妊娠期糖尿病小鼠胎盘EGFR的表达与其发病关系的研究

目的:研究妊娠期糖尿病小鼠胎盘表皮生长因子受体(EGFR)的表达,探讨EGFR表达与妊娠期糖尿病发病的关系。方法:采用链脲佐菌素建立妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)小鼠模型,对照组为正常妊娠小鼠,腹腔注射等量缓冲溶液。测定母鼠体重、血糖;计算胎鼠的存活率;测定胎鼠、胎盘重量,计算胎盘效率;RT-PCR、免疫组化分别测定GDM组和对照组胎盘EGFR m RNA和EGFR蛋白的表达。Pearson相关性分析用于母鼠血糖与EGFR表达的相关性分析。结果:GDM组母鼠体重和血糖均高于对照组(P0.01);GDM组胎鼠、胎盘重量及胎盘效率均高于对照组(P0.01);RT-PCR和免疫组化结果显示GDM组胎盘EGFR m RNA和EGFR蛋白的表达与对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。GDM组小鼠血糖值与其胎盘EGFR的表达具有相关性(r=0.582,P0.05)。结论:GDM导致胎盘EGFR表达升高,EGFR并不是GDM的发病因素,EGFR是预防GDM的潜在靶点。     

孕晚期GDM孕妇阴道菌群与阴道上皮细胞的自噬和应激水平的相关性

目的探究孕晚期妊娠期糖尿病(GDM)孕妇阴道菌群与阴道上皮细胞的自噬和应激水平的相关性。方法选取陆军军医大学第一附属医院2018年9月至2019年1月诊断及治疗的孕晚期GDM孕妇23例作为GDM组,选取同时段、同年龄段产检正常的孕妇23例作为对照组。对两组孕妇阴道菌群及自噬和应激水平进行检测,使用Pearson相关性分析探究菌群指标与自噬和应激水平间的相关性。结果两组阴道细菌构成存在差异,GDM组在毛螺菌科、双歧杆菌目、普雷沃菌属、詹氏乳杆菌、双歧杆菌科、加德纳菌属的相对丰度大于对照组,对照组在乳杆菌属、卷曲乳杆菌、惰性乳杆菌、假单胞菌目、假单胞菌属、气球菌科的相对丰度大于GDM组。GDM组p62相对表达量显著低于对照组(t=3.903,P0.001),hsp70相对表达量显著高于对照组(t=5.704,P0.001)。Pearson相关性分析结果显示,双歧杆菌目、加德纳菌属与p62水平呈显著负相关(r=-0.407、-0.482,P=0.009、0.002),双歧杆菌科与hsp70呈显著正相关(r=0.448,P=0.004);乳杆菌属与p62呈显著正相关(r=0.437,P=0.011),与hsp70水平呈显著负相关(r=-0.475,P=0.005)。结论孕晚期GDM孕妇阴道菌群与阴道上皮细胞自噬和应激水平存在一定相关性。     

妊娠期糖尿病与妊娠结局的临床分析

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)对孕妇妊娠结局和胎儿健康的影响。方法:回顾性分析2009年8月~2012年12月在我院分娩的184例GDM患者及200例健康孕妇的临床资料,并对两组孕妇的妊娠结局进行比较。结果:GDM组妊高症35例(19.0%)、羊水过多17例(9.2%)、早产21例(11.4%)、产后出血14例(7.6%)、产褥感染12例(6.5%),发生率均显著高于对照组(P0.05);GDM组中发生巨大儿48例(26.1%)、新生儿低血糖31例(16.8%),与对照组比较均显著增高(P0.05),而胎儿宫内窘迫的发生率(3.3%)也较对照组升高,但差异无统计学意义(P0.05);GDM组剖宫产141例(76.6%),阴道产43例(23.4%),剖宫产比例较对照组显著升高(P0.05)。结论:GDM对孕妇的妊娠结局有不利影响,孕妇应加强孕期保健,规范治疗妊娠期糖尿病,减少各种并发症的发生。     

