组织与原生质体培养

921417马铃薯悬浮细胞再生植株表型和蛋白质的变异〔英〕/Lindeque,J.M.…厂Euphytiea一1991,54 (1)。一41~44〔译自DBA,1991,10(15),91一10501〕 由体外培养的马铃薯(召ola。。。t。吞e,o;。二)小植株茎节间切段诱导愈伤,并将愈伤培养在含3mg/12,4一D和0.2mg/l KN的改良MS培养基上。将易碎愈伤接到含1.5 mg/l2,4一D、0.5 mg/lNAA和0.25mg/1 KN的MS液体培养基中。继代3次后,将悬浮细胞过滤并植板于固体Lam培养基。变绿后3周,将其转到植物再生培养基上。小植株转到MS培养基上迸一步生长和生根。测定的27株植株中,3株生长不良、16株…     

组织与原生质体培养

922236种间杂文水稻杂种的花药愈伤诱导及绿色植株的高频再生[英〕/Rout,J.R.…2 Euphytiea一1992,54(2)一155~159〔译自DBA,1991,10 (23),91一13558〕 将种间水稻杂种o,,;a sa‘￡。a LJ.火0.,。-f‘尹0900 Griff.的花药培养在N6和Potato一2培养基上,每一培养基补加7种组合的植物生长因子 (2,4一D、NAA、Kn)和6%(w/v)蔗糖。花药在连续弱光下培养,把2一3周龄的愈伤移到改良MS再生培养基里。所有培养物均保持在23~25℃下。在Potato一2培养基上花药愈伤的诱导率为9.9~23.9%,在N6培养基上为3.9~9.4%。2二g/l NAA最适于愈伤诱导。在两…     

植物遗传工程

951765通i生徽弹蠢击悬浮细胞培井物和电漱原生质俸稳定转化除草拊抗性甘蔗】皇【伤[英]/Chowdhury,M.K.U.…,Plant Cell Rep.一1992,11(10).一494～498[译自DBA,1992,1l(23),92-13089~ 用高速微弹轰击悬浮细胞培养物或电激原生质体船稳定地转化甘蔗(疗口cc.j14r口m o,,icimale)杂交种CP72—121.O。用外被质粒pBARGUS的金粒轰击8日龄培养物。质粒含玉米醇脱氢酶基因启动子调控的声一葡糖苷酸酶报道基因,还含有CaMV355启动子调控的编码除草剂抗性的bar选择标记基因。转化成功率为每四次轰击后过滤获得一个除草削抗性集落。用电激抉…     

植物细胞、组织及原生质体培养

94176 7萎叶愈伤组织的再生[英]/johri,A.J.K.…∥Curr.Sci.一1993 9 65(10).一793～796F译自DBA,1994,13(4),94—02101] 将田间生长萎叶的苗尖置于5％’reepol中浸泡5分钟,置于含5 mg/1氯霉素、5mg/l土霉素。50mg/l制霉菌素,150mg/l柠檬酸和100mg/1抗坏血酸的MS培养基上过夜培养。外植体用无菌水洗涤一次、用抗坏血酸溶液(1％)洗涤二次,培养在不同培养基上,诱导愈伤。在含3mg/l NAA、O.05rag/1 BA和100mg/1抗坏血酸的MS培养基上生长良好,不发生褐化。每:隔4周继代。转到含O.9mg/l Kn和O.05mg/l IAA的MS上诱导形成苗和根。在降低…     

植物遗传工程

923408利用体细胞和分子技术进行豆科植物的遗传改生〔英〕/Kumar,V.…了EuPhytiea一1991,55 (2)。一157~169〔译自DBA,1992,11(5),92一02702」 就饲料和谷粒豆科植物的遗传改良讨论了包括土壤杆菌介导转化,基因直接转移及原生质体融合的体细胞技术的优点和局限性。讨论主题为:用根癌土壤杆菌或发根土壤杆菌作载体将基因转移至豆科植物,基因直接转移(微注射、PEG一介导原生质体转化、电激和微弹轰击),体细胞杂交。与其它科(如茄科)比较,豆科植物方面的进展有限,”但很多豆科植物(如百脉根属和首藉属)适于组培的事实使体细胞技术以这些品…     

