^-1 NAA和MS＋6mg·L^-1 TDZ,诱导率分别达65．53％和71．88％。NEC和EC均能分化不定芽,分化率分别达88．89％和61．11％。最佳生根培养基上的生根率为87．50％。     

非洲菊未授粉胚珠的离体诱导和植株再生

通过不同培养基及培养条件的筛选,离体诱导12个品种的非洲菊未授粉胚珠的结果表明:MS中的大量元素 Heller中的微量元素 1/2铁盐 0.2mg·L~(-1)6-BA 0.1mg·L~(-1)IAA较适宜于非洲菊未授粉胚珠愈伤组织的诱导和芽的再生,8个品种中以品种‘E19’诱导愈伤组织的诱导率最高(为23.1%);5个品种可再生形成不定芽,再生率为4.8%-19.6%。用根尖染色体鉴定法鉴定再生的23个植株的倍性的结果显示,21.7%为二倍体,43.5%为单倍体,34.8%为混倍体.     

盆栽非洲菊基因枪介导法转化体系的建立

以非洲菊盆栽品种为材料,研究了BA和NAA不同浓度组合对不定芽诱导增殖的影响;基因枪介导法转化的不同轰击距离对转化率影响。结果表明：1．5mg／LBA的培养基上增殖倍数最高,高达8．96倍;9cm的目标轰击距离转化效率最高,达到10．9％。建立了非洲菊盆栽品种的再生和转基因体系,为非洲菊基因工程育种打下基础。     

烯效唑(S-3307)对非洲菊切花保鲜的影响

以非洲菊(GerberajamesoniiBolus)切花为材料,以保鲜基本液(BP,20gL-1蔗糖 200mgL-1柠檬酸 150mgL-18-羟基喹啉柠檬酸盐)和添加30mgL-1烯效唑(S-3307)的基本液(BP S-3307)作对比实验,通过对切花外部形态观察和切花衰老过程中一些生理生化指标测定,探讨了S-3307对非洲菊切花的保鲜效果。结果表明,S-3307处理使切花的瓶插寿命比对照(蒸馏水)延长了4.3d,比BP处理延长了2.3d,而弯颈率分别仅为对照和BP处理的9.6%和28.8%。说明S-3307可增强切花的吸水能力,增加花枝的鲜重,延缓了切花花瓣中蛋白质的降解和抗氧化酶SOD和CAT活性的下降,并减少了游离脯氨酸和MDA的积累,维持膜结构的相对稳定性,从而延缓了非洲菊切花的衰老和提高了切花瓶插期间的观赏品质。     

不同保鲜剂对非洲菊切花的保鲜效应

探讨不同保鲜剂对非洲菊切花的瓶插寿命、观赏品质以及生理生化指标的影响。结果表明,在供试7组保鲜剂中,以处理7(T₇):20g/L Suc+200mg/L 8-HQC+150mg/L CA+75 mg/L KH₂PO₄·3H₂O+1g/L CaCl₂的保鲜效果最佳,可显著延长非洲菊切花瓶插寿命;T₇处理有利于减缓花瓣组织pH上升、花青素含量下降及花瓣细胞膜相对透性的上升,从而延长瓶插寿命。     

非洲菊基因组DNA提取及ISSR-PCR扩增模板浓度优化

以改良的CTAB法为基础,对非洲菊基因组DNA提取进行了下述优化：在第二次用氯仿,异戊醇抽提时,加入“PCN”溶液(0.0675g PVP,45μl 10％ CTAB 4％NaCl),可明显去除多糖;在材料研磨时加入化学物质M(0.1000g Na2SO3,0.0500g Vc)及N(0.0200gVE,0.1000gNa2B4O7,0.0200gPVP,200μlB-巯基乙醇),都可去除酚类物质,明显提高DNA及ISSR-PCR扩增的质量,但N的效果稍优于M;同时加入M、N及“PCN”,具有明显的优化效果,所提5个样品DNA,平均A260/A280、A260/A230分别为1.81、2.02,浓度为0.649μg/μl,片段大小约为49kb,ISSR扩增带多且清晰、明亮、稳定性及多态性高,表明DNA纯度很高。对扩增反应的最佳模板浓度进行研究表明,所提DNA模板必须稀释30倍(浓度为15～30μg/μl时),才能扩增出清晰的谱带。     

