草鱼(♀)×赤眼鳟(♂)F1及其亲本CAST基因cDNA全长克隆与结构差异

钙蛋白酶抑制蛋白(Calpastatin, CAST)在肌肉生长和肉质特征形成中发挥重要作用。为探究草鱼(Ctenopharyngodon idellus)(♀)×赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)(♂)正交F1的肉质相关分子基础,通过RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技术分别克隆了草鱼(♀)×赤眼鳟(♂) F1及其亲本的CAST基因cDNA全长,并利用生物信息学方法分析比较了三种鱼的CAST结构差异。结果表明:草鱼(♀)、赤眼鳟(♂)及草鱼(♀)×赤眼鳟(♂) F1的CAST基因cDNA全长分别为3036、3165和3086 bp,编码901、893和904个氨基酸;预测蛋白质分子量分别为93.72、92.77和94.02 kD;推测的理论等电点分别为5.92、6.01和6.02。草鱼(♀)×赤眼鳟(♂) F1 CAST与草鱼(♀)和赤眼鳟(♂)核苷酸序列相似性分别为94.52%和90%。三种CAST蛋白均包括4个含有典型七肽的钙蛋白酶抑制结构域。草鱼(♀)、赤眼鳟(♂)和F1 CAST氨基酸残基中分别存在73、82和...     

赤眼鳟MyD88基因cDNA克隆与表达特性研究

实验使用RACE-PCR技术获得了赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)髓样分化因子88 (Myeloid differentiationfactor 88, MyD88)的cDNA全长, 命名为ScMyD88。ScMyD88的cDNA全长为1779 bp, 其中开放阅读框855 bp, 共编码284个氨基酸残基, 推导的蛋白质分子量为33.053 kD, 理论等电点为5.66。赤眼鳟MyD88具有典型的MyD88结构特征, 包括死亡结构域和TIR结构域(Toll-IL-1 receptor domain, TIR), 其氨基酸序列和鲤科鱼类具有高度保守性, 相似性达到了90%以上, 特别是和武昌鱼相比, 相似性达到了98%。在检测的9个赤眼鳟组织和器官中均有MyD88表达, 其中肝脏、头肾和体肾中表达水平最高, 在脑中表达量最低。在草鱼呼肠弧病毒(Grass carp reovirus, GCRV)感染初期(12h内), MyD88在赤眼鳟免疫组织中表达水平急剧上升, 特别是在脾脏和体肾中尤为明显, 随后恢复正常水平。研究表明, MyD88在赤眼鳟抵抗GCRV入侵的免疫应答反应初期发挥了重要作用。     

长江芜湖段赤眼鳟的年龄与生长

赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus Richiardson)隶属于鲤形目(Cypriniformes)、鲤科(Cyprinidae)、雅罗鱼亚科(Leuciscinae),在我国除青藏高原外的其他各水系中均有分布,在国外见于朝鲜和越南[1].赤眼鳟俗称红眼棒、野草鱼,其营养价值高且肉味鲜美,是我国江河主要优质经济鱼类之一.也是我国淡水鱼类养殖的重要品种之一[1].     

赤眼鳟Mx基因全长cDNA克隆及其经GCRV攻毒后的组织表达分析

为研究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)Mx蛋白(Myxovirus resistance protein)的功能, 采用简并PCR和SMART RACE方法从赤眼鳟脾脏中克隆得到Mx基因全长cDNA, 并通过生物信息学方法分析其同源性, 再利用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测其在脾、肝、肠、肾等9个组织中的表达, 以及感染草鱼呼肠孤病毒(Reovirus of Grass carp) GCRV-104后不同时间点赤眼鳟Mx的时空表达规律。结果表明: 赤眼鳟Mx基因cDNA序列(ScMx)全长2325 bp, 包含5'-UTR 40 bp, 3'-UTR 371 bp和ORF 1884 bp, 共编码627个氨基酸, 其编码的Mx蛋白分子量约为70.9 kD, 理论等电点 pI 为 8.25, 具有脊椎动物Mx蛋白共有的结构特征; 赤眼鳟Mx与鲫鱼Mx3同源性最高; Mx在赤眼鳟脾、肝、肠、肾等9个组织中均有表达, 其中肝脏中的相对表达量最高, 脾脏次之, 肠组织中的表达量最低; 经GCRV-104病毒感染刺激后, ScMx在肝和脾组织中的表达量显著上调, 均在48h到达峰值, 分别为对照组的10倍(肝)和5倍(脾), 且在这两个组织中的表达模式相似, 均表现为先升高后下降的波动型变化趋势。研究表明ScMx参与了赤眼鳟抗GCRV-104病毒的免疫反应。       

