一种花粉永久装片的制作法

花粉颗粒的大小多数在1/20毫米以下,肉眼仅能看到黄色的粉状,若制成永久装片显微观察,可清楚地看到各种各样花粉的形态。从开放的花药里取出花粉放在载玻片上,加一滴丙酮(去掉花粉表面的油脂)。用滤纸把溶解在丙酮中的油脂取出。在载玻片上的花粉     

利用药片包装板进行花粉萌发实验

花粉萌发实验时,必须给试验花粉提供一个便于显微镜下观察且具良好通气保温条件的环境,否则花粉萌发率不高且萌发过程不易清楚观察。我们在教学时利用常见的药片和奶片包装板上的凹槽作为培养小室简便易行、效果很好。方法是用银子小心剥出槽内包装的物品,保持槽底透明塑料无折痕或嗜污,将凹槽完整剪下·口向上平置于载玻片上,也可滴一些封片用树胶将其固定,凹槽内滴1～2滴清水。另取一盖玻片滴一滴花粉前发用培养基,将试验花粉撒在培养基表面,反覆盖玻片于凹槽口,然后即可在显微镜下观察花粉萌发或进行花粉管生长的测定。利用药片…     

花粉体外萌发的永久装片制作法

在大量花粉活力测定中,要做到及时计数是很困难的,因此需要在低温(0～4℃)下保存或用固定液固定,也可照相计数。但依赖低温和固定液保存时间很短,显微照相又费事。我们针对花粉萌发和萌发后的保存做了一定改进,实验步骤如下: 1.在上午10点左右采摘开放而花药未开裂的花朵,带回实验室,用镊子取下开裂的花药,将花粉搕于载玻片上,同时取培养液(15％蔗糖,10ppm硼酸,1％～2％琼脂)滴在载玻片上。此时,花粉均匀且密集于载玻片中部。     

用徒手切片法鉴定生物组织中的有机物

1　可溶性还原糖的鉴定切下一片极薄的梨肉薄片 ,放在载玻片上 ,加 2滴刚配制的斐林试剂 ,把载玻片在酒精灯上加热片刻 (注意受热均匀 ) ,盖上盖玻片 ,在显微镜下可看到多边形梨肉细胞内分散着许多砖红色的小颗粒。2　淀粉的鉴定取一小块马铃薯 ,用刀片刮些马铃薯泥放在载玻片上 ,滴上 2滴碘液 ,盖上盖玻片 ,在低倍显微镜下 ,可找到清晰的淀粉颗粒 ,转到高倍镜 ,可看到马铃薯细胞内 ,含有大量圆形或椭圆形的蓝紫色的颗粒。3　蛋白质的鉴定取新鲜的大豆种子 (去种皮 ) ,用刀片切下极薄的一片放在载玻片上 ,先滴 2滴质量浓度为 0 .1g/ m L的…     

简讯

一种简易霉菌制片法在一张干净载玻片中央滴上一滴融化的霉菌琼脂培养基,倾斜玻片使其铺成一薄层。在培养基上滴一滴稀释的霉菌孢子悬液,然后把玻片放在湿盒中,或放在     

一种代替双凹载玻片观察花粉管生长的好方法

在观察花粉萌发和花粉管生长的实验中 ,离不开双凹载玻片。通过多次实践 ,我们找到一种代替双凹载玻片的简易材料——健胃片、ATP片等药片的塑料包装板。具体用法是 :1)找已用完药的塑料药片包装板 ,其凹窝的直径不大于 1cm,深度不超过 0 .5cm,凹窝底面要保持光洁 ,并将其上附着的锡膜撕掉。2 )根据凹窝的大小 ,将凹窝 2个、4个或 6个为一组 ,剪成长方形板块 (相当于载玻片大小 ) ,放在 75%酒精中 ,清洗干净备用。3)实验时 ,先在凹窝内滴加 1～ 2滴蒸馏水 ,然后往盖玻片中央滴一滴液体培养基 (0 .5%琼脂 ,2 0 %糖 ,10 0× 10 -6硼酸 ) ,再…     

供光学显微镜观察的花粉样品制备的一种简单方法

传统的制备供光学显微镜观察的花粉样品的方法 (中国科学院植物研究所形态室孢粉组 ,1 960 )不但程序复杂 ,而且不同种类的花粉容易混杂。最近 ,我们在进行山茶属(Ｃａｍｅｌｌｉａ)花粉形态的系统研究中总结出一种制备供光镜观察的花粉材料的简单方法 ,现将其过程介绍如下 :( 1 )从标本或新鲜植株上取下花药 ,用冰醋酸浸软后 ,置洁净的凹玻片 (单凹玻片 )上 ,于解剖镜下将花药打开 ,滴上 95%酒精将花粉洗出。( 2 )滴上预先配制好的分解液 (醋酸酐 9份和浓硫酸 1份 ) ,于室温下或 50℃恒温箱里放置 5ｍｉｎ(具体温度和时间因花粉种类而异 ) …     