妊娠期糖尿病孕妇血糖水平与新生儿体质量的相关性

目的:探究妊娠期糖尿病(GDM)孕妇产前血糖水平与新生儿质量的关系。方法:选取2012年6月至2014年6月我院分娩的GDM孕妇97例为研究对象,按照随机数字表法将患者随机分为严格组(50例)和宽松组(47例),选择同期血糖正常孕妇50例作为对照组;分析孕妇血糖水平与新生儿出生质量的关系。结果:对照组血糖水平、新生儿质量以及巨大儿的发生率均明显低于宽松组和严格组(P0.05);严格组的血糖水平、新生儿质量以及巨大儿的发生率均明显低于宽松组(P0.05);孕妇血糖水平与新生儿质量存在显著的正相关(r=0.72,P0.05)。结论:产前孕妇血糖水平与新生儿质量存在显著的正相关,对GDM患者产前进行严格的血糖控制有助于降低巨大儿的发生率,有利于母体和新生儿的健康。     

饮食疗法对妊娠期糖尿病孕妇血脂代谢动态变化的研究

目的:探讨脂代谢紊乱在妊娠期糖尿病(GDM)中的作用,为妊娠期糖尿病的预防及指导临床干预提供理论依据。方法:观察妊娠期糖尿病患者和糖耐量正常孕妇血脂水平及胰岛素抵抗程度差异,分析妊娠期糖尿病患者饮食治疗前后的血脂及炎症标志物的动态变化,于孕12W、24W及36W分别抽取两组孕妇空腹静脉血,测定糖、脂代谢指标及炎症标志物水平,计算血浆致动脉粥样硬化指数(atherogenic index of the plasma,AIP);应用稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛分泌功能指数(HBCI),评价胰岛素抵抗指数(IR)程度及胰岛功能。结果:(1)GDM组的C肽、FINS、HOMA-IR明显高于糖耐量正常组(normal glucose tolerance,NGT)组(p0.05),GDM组HBCI指数低于NGT组(p0.05)。(2)干预组与对照组比较,12W时,TC、TG、HDL、LDL差异均无统计学意义(p0.05);24W及32W差异均有统计学意义(p0.05),均较对照组高。(3)对GDM组中TC、TG、HDL、LDL、AIP、hs-CRP、N及WBC值进行分析,TG、TC、LDL、AIP、hs-CRP、N及WBC值24W较36W及12W高(p0.05);HDL水平24W较36W及12W低(p0.05)。(4)NGT组中TG、TC、LDL、AIP、hs-CRP、N及WBC值36W较24W及12W高(p0.05);HDL水平36W较24W及12W高(p0.05)。结论:GDM孕妇存在着明显的胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌功能受损。GDM孕妇合并较正常妊娠更为严重的炎症反应,血脂水平明显升高,饮食治疗后对改善IR有益,提示在妊娠期糖尿病患者中,通过适当的饮食治疗进而对血糖及血脂的调整可以显著减少母儿并发症。     

孕妇肠道微生物组成与孕妇及新生儿糖脂代谢相关性研究

目的研究孕妇肠道微生物组成与孕妇以及新生儿糖脂代谢的相关性。方法选择2017年6月至2018年9月在大连市妇幼保健院定期产检的诊断为妊娠期糖尿病(GDM)的孕妇89例为GDM组,血糖正常孕妇96例为对照组。收集孕妇一般资料,孕妇和新生儿糖脂代谢物、孕妇粪便进行微生物检测。结果 GDM组孕妇空腹血糖、甘油三酯明显高于对照组,高密度脂蛋白水平明显低于对照组(均P<0.05)。GDM新生儿脂联素和血糖明显低于对照组,胰岛素和糖化血红蛋白明显高于对照组(均P<0.05)。对照组孕妇肠道微生物中拟杆菌(Bacteroides)丰富度最高(36.6%),其次是普雷沃菌(Prevotella)(15.3%)、柔嫩梭菌(Faecalibacterium)(10.2%)、考拉杆菌(Phascolarctobacterium)(7.2%)。GDM组孕妇肠道微生物中拟杆菌(Bacteroides)丰富度最高(29.4%),其次是柔嫩梭菌(Faecalibacterium)(19.7%)、普雷沃菌(Prevotella)(11.1%)、考拉杆菌(Phascolarctobacterium)(9.3%)。柔嫩梭菌(Faecalibacterium)与孕妇空腹血糖呈正相关(r=0.377 6,P=0.027 6),拟杆菌(Bacteroides)、埃希菌(Escherichia)与孕妇甘油三酯呈负相关(r=-0.027 5,-0.585 8,P=0.023 7,0.041 3)。柔嫩梭菌(Faecalibacterium)与新生儿空腹血糖呈负相关(r=-0.397 6,P=0.027 6)。结论 GDM孕妇肠道微生物构成与血糖正常孕妇不同,菌群丰富度和多样性较低,并且孕妇肠道菌群与其及新生儿的糖脂代谢相关,调节孕妇肠道菌群或有利于改善其与新生儿的糖脂代谢功能。     

