ACC合成酶基因及其反义基因对西瓜的遗传转化

以2日龄西瓜(Citrullus lanatus(Thunb.)Mansfeld)无菌苗子叶为外植体,通过与根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)进行叶盘共培养建立了西瓜的遗传转化系统。所用根癌农杆菌中含有改建后分别携带嵌合NPTⅡ基因和番茄的ACC合成酶基因及其反义基因的质粒。外植体在MSA培养基(MS盐类、B_5维生素、1.0mg/L BA、0.2mg/L IAA)上预培养3～4d后,与根癌农杆菌共培养4d,随后转移外植体至附加100mg/L卡那霉素、300mg/L头孢菌素的MSA培养基上筛选转化芽。将带芽外植体移入含有100mg/L卡那霉素、300mg/L头孢菌素的伸长培养基(MS 0.2mg/L KT)上进行芽伸长,切取2～3cm高的伸长芽移入生根培养基(1/2MS 0.1mg/L NAA)生根。Southern blot结果证明获得转基因植株,乙烯释放指标表明转入的正义和反义ACC合成酶基因得到不同程度的表达。     

双价抗真菌基因表达载体的构建及转基因西瓜的研究

构建了同时含有番茄儿丁质酶基因（Chi3）和β-1,3-葡聚糖酶基因（Glu-Ac）的双价抗真菌基因植物表达载体,以西瓜（Citrullus lanatus）子叶块为外植体,采用根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）介导法,将Chi3和Glu-Ac同时导入西瓜栽培种“中育一号”,共获得46株抗性再生植株。经PCR、Southern blot和RT—PCR检测,表明外源基因己成功整合到西瓜基因组中,并在转录水平得到表达。利用尖孢镰刀菌西瓜专化型（Fusarium oxysporum）对转基因植株进行离体叶片抗病性检测,表明转基因植株对枯萎病的抗性均有不同程度的增强。     

基于可见/近红外高光谱成像技术的西甜瓜糖度检测

提出了以不同品种的西瓜、甜瓜为研究对象,利用可见光/近红外成像高光谱技术分析不同糖度的西瓜、甜瓜的光谱差异及西瓜、甜瓜糖度在可见光/近红外波段范围的响应。研究表明应用成像高光谱技术检测西甜瓜糖度具有可行性,为进一步研究不同水果糖度高精度模型奠定基础。     

提高西瓜离体培养植株再生效率的研究

本文以"京欣1号"母本和"伊选"西瓜4天苗龄子叶为外植体,研究离体培养植株高频率再生体系.结果表明"伊选"子叶远轴端外植体的再生频率仅为10%,子叶近轴端外植体在5mg/LBA+0.1mg/L IAA的激素组合下植株再生频率为100%,平均每个外植体的丛生芽数在所有组合中最多,为10.3个;"京欣1号"母本子叶近轴端外植体在2mg/L BA+0.5mg/L IAA激素组合下植株再生频率为100%,平均每个外植体的丛生芽数在所有组合中最多,达6.9个.本试验条件下,子叶近轴端外植体接种4天即分化出不定芽,至再生苗的移栽仅需40天,在MS+0.1mg/L NAA的生根培养基上的生根率为97.3%,移栽成活率达98.5%.     

提高西瓜离体培养植株再生效率的研究

本文以“京欣1号”母本和“伊选”西瓜4天苗龄子叶为外植体,研究离体培养植株高频率再生体系。结果表明：“伊选”子叶远轴端外植体的再生频率仅为10％,子叶近轴端外植体在5mg／LBA 0．1mg／L IAA的激素组合下植株再生频率为100％,平均每个外植体的丛生芽数在所有组合中最多,为10.3个;“京欣1号”母本子叶近轴端外植体在2mg／LBA 0．5mg／L IAA激素组合下植株再生频率为100％,平均每个外植体的丛生芽数在所有组合中最多,达6．9个。本试验条件下,子叶近轴端外植体接种4天即分化出不定芽,至再生苗的移栽仅需40天,在MS 0．1mg／L NAA的生根培养基上的生根率为97．3％,移栽成活率达98．5％。     