吉林产哈士蟆中氨基酸含量的研究

应用日立835—50型氨基酸自动分析仪,对哈士蟆十种干样品进行了氨基酸成分的比较分析,结果表明:①必需氨基酸含量由高至低依次为雄蛙腿肉,雌蛙腿肉、卵、整只雄蛙、整只雌蛙、雄蛙皮、哈士蟆油、雌蛙皮、雌蛙腿骨、雄蛙腿骨。②氨基酸总量由高至低依次为雄蛙腿肉、雌蛙腿肉、雄蛙皮、雌蛙皮、卵、整只雄蛙、整只雌蛙、哈士蟆油、雌蛙腿骨、雄蛙腿骨。③雄蛙腿肉和雌蛙腿肉中各种氨基酸含量由大到小的排列顺序基本一致。     

孔雀肉的营养价值分析

用氨基酸自动分析仪对孔雀肉中的18种氨基酸进行定量分析,并与常见畜禽肉的主要营养成分、氨基酸模式进行对比.结果表明孔雀肉是一种蛋白质理想、能量低、脂肪低、胆固醇低的极具营养价值的肉类,符合美国极瘦型肉标准.此外,孔雀肉还有很好的药用价值,可从营养学和医学等多角度进行研究、开发、利用.     

赤眼鳟Mx1基因的cDNA克隆及表达特性

为探究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)是否存在Mx1 (Myxovirus resistance)基因及参与抗病毒免疫反应, 研究利用RACE技术获得了赤眼鳟Mx1基因(ScMx1)的cDNA全长序列, 并对其进行了生物信息学分析; 采用荧光定量PCR技术, 检测了ScMx1在赤眼鳟健康组织中的表达情况以及感染GCRV后ScMx1和ScIFN-Ⅰ的表达特征。结果表明, ScMx1的cDNA全长为3000 bp, 包含5′非编码区124 bp, 开放阅读框1893 bp, 3′非编码区983 bp, 共编码630个氨基酸。预测的ScMx1蛋白包含GTP酶结合区域、中央核心结构域和GTP酶效应结构域。ScMx1与青鱼Mx1的相似性最高(97%), 与ScMx的相似性仅为50%。ScMx1在所检测的10种组织中均有表达, 其中在脾脏中表达量最高。经GCRV感染开始至168h, ScMx1和ScIFN-Ⅰ在肝脏和体肾中的表达量持续上调; 在脾脏和头肾中于感染后72h达到峰值。相关性分析显示脾脏中ScMx1和ScIFN-Ⅰ的表达水平呈显著相关(r=0.94, P=0.018)。研究发现赤眼鳟存在Mx1基因, 且可能参与了抗GCRV免疫应答反应。     

山茱萸果实的化学成分

山茱萸(Cornus officinalis Sieb. et Zucc.)的肉质果皮称为萸肉,是我国特有的传统珍贵的中药材之一。占果实重量30％以上的果核则通常在加工萸肉的过程中被弃之。我们采用贝克曼System 6300型氨基酸自动分析仪、光谱半定量法及其他常规方法分别对萸肉和果核进行了氨基酸、微量元素、维生素B_2和维生素C的分析测定,并对新、陈萸肉中的氨基酸、维生素B_2和维生素C的含量进行了比较。周兆祥等对萸肉中的有机化学物质等也进行了分析测定。主要结果如下:     

赤眼鳟的繁殖生物学

对赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)的性腺发育、性征、繁殖力、性比、繁殖习性、胚胎发育和胚后发育进行了研究。赤眼鳟初次性成熟年龄为2冬龄。繁殖季节为4月下旬至8月上旬,以5~7月为盛产期。网箱饲养已达性成熟年龄的赤眼鳟性腺成熟系数大于池养及江河野生的。其相对繁殖力为252.8粒/g,高于池养者31.05%,高于野生鱼28.0%。雄鱼体形比雌鱼长,成熟雄鱼在繁殖季节胸鳍具有颗粒状珠星,非繁殖季节珠星消失。雌雄比接近1∶1。赤眼鳟属敞水性产卵类型,为不分批产卵鱼类。广西江河的赤眼鳟天然产卵场有11处,主要分布于郁江,左江和右江各有1处。在水温28~28.5℃的情况下,自受精到孵化所需时间为16 h 10 min,积温453℃.h。鱼苗经17 d发育,鳞片完全,体形、习性与成鱼相似。     