水稻花粉植株的诱导及其后代观察

研究了水稻(Oryza sativa)花药的离体培养及其花粉植株后代的表现,得到如下结果: 1.用加有2,4-D 1—5毫克/升的Blaydes培养基培养水稻花药,诱导出水稻花粉愈伤组织。采用花粉处于单核期的花药进行培养比较合适。 2.诱导愈伤组织成苗,以二次诱导法效果较好。即将愈伤组织种植在低浓度激素的培养基上(IAA 0.05—0.5毫克/升,激动素1—2毫克/升),在此培养基上分化快,芽点多,但芽不易伸长;芽点出现后再移到激素浓度较高的培养基上(IAA 2毫克/升,激动素4毫克/升),很快出现幼苗。 3.水稻花粉植株二代,田间表现和室内分析结果表明基本整齐一致,没有分离。杂种F_1花粉植株后代在许多性状上超过双亲,有选种价值。说明水稻花药培养用于育种是可能的。     

用凹形载玻片测定花粉管的生长

花粉管的生长速度,一般都用载玻片、玻璃小环、盖玻片和凡土林做成花粉萌发小室来测定。但是05cm高、1．5cm口径的玻璃小环难于制得,且操作复杂,不能尽如人意。现介绍一种只需用凹形载玻片和盖玻片做成的花粉萌发小室,便可测定花粉管生长速度的简易方法。实验材料有凹形载玻片、盖玻片、滴管、培养基（含10％～20％蔗糖、10～20mg／L硼酸、l％～2％琼脂）、显微镜、培养箱。测定时,取一片凹形载玻片,向凹孔内滴加少许清水（切忌多加）;将培养花粉所用培养基滴加在盖玻片中央,面积约Icm’,培养基用量要少,需薄而平,否则会与凹孔…     

介绍一种测定银杏花粉生活力的方法

银杏是雌雄异株植物,雌花开放一般晚于雄花。依靠自然传粉产量不高,生产上常采用人工授粉方法以提高结果率。这就需要收集和贮藏花粉,检查花粉生活力。但银杏花粉以常规的花粉发芽试验和Brewbackwack配制的培养基均难以前发。我们用改良的测定种子活力的氯化三苯四氮吐还原法（TTC）,同样可以测定银杏花粉的生活力,十分方便。其实验程序如下：取99ml0．05mol．L－1、pH为7．5的磷酸缓冲液,加入0．6gTTC和1ml1％吐温-80,从中取3ml加到盛有50mg花粉的IOInl试管中,放在25℃的光照培养箱中sh后,以80Or·Wu一滴心SWn,花粉下沉,…     

用显微镜观察涡虫咽

取一条2—5毫米长的涡虫,饥饿一周左右。另取一载玻片,用石蜡在其上塑两个高约4—5毫米的方形支撑(图1),滴一滴水于载片上,将涡虫放入水滴中。水不宜过多,使涡虫勉强游动即可。然后迅速地翻转载玻片,使石蜡块朝下,这样水滴就成了一个椭圆形的“水域”了。将载玻片放在5×10低倍镜下进行观察(随时移动玻片,以跟踪虫体)。     

水稻游离花粉培养的高频率再生植株

用二个水稻栽培品种(Oryza sativa L Sub.japonica.)中花11号和盐粳的花粉处于单核靠边期的花药,经低温处理10—20天,在无糖培养基中预培养2—4天后游离花粉进行培养。培养基为KM8P,附加1mg/L 2,4-D,100mg/L脯氨酸,500mg/L水解酪蛋白,9%蔗糖。培养5天,花粉进行一次分裂,10天后分裂频率为21.3%,21天可见小愈伤组织形成。随即将直径为0.5—1.0mm的愈伤组织移至分化培养基上,2—4星期后得到绿苗,频率为70%。并从许多花粉诱导的愈伤组织克隆中筛选出高频率再生绿苗的花粉细胞悬浮系。     

观察植物下表皮和气孔的好材料--菠菜

我在指导学生实验课中 ,发现菠菜叶是一种观察植物下表皮和气孔的好材料。用菠菜叶制备植物叶下表皮和气孔临时装片的方法步骤如下 :1)准备好洁净的载玻片和盖玻片 ;2 )取洗净的新鲜的菠菜叶 ;3)用左手拇指和食指捏住菠菜叶的尖端 ,然后用右手的拇指和食指捏紧带叶柄的一端斜着向上撕 ,即可得到菠菜叶的下表皮 ;4 )先在载玻片的中央滴 1滴清水 ;5 )用镊子夹取任意一块菠菜叶的下表皮 ,置于载玻片的水滴上 ,用解剖针展平 ,然后用镊子夹取盖玻片盖在水滴上 ;6)将制好的临时装片放在目镜为 10×、物镜为 10×的显微镜下观察 ,可以看到在不规则…     