两步外植体法高频再生麝香百合

采用两步外植体法,即以百合鳞片叶为初始外植体,以从初始外植体上长出的芽为次级外植体,成功建立了麝香百合的高频离体再生系统。对不同的BA浓度及次级外植体的不同部位对再生效果的影响,以及组培苗移栽前低温处理的影响进行了研究。结果表明:不同部位的次级外植体中,以短缩茎切片出芽快、整齐、芽数多且粗壮;以MS附加1.0 mg L-1 BA和0.1 mg L-1 NAA的培养基最适于麝香百合的分化。一个中等大小已脱春化的鳞茎通过两步外植体法能扩繁出54 000株左右的新植株,从鳞片叶开始至开花仅需8个月,而且4!低温处理对开花期的影响不大。     

茄子子叶和下胚轴的组织培养和植株再生

以4种茄子品种——六叶茄、七叶茄、九叶茄和长茄的子叶和下胚轴为外植体,探讨了不同生长调节物质对外植体分化的影响和不同品种、不同外植体以及外植体不同苗龄的分化能力差异。观察到外植体分化呈极性,并建立了4个品种茄子下胚轴的高效再生体系。     

白桦下胚轴再生系统的建立

本文对白桦下胚轴的再生系统作了研究。讨论了不同的基本培养基、激素组成、培养条件及外植体的生理年龄在不同阶段产生的效应。通过诱导、分化和生根阶段, 得到了再生植株, 提出了最适的基本培养基、激素组成、培养条件及下胚轴外植体的生理年龄, 为白桦的遗传转化奠定了基础。     

冬凌草离体培养体系的建立及主要次生代谢产物的测定

以冬凌草叶片为外植体,研究不同浓度激素组合对冬凌草愈伤组织诱导及植株再生的影响,并对不同外植体(茎、叶)诱导愈伤、芽的分化能力及再生植株内主要次生代谢产物的含量进行了比较研究。结果表明:在MS 2.0 mg/L 6-BA 1.0 mg/L NAA培养基上诱导愈伤组织效果较好;在MS 2.0 mg/L 6-BA的培养基上诱导芽的效果较好;叶片和茎段在愈伤诱导培养基上均能产生大量的愈伤组织,但其再分化能力以茎段最好;再生苗生根培养基以0.3 mg/L IBA最好;以叶为外植体诱导的再生植株中冬凌草甲素、迷迭香酸的含量均高于以茎为外植体诱导的再生植株。     

不同西甜瓜品种对截形叶螨生长发育和繁殖的影响

[目的]明确不同西甜瓜品种对截形叶螨Tetranychus truncates Ehara生长发育及繁殖的影响,为西甜瓜品种布局和该虫的综合治理提供科学依据.[方法]在实验室条件下,研究截形叶螨在不同西甜瓜品种(西瓜早佳8424、西瓜美都、西瓜嘉美和甜瓜金玉红2号、甜瓜玉菇)上的发育历期、产卵量和生命表参数.[结果]截形叶螨在西瓜早佳8424和甜瓜玉菇上的存活率较高,分别为95.00％和86.55％,而在西瓜美都和甜瓜金玉红2号上存活率较低,只有75.38％和70.45％;截形叶螨在不同西甜瓜品种上的繁殖力也存在显著差异,在西瓜早佳8424和西瓜美都上的繁殖适合性最高,即抗虫性最弱,产卵期长且产卵量大,如在西瓜早佳8424上平均单雌产卵量达(35.31±5.35)粒,而在西瓜嘉美上的繁殖适合性最低,即抗虫较最强,产卵期短产卵量少,平均单雌产卵量为(19.96±2.02)粒;此外,西瓜美都和西瓜早佳8424的内禀增长率rm和周限增长率λ最高,分别为0.203 1、0.161 7和1.225 2、1.175 5;西瓜嘉美的净增值率R0最低,仅为16.7.[结论]在供试的5个西甜瓜品种中,西瓜早佳8424和美都是最适宜截形叶螨生长和繁殖的品种,而西瓜嘉美有较高的抗虫性.     