激素和活性多肽

8622引类固醇的微生物转化.111.真菌菌丝体的11a一经基化仁英〕/Somal,P.…了Appl.M ierobiol.Bioteehnol一1985,21(5)一267~269〔译自CBA,1985,(7),2338〕 建立了储曲霉(As乡ergillus OChrace-us)的突变株。此突变株能将黄体酮(底物浓度为409/1)转化为高产量(1一90%)的11a一经黄体酮,6刀,lla一双经化合物在高浓度底物条件下获得的量很少。其生物转化率也高得多。本研究也使理想转化的各数参数标准化。(戴顺志)862232含基因融合载体的葡萄球菌足量分泌人胰岛素样的生长因子I及其表达〔英〕/Nilsson,B.…了Nueleie Aeids Res一1985,13…     

以根为外植体建立大蒜的组织培养体系

以国内4个大蒜栽培品种为材料,建立了以根为外植体的再生体系。将蒜瓣去皮后灭菌消毒,萌发后选取苗龄为5~7 d的无菌苗的根接种到含不同激素配比的培养基中进行愈伤组织诱导,发现MS+2,4-D 1 mg/L+2ip 0.1 mg/L组合愈伤诱导效率最高,平均为56.06%;愈伤组织经过2~3次继代培养,选取胚性愈伤组织置于不同分化培养基上进行培养,2~3个月后可见小芽产生,分化培养基为MS+KT 1 mg/L时,植株再生效率最高,平均达到35.01 %。本研究建立了一种以根为外植体的高效的大蒜愈伤诱导和再生体系,为大蒜遗传转化体系的建立打下良好基础。     

用天花粉蛋白基因转化小麦获得转基因植株

取普通小麦品种京411未成熟胚诱导愈伤组织,10天左右,对820个胚性愈伤组织用含有35S启动子的天花粉蛋白（trichosanthin,TCS)基因轰击。2周后,将这些被轰击的愈伤组织转到含潮霉素50mg/L的筛选培养基上,经分化和生根,获得了33棵再生植株,经接饲毒蚜虫抗病性鉴定和PCR,Southern杂交分析,从中筛选出4株含有编码TCS的转基因小麦植株,转化频率为0．49％。     

植物遗传工程

940312稳定转化的植物细胞中骨架连接区增强报道基因表达〔英〕/Allen,G.C.…/Plant Cell一1993,5(6)一603~613〔译自DBA,1993,12(17),93一09903〕 酿酒酵母自主复制片段ARS一1含有一个能离体与植物核骨架结合的骨架连接区(S AR)。为了试验对基因表达的效应,将一个位于该片段侧翼的、在CaMV 355启动子调控下的,GUS基因的构建物通过微轰击转送到烟草NT一1悬浮细胞中。在稳定转化的细胞系中,含两个侧翼SAR构建物的GUS活性比缺少SAR的对照平均高12倍。表达水平不与基因拷贝数成比例。而在某些含多基因拷贝的转化体中,该片段似乎是…     

Ti质粒对甘薯叶片和愈伤组织的转化

以甘薯(Ipomea batatas)叶片和愈伤组织为材料,分别与根癌农杆菌(Agrobateriuum famefaciens)T_(37)和B_6S_3菌株共培养。然后在MS_0培养基上(含唑啉头孢菌素钠250 mg/L,羧苄青霉素150 mg/L,氨苄青霉素150 mg/L)进行培养,实验结果如下:1.经根癌农杆菌感染后的甘薯叶片和愈伤组织,2～3周后长出新的愈伤组织(表1),而未经处理的则逐渐死亡。两株根癌农杆菌对愈伤组织的转化率明显高于叶片。2.感染后在MS_0培养基上形成的愈伤组     

