兔VX2肝癌模型制作改良及影像学评价

目的 对兔VX2 肝癌模型制作进行改良,以用于介入治疗学研究,同时探讨瘤灶的CT 表现及CT 在检测瘤灶中的作用.方法 将VX2瘤细胞接种于兔皮下使其成瘤并传代;新西兰兔24只,以改良嵌插法建立移植性肝癌模型,于建模后7、14、21 d分别行超声、CT及血管造影检查,用于检测兔肝VX2 瘤灶,评估瘤灶生长变化;随后处死动物,进行尸解,评估影像检查结果.结果 24只（100%） 动物以改良嵌插法建立移植性肝癌模型全部成功.瘤灶以种植后2周CT显示最清楚和典型,直径1 cm～2 cm 左右,平扫呈低密度或等密度,动脉早期明显强化,门脉期呈低密度,与周围肝组织分界较清楚.肝动脉造影显示肿瘤富血供.而种植后超过3 周的肿瘤大部分发生坏死.结论 嵌插改良法是一种值得推广的建立移植性肝癌模型的方法;在对瘤灶进行影像学评价上应尽量选择CT检查,接种后1 周左右的瘤灶较小而难以观察;2 周左右呈肝动脉源性血供丰富的约1 cm～2 cm的实体瘤,造影征像为肿瘤血管与肿瘤染色;3 周以上瘤灶大多出现明显示坏死;因此对1～2cm大小的兔VX2 肝癌瘤体,最适合行血管造影检查.     

介绍一种兔VX2肿瘤的传代和接种方法及其应用经验和体会

目的:介绍一种兔VX2肿瘤的传代和接种方法及其应用经验和体会,从而更好的利用此模型进行生物医学研究。方法:从荷瘤新西兰大白兔取活性良好的肿瘤组织块,制备肿瘤细胞悬液,过滤后接种于健康成年新西兰兔左后肢肌肉内。通过一般观察、MRI和大体及病理学切片对肿瘤进行验证。结果:肿瘤传代和接种后生长良好,MRI、大体及组织学验证保持了VX2的肿瘤特点。结论:本研究介绍的兔VX2肿瘤的传代与接种方法稳定、可靠,值得大家推广和应用。     

VX2肿瘤侵犯兔下腔静脉的生物学行为观察

目的建立VX2肿瘤侵犯新西兰兔下腔静脉(IVC)的动物模型,并观察相应的生物学行为。方法经腹直视下,将VX2肿瘤组织块分别种植在28只兔肾以下IVC附近的软组织内,然后随机分为A、B两组。A组术后每周在超声下观察肿瘤的大小、IVC和腹主动脉(AA)管径大小;DSA观察侧支循环建立。B组每周随机解剖4只,取IVC和AA做病理和免疫组化(PCNA)检查,并观察转移情况。结果 1.超声显示:所有肿瘤均种植成功,肿瘤面积大小与生长时间呈明显正相关(r=0.879),IVC管径与肿瘤面积大小显著负相关(r=-0.8295);4周时25%的IVC管腔闭塞,5周时达到91.7%。2.病理和免疫组化显示:3周时IVC管壁中见大量肿瘤细胞;5周时AA管壁中未见肿瘤细胞。3.DSA显示:IVC慢性受侵犯过程中侧枝循环建立良好。4.解剖观察:模型动物在第4周开始出现肝、肺和腹腔转移。结论 VX2肿瘤成瘤率高,其生长变化、对IVC的侵犯和远处器官转移均随生长时间而变化明显。     

兔大腿VX2移植瘤模型磁共振扩散成像研究

采用大腿肌肉注射法建立兔VX2肿瘤模型,于造模后第7天、14天及21天进行磁共振成像(MRI)平扫、增强及扩散加权成像(DWI)检查,观察不同时期MRI表现。并于造模后第21天对照大体标本测量结果比较DWI及T2WI图像肿瘤最大径,同时比较肿瘤实体部分与髂窝内转移淋巴结的表观弥散系数(ADC)值。结果显示,造模后第7天,12只模型兔MRI常规及DWI图像均可见成瘤;第14天,2例肿瘤内出现坏死灶;第21天,12例肿瘤内均出现坏死,DWI图像可发现局部淋巴结转移灶,DWI及T2WI图像肿瘤最大径与大体标本测量结果差别无统计学意义。髂窝内转移淋巴结的ADC值与原发肿瘤实体部分ADC值间差别无统计学意义。DWI可以监测兔大腿VX2肿瘤生长,有效区分肿瘤早期坏死成分,并判断相应引流区域淋巴结的性质。     

短波对兔VX2肿瘤热疗效果实验研究

目的 探讨短波热疗对荷VX2肿瘤的抑制作用.方法 选择一级新西兰兔49只,随机分成热化组(RH)13只、热疗组(R)13只、化疗组(H)12只和空白对照组(K)11只.移植VX2肿瘤10天后,对RH组施加热疗和化疗,R组施加热疗,H组施加化疗,K组不作任何处理,监测肿瘤的变化.结果 RH组、R组、H组和K组平均瘤重为9.1 g、29.81 g、16.62 g和29.93 g.RH组瘤重极显著小于对照组(P＜0.01),并显著小于H组(P＜0.05).肿瘤平均大小为:7.81 cm3、26.28 cm3、11.66 cm3和30.94 cm3,RH组肿瘤平均体积比H组小,但无显著性差异.结论 短波热疗结合化疗对兔VX2肿瘤的抑制作用明显高于单纯化疗.单纯热疗未见对肿瘤有明显的抑制作用.     