妊娠期糖代谢异常对新生儿出生结局的影响

目的:探讨妊娠期不同程度的糖代谢异常对胎儿发育及结局的影响。方法:前瞻性收集我院2009年1月至2010年1月分娩的糖代谢异常的331例单胎妊娠孕妇,分为糖筛查异常组69例、糖耐量异常组126例、妊娠期糖尿病(Gestaional DiabetesMellitus,GDM)组136例,并选择同期糖代谢正常的751例单胎孕妇为对照组,比较四组新生儿出生的最终结局。结果:糖筛查异常组与对照组新生儿结局差异无显著性意义(P>0.05);糖耐量异常组中巨大儿及新生儿窒息、早产儿的发生率与对照组差异有显著性意义(P<0.05);GDM组与对照组差异有显著性意义(P<0.05)。结论:母亲妊娠期不同程度的糖代谢异常对新生儿影响不同。口服葡萄糖耐量试验(Oral Glucose Tolerance Test,OGTT)异常与GDM一样对新生儿发育及结局均有影响,可使巨大儿、新生儿窒息、早产儿的发生率增高。     

胎盘IGF-1的表达及其DNA甲基化与IUGR的相关性分析

为探究胎盘中胰岛素样生长因子1的浓度和基因甲基化变化与宫内生长受阻(IUGR)发生的关系。选择56名正常妊娠足月分娩的产妇和新生儿为对象,其中27名IUGR患儿,29名正常出生体重儿,收集产妇及新生儿的基本信息和胎盘样本。用实时荧光定量PCR检测IGF-1 m RNA表达量,用BSP分析胎盘IGF-1基因启动子区Cp G位点的甲基化水平。IUGR组IGF-1 m RNA的ΔCT值为(7.483±1.406),对照组为(5.642±1.323),经t检验,t=3.567,p=0.001(p0.01),提示IUGR患者胎盘IGF m RNA表达低于对照组。胎盘IGF-1启动子区Cp G位点均呈高甲基化状态,两组间平均甲基化率的差异无统计学意义,但两组中男性和女性IGF-1甲基化率存在差异。IGF-1在IUGR的发生中起着重要的作用,一定水平的IGF-1对维持胎儿生长是至关重要的,其表达量的高低均与处于高甲基化状态的胎盘IGF-1的甲基化程度无关,与性别有关。     

CXCL8及其受体CXCR1、CXCR2在慢性乙肝中的表达及意义

为探讨CXC趋化因子8(CXCL8)及其受体CXC趋化因子受体1(CXCR1)、CXC趋化因子受体2(CXCR2)在慢性乙型肝炎中的表达及意义,本研究选取了我院治疗的慢性乙型肝炎患者64例(观察组),同时选取健康志愿者60例作为对照组,两组均采用SABC免疫细胞化学染色法检测CXCL8、CXCR1和CXCR2在各组外周血中性粒细胞(PMNs)内的表达量,采用RT-PCR检测PMNs中CXCL8、CXCR1和CXCR2mRNA表达。实验发现,观察组外周血PMNs中CXCL8、CXCR1表达明显强于对照组(p0.05);观察组和对照组外周血PMNs中CXCR2表达强度差异比较无统计学意义(p0.05);观察组外周血PMNs中CXCL8mRNA、CXCR1 mRNA和CXCR2 mRNA相对表达量分别为(1.16±0.15)、(0.87±0.24)和(1.01±0.22),明显高于对照组(p0.05);观察组中HBV-DNA阳性者外周血PMNs中CXCL8 mRNA和CXCR1 mRNA相对表达量分别为(1.27±0.10)和(1.02±0.13),明显高于HBV-DNA阴性者(p0.05);HBV-DNA阳性者和HBV-DNA阴性者CXCR2 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(p0.05);CXCL8 mRNA和CXCR1 mRNA相对表达量与ALT呈正相关(r=0.673和0.681,p0.05),CXCR2 mRNA相对表达量与ALT无相关性(p0.05)。慢性乙肝患者PMNs内CXCL8、CXCR1、CXCR2的mRNA水平升高,其中CXCL8、CXCR1的mRNA与血清ALT呈正相关,同时与HBV DNA载量有一定的相关性。     