蝴蝶兰组织培养研究进展(综述)

本文从蝴蝶兰外植体的选择．不同基本培养基、激素及添加物对其增殖与分化的影响,外植体褐变的防治以及生根壮苗方法等,概述蝴蝶兰组培快繁方面的研究进展,为其组培技术研究提供参考。     

不同倍性西瓜基因组DNA甲基化水平与模式的MSAP分析

DNA甲基化是表观遗传修饰的主要方式之一,在基因表达调控中发挥重要作用。本研究以不同倍性（2x、3x、4x）西瓜为试材,采用基于DNA甲基化敏感酶的扩增多态性分析（Methylation-Sensitive Ampliftcation Polymorphism,MSAP）方法,在全基因组水平上探究西瓜同源多倍化过程中DNA序列中CCGG位点的甲基化水平及模式变化特征。研究中选用23对选扩引物,共检测到1883个基因位点。二倍体、三倍体、四倍体中检测到的位点数分别为647、655和581;其中发生甲基化的位点数分别为181、150和159。相应的扩增总甲基化率分别为28．0％、22．9％和27．4％：全甲基化位点数分别为121、80和82,相应的全甲基化率分别为18．7％、12．2％和14．1％。进一步对不同倍性西瓜DNA甲基化模式的变化特征进行分析,结果显示：四倍体西瓜与二倍体西瓜相比有超过半数的位点（54．4％）DNA甲基化模式发生了变化,其与三倍体西瓜相比也有近一半的位点（45．4％）DNA甲基化模式发生了变化,并且变化趋势都以四倍体西瓜甲基化程度升高为主：而三倍体西瓜与二倍体西瓜相比．虽然也有41．6％的位点DNA甲基化模式发生了改变,但变化趋势以三倍体西瓜甲基化程度降低略占优势：与之相似,三倍体西瓜与四倍体相比较。甲基化的变化趋势也是以三倍体西瓜甲基化程度降低为主。以上结果表明：不同倍性西瓜中DNA甲基化事件虽均有发生．但不论是从总甲基化率还是全甲基化率来看,DNA甲基化水平与倍性高低关系不大．三倍体西瓜表现出较为显著的低甲基化水平特征。DNA甲基化模式的分析也表明。与二倍体及四倍体西瓜相比．三倍体西瓜DNA甲基化模式的调整主要以去甲基化为主。显示出三倍体西瓜基因组独特的DNA甲基化特征。本研究为进一步从表观遗传学的角度探讨西瓜的三倍体优?     

广藿香不同外植体离体培养的研究

以广藿香叶片、带节茎、不带节茎及根尖为材料进行离体培养,对影响离体再生的因素进行了研究。结果表明:BA有利于广藿香外植体出芽,浓度以0.1～0.5mg/L效果较好;不同外植体的出芽能力有较大差异,其中以叶片和带节茎出芽能力较强,出芽率均达100%;外植体在培养基上的接种方式对出芽也有一定影响,带节茎以形态学下端垂直插入,可以缩短出芽时间及增加单个外植体出芽的数量。无根苗生根以MT+IBA0.2mg/L培养基为好,苗的生长较为健壮。     

不同光质对白芥(Sinapis alba)下胚轴愈伤组织形成和器官再生的影响(简报)(英文)

以连续白光下或黑暗中生长5天的白芥幼苗下胚轴切段为外植体(分别叫作L-外植体和D-外植体),在1mg/L NAA+2mg/L BA的MS培养基上诱导脱分化和芽的再分化。在白光、红光、蓝光和黑暗中培养,L-外植体都比D-外植体愈伤组织形成早,生长快;对于L-外植体形成愈伤组织的促进作用依次是:白光>红光>蓝光》黑暗;而对D-外植体蓝光比红光更有效。L-外植体比D-外植体芽再生的能力强得多,不同光质的作用为:白光>红光>蓝光>黑暗。     

二乔杜鹃无菌株系建立的初步研究

以二乔杜鹃顶芽为外植体,探讨不同花色类型、不同消毒时间、培养基中不同生长调节剂组合对其无菌株系建立的影响。结果表明,以0.1%升汞作表面消毒剂,顶芽外植体的最适消毒时间为10 min;在相同消毒条件下,白花类型的污染率低于红色类型,红花类型外植体的褐变率低于白花类型;含较高浓度ZT的初代培养基中外植体的褐变率较低。     