糖、GA3及ABA对印度娃儿藤(Tylophora indica(Burm.f.)Merrill)体细胞胚发生的影响

从印度娃儿藤节间外植体获取愈伤组织,分析了糖、赤霉素(GA3)及脱落酸(ABA)对愈伤组织形成体细胞的影响。实验证明,含4μmol/L2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的MS培养基是获得具有成胚功能的愈伤组织的最佳培养基。在含有6μmol/L激动素(Kn)的MS培养基上,高达69%的愈伤组织分化为体细胞胚,平均单位外植体(每克愈伤组织)产胚25个。在6μmol/LKn存在的条件下,分析了蔗糖、葡糖糖对胚产生的影响,不同的糖及不同糖浓度对体细胞胚的发生影响很大。6μmol/L Kn与200mmol/L蔗糖处理胚胎发生率最大(71%),单位外植体生成49个胚。然而葡萄糖与Kn、或者葡糖糖、蔗糖与Kn三者加在一起则降低成胚率及产胚数。一定浓度的GA3和ABA能促进体细胞胚的产生。在含200mmol/L蔗糖的培养基中加10μmol/LGA3胚的生成率为98%,单位外植体产胚51个。在含200mmol/L蔗糖的培养基中加2μmol/L ABA能显著增加体细胞胚的量,该培养基上每外植体平均生成44个胚,产率为95%。本研究显示,含200mmol/L蔗糖的培养基中分别加入6μmol/L Kn、10μmol/L GA3或者2μmol/L ABA能显著提高印度娃儿藤体细胞胚发生率,而单独的葡萄糖或葡糖糖和蔗糖则有抑制作用。得到的胚均能正常发育并分化为植株。     

怀山药微型块茎愈伤组织的诱导形成及高频率再生

对怀山药微型块茎愈伤组织的诱导及高频率再生进行了研究。结果表明 :(1)光下诱导铁棍山药脱分化形成愈伤组织 ,6 -BA2 mg/L NAA2 mg/L 为最佳激素组合。KT2 mg/L 2 ,4 - D2 mg/L 有利于铁棍山药愈伤组织的增殖。附加 2 mg/L NAA能缩短 4 7号山药愈伤组织的诱导时间。KT2 mg/L NAA2 m g/L 有利于 4 7号山药愈伤组织增殖 ;(2 )不同光照条件对愈伤组织的诱导和增殖影响不同。光照是缩短 4 7号山药愈伤组织诱导时间的另一因素。暗培养有利于愈伤组织的增殖 ,对 4 7号山药来说 ,暗培养下诱导率也较高 ;(3)基因型不同 ,愈伤组织类型不同 ,诱导率和不定芽分化率也有差异 ,4 7号山药高于铁棍山药 ;(4 )KT对 4 7号山药愈伤组织分化形成不定芽起主要作用 ,2 ,4 - D2 mg/L KT2 mg/L 为最佳激素组合 ;(5 )光培养有利于不定芽的分化     

淋巴因子和干扰素

862244千扰素的生产仁专,英〕/Nobuha-ra,M.…了UK Patent Appl.GB 2146645.Pud.24.04.85.Appl.JP 55八72733,filed 17.09.83〔译自CBA,1985,(7),2324] 通过哺乳类细胞培养于含维生素C或其一种衍生物(1~500mg/1)或一种钒化合物(0.1一loomg/I)的培养基,生产干扰素。(戴顺志)862245免疫干扰素及其mRNA的生产〔专,英〕/Braude,I.A.…了European PatentAppl.EP 0139878.Pub.08.05。85.Appl。US 255136,filed 17.Q4.81仁译自CBA,1985,(7),2329〕 干扰素由培养白细胞于含诱导物或调节一105一物(紫花欧瑞素,或12,13,佛波醇丁酸盐)的…     

组织与原生质体培养

920B25关于小麦和大麦外植体体细胞胚状体发育的解剖学研究〔英〕/R ysehka,5.…1 Bioehom.Physiol。Pflanz。一1991,157(1)。一31~41〔译自DBA,1991,10(12),91一06872〕 研究了山梨醇对大麦(Ho,‘e“,”移l叮are)和小麦(Tr“玄c:哪a召s“朴“‘)不成熟胚的胚胎发生愈伤组织诱导及直接从不成熟胚的盾片进行体细胞胚胎发生的影响。愈伤诱导培养基(MS培养基十Zmg/12,4一D)里加入山梨醇后,致密愈伤培养物和胚胎样结构的诱导增强。显微镜检术证实了体细胞胚胎发生。胚状体的形成遵循以下3条途径:(1)远轴盾片表皮的单细胞伸长、周缘分裂,形…     