Cyclin B1和p21在妊娠期高血压产妇胎盘组织中的表达及其临床意义

目的:观察CyclinB1和p21在妊娠期高血压产妇胎盘组织中的表达并探讨其临床意义.方法:采用免疫组化MaxVision法检测正常胎盘组织(20例)、妊娠期高血压胎盘组织(30例)、轻度子痫前期胎盘组织(30例)和重度子痫前期(30例)产妇胎盘组织中的cyclin B1和p21蛋白表达,并分析其与妊娠期高血压病情严重程度的相关性.结果:妊娠期高血压、轻度子痈前期、重度子痈前期胎盘组织中cyclinB1蛋白的表达均显著低于正常胎盘组织,差异均有统计学意义(P＜0.05),妊娠期高血压、轻度子痈前期、重度子痈前期胎盘组织中p21蛋白表达均显著高于正常胎盘组织,差异有统计学意义(P＜0.05).妊娠期高血压患者病情的严重程度与其胎盘组织中cyclinB1的蛋白表达呈显著负相关(r=0.641,P=0.000);而与其胎盘组织中p21蛋白的表达呈显著正相关(r=0.635,P=0.000).结论:Cyclin B1蛋白的表达下调和p21蛋白的表达上调可能参与了妊娠期高血压的发生发展,且二者在胎盘组织中的表达水平与妊娠期高血压病情的严重程度显著相关.     

妊娠期肝内胆汁淤积症合并妊娠期糖尿病的母儿结局分析

目的:探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)合并妊娠期糖尿病(GDM)对母儿结局的影响。方法:选取2012年1月至2013年2月在我院住院分娩的13例ICP合并GDM孕妇为ICP+GDM组,将同期住院分娩的69例单纯ICP孕妇归为ICP组,对两组孕妇的母儿结局进行回顾性比较分析。结果:两组孕妇的子痫前期、胎膜早破、剖宫产、产后出血发生率比较,无明显差异(P0.05);ICP+GDM组孕妇围产儿Apgar小于7分、新生儿肺炎、早产发生率明显高于ICP组,差异有统计学意义(P均0.05);ICP+GDM组孕妇围产儿平均出生体重低于ICP组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:妊娠期肝内胆汁淤积症合并妊娠期糖尿病将进一步加重围产儿不良结局,对于此类孕妇,应加强监护和管理,适时终止妊娠,以改善围产儿结局。     

运动干预对肥胖超重孕妇血清游离脂肪酸及胎儿的影响

目的:研究运动干预对不同糖耐量超重肥胖孕妇孕期体重增加、妊娠晚期血清游离脂肪酸(Free Fatty Acids,FFA)、甘油三酯(Triglyceride,TG)水平及新生儿体重的影响.方法:2008年6月～2009年12月,对来自高危门诊的的肥胖超重孕妇,分别给予单纯饮食干预(饮食组)或运动饮食联合干预(运动加饮食组).妊娠32周采集两组病例空腹血样,测定FFA及TG.排除各组有运动禁忌的孕妇.足月分娩妊娠期糖尿病(Gestational Diabetes Mellitus,GDM)及正常糖耐量(Normal Glucose Tolerant,NGT)孕妇共143例,运动加饮食组(n=73,GDM 21例,NGT 52例).饮食组(n=70,GDM23例,NGT47例)按不同糖耐量分别进行了对比研究.分析二组在孕期体重增加,孕晚期脂代谢水平及新生儿出生体重方面的差异,并就新生儿出生体重与孕期体重增加及孕晚期血清FFA水平的关系做相关性分析.结果:两组孕妇在年龄,孕前体重指数及分娩孕周方面差别无统计学意义.两组GDM在孕期增重(p＜0.01)、新生几出生体重体重(p＜0.05)、孕晚期血清FFA(p＜0.05)、TG水平(p＜0.05)等方面差别有显著性.两组NGT在孕期体重增加(p＜0.05)及新生儿出生体重方面差别有显著性(p＜0.05);饮食组平均血清FFA及TG水平高于运动加饮食组,但未形成显著性差异.饮食组新生儿出生体重与孕期增重(NGT,r=0.468,P＜0.01;GDM,r=0.564,p＜0.01)及孕32周血清FFA水平(NGT,r=0.431,P＜0.05;GDM,r=0.462,p＜0.05)相关有显著性.饮食加运动组新生儿出生体重与孕期增重相关无显著性,与血清FFA相关有显著性(NGT,r=0.375,P＜0.05;GDM,r=0.405,p＜0.05).两组孕妇在巨大儿发生率方面有显著性差异.结论:肥胖超重孕妇新生儿出生体重与孕晚期血清FFA水平有关.饮食结合运动干预有助于肥胖超重GDM孕妇在孕期体重增加,妊娠晚期血清FFA水平,新生儿出生体重,巨大儿发生率等方面取得良好的妊娠结局.     