磁化水浸种对西瓜种子萌发及幼苗生理的影响

用不同强度的磁化水(0．05T、0．08T、0．10T、0．15T)浸种西瓜种子研究磁化水对西瓜种子萌发及幼苗生理的影响,结果表明：与对照相比,各种强度磁化水浸种都能提高种子的发芽率、发芽势、发芽指数和幼苗的抗坏血酸含量,其中0．10T磁化水处理后西瓜种子发芽率、发芽势提高幅度最大;对抗坏血酸含量的影响以0．08T处理最明显;经过不同强度磁化水处理后幼苗中的过氧化物酶同工酶酶、酯酶同工酶活性得到不同强度的增强,不同品种表现不同。实验结果说明磁化水处理后能明显提高西瓜种子的萌发能力,并能提高幼苗的各种生理活性。     

西瓜牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因的克隆及表达分析

目的:了解牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因(GGPS)在4种不同瓤色西瓜果实发育过程中的表达变化,将为西瓜类胡萝卜素基因操作提供工具。方法:通过RT-PCR和RACE技术从西瓜果实中克隆GGPS的cDNA全长,用生物信息学方法分析其序列及推测氨基酸序列,并用实时定量PCR技术检测GGPS在不同瓤色果实发育过程的表达水平。结果:GGPS基因cDNA全长1 445 bp(GenBank登录号为KF914758),其开放阅读框为1 092 bp,编码363个氨基酸。预测其氨基酸序列N末端存在转运肽信号序列。西瓜GGPS与甜瓜和黄瓜GGPS的序列同源性高达90%以上。GGPS在红瓤西瓜中的表达量最高,白瓤西瓜中最低。结论:克隆获得的GGPS可能对西瓜果实中类胡萝卜素的积累具有重要影响。     

离体植物开花的激素调节

本文综合了近３０多年来在利用植物激素诱导不同植物的组织培养植株成花的不同结果。从总的情况分析可以看出,植物激素对花芽发端和发育的作用,不仅取决于植物本身的遗传特性和外界环境条件,也与取之母本外植体的部位及它们所处的生理状态有关。即不同生理状态的外植体对植物激素反应的差异与内源激素的水平及对植物激素的敏感性和／或外植体内所包含的其它物质的不同有着密切关系。     

植物激素对褐斑伽蓝叶片分化的影响

首次以景天科多肉植物褐斑伽蓝叶片为外植体进行组织培养.建立植株再生系统后,研究了不同植物激素及其不同浓度配比对叶片分化的影响.试验结果表明:褐斑伽蓝叶片分化方式特殊,初代培养时外植体叶片分化困难,仅在附加6-BA(6-苄基腺嘌呤) 1.5 mg/L、IBA(吲哚丁酸) 0.5 mg/L的MS培养基上分化出绿色球状体.试管苗叶片与外植体叶片分化方式不同,在单独附加6-BA 1.0～2.5 mg/L或(萘乙酸)NAA 0.1～1.0 mg/L,以及6-BA与NAA不同浓度配比的培养基上出现了根、芽及愈伤组织等多种器官分化方式,且分化出的器官生长情况差异很大,可以根据不同的培养目的筛选不同的培养途径和适宜的培养基.     

秸秆覆盖旱作瓜田土壤水分的空间变化及对西瓜产量的影响

为了探明秸秆覆盖栽培对西瓜产量及土壤水分的影响,选用玉米秸秆在生育期设置地表全覆盖（WM）、行间覆盖（SM）和根域覆盖（RM）3个覆盖处理,以不覆盖为对照（CK）,研究不同秸秆覆盖方式对旱作西瓜不同生育时期土壤总贮水量、不同深度土壤含水量及产量的影响.结果表明：秸秆地表全覆盖和根域覆盖处理显著提高了西瓜全生育期根域和行间0～120 cm的土壤含水量和贮水量,且伸蔓后期以后的土壤贮水量根域高于行间;秸秆覆盖处理对西瓜伸蔓后期至膨大前期的土壤含水量影响最大,随着西瓜的生长发育,秸秆覆盖处理提高根域土壤含水量的幅度增加,深度下延.秸秆覆盖处理提高西瓜产量主要受根域土壤水分条件改善的影响;各覆盖处理均显著提高了西瓜的产量和水分利用效率,WM、SM和RM处理的增产幅度分别为24.8%、11.5%和15.1%,水分利用效率分别提高了42.7%、24.3%和294%.以地表全覆盖13500 kg·hm^-2秸秆量的处理蓄水保墒、提高西瓜产量和水分利用效率的效果最显著.