A型肉毒神经毒素理化及生物学特性研究

目的探究A型肉毒神经毒素的理化及生物学特性,为A型肉毒神经毒素制品的研制提供依据。方法采用SDS-PAGE、HPLC测定A型肉毒神经毒素的纯度;采用毛细管凝胶电泳分析其在非还原条件及还原条件下各组分的相对分子质量;采用等电点聚焦电泳测定其等电点;对其N-末端氨基酸序列进行测序,并将测序结果与NCBI blast数据库中A型肉毒梭菌Hall株的氨基酸序列作比对,确证其各组分的成分;对A型肉毒毒素复合物及A型肉毒神经毒素进行口服毒性分析,并对3批A型肉毒神经毒素原液和其半成品进行生物学稳定性研究。结果 A型肉毒神经毒素纯度99.00%;非还原条件下其相对分子质量约为152 000,N-末端氨基酸序列ALNDLQINVN,为完整的A型肉毒神经毒素;还原条件下,由相对分子质量约为101 000、N-末端氨基酸序列为ALNDLQINVN的重链和相对分子质量约为101 000、N-末端氨基酸序列为PFVNKQFNYK的轻链组成;等电点为4.91;口服A型肉毒神经毒素的小鼠LD50为1.50×107U/kg,是其复合物的7.9倍;3批A型肉毒神经毒素原液在2~8℃放置28 d生物学活性无下降,平均比活性为2.13×108U/mg,是其复合物的7.1倍;3批半成品在18~26℃放置28 d生物学活性无下降。结论 A型肉毒神经毒素纯度较高,非还原条件下为单链,还原条件下裂解为轻链和重链,其原液及其半成品的生物学稳定性较好。     

家蝇作为饲料添加剂对清远良种鸡肉质和风味的影响

测定蝇蛆和蝇蛹作为饲料添加剂对清远良种鸡肉质和风味的影响,为家蝇Musca domestica L.作为添加饲料改善鸡的肉质和风味,以及代替鱼粉成为新的蛋白质来源提供数据。150只清远鸡雏鸡随机等分成5组,以鱼粉或商业饲料加入不同比例的家蝇幼虫或蝇蛹作为添加饲料加以饲养。结果显示,饲喂不同食料的清远鸡的增重、脾重和法氏囊重影响差异不显著,但饲喂蝇蛆和蝇蛹的鸡群的死亡率明显低于仅饲喂鱼粉或商业饲料的鸡群;饲喂蝇蛆或蝇蛹的鸡肉的系水力(用失水率表示)和风味评价明显提高,氨基酸含量差异显著。说明家蝇幼虫作为动物蛋白可提高鸡的抗疾病能力及改善鸡肉风味。     

The accumulation and metabolism of amino acids by Biomphalaria glabrata, a freshwater pulmonate snail

Freshwater pulmonate snails (Biomphalaria glabrata), pre-treated under bacteriostatic conditions, were incubated in 10 ml of standard medium containing various U-¹⁴C-labelled amino acids at concentrations of 10 μM. Measurements of mass-specific accumulation rates (MSARs) based on HPLC and the accumulation of U-¹⁴C-labelled amino acids into snail tissues have shown unequivocally for the first time that freshwater snails achieved a net accumulation of all the amino acids tested, including aminoisobutyrate (AIB), aspartate, alanine and a mixture of 13 amino acids. There were no significant differences between the MSAR values determined by HPLC from those based on the use of radiolabelled amino acids, whereas MSAR values for control snails were negligible and significantly less. Incubation of snails in media containing radiolabelled aspartate and a mixture of amino acids showed that the accumulated amino acids were readily distributed through the snail’s tissues and then metabolized. The ecological and biochemical questions arising from the fact that freshwater snails are capable of net accumulation of exogenous amino acids at naturally occurring concentrations and subsequent metabolic conversion, contrary to widely held views, are addressed.     

湖南道地白芷氨基酸含量与组成分析

白芷是我国常用中药材的一种,关于白芷镇痛的有效成分,主要认为是异欧前胡素、欧前胡素等香豆素类具有解痉、镇痛等作用的挥发油类化学成分,但白芷镇痛的成分及其机理尚不十分清楚,是否有其他物质也具有一定的药理作用也不得而知,比如说某些药效性氨基酸。该研究采用自动氨基酸分析仪测定了湖南道地茶陵白芷的蛋白质类氨基酸和游离氨基酸的含量,并分析其氨基酸组成。结果表明:总氨基酸检出除Asn以外的其他16种蛋白质氨基酸,含量最高的Arg占总氨基酸的31.21%,接近1/3;必需氨基酸总量达27.01%,其中含量最高的是Leu,占总必需氨基酸的24.14%;药效氨基酸比例较高,在酸水解产物总氨基酸和游离氨基酸中分别达到73.89%和85.78%,其中Arg的含量最高,达1.383g·100g-1,占比为42.24%,游离氨基酸中γ-氨基丁酸、鸟氨酸含量也较高。此外,还含有少量的高半胱氨酸和鹅肌肽等游离非蛋白质氨基酸和短肽;必需氨基酸的组成接近WHO/FAO的建议摄入值,但Met+Cys的RC值最小,为第一限制性氨基酸。这些药效性氨基酸和游离氨基酸可能是茶陵白芷具有良好药效的一个因素,而且茶陵白芷的氨基酸组成和配比较合理、符合人体需要,在强化含硫氨基酸的基础上具有开发成为新型药食同源保健性食品的潜力。研究结果可为进一步研究白芷的药理作用提供依据。     