两株链霉菌对非洲菊生长和生理生化指标的影响

本研究以非洲菊(Gerbera jamesonii)为试材,采用不同浓度的脱叶链霉菌FT05W和深蓝链霉菌ZEA17I孢子悬浮液浇灌盆栽非洲菊,筛选出非洲菊的最佳施用浓度,探索两株链霉菌对非洲菊生长和生理生化指标的影响,为非洲菊生产上科学合理施用链霉菌提供理论依据.结果 表明:脱叶链霉菌FT05W和深蓝链霉菌ZEA17...     

Efficient TDZ-induced regeneration from capitulum explants of Gerbera jamesonii Bolus ex Hooker F. - an ornamental plant with high aesthetic value

Gerbera jamesonii Bolus ex Hooker F. (Asteraceae), a most prominent ornamental plant ranking fifth in the world cut flower market has gained huge demand across the globe for its high aesthetic value. In the present study, an efficient plant regeneration protocol was developed using capitulum explants from the field grown mature plants of G. jamesonii. A successful surface sterilization procedure was established using a series of sterilants without affecting explant regenerability. The culture of capitulum explants on Pre-culture Induction Medium [(PIM), Murashige and Skoog (MS) medium fortified with 0.5?mg/L thidiazuron (TDZ) in combination with low levels of auxins] for a period of 2 weeks in dark conditions was crucial for inducing morphogenetic response. Upon transfer onto Shoot Regeneration Medium [(SRM), MS +4.0?mg/L 6-benzyladenine (BA) and 0.2?mg/L NAA], explants has significantly produced highest number of shoots (16?±?0.33). Incubation for 18–21?days on Shoot Multiplication and Elongation Medium [(SMEM), MS +2.0?mg/L BA +0.2?mg/L NAA] resulted in the highest number of multiple shoots (22.00?±?0.93) with increased mean shoot length (3.49?±?0.08). In vitro elongated shoots were rooted (95%) on ½ MS +1.0?mg/L indole-3-acetic acid (IAA) within 10–12?days and fully rooted plants were transferred to poly-house for hardening with 90% survival rate.     

First Report of Alternaria Leaf Spot on Gerbera (Gerbera jamesonii H. Bolux ex J. D. Hook) in Bulgaria

Alternaria leaf spots of gerbera (Gerbera jamesonii H. Bolus ex J. D. Hook) were observed on plants from different greenhouses on commercial plants in Bulgaria. The symptoms of the disease on the leaves were characterized by the development of brown, small, scattered dots, which gradually enlarged and coalesced to form large, oval, circular or irregular, brown to black lesions with concentric rings. Affected plants showed lower vitality, suppressed development and fewer, smaller, distorted in shape flowers. Alternaria isolates, obtained from infected leaf tissues were grown in pure culture and the morphological characteristics of the colony and sporulation apparatus were determined. DNA, extracted from the fungal isolates was subjected to polymerase chain reaction (PCR) with primers ITS1/ITS4, amplifying the internal transcribed spacer (ITS) regions. The resulting products were sequenced and compared for homology with other species in the GeneBank. The isolates showed 94% homology of the ITS region with either Alternaria alternata, A. arborescens, A. tenuissima, A. longipes, A. lini or A. smyrnii. None of the studied isolates was amplified with the A. alternata specific primers AAF2/AAR3, indicating that they are pathogenic varieties of it or belong to another species. Pathogenicity tests on 10 gerbera cultivars revealed that all of them were susceptible to Alternaria leaf spot. Additional tests on nine other crops (Solanum lycopersicum, Calendula officinalis, Capsicum annuum, Celosia argantea, Pelargonium spp., Petunia hybrida, Nicotiana tabacum, Cucurbita moscata and Raphanus sativus var. radicina) and on tomato or pepper fruits, potato tubers and carrot roots also indicated that all tested plant species were potential hosts of the disease. This is the first report of highly virulent isolates of Alternaria spp. in Bulgaria that cause leaf spots on gerbera in greenhouses.