不同营养状况下血清瘦素与家兔肝功能的关系研究

家兔的瘦素水平及肝功能受营养状况的影响,为研究三者的关系,将健康雌性新西兰白兔(40日龄)随机分为三组:正常对照组、过饲组及限饲组,每组10只。按营养标准正常饲喂的设为正常对照组,以高于对照组30%的日饲喂量作为过饲组,低于对照组30%的日饲喂量作为限饲组。各组检测指标:体重、血清瘦素(leptin)水平、总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(T-BIL)、脂肪细胞中的瘦素水平及脂肪细胞的瘦素m RNA相对表达量。结果为:12周末,过饲组和限饲组的体重均发生显著变化(p0.05),且两组的血清Leptin均显著高于对照组(p0.05);12周末过饲组和限饲组脂肪细胞中的leptin水平均显著高于对照组(p0.05);过饲组和限饲组脂肪瘦素的m RNA表达均显著高于对照组,而且限饲组也显著高于过饲组(p0.05);限饲组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆汁酸、总胆红素均高于对照组和过饲组(p0.05);限饲组血清总蛋白水平显著低于对照组和过饲组(p0.05)。结论:营养不良可引发血清瘦素水平升高并伴随出现肝功能受损。但在正常饲喂和营养供给充分的情况下,动物的肝功能未见异常,且在一定的生长时期内体重越大,血清瘦素水平越高。     

妊娠糖尿病对仔鼠肺成熟的影响及吡格列酮的干预作用

摘要 目的：探究妊娠糖尿病（GDM）对仔鼠肺成熟的影响及吡格列酮对肺发育的干预作用。方法：将30只SD孕鼠分为对照组、GDM组和GDM+吡格列酮组（GDM+P组）,每组10只。GDM组和GDM+P组孕鼠通过腹腔注射链脲霉素（STZ,45 mg/kg）和高脂饮食饲养构建GDM孕鼠模型,GDM+P组大鼠建模后灌胃10 mg/kg的吡格列酮,对照组和GDM组孕鼠每天灌胃等体积生理盐水。分娩后,检测各组仔鼠的血糖和血浆胰岛素水平以及胎肺组织中的总磷脂量。通过苏木精伊红（HE）染色、油红O染色和透射电镜观察胎肺组织结构和形态变化。通过RT-PCR和Western blot检测胎肺组织中SP-A、SP-B、SIRT1和PPARγ的表达。结果：GDM组仔鼠的血糖水平与对照组无显著差异（P>0.05）,胰岛素水平明显高于对照组（P<0.05）。与对照组相比,GDM组仔鼠胎肺组织中的总磷脂含量降低（P<0.05）;胎肺组织中肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)数量和脂滴明显减少。与对照组相比,GDM组仔鼠胎肺组织中的SP-A、SP-B、SIRT1和PPARγ的mRNA和蛋白相对表达水平均降低（P<0.05）。吡格列酮干预显著逆转了GDM对仔鼠胰岛素、胎肺组织结构和形态变化的影响;GDM+P组仔鼠胎肺组织中的SP-A、SP-B、SIRT1和PPARγ的mRNA和蛋白相对表达水平相较GDM组均升高（P<0.05）。结论：GDM母鼠所生仔鼠存在肺发育延迟,吡格列酮干预可有效促进仔鼠的肺成熟。     