兔VX2肿瘤淋巴转移动物模型建立和病理学观察

目的建立适用的VX2淋巴癌转移模型.方法 24只新西兰白兔随机分成模型组和对照组,模型组14只,对照组10只.模型组在兔右股二头肌肌腹中部注射VX2细胞悬液0.5 mL,对照组在相同位置注射0.5 mL生理氯化钠溶液,观察淋巴结的变化,第28天处死动物,病理学观察肿瘤大小、形态及组织学改变.结果模型组14只动物全部成瘤,成瘤率100%.腘窝淋巴结明显肿大, 病理检查显示其淋巴结可见大量癌细胞,淋巴结的正常结构完全被破坏,甚至消失,转移率100%.结论肌肉注射VX2组织悬液能建立腘窝淋巴结癌转移动物模型,方法简便易行,转移率高.该模型动物体形较大,淋巴结浅而大,对实验性癌淋巴转移的研究具有实用意义.     

大白兔VX2肝癌模型制作优化研究

目的:改进大白兔VX2肝癌模型制作方法并研究肝癌组织缺血再灌注后的损伤作用。方法:用特殊技术方法制备高浓度细胞悬液,分别以27号注射针头向动物肝脏左中叶注射0.3 mL,制成动物肝癌模型。待肿瘤细胞种植成功至实验标准后,阻断肝左中叶之供血和门静脉60分钟,恢复血流至各个实验时间点。检测癌组织中CAT和SOD浓度的改变和细胞凋亡情况。结果:全部动物肝脏VX2细胞悬液注射后均种植成功但每组动物中有2-3只出现肿瘤细胞外溢和种植。种植成功之肿瘤组织缺血再灌注后CAT浓度明显降低且至1天达最低水平。SOD浓度在正常肝组织和肝癌组织中均明显降低而肝癌组织在再灌注后7天气浓度仍然保持较低水平。在正常肝组织和肝癌组织中肿瘤细胞凋亡均有增加,但在后者更为显著。结论:以特殊外科方法直接向肝组织内注射VX2细胞悬液能够成功制作大白兔肝癌模型。缺血再灌注可以导致组织的细胞凋亡,但对肝癌组织的影响更大。     

放射性粒子125I联合TACE治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的:通过研究不同活度的125I粒子以及联合TACE治疗兔VX2肝移植癌的疗效及其病理基础,探讨125I粒子组织间植入治疗肝癌的有效性。方法:建立兔VX2肝癌模型。60只肝癌模型兔随机分成5组,对照组(A组)植入空白剂量(0mCi)125I粒子,B组植入1.0mCi125I粒子,C组植入0.7mCi125I粒子,D组植入0.4mCi125I粒子,E组植入0.7mCi125I粒子+TACE。观察植入前后各组肿瘤体积并计算抑瘤率,切除肿瘤组织及周围正常组织进行常规病理检查。结果:各治疗组肿瘤大小在治疗前后比较具有统计学差异(P<0.01),均小于同期对照组(A组)(P<0.01)。在不同观察时期抑瘤率差别均有统计学意义(P<0.05),各个组间抑瘤率差异在治疗后2周最为明显(P<0.01),但均高于D组(P<0.01)。治疗后6周病理提示D组部分组织内仍可见少量肿瘤细胞,而其余各治疗组均未见明显的肿瘤细胞残存,B组对周围肝组织损伤较大,C组、E组适中。总体疗效E组优于其余各治疗组。结论:125I粒子联合TACE治疗肝癌效果明显优于单一的治疗方案,是肝癌目前较为理想的治疗方案,其中单个粒子活度以0.7mCi左右较为适宜。     

放射性粒子^125I联合TACE治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的：通过研究不同活度的125I粒子以及联合TACE治疗兔VX2肝移植癌的疗效及其病理基础,探讨125I粒子组织间植入治疗肝癌的有效性。方法：建立兔VX2肝癌模型。60只肝癌模型兔随机分成5组,对照组（A组）植入空白剂量（0mCi）125I粒子,B组植入1.0mCi125I粒子,C组植入0.7mCi125I粒子,D组植入0.4mCi125I粒子,E组植入0.7mCi125I粒子＋TACE。观察植入前后各组肿瘤体积并计算抑瘤率,切除肿瘤组织及周围正常组织进行常规病理检查。结果：各治疗组肿瘤大小在治疗前后比较具有统计学差异（P〈0.01）,均小于同期对照组（A组）（P〈0.01）。在不同观察时期抑瘤率差别均有统计学意义（P〈0.05）,各个组间抑瘤率差异在治疗后2周最为明显（P〈0.01）,但均高于D组（P〈0.01）。治疗后6周病理提示D组部分组织内仍可见少量肿瘤细胞,而其余各治疗组均未见明显的肿瘤细胞残存,B组对周围肝组织损伤较大,C组、E组适中。总体疗效E组优于其余各治疗组。结论：125I粒子联合TACE治疗肝癌效果明显优于单一的治疗方案,是肝癌目前较为理想的治疗方案,其中单个粒子活度以0.7mCi左右较为适宜。     