根癌农杆菌介导蓝猪耳转化的影响因素研究

研究了根癌农杆菌介导蓝猪耳转化的影响因子。结果表明,以蓝色花类型蓝猪耳5~6周的叶片为外植体,在OD₆₀₀为0.5~0.6的活化菌液中浸染5~10min,暗培养4d后,在愈伤组织诱导培养基(MS+BA 1.0mg/L+2,4-D 0.1mg/L)上生长14d,获得抗性愈伤组织;经芽诱导培养基(1/2MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L)培养28d得到抗性芽;生根培养基(1/2MS)上培养14d得到抗性植株。经PCR检测证实外源基因已整合到蓝猪耳基因组中,转化率达13%~14%。Cef和Hyg浓度对转化影响较大,转化的不同阶段其适宜浓度不同。     

枸杞耐盐变异体的筛选及植株再生

枸杞(Lycium barbarum)种子消毒后接种于无激素的 MS 培养基上,二周后取无菌苗下胚轴于诱导培养基(MS 2,4-D0.25mg/L LH500mg/L)产生愈伤组织。挑取黄绿色具颗粒状结构的愈伤组织继代,从而获得均一的胚性愈伤组织。经0.34%的 EMS(半致死剂量)处理后的胚性愈伤组织恢复增殖二周后,将存活的组织转接到含有1.5%NaCl 的诱导培养基中培养4周,再将少数存活下来的组织转接到含1.0%Nacl 的同样培养基中继续培养,每3周转移一次,共继代4次。经不断选择,选出了耐1.0%NaCl 的愈伤组织变异体。后者经多次继     

体外培养和遗传育种

当转移到含有低浓度毒荞定(。.06毫克/升)的液体培养基时,在2个月内,成功地从豌豆(Pisuo sa才iru。)叶片愈伤组织诱导出了体细胞胚,并可重复。(杜允)861014一种薯菠属植物培养物的器官发生及块茎形成仁英〕/Sengupta,J.…了PlantCell Tissue organ Cult一1954,3(4)一325一331〔译自CBA,1985,(4),1306〕通过愈伤组织培养的器官再生形成了     

大豆未成熟胚培养中高浓度植物生长素的作用及其植株再生

用大豆(Glycine max(L.)Merr.)未成熟胚为外植体,在含高浓度 NAA 或2,4-D 的培养基上可诱导绿色结构体和体细胞胚状体。叶状、花状和喇叭形状的绿色结构体在含30mg/l2,4-D 的 MS-1培养基上可重新愈伤组织化。这种由高浓度2,4-D 诱发并保持的愈伤组织,转到低激素水平的培养基上后,能诱导出大量的同类形状的新结构体。绿色结构体可以进一步发育成叶丛状,但顶端不伸长。使用含2m g/l GA,和0.1mg/l IBA 的培养基,能促进顶端伸长和根的发育,获得正常植株。由未成熟胚的子叶(其时种子长度约4—6mm)诱导的愈伤组织具有再生能力。在含高浓度2,4-D(5-30mg/l)的培养基上诱导出的愈伤组织具有较高的产生绿色结构的潜力。而高浓度 NAA(10mg/l)培养基产生的愈伤组织具有较强的产生根状体的潜力。培养的外植体或愈伤组织在含5mg/l 2,4-D 的培养基上,不需要经常的继代培养,即可长期保存。     

发根农杆菌对骆驼刺的转化及转化组织的形态发生

将骆驼刺离体再生苗的茎切段经发根农杆菌A4菌株感染后,在含500mg/L头孢霉素的MS无激素培养基上培养,产生了转化的发根和愈伤组织.转化根在附加2mg/L2,4-D和0.5-1mg/L6BA的MS培养基上培养后,亦可诱导出愈伤组织.在含3mg/L6BA和0.5mg/LNAA的培养基上诱导出了苗的分化.冠瘿碱分析表明,在95%以上的发根和75%的转化愈伤组织及再生植株中都显示了T-DNA的整合和表达.染色体检查发现,约81%的发根细胞具有正常染色体数(2n=18),其余则存在染色体数目的变化,在继代培养一年之后,转化体仍维持旺盛的再生能力.     

体外培养和遗传育种

将lcm长的蒺藜草Cenchrus ciliariscv.75花序切段培养在补加有2,4-D(lmg / 1), 3-IAA(Smg / 1)和激动素(o.5mg / 1)的MS培养基上.然后置于25℃,- 16小时光周期下培养.4-6天后开始发生愈伤组织,21天后获得了良好增殖的愈伤组织.通常每隔一周在同样培养基上进行一次继代培养.经12-- 14周生长