孕早中期血清脂联素、抵抗素、铁蛋白水平及与妊娠期糖尿病的相关性分析

目的:研究孕早中期血清抵抗素、脂联素及铁蛋白水平与妊娠期糖尿病的相关性。方法:选取孕早期(11-13周)、孕中期(24-28周)诊断为GDM的孕妇46例作为试验组(GDM组),及同期糖代谢正常的孕妇46例作为对照组(NGT组),检测和比较两组孕早、中期血清脂联素、抵抗素、铁蛋白水平,计算各期胰岛素稳态模型抵抗指数(HOMA-IR),并对孕早中期血清抵抗素、脂联素及铁蛋白(SF)水平与HOMA-IR进行相关性分析。结果:与NGT组比较,GDM组孕早、中期血清脂联素水平均显著降低,且孕早期血清脂联素水平与HOMR-IR呈负相关(r=-0.21,P0.05);孕早、中期血清SF水平均显著升高,且孕早期血清SF水平与IR呈正相关(r=0.238,P0.05);孕早期血清抵抗素水平无明显变化(P0.05),但孕中期血清抵抗素水平显著降低(P0.05)。多元线性回归分析结果显示孕早期血清铁蛋白水平对HOMA-IR的影响更显著,孕早期SF每升高1μg/l,HOMA-IR提高0.179。孕早期SF水平作为预测GDM发病的血清学阈值为≥23.2μg/L。结论:孕早期血清脂联素及SF水平变化均与GDM的发病相关,孕早期血清SF水平可能作为早期诊断和预防GDM的血清学指标。     

妊娠期糖尿病对子代脐血中造血干细胞质量影响的讨论

目的:探讨母体妊娠期糖尿病对新生儿脐血中造血干细胞质量的影响。方法:对30例妊娠期糖尿病孕妇(GDM组)和30例正常孕妇(对照组)分娩的新生儿的脐血相关指标进行检测并分析差异性,包括:冷冻前有核细胞数(TNC)、CD34+细胞数、细胞活率、造血祖细胞培养集落形成总数。结果:GDM组与对照组的各项研究数据间的差异均无统计学意义(P0.05)。结论:妊娠期糖尿病对子代脐血中造血干细胞质量没有显著影响。因此,妊娠期糖尿病孕妇可放心储存脐血造血干细胞。     

Toll样受体4结合脂多糖对天然调节性T细胞抑制功能的影响及其机制

探讨Toll样受体4结合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对天然调节性T细胞(natural regulatory T cells,n Tregs)抑制功能的影响及其机制。采用磁珠分选健康人外周血中n Tregs,并用流式细胞术检测分选纯度后进行原代细胞培养。将不同浓度的LPS(10μg/m L,1μg/m L,0.1μg/m L)分别加入抗TLR4单抗封闭的n Tregs(即anti-TLR4+LPS组)和正常n Tregs(即Non anti-TLR4组)两组细胞、同时设定不加LPS作为对照组。采用实时定量PCR和酶联免疫吸附(ELISA)检测各组n Tregs中IL-10、TGF-β的m RNA表达水平和细胞培养上清液中蛋白含量。采用CFSE法流式细胞术检测不同浓度LPS处理的n Tregs与CD4+T效应细胞混合培养后CD4+T细胞的增殖水平。Western blotting检测LPS刺激后n Tregs的胞浆及胞核中NF-κBP65蛋白表达水平。结果分选得到的n Tregs纯度82%(84.52±2.10)%。Non anti-TLR4组n Treg细胞中IL-10的m RNA表达水平和培养上清液中蛋白含量均较对照组和anti-TLR4组显著增加(p0.05),且anti-TLR4组n Treg细胞IL-10的m RNA和培养上清液蛋白含量均较对照组显著降低(p0.05);Non anti-TLR4组n Treg细胞中TGF-β的的m RNA表达水平和培养上清液中蛋白含量均较对照组和anti-TLR4组均显著降低(p0.05),且anti-TLR4组n Treg细胞中TGF-β的m RNA表达水平和培养上清液中蛋白含量较对照组显著增高(p0.05)。n Tregs可显著抑制CD4+T细胞的增殖,且与CD3/CD28抗体活化的阳性对照组相比有差异(p0.05)。Non anti-TLR4组中,CD4+T细胞增殖指数较对照组显著降低(p0.05);anti-TLR4组中,CD4+T细胞增殖指数较阴性对照组显著增加(p0.05),较阳性对照组亦明显增加(p0.05)。1μg/m L LPS刺激后,Non anti-TLR4组n Tregs胞浆蛋白中NF-κBp65的含量较对照组降低,而胞核中则相应增加;anti-TLR4组则无明显变化。因此本研究认为,n Tregs膜型TLR4与LPS相互结合,可促使n Tregs抑炎性因子(IL-10,TGF-β)m RNA表达水平和分泌含量产生变化,可增强对效应性CD4+T细胞增殖的抑制功能,其变化机制可能与NF-κB信号分子活化相关。     