兔卵巢组织石蜡切片技术的改良

针对常规石蜡切片方法步骤繁多,耗时长,所用的二甲苯试剂对人体健康有较大毒害性的缺陷,探讨提高制作兔卵巢组织石蜡切片质量的方法。试验从脱水和透明环节进行技术改良,用正丁醇与无水乙醇混合剂取代常规的脱水剂和透明剂。该混合剂具有良好的脱水和透明作用。实验结果表明：通过该技术改良,镜下观察组织结构清晰可辨、颜色鲜艳、对比度好、层次分明,组织切片效果良好。试验改良技术的工艺简单,具有质优、省时、快捷和实用性较好等优点,有推广应用价值。     

兔VX2肺外周肿瘤超声造影特征与CD31和CD34微血管密度的相关性研究

摘要 目的：探讨兔VX2肺外周肿瘤超声造影特征与CD31和CD34微血管密度的相关性研究。方法：15只雌性新西兰白兔进行VX2 肺肿瘤模型，总共有30个VX2 癌植入15只兔子的肺中。通过高倍镜分析不同期VX2肿瘤的MVD。通过双重免疫荧光化学染色分析不同生长期VX2肿瘤Ki67和CD31阳性表达。分析肿瘤形态学组织病理学结果与微血管分布和CEUS结果之间的相关性。结果：随着生长周期的进展，VX2肿瘤的MVD增大（P<0.05）。随着生长周期的进展，VX2肿瘤内Ki67和CD31的阳性表达率增加（P<0.05）。CEUS显示VX2 肿瘤在早期动脉期有明显的外周增强和短暂的内部增强。肺外周VX2 肿瘤中 PI和CD31 MVD值之间呈显著正相关性（r=0.734，P<0.05）。CD31 MVD和CD34 MVD之间呈负相关（r=-0.691，P<0.05）。PI和CD34 MVD值之间不存在显著相关性（r=-0.412，P>0.05）。结论：与CD34 MVD 相比，CD31 MVD 可以更有效地评估肿瘤血管生成。CEUS作为一种无创成像方法，可以有效评估兔周围型肺癌的肿瘤血管生成情况。     

兔肝VX2肿瘤射频消融术后残癌中基质金属蛋白酶9表达

目的:探讨兔肝脏VX2肿瘤射频消融术(radio-frequency ablation,RFA)后残余肿瘤组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达。方法:超声引导下将VX2肿瘤组织块接种于23只新西兰大白兔肝脏中,造模成功后随机分为5组,对照组(A组,n=3),不行RFA治疗;余20只为实验组行RFA治疗,在超声引导下射频针插入肿瘤偏心位置,展开电极致损毁范围最大为肿瘤总体积的2/3,人为造成残存肿瘤组织。根据治疗结束后不同时间点分为4组:0小时组(B组,n=5)、术后1周组(C组,n=5)、术后2周组(D组,n=5)、术后4周组(E组,n=5),行超声检查结束后处死大白兔,取肿瘤组织采取免疫组化法观察残存肿瘤组织中及未治疗肿瘤组中MMP-9的表达情况。结果:RFA术后0小时、1周、2周、4周残存肿瘤组织中MMP-9的表达均较对照组明显降低(P0.05)。结论:RFA治疗后残存肿瘤细胞中MMP-9水平表达减低。     

不同手术方式对VX2肿瘤侵犯兔下腔静脉预后的影响

目的建立VX2肿瘤侵犯下腔静脉（inferior vena cava,IVC）的动物模型,观察3种不同手术方式对实验动物预后的影响。方法成功建立VX2肿瘤侵犯IVC的动物模型,彩超下证实;将实验动物随机均分为A、B、C三组,分别予以彻底切除IVC和肿瘤、不予重建、彻底切除后人工血管进行重建处理,切下的IVC均送病检。分别于手术后每周彩超观察IVC,出现闭塞的IVC在DSA（digtal subtraction angiography,DSA）下观察侧枝循环建立情况。观察实验动物自然死亡时间,并解剖。结果超声发现3周时所有实验动物均有肿瘤生长（2.75±0.91cm2）,IVC管腔无明显狭窄（2.53±0.23 mm）;DSA显示,人工血管中长期通畅率低,随时间变化实验组可见侧支循环建立和腹壁浅静脉增粗逆流;A、B两实验组生存时间显著高于对照组C组（P1〈0.05;P2=0.036〈0.05）;两实验组中A组生存时间显著高于B组（P3=0.04〈0.05）。两实验组远处转移无差异,均显著低于对照组。结论彻底切除肿瘤可以提高实验动物的术后生存时间和生存率;兔IVC人工血管重建中长期通畅率低,且围手术期死亡率高,生存时间也较不重建组低。