烟草幼嫩花粉原生质体分离与早期离体发育

建立了两种分离烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ）幼嫩花粉原生质体的方法：一为通过花药漂浮培养释放出外壁裂开的花粉,后者转入酶液彻底脱去外壁,内壁降解而分离出原生质体（简称“花药预培养法”）;二为花粉经饥饿处理后,转入酶液释放原生质体（简称“花粉饥饿预处理法”）。对影响分离效果的主要因素作了研究。用花药预培养法分离的幼嫩花粉原生质体,在Ｋ３ 培养基中可再生细胞壁,启动１ 次细胞分裂,或萌发花粉管。表明具有孢子体发育与配子体发育的潜能。观察到花粉原生质体分裂成二细胞后,其中１ 个子细胞又长出花粉管的稀有现象,暗示其开始启动孢子体发育后又重新恢复配子体发育途径     

烟草脱外壁花粉人工萌发与离体授粉实验系统的建立

通过花蕾低温处理、花药漂浮培养与花粉短时酶解程序可脱去花粉外壁,分离出烟草(Nicotianatabacum L.)的脱外壁花粉。研究了分离过程中的酶液渗透压、培养基中聚乙二醇(PEG)与蔗糖以及添加水解乳蛋白等因素对脱外壁花粉人工萌发的影响。在含30％PEG-6000与0.1％水解乳蛋白的D_2培养基中,萌发率最高达57.8％;花粉管生长正常,培养24h后一半以上的花粉管中生殖细胞分裂成精子。用微滴和贴滤纸小片的方法将30～40粒脱外壁花粉授予柱头上,近一半能萌发花粉管并在花柱中生长。采取授粉后子房培养方法,获得了种子与幼苗。从而建立了脱外壁花粉离体授粉实验系统。讨论了脱外壁花粉人工萌发与离体授粉实验系统的建立对于研究外壁在花粉萌发中的生物学功能以及开拓新的转基因技术等方面的意义。     

用印片法制青霉和曲霉的永久封片

(一)材料和方法 1.菌种:青霉(Penicillium chrysogenum),黑曲霉(Aspergillus niger) 2.培养:将青霉和黑曲霉斜面制成悬液,吸0.1ml于马铃薯培养基(马铃薯200克,蔗糖20克,琼脂粉11克,水1000毫升,15磅/吋~2灭菌30分钟)平板上涂布,于28℃培养2天。 3.制片:取两块干净载玻片,在其中一块上涂一层薄胶层(胶为光学树脂),然后用解剖针在青霉或曲霉平板上挖一小块带菌琼脂(约0.5厘米~2),将琼脂块放在薄胶层上(培养面朝下),用另一块载玻片在琼脂块上轻轻按压,然后将琼脂块小心弃去。将印有菌迹的载玻片     

小麦花粉胚的产生及某些诱导因素的影响

1.在小麦花药培养中,花粉直接发育成植株的途径有二:一是由单核花粉经多次分裂后发育成成熟胚,再长成小植株;二是花粉分裂形成“球形胚”,“球形胚”分裂形成愈伤组织,并在原培养基上迅速分化形成小植株。2.基本培养基以 N_6培养基为最好。3.在接种前,花药以相当于2000转/分离心力离心20分钟,对提高花粉直接产生植株的频率有明显作用。4.外源激素对小麦花粉胚的建成是有利的。材料7621的花药接种在附加吲嗓乙酸(1AA)2毫克/升、动力精(KT)6毫克/升和干酪水解物(CH)300毫克/升的培养基上,接种后以7—10℃低温连续培养120小时,诱导频率可达6.20%。     

冬小麦的不同生育条件对其花粉植株诱导频率的影响

对三种不同生育条件的冬小麦的花药培养进行了比较,观察到它们对培养的反应有明显的和稳定的差异。经春化处理的冬小麦顶凌春播,5月中旬取花药做离体培养,比适时秋播,4月下旬进行离体培养的花粉愈伤组织和花粉植株的诱导频率提高约一倍;比冬天温室栽培,于2月下旬至3月上旬取花药做离体培养的愈伤组织诱导频率提高约二倍。1978年接种顶凌播种的28个杂交组合的冬小麦花药100％的组合诱导出了花粉愈伤组织,92.3％的组合分化出花粉绿苗。分析讨论了冬小麦顶凌播种诱导频率高的原因和它在冬小麦花粉单倍体育种研究中的应用     

一种在高倍镜下观察草履虫活体结构的方法

对草履虫进行活体观察,一般是向草履虫培养液中加少量棉花纤维或一滴鸡蛋清以减慢虫体运动。但由于虫体仍处于运动之中,这些方法只适用于在低倍镜下观察。现介绍一种在高倍物镜下观察草履虫活体结构的方法: 1在干净的载玻片中央滴一滴草履虫培养液。 2.取1%洋红溶液和0.1%中性红溶液各一滴,在另一载玻片上混匀。用细玻璃棒蘸取少量混合液与载玻片上的草履虫培养液混合均匀,静置3一5分钟。 3取一段略长于载玻片宽度的头发,以垂直于载玻片长边的方向放于草履虫培养液的右边。然后取一     

观察植物细胞有丝分裂实验的一点改进

本实验采用在载玻片上染色的方法,其具体作法是:把解离后漂洗好的根尖放在载玻片上,用两根解剖针将根尖生长点端拨开,滴一滴0.25%的龙胆紫,染色两分钟.然后再滴一滴