急性冠脉综合征单核细胞PPARδ表达及其与血清MMP-9和TIMP-1的相关性

目的:观察急性冠脉综合征(ACS)患者外周血单核细胞中过氧化物酶体增殖激活受体δ(PPARδ)的表达及其与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的相关性。方法:纳入52例ACS患者和46例健康对照者,分离其外周血单核细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测PPARδ的表达;采用酶联免疫吸附试验检测血清MMP-9和TIMP-1的水平。结果:ACS患者外周血单核细胞中PPARδ的表达水平显著低于健康对照组(p0.01);ACS患者血清MMP-9水平高于健康对照组(p0.01),而TIMP-1水平低于健康对照组(p0.01);PPARδ表达水平与MMP-9呈负相关(r=-0.421,p0.05),而与TIMP-1呈正相关(r=0.531,p0.05)。结论:PPARδ可能在ACS的发病中具有重要作用。     

高糖环境下beclin2介导的自噬增强绒毛膜滋养层细胞凋亡

目的探讨高糖对人绒毛膜滋养层细胞早期凋亡及自噬水平的影响。方法取足月妊娠的正常及妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者的胎盘组织,透射电镜观察滋养层细胞超微结构的改变。体外用不同浓度的含糖培养基培养滋养层细胞系HTR8/Svneo细胞24h,分为低糖组(1.57mmol/L或LG2 2.25mmol/L),正常对照组(5.57mmol/L)和高糖组(10.57mmol/L、15.57mmol/L或40.57mmol/L);流式细胞术检测细胞早期凋亡率;q-PCR检测细胞内beclin1、beclin2和ATG7等自噬相关基因的m RNA表达水平;Western blot检测Ⅱ型自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3-II)和p62蛋白表达水平。结果透射电镜下可见GDM组滋养层细胞中存在自噬小体且空泡数目明显多于正常足月妊娠组,其游离面微绒毛出现明显倒覆及坍塌现象;在体外培养的滋养层细胞中,流式细胞术检测显示1.57mmol/L低糖组及40.57mmol/L高糖组较正常对照组HTR8/SVneo细胞的早期凋亡率均明显增加;q-PCR分析发现40.57mmol/L高糖组beclin2及ATG7 m RNA表达水平较正常对照组升高,beclin1 m RNA表达无差异;Western blot检测表明,与正常对照组比较,40.57mmol/L高糖组LC3-II蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平降低。结论高糖可通过beclin2介导的自噬信号途径增强滋养层细胞自噬水平进而导致细胞凋亡,并可能与不良的妊娠结局相关。     

热休克蛋白27和热休克因子1在子痫前期胎盘表达及意义

目的:研究热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)与热休克因子l(heat shock factor 1,HSFl)在子痫前期孕妇胎盘中的表达情况.方法:选择2011年6月-2012年6月在南京医科大学第一附属医院产科住院分娩的子痫前期患者21例(子痫前期组),以同期分娩的正常孕妇21例(正常妊娠组)作为对照组,采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化(Immunohistochemistry)、蛋白印迹法(Western Blotting)检测两组孕妇胎盘HSP27mRNA和蛋白的表达以及HSF1蛋白表达水平,分析其是否存在组间差异.结果:子痫前期组胎盘中HSP27mRNA表达(3.28±0.34)高于正常妊娠组(1.87±0.22)和蛋白的表达明显增高,HSF1蛋白表达增高,差异具有统计学意义;HSF1与HSP27呈正相关关系(r=0.73,P＜0.05).结论:胎盘中HSF1是HSP27表达的主要调控因子.