“增收宝－3”中氨基酸成分

用日立８３５－５０型氨基酸分析仪对“增收宝－３”中游离的氨基酸进行了分析。结果表明其中含有１５种氨基酸,以脯氨酸含量最高。实验结果揭示,氨基酸可能是“增收宝－３”中抗逆增产的有效成分。     

Taurine and zoo felids: considerations of dietary and biological tissue concentrations

Taurine (TAU) is an essential amino acid required in the diets of Felidae at concentrations ranging between 0.04 and 0.2% on a dry matter (DM) basis (in purified, highly digestible diets, and canned diets, respectively). Although the domestic cat seems to be an appropriate physiologic model for zoo felids, it is sometimes difficult to assess TAU status in zoo feeding programs owing to scattered information on feed ingredient TAU content as well as a lack of normal ranges for assessment of TAU in biological tissues. Knowing that TAU is required in the formulation of hand‐rearing diets for exotic felids, the TAU content of 38 ingredients or products used in zoo carnivore feeding or hand‐rearing programs was summarized, including 21 new feedstuffs for which TAU data were previously lacking. The kitten milk replacer contained a lower than expected value for TAU. Commercially prepared frozen or canned meat products, seafood products, whole rodent prey, and most strained meat jarred baby foods contained adequate TAU; chunk meats, and some specific types of jarred baby food meats were considerably lower in TAU content (≤0.10% DM) than other foodstuffs. TAU concentrations in plasma and whole blood of eight spp. of zoo felids sampled opportunistically fell within reference ranges for domestic cats (80–120 and 300–600 nmol/ml in plasma and whole blood, respectively). Plasma concentrations are a useful measure of dietary impact, whereas whole blood concentrations seem to reflect tissue storage of this nutrient. Zoo Biol 26:517–531, 2007. © 2007 Wiley‐Liss, Inc.     

“增收宝－3”中氨基酸成分

用日立８３５－５０型氨基酸分析仪对“增收宝－３”中游离的氨基酸进行了分析。结果表明其中含有１５种氨基酸,以脯氨酸含量最高。实验结果揭示,氨基酸可能是“增收宝－３”中抗逆增产的有效成分。     

闽产李果实氨基酸组成及其营养分析

为了弄清不同闽产李（Prunus salicina）果实氨基酸含量、组成及营养价值,采用氨基酸自动分析仪 对不同李果实样品中各种氨基酸的含量进行检测,并对其组成进行比较分析。结果表明,李果实含有18种蛋白质氨基酸和3种非蛋白质氨基酸。田黄李的牛磺酸含量与蛋白质氨基酸含量均最高分别为26.54 mg/100 g和496.14 mg/100 g;皇后李的鸟氨酸、药用氨基酸、酸味氨基酸含量以及特殊功效蛋白质氨基酸的比重均最高分别为0.36 mg/100 g、364.67 mg/100 g、298.28 mg/100 g和73.45%;早熟胭脂李的γ-氨基丁酸含量最高为7.98 mg/100 g;大胭脂李的支链氨基酸含量最高为46.77 mg/100 g。李果实中氨基酸种类齐全、含量存在一定的差异,可根据不同的开发利用目标选择合适的品种。     

Evaluation of the Chinese indigenous pig breed Dahe and crossbred Dawu for growth and carcass characteristics, organ weight, meat quality and intramuscular fatty acid and amino acid composition

The objectives of the experiment were to evaluate growth and carcass characteristics, organ weight, meat quality and intramuscular fatty acid (FA) and amino acid composition between the Chinese indigenous pig breed Dahe and the crossbred Dawu. The Dahe pigs had lower average daily gain (P < 0.001) and a higher feed conversion ratio (P < 0.001) compared with the Dawu pigs. The Dahe pigs contained less lean meat percentage (P < 0.001) and more carcass fat percentage (P < 0.001) compared with the Dawu pigs. For organ weight, the Dahe pigs had lower relative heart weight and small intestine weight, respectively, compared with that of the Dawu pigs (P < 0.001). In addition, the Dahe pigs showed higher pH values (at 45 min and 24 h, P < 0.001 and P < 0.001, respectively), higher Marbling score (P < 0.05), lower Minolta L values (at 45 min and 24 h, P < 0.001 and P < 0.05, respectively) and lower muscle fiber area (P < 0.05) than did the Dawu pigs. C18:1, C16:0, C18:0 and C18:2 were the main FAs and nine essential amino acids were found in the Longissimus dorsi of the two breeds.